舟山群岛慢性乙型肝炎外周血T细胞CD80/CD28表达率与病毒载量的关系

目的研究慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血T淋巴细胞CD80／CD28表达率与血清HBV-DNA之间的相关关系。方法应用流式细胞技术检测78例慢性乙型肝炎患者外周血T细胞CD80与CD28表达率,实时荧光PCR法检测患者血清HBV-DNA含量,同时予以肝组织活检,观察病理组织炎症程度。结果(1)CHB患者轻度组、中度组和重度组T细胞CD80表达率分别为(3．06±1．39)％、(4．55±0．68)％、(5．10±0．25)％,3组间差异有显著意义(P<0．05);CD28表达率分别为(51．62±10．30)％、(37．18±4．89)％、(34．58±6．69)％,3组间存在显著性差异(P<0．05)。(2)CHB患者轻、中、重度炎症组血清HBV-DNA定量对数值(logarithm value,lg)分别为6．53±1．52、5．04±1．24与3．86±1．09。(3)CHB患者CD80表达率与HBV-DNA lg值呈负相关(r=-0．57,P<0．01);CD28与HBV-DNA lg值呈正相关(r=0．55,P<0．01)。结论外周血T细胞CD80／CD28表达率同CHB患者HBV血清含量存在一定的相关性,提示可用于检测HBV感染者清除HBV能力。     

β-arrestin 1在原发性胆汁性肝硬化患者PBMCs中的表达

目的探讨β-arrestin 1 mRNA在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中以及在各细胞亚群(CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞)中的表达情况。方法利用基于TaqMan-MGB探针建立的实时荧光定量RT-PCR技术,分别检测50例PBC患者、50例健康体检者和50例乙肝后肝硬化患者PBMCs中的表达;再利用磁珠分离PBC患者、健康体检者的CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞和单核细胞,经实时荧光定量PCR技术分析β-arrestin 1 mRNA在各细胞亚群中的表达情况。结果β-arrestin 1 mRNA在PBC患者PBMCs、CD4+T细胞、CD8+T细胞和单核细胞中的表达明显高于健康对照组和疾病对照组(P<0.01),在B细胞,PBC组与健康对照组没有明显差异(P>0.05);疾病对照组与健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论β-arrestin 1可能参与PBC发病机制,其中涉及CD4+T细胞、CD8+T细胞和单核细胞。     

小儿传染性单核细胞增多症免疫状况动态观察

目的研究小儿传染性单核细胞增多症(IM)免疫功能动态变化,观察EB病毒(EBV)感染对免疫功能影响,为判断预后及治疗提供依据。方法应用流式细胞术对23例IM患儿急性期及恢复期外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD19+抗原进行检测,并与30例对照组健康儿童比较。结果IM患儿急性期外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD19+抗原分别为(80.74±8.51)%、(17.53±6.08)%、(57.38±14.90)%、(7.35±6.24)%,CD3+、CD8+显著高于对照组[(68.47±7.01)%、(24.10±4.65)%,P<0.01],CD4+、CD19+较对照组降低[(38.63±6.14)%、(19.00±5.27)%,P<0.01]。恢复期CD8+降低[(34.52±12.28)%],仍高于对照组(P<0.01);CD4+升高[(26.91±6.24)%],仍低于对照组(P<0.01)。结论IM患儿急性期外周血淋巴细胞亚群显著异常,恢复期机体仍处于免疫紊乱状态,CD4+T细胞持续低下可能需免疫调节治疗。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血IL15的表达及临床意义

目的检测IL15在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者中的表达情况,并初步探讨IL15与疾病发生发展关系。方法采用荧光定量PCR检测30例PBC、30例乙型肝炎肝硬化患者(疾病对照)和30例健康对照者的外周血单个核细胞(PBMC)中IL15 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中IL15蛋白水平,并分析IL15与PBC患者肝功能指标之间的相关性。结果和健康对照组相比,PBC组和疾病对照组IL15 mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05);PBC患者IL15的蛋白表达水平与总胆红素(TBIL)、r-谷氨酰基转移酶(r-GT)、碱性磷酸酶(ALP)水平均呈显著正相关(r=0.599,P<0.01;r=0.407,P<0.05;r=0.452,P<0.05)。结论IL15的表达与PBC的发生发展存在一定的相关性,可能与肝内胆管损伤及其严重程度有关,可作为PBC的辅助诊断和病情监测指标之一。     

创伤患者单核细胞表面人白细胞抗原-DR表达变化及其临床意义

目的探讨创伤患者单核细胞表面人白细胞抗原-DR(HLA-DR)表达的变化规律及其与炎症反应的关系。方法采用流式细胞仪连续检测32例创伤患者[损伤严重度评分(ISS)＞16]伤后单核细胞HLA-DR的阳性分子的表达率,并据感染发生与否分组进行分析；同时检测白细胞介素(IL)-6和IL-10的变化。结果所有患者创伤后1 d单核细胞HLA-DR抗原为(73．67±7．32)%,显著低于正常值(P＜0．01),并于伤后4 d达到最低水平[(47．89±9．31)%]；合并感染并发症患者伤后1,2,4,7,14 d单核细胞HLA-DR抗原分别为(62．92±8．62)%、(45．34±5．96)%、(22．36±8．21)%、(25．14±5．17)%、(28．93±9．92)%,而无并发感染者分别为(75．32±6．53)%、(55．13±3．95)%、(53．21±5．36)%、(63．10±7．55)%、(88．34±8．07)%,相同时相两组比较,差异有统计学意义(P＜0．05,0．01)。创伤患者单核细胞HLA-DR表达与APACHEⅡ评分呈显著负相关(r=-0．435,P＜0．01)。创伤患者IL-10的变化和HLA- DR呈负相关,伤后2 d相关性最强(r=-0．782,P＜0．01)。结论(1)创伤后患者早期就存在免疫抑制状态；免疫抑制程度与病情严重度密切相关；(2)创伤患者CD14~+单核细胞的HLA-DR下降与创伤后感染有关；(3)创伤患者CD14~+单核细胞的HLA-DR的变化与血浆IL-10的变化有关。     

GM-CSF对类风湿性关节炎单核细胞MMP-2,MMP-9合成及CD147表达的调节作用

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者单核/巨噬细胞用GM-CSF刺激后,基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)合成及CD147表达的变化。方法:分离RA患者外周血及滑液单核细胞,用GM-CSF刺激,明胶酶谱法测定刺激后MMP-2,MMP-9的活性。用流式细胞术测定细胞表面CD147表达。结果:GM-CSF刺激后,RA单核细胞形态及表面标志改变,MMP-2,MMP-9合成及表面CD147增加,与GM-CSF的剂量相关;滑液单核细胞高于外周血。相关性分析证实CD147表达与MMP-2,MMP-9增加呈正相关。结论:GM-CSF可以促进单核/巨噬细胞CD147表达及MMP合成,这可能是RA发病中CD147表达及MMP合成的调控机制之一。     

Caspase在原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞的表达及其临床意义

目的检测caspase8和caspase3在原发性胆汁性肝硬化(PBC,primary biliary cirrhosis)患者外周血单个核细胞中的表达,探讨其与PBC疾病进展的相关性。方法采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法,检测30例PBC和30例正常对照者的外周血单个核细胞(PBMCs)中caspase8和caspase3的基因和蛋白表达。结果PBC患者PBMCs中的caspase8和caspase3的mRNA和蛋白的表达明显低于健康对照组(P<0.05)。结论PBC患者caspase8,3的表达与疾病的发生发展存在一定的相关性,可以为PBC的诊断和预防提供新线索。     

蜕膜巨噬细胞中Siglec-11的表达及其与复发性自然流产的相关性研究

目的检测正常妊娠早期人工流产和复发性自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）患者蜕膜巨噬细胞中免疫球蛋白样凝集素（sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins,Siglec）-11的表达差异,探讨母胎界面巨噬细胞中Siglec-11的变化对母胎免疫耐受微环境平衡的作用。方法84例正常早孕人工流产时（对照组）、84例RSA患者清宫时（RSA组）取其蜕膜;提取核酸和蛋白质,实时定量荧光PCR法分析RSA组和对照组Siglec-11 mRNA的表达水平;免疫组化和免疫荧光检测Siglec-11分子在RSA患者蜕膜巨噬细胞上的原位表达情况及其与对照组的差异,通过高通量组织芯片的方法验证;ELISA法检测RSA患者和正常对照组血清中辅助型T细胞1(T helper 1 cell,Th1)/Th2细胞因子的表达水平变化。结果与对照组比较,Siglec-11在RSA组mRNA和蛋白水平上显著降低(P<0.05);且RSA组Th1型细胞因子表达升高,Th2型细胞因子表达降低(P<0.05)。结论Siglec-11的表达降低影响巨噬细胞功能,可能与母胎免疫平衡被破坏及RSA的发病有关。     

乙肝患者外周血单核细胞比例与肝脏病变程度的关系研究

目的探讨乙肝患者外周血单核细胞比例与肝脏病变程度的关系。方法收集2010-2011年解放军302医院明确诊断的轻中度慢性乙型肝炎患者197例(肝炎组)、乙肝肝硬化患者248例(肝硬化组),以同期269例健康体检者作为对照组。采用Sysmex XE-2100血液分析仪进行全血细胞分析,实时荧光PCR扩增仪进行血清HBV DNA定量,ELISA法测定血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(IV.C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平。共390例患者进行了肝组织活检,参照中华医学会《病毒性肝炎防治方案》(2000年)进行肝脏炎症程度(G0-G4)及纤维化程度(S0-S4)评价。结果全血细胞分析结果表明,肝炎组和肝硬化组外周血单核细胞比例(分别为8.93%±3.05%、9.85%±3.61%)明显高于对照组(8.16%±1.88%,P<0.01),且肝硬化组明显高于肝炎组(P<0.01);血清HBV DNA定量分析表明,239例HBV DNA≥100U/ml的患者单核细胞比例(8.61%±2.83%)显著高于206例HBV DNA<100U/ml的患者(8.12%±2.53%,P<0.05);ELISA检测结果表明,肝硬化组肝纤维化指标HA、LN、IV.C、PCⅢ水平均明显高于肝炎组,且同组内肝纤维化指标升高者的单核细胞比例高于肝纤维化指标正常者;390例患者的肝组织活检病理结果显示,随肝脏炎症及纤维化程度加重,单核细胞比例升高的患者逐渐增多,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01)。结论乙肝患者外周血单核细胞比例升高与肝脏病变程度关系密切,可在一定程度上反映肝脏的炎症及纤维化水平。     

银屑病患者红细胞天然免疫分子CD35与CD59/ECKR相关性变化的初步研究

目的 研究银屑病患者红细胞表面CD35(Ⅰ型补体受体CR1)与CD59及红细胞趋化因子受体(ECKR)的表达及其相关性,并探讨其在银屑病发病机制中的作用。方法 应用流式细胞仪同时检测寻常型银屑病患者新鲜红细胞表面天然免疫分子CD35,CD59的表达水平;分离一定量的红细胞与IL-8结合,离心后取上清液用ELISA法测IL-8含量,反映ECKR结合活性。结果 正常人红细胞CD35与CD59呈明显负相关(r=-0.603,P<0.01),而在银屑病和恶性肿瘤则呈紊乱状态。银屑病红细胞CD35与ECKR结合活性呈正相关(r=0.515,P<0.005),而正常人和肿瘤患者两者无相关性。结论 红细胞CD35与CD59间及CD35与ECKR间可能存在某种调控机制,并在机体天然免疫反应和银屑病免疫发病机制中可能起重要作用。银屑病患者红细胞天然免疫功能亢进和红细胞CD35表达增加可能属反应性,而CD59表达可能属代偿性增强。     

原发性胆汁性肝硬化患者检测可溶性肿瘤坏死因子sTRAIL的意义

目的探讨PBC患者中的肿瘤坏死因子sTRAIL的表达情况。方法采用双抗体夹心法来检测60例PBC患者血清中的sTRAIL,并以60例自身免疫病患者(40例系统性红斑狼疮患者,8例类风湿性关节炎,12例强直性脊柱炎)、60例健康体检者为对照组。检测ALP、GGT、IgM与sTRAIL的相关性。结果 PBC患者血清中的sTRAIL的浓度显著低于健康体检者(P<0.05),并根据临床不同分期检测后发现,PBC患者血清中sTRAILⅢ期、Ⅳ期低于Ⅰ期、Ⅱ期结果(P<0.05),表明血清中sTRAIL在PBC患者中的检测有一定的显著意义,并与病情程度存在一定的相关性。并且sTRAIL与ALP、GGT、IgM均呈负相关(r=-0.4335,P<0.01、r=-0.6502,P<0.01、r=-0.5610,P<0.01)。结论 PBC患者血清中的sTRAIL浓度变化与原发性胆汁性肝硬化的病程呈一定的相关性,对于临床观察病情的发展,指导临床医生的诊断提供一些辅助的参考。     

急慢性ITP患儿调节性T细胞及相关细胞因子改变的研究

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Regulation T cell,Treg细胞)及其相关细胞因子在小儿特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的表达状况。方法收集ITP患儿51例及对照组(健康儿童)40例,空腹取静脉血抗凝。用流式细胞术检测调节性T细胞的百分比;用酶联免疫法(ELISA)检测IL-10、转化生长因子β-1(TGF-β1)的浓度。分别比较病例组与对照组、急性组与慢性组各指标的差异。结果病例组Treg细胞百分率(3.67±1.23)%显著低于对照组(5.16±2.34)%,两组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),慢性组Treg细胞百分率显著低于急性组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-10及TGF-β1结果病例组显著低于对照组,两组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),慢性组显著低于急性组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ITP患儿Treg细胞减少,其分泌的IL-10、TGF-β1等免疫抑制性细胞因子降低,这些改变在慢性病例尤其明显。上述变化表明Treg细胞及其相关细胞因子降低是ITP患儿发病的机制之一,也是慢性病例疗效不佳的原因之一。     

TNFSF9在原发性胆汁性肝硬化的表达及其临床意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清TNFSF9的浓度变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例PBC患者及与之配对的健康人血清中TNFSF9水平,并分析PBC患者血清TNFSF9与TBIL、γ-GT的关系。结果 PBC患者血清TNFSF9水平(1102.45±294.48)ng/L比健康对照组(123.67±62.60)ng/L显著增高,且与TBIL呈显著正相关(γs=0.549,P=0.000),但与γ-GT的相关性没有统计学意义(γs=0.291,P=0.062)。结论 TNFSF9可能参与了PBC的发病机制,可能是一个潜在的治疗靶点。     

熊果酸对TGF-β1诱导肝细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的 研究熊果酸(UA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肝细胞凋亡的干预作用及其机制.方法 采用原位灌注法分离健康SD大鼠原代肝细胞,随机分成空白对照组、UA自身对照组(UA 25μmol/L)、TGF-β1组(TGF-β12.5ng/ml)、UA干预组(UA 25μmol/L+TGF-β12.5ng/ml)、DPI干预组(DPI 0.5μmol/L+TGF-β12.5ng/ml).药物作用相应时间后,采用流式细胞术检测肝细胞增殖及凋亡情况,荧光定量PCR法检测肝细胞内CD95(Fas) mRNA的表达,Western blotting检测肝细胞内CD95蛋白的表达以及NADPH氧化酶(NOX)亚基p47phox移位至胞膜的蛋白量,并采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测肝细胞内ROS水平.结果 在TGF-β1刺激肝细胞前30min加入UA进行干预可明显降低TGF-β1诱导的肝细胞凋亡率(80.53％±1.56％vs 63.97％±3.19％,P＜0.01),肝细胞增殖指数明显增加(10.83％±2.03％vs 18.67％±1.60％,P＜0.01),细胞内CD95 mRNA及蛋白表达均明显下调(2.40±0.25 vs 1.28±0.15,P＜0.01;1.37±0.18vs 1.05 ± 0.15,P＜0.05),p47phox向膜移位明显减少(1.76±0.22 vs 1.13±0.12,P＜0.01),肝细胞中ROS水平明显降低(3.23±0.53vs2.12±0.45,P＜0.01).结论 UA可能通过抑制肝细胞内NOX激活,减少ROS产生,下调CD95的表达来抑制TGF-β1诱导的肝细胞凋亡.     

Study of the features of proton MR spectroscopy (1H‐MRS) on amyotrophic lateral sclerosis

Purpose:

To study the features of proton magnetic resonance spectroscopy (¹H‐MRS) on amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and its relation with clinical scale.

Materials and Methods:

Fifteen patients with definite or probable ALS and 15 age‐ and gender‐matched normal controls were enrolled. ¹H‐MRS was performed on a 3.0 Tesla GE imaging system (GE Healthcare, Milwaukee, WI). TE‐averaged Point Resolved Selective Spectroscopy was used. N‐acetylaspartate (NAA), creatine (Cr), Glu, and Glx (glutamate + glutamine) values of the motor cortex and posterior limb of internal capsule were acquired. The t‐test was used to compare differences between groups, and the correlations between the above values and clinical scale were analyzed.

Results:

The motor area and posterior limb of the internal capsule of ALS patients had lower NAA/Cr (1.91 ± 0.34, 1.53 ± 0.17) compared with normal subjects (2.23 ± 0.33, 1.66 ± 0.07), and the differences between groups were statistically significant (P < 0.01, 0.01). ALS patients had higher Glu/Cr (0.34 ± 0.05, 0.29 ± 0.06) and Glx/Cr (0.40 ± 0.04, 0.33 ± 0.06) compared with normal subjects (0.30 ± 0.03, 0.25 ± 0.04) and (0.32 ± 0.05, 0.26 ± 0.03), and the differences between groups were statistically significant (P < 0.01, 0.01). The Norris scale was negatively correlated with Glx/Cr of primary motor cortex by lineal correlation analysis (r = −0.75), and this correlation had statistical significance (F = 16.60; P = 0.001).

Conclusion:

Neuronal loss and Glu+Gln increase can be detected by using proton MRS in ALS patients. ¹H‐MRS is an useful tool in reflecting the characteristic changes of metabolite in ALS. J. Magn. Reson. Imaging 2010; 31: 457–465. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.

     

丙泊酚持续小剂量镇静对大面积烧伤患者CD14~+单核细胞HLA-DR表达的影响

目的 探讨大面积烧伤患者CD14+单核细胞HLA-DR抗原的表达规律及丙泊酚持续小剂量镇静对HLA-DR抗原表达的影响.方法 选取2010年3月-2011年11月收治的烧伤而积大于30％ TBSA的严重烧伤患者30例,其中17例给予常规治疗(常规治疗组),13例除常规治疗外还应用丙泊酚持续小剂量镇静治疗(丙泊酚治疗组),分别于镇静治疗前及治疗后第1、3、5、7天抽取外周静脉血,流式细胞仪检测CD14+单核细胞表面HLA-DR抗原表达情况.另取20例健康体检者作为健康对照.结果 大面积烧伤患者入院24h内CD14+单核细胞表面HLA-DR抗原表达率(25.07％±14.83％)显著低于健康对照组(76.45％±7.96％,P＜0.01).常规治疗组治疗后第3、5天CD14+单核细胞表面HLA-DR抗原表达率(分别为27.76％±11.36％、27.11％±14.49％)明显低于丙泊酚治疗组(分别为35.44％±11.55％、37.47％±15.46％),差异有统计学意义(p＜0.05),治疗前及治疗后第1、7天两组比较无统计学差异.结论 丙泊酚可能通过抑制应激激素的过度释放而减轻烧伤患者的过度应激反应,进而改善大面积烧伤患者的免疫功能.     

Iodine trapping and organification in patients with chronic renal failure

In vitro thyroid function tests were studied in 30 patients on regular hemodialysis. In addition, 8 patients (one not yet dialyzed) underwent perchlorate discharge testing and the salivary to plasma ratio of¹³¹I was measured to identify defects in iodine uptake or organification. When compared with 35 healthy controls, uremic patients had lower total T4 (5.8±0.4 vs 8.6±0.3 μg/100 ml) and total T3 (81±6 vs 124±5 ng/100 ml) but T3RU was higher in dialysis patients (35.5±0.9 vs 28±0.5%,P<0.01). The TSH levels were not different from those of controls. The RAI uptake 1 h after perchlorate was significantly higher than the control valve (0.6±0.14 vs 0.06±0.04,P<0.05). Similarly, the salivary to plasma ratio of¹³¹I was higher in patients with chronic renal failure (70±10:1 vs 40±4:1). It is concluded that there is altered iodine trapping in CRF patients but iodine organification appears to be normal.