慢性乙型肝炎患者外周血SOCS3 mRNA的表达及其与Th17的关系

 目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)以及细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3) mRNA的表达状况,探索CHB患者SOCS3 mRNA表达与Th17的关系。方法 选取2021年2—8月于某院门诊就诊的30例CHB患者为研究对象,并选取同期正常体检者15例为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测外周血Th17细胞频数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清细胞因子IL-17A和IL-23表达水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定外周血SOCS3、维甲酸相关孤儿核受体γt (RORγt) mRNA表达水平,并比较两组患者的检测结果。结果 CHB患者外周血Th17细胞频数及其效应分子IL-17A、IL-23表达水平高于对照组(均P＜0.05),Th17细胞频数、IL-17A与HBV DNA水平之间存在正相关(r值分别为0.570、0.563,均P＜0.005)。CHB患者外周血SOCS3、RORγt mRNA表达水平高于对照组(均P＜0.05),两者与HBV DNA水平正相关(r值分别为0.662、0.561,均P＜0.05)。CHB患者SOCS3 mRNA与RORγt mRNA、Th17细胞频数、IL-17A之间存在正相关(r值分别为0.552、0.626、0.826,均P＜0.05)。结论 CHB患者外周血SOCS3 mRNA的异常高表达,可能通过调节RORγt mRNA的表达来影响Th17的分化及其效应分子的分泌。     

脓毒症患儿外周血Th17细胞水平的变化 及其临床意义

摘要:目的　探讨外周血辅助性T 细胞17（Th17）细胞水平在儿童脓毒症发病中的作用及临床价值。方法　选取脓毒症患儿36例;健康儿童20例为正常对照组。分离外周淋巴细胞后,分别采用流式细胞仪检测Th17细胞比例;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测Th17细胞特异性转录因子即维甲酸受体相关孤儿受体γt（RORγt）mRNA 表达水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-6,IL-17及IL-23的含量。结果　与健康对照组比较,脓毒症患儿组外周血Th17细胞比例增高（t＝3.68,P＜0.05）;脓毒症患儿组RORγt mRNA 表达水平也显著高于健康对照组（t＝8.32,P＜0.05）;同时脓毒症患儿组细胞因子含量（IL-6,IL-17,IL-23）明显高于健康对照组（P＜0.05）。此外,脓毒症死亡组患儿外周血Th17细胞水平（2.2±0.5）%显著高于存活组（0.8±0.3）%（t＝4.67,P＜0.05）,外周血Th17细胞比例与患儿死亡率呈正相关（r＝0.24,P＜0.001）。结论　Th17细胞参与了脓毒症的炎症反应,检测Th17细胞水平有助于儿童脓毒症的早期诊断、治疗及预后的判断。     

子痫前期阴道念珠菌感染孕妇Th17/Treg及其相关细胞因子的表达

目的 探讨子痫前期(PE)阴道念珠菌感染孕妇Th17/Treg及其相关细胞因子水平的表达。方法 选取2020年3月-2021年3月武汉市洪山区妇幼保健院和武汉市第三医院收治的149例PE患者,按照阴道念珠菌感染情况分为感染组32例、非感染组117例。收集两组的临床资料;检测患者辅助性T17细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)及其特异性转录因子维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA相对表达水平及血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、IL-21、IL-23、转化生长因子-β(TGF-β)各相关细胞因子水平。结果 感染组患者外周血Th17水平及Th17/Treg比值、RORγt mRNA相对表达水平、IL-6、IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β水平高于非感染组,而Treg水平、Foxp3 mRNA相对表达水平、IL-10水平低于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 阴道念珠菌感染能影响患者Th17/Treg平衡及相关细胞因子水平的分泌,其与PE可能存在一定关联。     

EV71型手足口病患儿外周血RORγt mRNA与IL-17A和IL-23水平变化及其意义

目的探讨手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)患儿血液中转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA、白介素-17A(IL-17A)、白介素-23(IL-23)表达差异及其意义。方法将某医院2016年7月-2018年7月50例确诊为EV71感染的HFMD患儿分为重症组(15例)、轻症组(35例),20名同龄健康儿童作为对照组,采用液相芯片技术检测血液IL-17A、IL-23细胞因子水平,通过实时荧光定量PCR检测RORγt mRNA的表达水平。并进行组间比较。结果重症组患儿血清IL-17A、IL-23细胞因子水平和外周血RORγt mRNA表达水平均高于轻症组及对照组(P<0.05),轻症组与健康对照组比较差异无统计学意义。结论手足口病发生发展可能与外周血IL-17A、IL-23浓度升高及Th17细胞特异性转录因子RORγt mRNA表达升高引起免疫系统异常有关,值得进一步研究。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17及相关细胞因子表达研究

目的探讨Th17细胞及相关细胞因子与慢性乙型肝炎(CHB)病情的关系。方法采用RT-PCR检测慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者及健康对照外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞的特异性转录因子RORC mRNA及相关细胞因子TGF-β、IL-23、IL-6、IL-22、IL-1βmRNA表达水平,采用ELISA法检测CHB患者及健康对照PBMCs培养上清液中IL-17、IL-22的水平,比较不同组各生物指标分布的差异。结果与健康对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC、TGF-β、IL-23、IL-17、IL-6、IL-1βmRNA含量随病情加重而升高,IL-22mRNA随病情加重而降低。CHB患者PBMCs培养上清液中IL-17、IL-22水平,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论 Th17细胞以及诱导Th17分化相关的细胞因子参与了CHB病情发展。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17及相关细胞因子表达研究

目的 探讨Th17细胞及相关细胞因子与慢性乙型肝炎(CHB)病情的关系.方法 采用RT- PCR检测慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者及健康对照外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞的特异性转录因子RORC mRNA及相关细胞因子TGF-β、IL-23、IL-6、IL-22、IL- 1βmRNA表达水平,采用ELISA法检测CHB患者及健康对照PBMCs培养上清液中IL- 17、IL- 22的水平,比较不同组各生物指标分布的差异.结果 与健康对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC、TGF-β、IL-23、IL-17、IL-6、IL- 1βmRNA含量随病情加重而升高,IL- 22mRNA随病情加重而降低.CHB患者PBMCs培养上清液中IL- 17、IL-22水平,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 Th17细胞以及诱导Th17分化相关的细胞因子参与了CHB病情发展.     

外周血Th17/Treg细胞平衡与儿童口腔溃疡严重程度的相关性分析

目的 探讨外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡与儿童口腔溃疡(OU)严重程度的关系。方法 选择浙江中医药大学附属广兴医院2018年5月—2020年7月收治的72例OU患儿进行研究(OU组),并选取同期75例体检健康儿童进行对照分析(健康组)。利用流式胞仪测定外周血Treg细胞、Th17细胞百分比，计算Th17/Treg细胞比值；利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测定叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA表达水平，计算RORγt/Foxp3比值；比较不同严重程度OU患儿外周血Th17、Treg、Th17/Treg及血清RORγt、Foxp3 mRNA水平、RORγt/Foxp3比值；Pearson法分析OU患儿外周血Th17、Treg、Th17/Treg水平与血清RORγt、Foxp3 mRNA水平、RORγt/Foxp3比值，外周血Th17细胞百分比与Treg细胞百分比，及血清RORγt mRNA水平与Foxp3 mRNA水平的相关性。结果 OU组患儿外周血Th17细胞百分比、Th17/Treg细胞比值...     

Th17/Th22/Treg细胞及其细胞因子在先兆流产发病中的作用

目的探讨Th17/Th22/Treg细胞及其细胞因子在先兆流产发病中的作用。方法采用流式细胞术检测20例先兆流产组患者和20例正常对照组女性外周静脉血Th17/Th22/Treg细胞频数,采用ELISA双抗体夹心法检测血清中IL-17A、IL-22、IL-23和IL-35细胞因子,RT-PCR检测Th17/Th22/Treg细胞的转录因子(ROR-γt/AHR/Foxp3)的mRNA表达水平。结果先兆流产组的Th17和Th22细胞百分比高于正常对照组;Treg细胞百分比低于正常对照组;Th17/Treg比例失衡,上述差异均有统计学意义(P0.01)。先兆流产组的IL-17A、IL-22和IL-23表达水平高于正常对照组;IL-35表达水平低于正常对照组;IL-17A/IL-35比例失衡,上述差异均有统计学意义(P0.01)。先兆流产组外周血中Foxp3的mRNA表达明显低于对照组;AHR和ROR-γt的mRNA表达明显高于正常对照组,上述差异均有统计学意义(P0.01)。结论 Th17/Th22/Treg细胞失衡可能导致先兆流产发生。     

川崎病患儿不同时期外周血Th17/Treg细胞特异性转录因子以及相关细胞因子变化研究

目的阐明Th17细胞特异性RORγt、相关细胞因子IL-17A、IL-6和Treg细胞特异性FOXP3、相关细胞因子IL-10、TGF-β在川崎病不同时期的表达以及与冠状动脉损伤(CAL)、静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗反应性的关系。方法选择85例川崎病患儿为病例组,30例健康儿童为对照组,病例组患儿于开始IVIG治疗前、治疗后3、21 d取外周血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血细胞因子IL-10、IL-17A、TGF-β及IL-6水平,实时PCR检测RORγt mRNA和FOXP3mRNA表达水平。结果病例组患儿治疗前血中IL-17A、IL-6比对照组儿童高,差异有统计学意义(P0.01);IVIG治疗3、21 d后IL-6显著低于治疗前,差异有统计学意义(P0.01)。血IL-17A在治疗3 d后有所下降,但与治疗前相比差异无统计学意义(P0.05);治疗21 d后IL-17A显著下降,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。IL-10明显高于对照组(P0.01),而TGF-β与对照组差异无统计学意义(P0.05);IVIG治疗3 d后IL-10无显著下降(P0.05),TGF-β水平在IVIG治疗前、治疗后3、21 d差异无统计学意义(P0.05)。与对照组儿童比,病例组患儿治疗前外周血细胞FOXP3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P0.05),治疗3 d时FOXP3 mRNA表达水平显著上升,RORγt mRNA显著升高,差异均有统计学意义(P0.01);治疗3、21 d时Th17的RORγt mRNA表达水平均有所下降,仍高于对照组儿童。川崎病CAL患儿IL-10、IL-17A均高于无CAL患儿,IVIG无反应型的川崎病患儿IL-10及IL-17A均高于IVIG敏感型的患儿,差异均有统计学意义(P0.01)。结论川崎病患儿急性期外周血中Th17的转录因子RORγt以及细胞因子IL-17A、IL-6升高,而Treg细胞特异性FOXP3及其细胞因子IL-10降低;川崎病患儿外周血IL-17A的持续高水平与川崎病IVIG无反应以及CAL有关。本研究为阐明川崎病的发病机制以及治疗提供了科学依据,为IVIG无反应以及IVIG治疗的敏感性判断提供了潜在的标志物。     

尖锐湿疣患者外周血Treg/Th17细胞平衡及相关转录因子的表达

目的探讨Treg/Th17细胞失衡在尖锐湿疣(CA)发病及复发机制中的作用及意义。方法选取52例CA患者(初发27例,复发25例)作为研究组,30例健康者为正常对照组,采用流式细胞术(FCM)检测其外周血Treg、Th17细胞的比例,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA和RORγt mRNA的表达水平。结果 CA患者外周血Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达水平高于正常对照组,复发组高于初发组,差异均有统计学意义(均P0.05);Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平低于正常对照组,复发组Th17细胞比例低于初发组,差异有统计学意义(均P0.05);Treg/Th17比值高于正常对照组[4.60(3.20,8.68)vs 1.39(1.05,2.05)],复发组高于初发组[8.19(4.21,10.81)vs 3.52(2.47,4.85)],差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 CA患者存在Treg/Th17细胞失衡,复发患者Treg/Th17细胞失衡更显著,并可能在CA发病及复发机制中起重要作用。     

复发性流产患者外周血FOXP3 mRNA、RORγt mRNA表达及临床诊断价值

目的:探讨外周血中FOXP3mRNA、RORγt mRNA在复发性流产(RSA)患者的表达及临床诊断效能。方法:选择2018年1月-2019年12月本院就诊的RSA患者106例为RSA组,早孕健康女性39例为健康早孕组,健康体检女性42例为健康体检组,实时荧光PCR技术测定各组妇女外周血中FOXP3mRNA、RORγtmRNA表达,酶联免疫吸附试验测定白细胞介素-6、7(IL-6、7)、人胸腺活化调节趋化因子17(CCL17)、CC趋化因子受体4(CCR4)水平;绘制ROC曲线,分析FOXP3mRNA、RORγtmRNA诊断RSA效能。结果:RSA组FOXP3mRNA水平高于健康体检组但低于健康早孕组,RORγtmRNA、IL-6、IL-7水平均高于健康早孕组及健康体检组,CCL17和CCR4水平低于健康早孕组但高于健康体检组(均P<0.05)。ROC曲线分析,FOXP3mRNA联合RORγtmRNA检测诊断RSA的曲线下面积为0.962,敏感性(94.3%)、特异性(92.2%)均高于单一项目检测(P<0.05),准确率达100%。结论:外周血中FOXP3mRNA、RORγtmRNA在RSA患者中表达异常,可能与机体免疫紊乱有关,二者联合检测能获得较高的诊断RSA效能。     

老年糖尿病患者口腔颌面部感染病原菌特点及Th17/Treg细胞免疫变化

目的探讨老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)病原学特点及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞免疫的变化。方法选择三亚市人民医院老年科2017年1月-2019年3月收治的老年糖尿病患者142例作为研究对象,根据患者是否发生OMSI分为感染组82例及非感染组60例。分析感染患者病原菌分布及耐药性,分别采用流式细胞术及酶联免疫吸附法检测两组患者外周血中Th17/Treg及白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果感染患者临床标本共检出病原菌87株,其中革兰阳性菌57株,占65.52%,革兰阴性菌30株,占34.48%;检出的主要革兰阳性菌对头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑林和氨苄西林耐药率较高;检出的主要革兰阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素耐药率较高;感染组Th17(17.52±2.18)%、Th17/Treg(3.01±0.24)、IL-17(65.67±18.24)pg/ml、IL-23(42.08±11.39)pg/ml均高于对照组(均P<0.05),Treg(5.83±1.06)%、IFN-γ(18.89±5.22)pg/ml、TGF-β水平(23.24±6.01)pg/ml均低于对照组(P<0.05)。结论老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染病原菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血链球菌、普雷沃氏菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,可根据耐药性选用合理抗菌药物,感染患者Th17/Treg失衡,Th17细胞及促炎细胞因子表达升高,Treg细胞及抑炎细胞因子表达降低。     

Fyn在母胎界面的表达及免疫调控作用

目的研究Fyn在母胎界面的表达及作用。方法构建妊娠和自然流产小鼠模型,免疫组化、实时荧光定量PCR、western-blot检测子宫胎盘组织中Fyn表达;建立LPS诱导的小鼠流产模型,以Fyn活性抑制剂,计算胚胎吸收率,实时荧光定量PCR和流式细胞学技术检测炎症因子(IL-17、RORγt、IFN-γ和TNF-α)水平、Th17和Treg细胞含量。结果 Fyn水平在小鼠妊娠第4.5天最高,着床后明显降低;Fyn主要表达于子宫系膜淋巴聚集区的淋巴细胞中,自然流产组Fyn表达高于正常妊娠组;SU6656抑制LPS诱导的小鼠流产和IL-17、RORγt、TNF-α的异常高表达,以及Th17细胞含量的升高。结论 Fyn通过Th17细胞等免疫因素参与母胎免疫调控及妊娠维持。     

儿童支原体肺炎的Th17/Treg细胞平衡变化及Notch信号通路作用研究

目的探究儿童支原体肺炎的辅助型T细胞17/调节型T细胞(help T cell 17/T regular cell,Th17/Treg)平衡变化及Notch信号通路作用。方法选取2017年1月-2019年2月新乡市中心医院收治的肺炎支原体肺炎患儿50例,根据肺部是否出现哮鸣音,分为喘息组23例和非喘息组27例,以及同期于该医院体检的健康儿童30名作为对照组。抽取所有研究对象的空腹静脉血5 ml,采用流式细胞术检测Th17/Treg细胞比例;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)水平;采用荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR法)检测Notch信号通路分子(Notch1、Hes1)及Th17/Treg转录因子(Foxp3、RORγt)的表达情况;比较三组研究对象的肺功能指标水平1秒用力呼气容积(1 second forced expiratory volume,FEV1)、用力肺活量(Forced vital capacity,FVC)、峰值呼气流量(Peak expiratory flow,PEF)及肺活量为25%、50%、75%时的最大呼气流速(V25、V50、V75)。结果喘息组的Th17、Th17/Treg比例高于非喘息组和对照组,Treg比例低于非喘息组和对照组(P<0.05);喘息组的Foxp3表达及IL-10水平低于非喘息组和对照组,RORγt表达及IL-17水平高于非喘息组和对照组(P<0.05);喘息组的Notch1、Hes1表达高于非喘息组和对照组(P<0.05);喘息组的FEV1、FEV1/FVC、PEF、V25、V50、V75等肺功能指标水平低于非喘息组和对照组(P<0.05)。结论支原体肺炎患儿体内Th17/Treg细胞比例失衡,Notch信号通路相关分子水平升高,导致患儿肺功能下降,Notch信号通路可能通过干预Th17/Treg细胞分化,影响相应细胞因子水平,参与支原体肺炎发生进展。     

卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子的变化趋势及其临床意义

目的:分析卵巢癌患者外周血Thl和Th2细胞的细胞因子变化,为其免疫治疗提供实验依据。方法:用刺激物刺激43例卵巢癌患者外周血CD3+T细胞增加细胞因子的表达,然后加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗体与抗原结合,最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中相应的细胞因子水平,同时设正常对照组,以评价其水平变化趋势。结果:卵巢癌患者Thl型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)表达水平较正常对照组显著降低,Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平较正常对照组升高,差异有显著性。结论:卵巢癌患者Th2型细胞因子模式占优势,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。     

慢性乙型肝炎患者肠源性内毒素血症中免疫调节细胞因子表达变化的研究

目的：研究慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者肠源性内毒素血症（intestinal endotoxemia, IETM）中与调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）、Th17细胞相关免疫调节细胞因子的表达变化。方法：应用ELISA法分别对80例CHB患者和20例健康对照者的血浆IL-10、TGF-β、IL-6、IL-17、IL-23及内毒素水平进行检测。根据测定的内毒素水平,将CHB患者分为内毒素阳性组和内毒素阴性组。结果：CHB患者血浆IL-10、TGF-β、IL-6、IL-17、IL-23水平均明显高于健康对照组（Z值分别为5.265、6.859、6.894、5.028、6.877,均P〈0.01）。内毒素阳性组患者明显高于内毒素阴性组和健康对照组（H值分别为45.833、48.423、48.984、75.184、75.814,均P〈0.01）。结论：CHB患者IETM时血浆中与Treg、Th17细胞相关细胞因子水平进一步增高。     

Th1/Th2/Th17型细胞因子在非小细胞肺癌治疗过程中的临床意义

目的探讨Th1/Th2/Th17型细胞因子在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗过程中的临床意义。 方法收集56例初步诊断为NSCLC患者化疗前、第1~4次化疗的外周血标本,用流式细胞术微球阵列法(flow cytometry microsphere array,CBA)检测其血清中Th1/Th2/Th17型细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ)水平,并分析上述指标与NSCLC患者各个治疗阶段的关系。 结果在第4次化疗后,IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平显著上升,与前3次差异有统计学意义(P<0.05)。IL-6、IL-17水平均有显著下降,并与化疗前差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ水平在化疗阶段存在波动,其第2~4次化疗均相较于第1次化疗存在显著性差异(P<0.05)。 结论Th1/Th2/Th17型细胞因子水平随着NSCLC化疗病情的缓和达到趋势性稳定,说明研究细胞因子失衡导致的免疫紊乱在NSCLC诊疗中有重要意义。