雷公藤内酯醇纳米脂质体的处方及制备工艺研究

目的优化雷公藤内酯醇纳米脂质体(TP-NLS)的处方及制备工艺。方法采用高压均质法制备TP-NLS。依据均匀设计U7(73)实验方法,以两种脂类基质a与b的配比(A)、泊洛沙姆188的用量(B)和均质压力(C)为考察因素,以包封率、平均粒径和Zeta电位为考察标准,优选TP-NLS的处方及制备工艺。结果最优处方为A1B5C7,即按制备600 m L TP-NLS溶液,所取脂类基质a为1.2 g,b为0.2 g,泊洛沙姆188的用量为1.3 g,均质压力70 MPa,均质乳匀15 min。制备的TP-NLS溶液外观好,平均包封率为83.52%,平均粒径117 nm,Zeta电位31.7 m V。所得TP-NLS溶液置于4℃,避光环境下保存30 d,包封率、粒径、电位等基本保持不变,稳定性良好。结论优化后的TP-NLS制备工艺简单易行,为其进一步研究奠定了基础。     

鱼精蛋白凝聚法测定脂质体和纳米脂质体包封率

 目的建立鱼精蛋白凝聚法测定脂质体、纳米脂质体包封率的方法。方法鱼精蛋白凝聚法分离脂质体、纳米脂质体,以高效液相色谱法为分析手段,测定脂质体药物包封率,并与葡聚糖凝胶柱色谱法比较。考察脂质体粒径、脂质体Zeta电位、鱼精蛋白用量以及药物不同溶解性、荷电性、分子量大小等因素对鱼精蛋白凝聚法测定脂质体包封率的影响。结果鱼精蛋白凝聚法可以准确测定不同溶解性质药物脂质体的包封率;应用葡聚糖凝胶G-50柱色谱法与鱼精蛋白凝聚法均能很好测定粒径≥220 nm碘海醇脂质体的包封率。脂质体粒径减小,葡聚糖凝胶柱色谱法药物回收率下降;碘海醇脂质体粒径小于200 nm时,葡聚糖凝胶G-50柱色谱法测得药物回收率较鱼精蛋白凝聚法低。葡聚糖凝胶柱色谱法不适合脂溶性药物脂质体的分离且不能准确测定脂溶性药物托氟啶脂质体的药物包封率;鱼精蛋白凝聚法可准确测定粒径在100～500 nm的托氟啶脂质体的药物包封率。脂质体荷电性影响鱼精蛋白凝聚法测定脂质体包封率;调节介质pH值使托氟啶脂质体Zeta电位分别为-44.07,-4.76和14.5 mV,鱼精蛋白凝聚法方法回收率分别为98.1%,95.3%和86.6%。不同荷电性小分子药物不影响鱼精蛋白凝聚法测定脂质体包封率,但大分子药物荷电性有影响;解离的奥沙西罗(荷负电)和pH 2的胰岛素(荷正电)回收率较好,而pH 7的胰岛素(荷负电)的回收率则较低。结论鱼精蛋白凝聚法可以测定不同溶解性质药物脂质体、纳米脂质体的包封率,此法适合小分子药物及正电荷大分子药物脂质体的测定;适于中性或负电荷脂质体的测定。     

黄芩苷柔性纳米脂质体的制备

目的:制备黄芩苷柔性纳米脂质体。方法:采用薄膜分散法制备柔性纳米脂质体混悬液,以黄芩苷的含量作为工艺研究中包封率的评价指标,以粒径、粒径分散系数,Zeta电位及包封率为考察指标,采用正交试验筛选最佳处方和制备工艺条件,并考察其物理化学性质。结果:最佳处方和制备工艺条件为卵磷脂与胆酸钠的质量比6∶1,卵磷脂与黄芩苷的质量比10∶1,探头超声时间15 min。包封率60.11%,所得的柔性纳米脂质体为类球形实体粒子,平均粒径175 nm,平均Zeta电位-78.9 mV。结论:黄芩苷柔性纳米脂质体处方和制备工艺基本可行。     

羟基喜树碱包衣纳米脂质体的处方及制备工艺研究

 目的研究羟基喜树碱包衣纳米脂质体的处方筛选及制备工艺。方法采用薄膜分散法制备羟基喜树碱脂质体;用柱色谱法分离游离药物;用紫外分光光度法测定包封率;用正交实验优选处方;用氯化壳聚糖包被脂质体,经高压乳匀得到纳米脂质体(<100nm)并测定Zeta电位、粒径大小及分布;用不同冻干保护剂进行冷冻干燥,以筛选合适的保护剂。结果最佳处方制备的药物平均包封率为(68.8±0.9)%(n=3);包衣纳米脂质体的Zeta电位为55.1mV,平均粒径为90.9nm,粒径分布为20～120nm;以15%海藻糖做冻干保护剂的脂质体冻干前后粒径变化最小。结论本试验制备的羟基喜树碱包衣纳米脂质体具有包封率高,稳定性好,表面带正电荷等特点,为其进一步研究奠定了基础。     

鱼腥草挥发油纳米脂质体的制备

常见的鱼腥草煎服法不但会造成其主要药效成分挥发油的损失,而且由于挥发油难溶于水而降低生物利用度.鉴于脂质体作为药物载体可以提高药物的治疗指数,延长疗效,本实验研究了逆相蒸发-超声法制备鱼腥草挥发油纳米脂质体的条件.     

应用均匀设计法对灯盏花素纳米脂质体的处方优化

目的:对灯盏花素纳米脂质体的制备处方进行优化.方法:采用薄膜挤压法制备灯盏花素纳米脂质体,按均匀设计法,以包封率和载药量为考察指标,对实验结果进行最优子集法的二次回归优选处方配比.结果:用胆固醇和卵磷脂来包封的灯盏花素脂质体包封率为69.60%,载药量为29.06%,平均粒径为105.6 nm.结论:用均匀设计优化后的制备处方制得的灯盏花素脂质体,有较高的包封率和载药量.     

淫羊藿苷磁性纳米脂质体的制备及体外释放情况分析

目的: 优选淫羊藿苷磁性纳米脂质体的处方工艺并考察其体外释放情况,为改善淫羊藿苷的生物利用度提供参考. 方法: 采用超声薄膜分散法制备淫羊藿苷磁性纳米脂质体,以淫羊藿苷包封率为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察油酸改性磁粉、泊洛沙姆188(F-68)、聚乙二醇-2000(PEG-2000)投料量及水化介质对处方工艺的影响.利用HPLC考察淫羊藿苷磁性纳米脂质体在含30%甲醇的磷酸盐缓冲液(PBS)中的体外释放率,流动相乙腈-水(30:70),检测波长270 nm. 结果: 最优处方为淫羊藿苷-磁粉(2:1),F-68 200 mg,PEG-2000 40 mg,水化介质为PBS(pH 7.4),大豆卵磷脂500 mg,胆固醇150 mg.淫羊藿苷磁性纳米脂质体包封率(96.57±0.42)%,72 h累积释放率96.51%;淫羊藿苷溶液16 h释放99.68%. 结论: 通过超声薄膜分散法制备的淫羊藿苷磁性纳米脂质体具有较高包封率和良好的缓释效果.     

苦参碱固体脂质纳米粒的制备和处方优化

目的制备苦参碱固体脂质纳米粒,并进行处方优化。方法选择硬脂酸作为固体脂质,吐温-80作为乳化剂,高压均质法制备苦参碱固体脂质纳米粒。以吐温-80用量、均质压力、药脂比为影响因素,包封率为评价指标,正交试验优化制备工艺。结果最佳处方为吐温-80用量0.3 g,均质压力90 MPa,药脂比1∶5,包封率(94.15±1.44)%。结论该方法简便可靠,可用于制备苦参碱固体脂质纳米粒。     

二氢杨梅素长循环纳米脂质体的制备及大鼠体内药动学研究

目的筛选二氢杨梅素(DMY)长循环纳米脂质体的最佳处方和制备工艺,研究其体外释放特性和大鼠体内药动学特征。方法采用薄膜超声法制备脂质体,通过单因素和正交试验优化脂质体处方和制备工艺;采用透射电子显微镜观察脂质体的外观形态,激光粒径分析仪测定脂质体的粒径和Zeta电位;采用透析法研究脂质体体外释放特性,LC-MS/MS法测定大鼠血药浓度。结果优化的DMY脂质体制备条件为大豆磷脂酰胆碱-胆固醇-DSPE-m PEG2000物质的量比为75∶20∶5,DMY与类脂的质量比为1∶12,载药温度为60℃,载药介质为pH 5.0 PBS缓冲液,超声时间为20 min。在此条件下,DMY的包封率为(54.7±3.3)%,载药量为(4.3±0.2)%,粒径为(117.9±5.5)nm,Zeta电位为(-2.6±1.7)m V。48 h在pH 1.2和pH 6.8释放介质中的累积释放率均为86%。DMY脂质体在大鼠体内的t_(1/2z)和AUC0~∞分别是游离DMY的2.7倍和1.8倍。结论与游离DMY相比,DMY脂质体体外释放缓慢,体内消除减缓,口服生物利用度提高。     

姜黄素纳米脂质载体的制备、优化及体外评价

目的制备、优化姜黄素纳米脂质载体,并进行体外评价。方法薄膜分散法制备姜黄素纳米脂质载体后,以粒径和包封率为评价指标,单因素和正交设计法优化处方和制备工艺。透射电镜观察其外观形态,激光粒度分析仪测定其粒径、粒径分布及Zeta电位,透析法测定其体外释放行为。结果最优条件为投药量10 mg,固液比2∶5,超声时间6 min,磷酸缓冲溶液p H值6.5。不同磷脂酰丝氨酸比例(0%、4%、8%、12%)修饰的载体呈球形或类球形,分布均匀,平均粒径分别为(212.1±1.4)、(210.5±1.3)、(207.6±1.7)、(198.4±1.7)nm,Zeta电位分别为(-1.33±0.39)、(-18.01±0.41)、(-45.31±0.36)、(-45.56±0.41)m V,包封率分别为(85.64±0.67)%、(86.13±0.56)%、(88.38±0.34)%、(88.78±0.58)%,载药量分别为(2.23±0.03)%、(2.15±0.03)%、(2.19±0.04)%、(2.18±0.02)%,具有明显的缓释特性。结论制备的姜黄素纳米脂质载体粒径分布均匀,包封率和载药量均良好。     

蜂毒多肽长循环脂质体的制备研究

 目的研制蜂毒多肽长循环脂质体。方法采用薄膜超声分散法制备蜂毒多肽长循环脂质体,以包封率为指标,分别考察药脂比、胆固醇用量、磷脂种类、不同相对分子质量PEG-胆固醇、不同pH值、离子强度等对脂质体的影响,在此基础上采用正交设计[L₉(4³)]对处方进行优化。结果制得的长循环脂质体包封率为(86.13±0.51)%,平均粒径为(74.43±5.53)nm,4℃放置10d包封率无变化。结论蜂毒多肽长循环脂质体包封率、稳定性较高,且制备工艺简单、重现性好。     

青藤碱脂质体的处方优化及制备工艺研究

目的:优化青藤碱脂质体的膜材处方,并进行制备工艺研究.方法:采用乙醚注入法制备脂质体,以包封率为指标,采用混料均匀设计法优化其膜材处方,确定豆磷脂、胆固醇、维生素E等组分的用量.并在此基础上采用单因素考察法进行制备工艺研究,包括缓冲液用量、制备温度、超声时间等.结果:最佳膜材处方为青藤碱:豆磷脂:胆固醇:维生素E质量化(8.92:60.35:28.81:1.91),缓冲液用量为50 mL·g~(-1)膜材,制备温度为50℃,超声时间为20 min.结论:按此优化处方及工艺制各的脂质体可获得满意的形态及包封率.     

正交设计优化盐酸川芎嗪脂质体的制备工艺

目的:优选盐酸川芎嗪脂质体的制备工艺,为川芎嗪的临床应用提供参考。方法:采用HPLC测定盐酸川芎嗪含量,流动相甲醇-0.2%三乙胺水溶液(加冰乙酸调节p H 5.0)(60∶40),检测波长295 nm。利用薄膜分散法制备盐酸川芎嗪脂质体,以包封率为评价指标,磷脂和胆固醇为膜材,通过正交试验考察水合时间、胆固醇和磷脂质量比、盐酸川芎嗪和磷脂质量比、磷脂质量分数对制备工艺的影响,考察脂质体包封率、形态、粒径、稳定性和Zeta电位。结果:最佳制备工艺条件为水合时间30 min,胆固醇-磷脂(1∶2),盐酸川芎嗪-磷脂(1∶15),磷脂质量分数3%;盐酸川芎嗪脂质体包封率(70.27±0.58)%,外观接近球形,粒径(22.9±6.8)nm,Zeta电位(-29.79±1.24)m V,于4℃保存2周后稳定性良好。结论:优选的制备工艺合理、稳定,可促进盐酸川芎嗪的体内吸收并延长其作用时间。     

甘露糖修饰雷公藤红素脂质体处方工艺优化及体外靶向性评价

目的 制备甘露糖修饰的雷公藤红素脂质体（mannose-celastrol-liposomes,Man-Cel-Lips）,对其处方进行优化,并初步评价其体外靶向性。方法 采用薄膜分散法制备Man-Cel-Lips。以包封率为考察指标,采用Box-Behnken设计-响应面法优化处方中胆固醇加入量、Cel加入量和探头超声时间间隔;按最优处方制备3批脂质体,对其进行表征并考察其体外释放情况。以香豆素为荧光探针,采用流式细胞仪和荧光显微镜法考察甘露糖对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的摄取和靶向作用。结果 通过Box-Behnken响应面法,确定最优处方工艺为胆固醇4 mg、Cel 1 mg、磷脂22 mg,超声间隔时间5 s,总处方量为5 mL。所制得3批脂质体平均粒径为（93.50±1.04） nm,多分散指数为0.22±1.81,ζ电位为（-5.70±0.26） mV,平均包封率为（92.75±0.61）%,相比于游离Cel,Man-Cel-Lips具有一定缓释效果。体外细胞摄取实验结果表明,Man-Cel-Lips对细胞的摄取效率高于其他组,且呈剂量相关性（P<0.05）。结论 成功制备并优化Man-Cel-Lips,经甘露糖修饰的Cel-Lips靶向性增强,为后续研究其抗炎活性奠定基础。     

叶酸修饰的斑蝥素/黄芩苷共载脂质体处方工艺优化及其评价

目的 筛选二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-叶酸（DSPE-PEG 2000 folate,DSPE-PEG_2k-FA）修饰的斑蝥素/黄芩苷共载脂质体（DSPE-PEG_2k-FA-cantharidin & baicalin-lipsomes,FA-Can&Bai-Lips）的处方工艺并对其进行表征及评价。方法 由薄膜分散超声法制备FA-Can&Bai-Lips,以药脂比、胆脂比、水化温度及水化时间为考察因素,以两药包封率、粒径、多分散指数（polydispersity index,PDI）和ζ电位为评价指标,采用单因素考察和Box-Behnken设计-响应面法（Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM）优化其处方工艺。采用电位粒径仪和透射电子显微镜（TEM）分别测定其粒径、ζ电位及形态。通过溶血性实验、细胞摄取实验、CCK-8法实验及活体成像等方法进行安全性、靶向性评价。结果 FA-Can&Bai-Lips的最佳制备工艺为药脂比1∶11、胆脂比1∶6、DSPE-PEG_2k-FA用量为10%、溶剂为50 mL、旋转蒸发及水化温度为55 ℃、水化介质为pH 6.8 PBS缓冲液、水化体积为10 mL、水化时间为94 min,超声时间为8 min。经BBD-RSM优化制得的FA-Can&Bai-Lips形态规整,为类球形粒子,稳定性及安全性好,斑蝥素与黄芩苷的包封率分别为（90.19±0.67）%、（81.24±0.72）%,粒径为（172.47±4.83）nm,PDI为0.268±0.018,ζ电位为（−1.07±0.07）mV。体外评价结果表明,FA-Can&Bai-Lips能有效抑制HepG2细胞增殖,具良好的肝肿瘤靶向性。结论FA-Can&Bai-Lips具有增效减毒作用,能高效靶向肿瘤组织,是一种极具开发潜力的抗肝肿瘤纳米递送系统。     

葡萄糖修饰脑靶向紫杉醇脂质体包封率测定方法的比较

目的:建立葡萄糖修饰脑靶向紫杉醇脂质体的包封率测定方法,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用薄膜分散法制备脂质体。采用RP-HPLC测定紫杉醇的含量,流动相甲醇-水(70∶30),检测波长228 nm,流速0.8 m L·min-1。利用RP-HPLC测定胆固醇的含量,流动相甲醇,检测波长210 nm,流速1 m L·min-1。采用凝胶柱色谱法、鱼精蛋白沉淀法、滤膜法、透析法分离脂质体与游离药物,比较4种方法测定包封率的可行性。结果:紫杉醇与胆固醇含量测定方法的专属性、精密度、稳定性和回收率试验均符合测定要求,线性范围分别为0.4~100,1~500 mg·L-1。4种方法紫杉醇与脂质体回收率均介于95%~105%,满足脂质体包封率测定的要求;包封率分别为74.68%,92.91%,95.14%,95.08%。结论:鱼精蛋白沉淀法操作简单、快捷,几乎不受脂质体粒径的影响,适用于紫杉醇脂质体包封率的测定。     

斑蝥素半乳糖化脂质体制备工艺研究

目的优选斑蝥素半乳糖化脂质体(Lac-CTD-lips)的最佳处方配比和制备工艺,并建立其含量测定的方法。方法采用薄膜分散法制备Lac-CTD-lips,采用GC-MS法建立斑蝥素含量测定的方法,以斑蝥素的包封率为评价指标,通过单因素考察结合正交试验,优化Lac-CTD-lips的制备工艺,并对其进行表征、包封率、粒径、Zeta电位考察。结果 Lac-CTD-lips最佳处方为斑蝥素-氢化大豆磷脂-胆固醇(1∶20∶5)、10%半乳糖苷;最佳工艺为50℃成膜,30 m L pH 6.0的PBS溶液洗膜,40℃下水合1.5 h。所得Lac-CTD-lips外观呈淡蓝色乳光,粒子形态呈球型,表面较圆整,无粘连。平均粒径为(123.9±4.8)nm(n=3),粒径分布呈单峰,Zeta电位为(-0.36±0.81)m V(n=3),包封率可达75%以上。结论 GC-MS适用于斑蝥素的定量测定,正交试验优选的制备工艺稳定可靠,所得的Lac-CTD-lips包封率较高、粒径小,外观形态好。     

姜黄素长循环脂质体的制备及评价

目的:研制姜黄素长循环脂质体。方法:采用乙醇注入法制备姜黄素长循环脂质体,应用微柱离心法测定包封率,以包封率为指标,分别考察缓冲液种类、药脂比、胆固醇用量、不同相对分子质量的PEG-胆固醇、不同pH、离子强度等对脂质体的影响,在此基础上用正交设计[L₉(4³)]对处方进行优化。结果:经乙醇注入法制得的脂质体的包封率为(88.27±2.16)%,平均粒径为(136±18)nm,粒度分布均匀,呈单峰分布,4℃放置30 d包封率无明显变化。结论:姜黄素长循环脂质体制备工艺简单可行,姜黄素长循环脂质体制剂学性质稳定。