丹芍化纤胶囊对肺纤维化大鼠MMP-2和TIMP-1表达的影响

目的 观察丹芍化纤(DSH)胶囊对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)表达的影响,并初步探讨其抗肺纤维化的作用机制.方法 选取30只SD大鼠,随机分为正常对照组、肺纤维化模型组和丹芍化纤胶囊治疗组.在模型组和治疗组大鼠的气管内注射博来霉素(5mg·kg...     

丹芍化纤胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝脏Smad-7表达的影响

目的探讨Smad7在大鼠肝纤维化肝脏中的表达及丹芍化纤胶囊抗大鼠肝纤维化对其表达的影响。方法雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组,除正常组外,其余采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后两治疗组分别予以低剂量(0.5g/kg)、高剂量(1.0g/kg)丹芍化纤胶囊灌胃治疗8周。实验结束后测定肝脏指数,光镜下观察肝组织纤维化程度,同时免疫组化SABC法检测肝组织中Smad7的表达。结果Smad7在肝纤维化大鼠肝脏中表达明显减少(0.98±0.20/12.80±2.32),治疗8周后,治疗组与肝纤维化模型组、自然恢复组比较,肝脏指数、肝纤维化程度显著减轻;肝脏Smad7表达显著增加(10.42±2.74/1.74±0.29)。结论丹芍化纤胶囊能显著增加肝纤维化大鼠肝组织中Smad7的表达,可能是其发挥抗纤维化作用的机制之一。     

缬沙坦对肝纤维化大鼠TGF-β_1/Smad3,Smad7表达的影响

目的探讨缬沙坦对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3,Smad7表达的影响。方法复合因素法制作大鼠肝纤维化模型,在制模的不同阶段(2、4、6、8周)采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测大鼠血清中TGF-β1含量的变化,免疫组化法测定肝组织Smad3及Smad7表达的变化;并将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、8周模型组及缬沙坦治疗组。缬沙坦治疗组在造模8周后予以缬沙坦(20mg/Kg,1次/日,共2周)灌胃,正常对照组和8周模型对照组予以等量蒸馏水(1次/日,共2周)灌胃,治疗结束,2周后处死各组大鼠,免疫组化法检测Smad3及Smad7在大鼠肝组织中的表达。结果与正常对照组相比,2、4、6、8周模型组大鼠血清TGF-β1的含量及肝组织Smad3的表达进行性升高,而肝组织Smad7的表达进行性减少(P<0.01);给予缬沙坦干预后,血清TGF-β1的含量及肝组织Smad3的表达较模型明显减少,而Smad7的表达明显增加(P<0.01)。结论缬沙坦可通过降低肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3的表达,增加Smad7的表达,发挥其抗肝纤维化的作用。     

培哚普利对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1及其Smad3、7的影响

目的：探讨培哚普利抗大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。方法：用培哚普利治疗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型。免疫组化技术检测TGF-β1、Smad3及Smad7在肝内的表达及定位，常规生化方法检测肝功能，放射免疫方法检测透明质酸（HA），肝组织VanGiseonr染色、HE染色。结果：经培哚普利治疗后大鼠肝组织内TGF-β1及Smad3表达降低，而Smad7的表达增加。TGF-β1及Smad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆，Smad7则主要在肝细胞浆表达。血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、HA显著减低，肝小叶结构趋于正常，纤维间隔明显变薄。结论：培哚普利能有效地减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度，与其抑制肝内TGF-β1及Smad3．促进Smad7表达有关。     

白花丹醌对大鼠肝星状细胞活性氧及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的研究白花丹醌对大鼠原代分离肝星状细胞(HSC)活性氧(ROS)水平、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达的影响。方法分离原代大鼠HSC,接种活化期HSC,进行α-SMA免疫荧光鉴定,分为空白组、TGF-β1组、NADPH氧化酶抑制剂组(DPI)、白花丹醌低、中、高剂量(2、4、8μmol·L~(-1))组。MTT检测白花丹醌对HSC增殖的影响;显微镜下观察白花丹醌对HSC形态学的影响;荧光探针法测定HSC内ROS表达水平;Western blot检测HSC中Smad2/3、p-Smad2/3和Smad7蛋白表达。结果经α-SMA免疫组织荧光鉴定,阳性率达91%,表明获得高纯度的大鼠原代HSC。MTT测定白花丹醌最佳给药浓度为2、4、8μmol·L~(-1);DPI组和白花丹醌各浓度组可不同程度下调HSC内ROS的表达;Western blot结果显示,与模型组比较,DPI和白花丹醌给药组Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白表达降低,Smad7蛋白表达增加。结论白花丹醌可能是通过下调ROS水平,进而降低Smad2/3和p-Smad2/3的表达,从而发挥抗HSC活化的作用。     

姜黄素对增生性瘢痕TGF-β1/Smad信号转导通路的影响

目的:探讨姜黄素对兔耳增生性瘢痕生长的抑制作用及其对TGF-p1/Smad信号通路的影响.方法:建立兔耳增生性瘢痕模型,随机分为模型组(B组)、姜黄素低剂量组(C组)、姜黄素高剂量组(D组);C组及D组分别涂抹浓度为2.5％及10％的姜黄素软膏,B组涂抹不含姜黄素的软膏基质;连续用药28d,同时以正常兔耳作对照组(A组...     

TGF—β1和Smad3在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的检测转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF—β1）和Smad3在子宫肌瘤组织中的表达,探讨两者的相关性。方法采用RT—PCR法分别检测子宫肌瘤组织以及邻近正常子宫平滑肌组织中TGF—β1和Smad3的mRNA表达情况。结果①TGF—β1在子宫肌瘤组织和正常子宫平滑肌组织中都有表达,且肌瘤组中TGF—β1的mRNA的表达（1．51±0．34）明显高于正常组（1．29±0．35）,差异有统计学意义（t=5．73,P=0．000）;②Smad3在肌瘤组和正常组都有表达,且肌瘤组中Smad3表达（1．36±0．20）明显高于正常组（1．13±0．27）,差异有统计学意义（t=7．34,P=0．000）;③肌瘤组中TGF—β1和Smad3的mRNA的表达呈正相关（rs=0．769,P=0．000）。结论TGF—β1能诱导子宫肌瘤纤维化,信号蛋白Smad3在其中发挥了重要作用。     

转化生长因子-β1对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖及Smad3、Smad7表达的影响

目的:观察转化生长因子(TGF)-β1对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖能力及其Smad3、Smad7蛋白表达的影响.方法:体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同剂量及不同作用时间的TGF-β1进行诱导,四甲基氮唑比色法检测细胞增殖能力变化,蛋白印迹法检测Smad3、Smad7蛋白的表达变化.结果:JEG-3细胞对TGF-β1的诱导作用表现为良好的浓度效应和时间效应.100、200μg/L TGF-β1作用后,细胞增殖率显著增加(P＜0.01),Smad3蛋白的相对表达量增加(P＜0.05或P＜0.01),Smad7蛋白无明显改变(P＞0.05);同时100μg/L TGF-β1作用12 h后,细胞增殖率显著增加,Smad3蛋白相对表达量增加(P＜0.05或P＜0.01),Smad7蛋白表达无改变(P＞0.05).结论:外源性TGF-β1能够促进绒毛膜癌JEG-3细胞的增殖,具有良好的浓度效应和时间效应;绒毛膜癌JEG-3细胞逃逸TGF-β1介导的生长抑制作用,可能是由于TGF-β1/Smads信号通路中的Smad3、Smad7蛋白发生异常而致.     

Smad7和TGF—β1在结直肠癌中的表达及意义

目的检测Smad7和TGF—β1在结直肠癌中的表达,探讨其在不同临床病理特征中的表达意义,以期为研究结直肠癌的发生发展提供理论帮助。方法本实验以140例结直肠癌标本作为研究对象,70例正常结肠黏膜组织作为对照,采用免疫组织化学技术,分别检测Smad7和TGF—β1的表达及其在不同临床病理特征之间的关系。结果结直肠癌中Smad7和TGF—β1的表达明显低于对照组,Smad7和TGF-β1的表达与结直肠癌浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移密切相关,二者在结直肠癌中的表达呈正相关。结论Smad7和TGF-β1在结直肠癌发生发展中具有重要协同作用,联合检测Smad7和TGF-β1的表达可能与判断预后有关。     

基于TGF-β1/Smads通路研究化纤中药颗粒干预纳米氧化镍所致肺纤维化的作用

目的 探讨化纤中药颗粒(HXF)对纳米氧化镍(NiO)所致的肺纤维化的干预效果和作用机制。方法 将28只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、纳米NiO组、纳米NiO+500 mg/kg HXF干预组和纳米NiO+1 000 mg/kg HXF干预组。Mssson染色和羟脯氨酸(Hyp)含量检测确定大鼠肺组织胶原蛋白沉积情况,Western blot检测大鼠肺组织Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、TGF-β1和Smad3蛋白的表达水平。结果 与对照组相比,纳米NiO组大鼠肺组织大量胶原纤维沉积,Hyp含量和Col-Ⅰ蛋白表达升高,TGF-β1/Smads通路中TGF-β1和Smad3蛋白的表达均明显升高(F=10.568,F=4.593,F=28.354,F=31.533,F=17.236,P<0.05);与纳米NiO组相比,Masson染色结果显示HXF干预组大鼠肺组织胶原沉积减少,肺组织Hyp含量降低,Col-Ⅰ、TGF-β1和Smad3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 HXF可通过抑制TGF-β1/Smads信号通路干预纳米NiO所致的肺纤维化。     

黄芪总黄酮对高血压大鼠肾脏TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的：研究黄芪总黄酮对自发性高血压大鼠肾脏的影响以及其可能的机制。方法：原发性高血压大鼠20只,随机均分为模型组和黄芪总黄酮治疗组,10只正常SD大鼠为正常对照组。取正常大鼠、原发性高血压大鼠及黄芪总黄酮治疗后的原发性高血压大鼠的肾脏,进行免疫组织化学染色和蛋白印迹实验,观察黄芪总黄酮对高血压大鼠TGF-β1、Smad2/3、Smad7的影响。结果：模型组与正常组比较,大鼠肾脏免疫组织化学染色及蛋白印迹显示TGF-β1、Smad2/3的表达显著升高（P<0.01）,Smad7的表达显著降低（P<0.01）;黄芪总黄酮治疗组与模型组比较, TGF-β1、Smad2/3的表达显著降低（P<0.01）,Smad7的表达显著升高（P<0.01）。结论：黄芪总黄酮对高血压大鼠肾脏TGF-β1/Smad信号通路有显著影响,黄芪总黄酮可能通过调节TGF-β1/Smad信号通路产生了对高血压大鼠肾脏的保护作用。     

TGF-β1/Smad信号通路相关因子在颅脑外伤大鼠体内的表达研究

目的 研究转化生长因子-β1/细胞内信号传导蛋白Smad(TGF-β1/Smad)信号通路相关因子在颅脑外伤大鼠体内的表达.方法 建立大鼠颅脑外伤模型,检测血清中的核心蛋白聚糖(Decorin)、TGF-β1、Smad2、Smad3含量,以及脑组织中的TGF-1、Smad2、Smad3、炎症介质刺激组织因子(TF)的含量.结果 结果表明重度损伤组与中度损伤组、轻度损伤组、空白对照组、正常组相比较,脑组织皮质与海马神经细胞的变性、丢失最严重,TGF-β1、Smad2、Smad3、TF血清蛋白的表达最高,血清中Decorin的表达最低.结论 TGF-β1/Smad信号通路与颅脑创伤诊断及损伤程度的判断关系密切,TGF-1信号因子可作为颅脑创伤的诊断、治疗、预后的判断指标.     

培哚普利和缬沙坦对肝纤维化大鼠TGF-β1及其Ⅱ型受体mRNA与Smad3、Smad7表达的影响

目的观察培哚普利和缬沙坦抗大鼠肝纤维化的疗效.方法 60只Wistar大鼠随机平均分为4组正常组、模型组、培哚普利治疗组和缬沙坦治疗组.四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,治疗组于造模第4周开始分别予以培哚普利和缬沙坦灌胃.RT-PCR检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅱ型受体(TGFRⅡ mRNA);免疫组化技术检测TGF-β1、Smad3及Smad7在肝内的表达及定位,肝组织HE染色检测病理改变.结果与模型组大鼠比较,经培哚普利或缬沙坦治疗大鼠肝内TGF-β1与TGFRⅡ mRNA、以及Smad3蛋白表达明显降低;而Smad7的表达增加.TGF-β1与Smad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆,Smad7则主要在肝细胞浆表达,上述物质在两种药物组之间表达差异无显著性(P＞0.05).培哚普利或缬沙坦治疗后肝小叶均趋于正常,纤维间隔明显变薄.结论培哚普利或缬沙坦均能有效地减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度,其机理可能与直接或间接抑制肝内TGF-β1、与TGFRⅡ mRNA及Smad3表达,并促进Smad7表达有关.     

TGF-β/Smad3信号参与介导TRB3的促肿瘤作用

目的研究TRB3介导的促肿瘤作用与TGF-β/Smad3信号通路的关系。方法利用PCR扩增具有组成活性的Smad3突变体Smad3D,并将其构建至pcDNA3.1/Myc-His(-)B真核表达载体中。在稳定沉默TRB3的HepG2细胞中转染Smad3D-Myc表达质粒,利用G418筛选稳定表达Smad3D-Myc的细胞株。利用双荧光素酶报告基因系统检测3TP-lux转录活性。利用Transwell实验观察细胞侵袭能力变化。结果成功构建Smad3D突变体真核表达质粒。成功建立稳定沉默TRB3,同时稳定表达Smad3D突变体的HepG2细胞株。过表达Smad3D能明显增强3TP-lux转录活性,并在一定程度上逆转沉默TRB3后对肿瘤侵袭的抑制作用。结论 TGF-β/Smad3信号通路参与了TRB3促进肿瘤的作用。     

糖肾方抑制TGF-β1/Smad3通路促进小鼠肾小管上皮细胞胆固醇流出

目的:利用高糖诱导的小鼠肾小管上皮细胞(mouse tubular epithelial cells,mTECs)观察中药糖肾方颗粒及Smad3抑制剂SIS3对于TGF-β1/Smad3通路及细胞胆固醇流出通路的影响。方法:25 mmol/L高糖诱导mTECs细胞后,分别给予糖肾方及Smad3抑制剂SIS3干预,利用ELISA试剂盒检测细胞中脂质含量,利用Western blot和Real-time PCR检测细胞中TGF-β1/Smad3通路及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator 1α,PGC-1α)、肝脏X受体(liver X receptor,LXR)、ATP-结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ATP-结合盒转运蛋白G1(ABCG1)的表达。结果:糖肾方可以降低高糖诱导mTECs细胞中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酸酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量,上调高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量(P<0.05);糖肾方及Smad3抑制剂SIS3可下调高糖诱导mTECs细胞中TGF-β1、Smad3、CollagenⅠ和Fibronectin的表达,上调PGC-1α、LXR、ABCA1、ABCG1的表达(P<0.05)。结论:糖肾方可通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路促进细胞胆固醇流出,减轻肾损害。     

肺纤维化中TGF-β_1动态表达的Meta分析

目的:综合分析确定肺纤维化中TGF-β1(Transforming growth factors-β1,转化生长因子)表达的动态变化趋势。方法:采用Meta分析方法对二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化中TGF-β1表达的文献进行综合分析。结果:本次检索文献中,对TGF-β1在肺纤维化中的时相性研究中,二氧化硅组时间点主要有1、3、5、7、14、28、60d,博莱霉素组时间点主要有1、3、7、14、21、28d。二氧化硅组1、3、5、60d时间点的标准化差值(Standardize mean difference,SMD)无统计学意义(P>0.05),其余时间点有统计学意义(P<0.05)。博莱霉素组,各时间点的标准化差值都具有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1在二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化过程中表达升高,呈动态变化趋势,且变化趋势相近,但二氧化硅组表达水平高于博莱霉素组。     

丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠肝脏细胞凋亡与凋亡调控基因表达的影响

目的研究丹芍化纤胶囊对CCI4肝纤维化大鼠肝细胞及肝星状细胞 (HSC)凋亡的影响 ,以探讨丹芍化纤胶囊的作用机制。方法雄性Wistar大鼠制备CCI4肝纤维化动物模型 ,然后予丹芍化纤胶囊 (1 g/kg)灌胃治疗 8周 ,设正常对照组、肝纤维化模型组、自然恢复组、治疗组。实验结束后各组大鼠检测肝细胞凋亡、HSC凋亡情况及肝组织Bcl 2、Bax的表达。结果模型组大鼠肝纤维化程度均达肝纤维化的Ⅲ～Ⅴ期以上。治疗组较肝纤维化模型组、自然恢复组肝纤维化程度减轻 ;Bax的表达量下降 ;肝细胞凋亡指数下降 ;HSC凋亡增加 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论肝纤维化时Bcl 2、Bax的表达加强 ,丹芍化纤胶囊能够促进HSC凋亡 ,且通过下调Bax的表达 ,减少肝细胞的凋亡可能是丹芍化纤胶囊抗肝纤维化的机理之一。     

TGF-β1和Smad3在退变性腰椎滑脱症患者椎间盘中的表达及其相关因素分析

目的探讨退变性腰椎滑脱症患者椎间盘组织中TGF-β1和Smad3基因的表达及其临床相关影响因素。方法应用免疫组化染色法及JEDA801D形态学图像分析系统分别对42例退变性腰椎滑脱椎间盘髓核组织及12例正常对照组椎间盘组织中TGF-β1和Smad3表达水平进行测定,正常对照组均系腰椎爆裂性骨折患者椎间盘髓核组织。结果实验组TGF-β1和Smad3累计光密度值分别为(62.79±18.53)、(32.72±13.41),显著高于对照组(39.07±19.76)、(20.95±6.28),两者比较差异有统计学意义(P0.01);Pearson相关性分析显示实验组TGF-β1和Smad3表达水平呈正相关(r=0.709,P0.05);多元线性回归分析显示年龄、病程和滑脱分度对两种蛋白表达有重要影响。结论 TGF-β/Smad信号通路参与退变性腰椎滑脱的发生发展过程,调节该信号通路的表达可能为退变性腰椎滑脱症的治疗提供新的途径。