苦味酸天狼猩红偏振光法鉴别Ⅰ型及Ⅲ型胶原纤维

肝纤维化程度是表明慢性肝损伤发展阶段的重要标志。为研究酒精性肝纤维化的程度，我们采用苦味酸天狼猩红染色偏振光法显示1型及匾型胶原［‘j。同时探索了影响偏振光强度的因素及改进方法。一、材料与方法1．取自近年活检的酒精性肝纤维化组织、尸检的肝纤维化、肝硬变及正常肝组织。2．肝组织经10％福马林固定，石蜡包理，切片厚3。6Pmo3．苦味酸天狼猩红染液配制：olg天狼猩红（Sir－iusRedF3B，英国），溶于100ml苦味酸饱和液中。切片脱蜡至水，苦味酸天狼猩红液浸染1小时，自来水洗，苏木素复染核、封片。并对比了不同染色时间的效…     

骨髓活检塑料半薄切片的染色

半薄切片的操作过程及方法简单 ,尤其适用于骨髓活体检查 ,切片中的各系统细胞形态接近于涂片形态。因ＨＥ染色不能完全显示骨髓中的一些特殊成分 ,故导致分辨率不够理想。作者针对这一问题建立一种适用于作骨髓半薄切片的染色方法。1　配制方法1 1　染色液的配制　 (1)苏木精、姬姆萨　根据Ｈａｒｒｉｓ苏木精和Ｇｉｅｍｓａ染液的配制方法。 (2 )酸性品红溶液　 1 2 %浓度。1 2　染色方法及步骤　 (1)将骨髓塑料半薄切片 (2 μｍ)附贴于载玻片上在加热板上使充分干燥。 (2 )Ｈａｒｒｉｓ苏木精染色 5ｍｉｎ ,自来水或蒸馏水冲洗。 (3)Ｇｉ…     

组织化学染色技术在超薄生物塑化标本中的应用

目的 探讨组织化学染色技术是否可以应用于塑化标本并验证染色塑化标本是否具有自发荧光。 方法 选取1个手掌标本经超薄生物塑化技术做成组织块,进行连续切片,切片数量56张,并按切片顺序进行染色处理：原始切片,苏木素-伊红染色,凡尔霍夫- 酸性品红染色,亚甲蓝-天青Ⅱ号染色,在扫描仪、光学显微镜和激光扫描共焦显微镜下观察染色效果和组织结构特点并进行比较。 结果 3种染色技术都可应用于塑化切片染色。苏木素-伊红染色显示肌肉、结缔组织呈红色或紫红色,骨质呈紫蓝色或蓝色。凡尔霍夫-酸性品红染色显示弹力纤维呈黑色,胶原呈红色,其他组织为黄色或棕黄色。亚甲蓝-天青Ⅱ号染色显示肌腱呈紫红色,骨质呈粉红色,软骨呈紫罗兰,其他组织呈紫色。但细胞内结构的染色效果并不理想。在激光扫描共焦显微镜下,胶原纤维、弹力纤维和肌肉纤维具有自发荧光,结构清晰可辨。结论 常用的组织化学染色技术适合于超薄塑化切片染色,染色切片的各种组织结构比未染色的观察效果好。染色后,塑化切片中具有自发荧光的结构在激光扫描共焦显微镜下亦可清晰显影。     

胶原纤维VanGieson染色改良法

胶原纤维是由纤维细胞产生的一种纤维蛋白成分。一般情况下是被酸性染料所染色 ,以往采用的最多的胶原纤维染色是 Van Cieson苦味酸性复红法 (1889) ,此法染色结果很好 ,胶原纤维被染成鲜艳的红色 ,肌组织、胞质及红细胞染成黄色 ,染色后 1～ 2个月 ,明显退色 ,给大量回顾性研究带来许多不便 ,为了解决这一问题 ,经过大量实验 ,我们将此法改良 ,选用丽春红 S代替酸性复红 ,不仅颜色更鲜艳 ,而更主要的是解决了退色问题 ,现将方法介绍如下 :1组织固定于 10 %的福尔马林中 ,常规脱水包埋 ;2组织切片脱蜡至水 ;3用 Weigert苏木素染 5分钟 ;4…     

一种不易褪色的Masson三色染色方法及其应用

目前常用的Ｍａｓｓｏｎ三色染色法染出的组织切片虽然颜色艳丽、色调对比分明,但容易褪色、难以长久保存。现介绍一种改良Ｍａｓｓｏｎ三色染色法,经实践证明染色稳定且不易褪色,可长时间保存,现介绍如下。1　材料和方法11　材料111　标本来自于中山医科大学法医病理学教研室及病理学教研室的解剖心脏200例及5例肿瘤标本。112　Ｂｏｕｉｎ液　饱和苦味酸水溶液75ｍｌ,甲醛25ｍｌ,冰乙酸5ｍｌ。113　Ⅰ液　1%比布列西猩红水溶液90ｍｌ,1%酸性品红水溶液10ｍｌ,冰乙酸1ｍｌ。114　Ⅱ液　磷钼酸25ｇ,磷钨酸25ｇ,蒸馏水100ｍｌ。115　Ⅲ液　苯…     

无醛固定液与甲醛固定液对组织形态学保存效果比较

组织固定是组织处理过程中最重要的环节,在病理诊断学中,10%中性缓冲福尔马林以其低成本、易配制和固定后组织保持优异的组织形态学特点而成为具有悠久传统的国际通用组织固定液。近年来,随着人们环保意识的提高,甲醛的危害性逐渐动摇了其作为病理学界固定“金标准”的地位,病理工作人员长期暴露于甲醛严重超标的环境中,对身体健康造成严重危害[1]。国外发达国家已经推广应用环保型固定液取代甲醛固定液。本实验通过配制3种无醛固定液来进行组织固定,通过 HE染色、组织化学染色(特殊染色),并以NBF作为对照来比较不同固定液对组织形态学方面的影响,试图建立新的高质量的组织固定液。     

改良神经髓鞘的依来铬氰R染色法

为研究周围神经髓鞘被覆状态 ,我们经常要进行髓鞘染色 ,在实践中 ,我们摸索了一种便捷、有效、经济的染色方法 ,介绍如下。一、材料和方法1.取材、固定、切片 :取大鼠正常坐骨神经组织 ,4%甲醛生理盐水固定。石蜡切片 6～ 10 μｍ厚 ,6 0℃左右烘箱烘 3～4ｄ。2 .试剂配制 :(1)依来铬氰Ｒ液 :依来铬氰Ｒ 0 .2ｇ ,蒸馏水 96ｍｌ,10 %铁明矾液 4ｍｌ,浓硫酸 0 .5ｍｌ。 (2 )苦味酸丽春红Ｓ液 :1%丽春红Ｓ水溶液 10ｍｌ,苦味酸饱和水溶液 86ｍｌ,1%醋酸水 4ｍｌ。3.染色程序 :(1)石蜡切片 ,常规脱蜡水洗 ,吸干或烘干切片。 (2 )依来铬氰Ｒ液染…     

显示平滑肌和胶原纤维的双色染色法

我室在动脉粥样硬化发病机理研究中,要求突出构成动脉壁中平滑肌和胶原纤维二种成分。但国内,外在显示胶原纤维或显示平滑肌的特殊染色中,一直没有特异性的染色法,多为复合染色,而且以显示其它成分为主。往往顾此失彼,不易得到清晰,染色鲜艳,突出平滑肌和胶原纤维成分。为了科研工作的需要,经反复试验,创造出了显示平滑肌和胶原纤维的双色染色法。一、试剂配制 1.丽春红3R(Poncean 3R)液:0.5gm丽春红3R和0.5gm磷钨酸(Phoshotungstic acid)     

塑料包埋技术在骨组织研究中的应用

目的研究塑料包埋技术制作的不脱钙硬组织切片,确定制作的关键步骤及用于骨组织研究的优点。方法选取狗胫骨节段或带有金属种植体的骨材料塑料包埋,LeicaSP1600切片机（德国）切片,用苦味酸品红染色观察,并与常规石蜡包埋相比较。结果不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、多孔材料及种植体周围骨组织的整合程度。与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小。结论应用规范塑料包埋技术制作不脱钙硬组织切片,更有利于行骨形态计量分析以及材料与骨整合的研究。     

塑料包埋技术在骨组织研究中的应用

目的 研究塑料包埋技术制作的不脱钙硬组织切片,确定制作的关键步骤及用于骨组织研究的优点.方法 选取狗胫骨节段或带有金属种植体的骨材料塑料包埋,LeicaSP1600切片机(德国)切片,用苦味酸品红染色观察,并与常规石蜡包埋相比较.结果 不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、多孔材料及种植体周围骨组织的整合程度.与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小.结论 应用规范塑料包埋技术制作不脱钙硬组织切片,更有利于行骨形态计量分析以及材料与骨整合的研究.     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

形态学检验方法在心肌组织样本中的应用

目的探讨形态学检验方法在心肌疾病中的应用,评价其优缺点。方法运用磷钨酸苏木素(PTAH)染色法、Masson 3色染色法、弹力纤维组织(ET)+Van Gieson(VG)染色法、刚果红染色法、过碘酸雪夫氏(PAS)染色法、革兰氏染色法、以及免疫组织化学法及透射电子显微镜对心肌组织进行检测。结果 HE染色对心肌组织的区分度不好;Masson 3色染色法对心肌细胞和胶原纤维有明确的区分作用;ET+VG染色法可以很好地区分弹力纤维、胶原纤维、肌纤维和淀粉样物质;刚果红染色主要用于淀粉样物质的检测;PAS反应可辅助诊断糖原累积症;免疫组织化学(IHC)技术在疾病模型的研究及对疾病的观察中具有重要辅助作用;电子显微镜对超微结构的观察是病因学诊断的重要手段。结论运用组织水平、亚细胞水平以及分子水平的形态检验方法,对心肌组织样本进行观察与评估,可以得到较好的效果。     

一种快速细胞学涂片染色方法

一种快速细胞学涂片染色方法黄勇进快速细胞学涂片染色法是根据病理常规ＨＥ染色的原理和涂片染色的特点进行改进和设计的。适用于阴道、食管、口腔等新鲜组织的刮片染色，特别适用于肿瘤普查及临床急需诊断的脱落细胞学检查。１材料和方法１．１染液配制甲液：（１）美蓝...     

PPA-O显示人体子宫组织中弹性和胶原纤维的组合染色法

在进行人体正常和肿瘤子宫组织的形态学研究中,选用丽春红S(ponceau S)、苦味酸(picric acid)和地衣红(orcein)进行组合染色,简称PPA-O法.经反复实验后,能够同时分别显示组织中弹性纤维、胶原纤维和平滑肌的分布及变化情况,得到了较好的染色效果,现将方法介绍如下.     

PTAH染色液配制的改进及应用体会

ＰＴＡＨ染色液配制的改进及应用体会王晓东为了缩短常规ＰＴＡＨ（ｐｈｏｓｐｈｏｔｕｎｇｓｔｉｃａｃｉｄｈｅｍａｔａｉｎ）染液制备的成熟时间，且能较长久地保存染液，与常规方法比较同样可获得满意的染色效果。我们主要根据化学反应原理［１］，对ＰＴＡＨ染液配制...     

改良镀银染色在大鼠脑缺血选择性神经元及轴突溃变中的应用

常规染色难以直接证实所有坏死或溃变的神经元 ,但镀银染色可显示溃变的神经元及轴突和轴突终末。本文介绍一种研究海马缺血性神经元死亡及其轴突溃变程度和时间过程的改良镀银染色方法。1　材料与方法1.1　动物模型　大鼠急性前脑缺血 2 0 min再灌流 2 d或 4d,1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉下 ,4%多聚四醛经左心室升主动脉灌注固定 ,取脑在同样的固定液中后固定 4～ 5 d,包括背侧海马的 2 0 μm冰冻切片 ,做改良的 Gallyas et al镀银方法染色 ,相邻切片作 HE常规染色。1.2　银染工作液的配制1.2 .1　预处理液　 9% Na OH和 1.2 % NH4NO3等…     

胶原纤维的天狼猩红染色法与Vangieson染色法的比较

胶原纤维是结缔组织的一个主要组成成分 ,也是临床上许多器官病理变化的特征之一。因此胶原纤维的染色有助于医学生更好地了解、巩固和掌握人体正常结构 ,同时对临床上判断器官的病理变化具有极其广泛的用途。传统的胶原纤维染色法多为Ｖａｎｇｉｅｓｏｎ染色法 ,该染色法只易使疏松结缔组织的胶原纤维上色 ,且色彩呈品红色 ,不够鲜艳 ,无法将胶原纤维的偏振光性质显示出来 ,而天狼猩红对胶原纤维染色效果较好 ,它既有Ｖａｎｇｉｅｓｏｎ染色法的优点 ,又弥补了其不足。1　材料与方法1 1　酸性品红 (上海试剂三厂 )、天狼猩红 (ＵＫ进口分装…     

广西猕猴房室结的形态学特征

目的探讨猴房室结的形态学特征,比较物种之间的生物学差异。方法取4例广西猕猴房室结区域,石蜡包埋,连续切片,分别用HE染色、Van Gieson染色和间苯二酚品红液染色,光镜观察其房室结的形态学特征和组织结构。结果猴房室结呈前后长的三角体状。左侧紧贴中心纤维体,右侧有胶原纤维和心房肌覆盖。向前延续为房室束。房室结内存在少量起搏细胞、Purkinje细胞和大量移行细胞。细胞间质内含量有大量胶原纤维和丰富的弹性纤维,两者交织成网。结论广西猕猴房室结的形态较人和其他动物相似,细胞成分较成年人典型,间质内胶原纤维和大量弹力纤维丰富。     

显示尼氏体方法的尝试

选用Bouin固定液固定新鲜脊髓,石蜡包埋切片,采用普通的苏木素一伊红染色,清晰地显示了神经细胞胞浆内的嗜碱性物质一尼氏体,而且较特染简单、经济、不易退色.1材料与方法取狗新鲜脊髓颈膨大固定于Bouin液24小时.(1)苦味酸75份(饱和),甲醛25份,冰醋酸5份(用前临时配制);(2)常规脱水包埋;(3)石蜡切片5μm; (4)HE染色;(5)中性树胶封片.2结果尼氏体呈兰色粒状和块状,清晰可见,背景呈浅红色(附图).     

OR-VB显示脂质和弹力纤维的组合染色法及其应用

在实验动物脂质代谢模型的建立中 ,分别对组织的脂质代谢和纤维进行染色与组合对照染色。本实验选用改进的ＯｉｌｒｅｄＯ乙醇饱和液 ,能较好的显示脂质成分 ,Ｖｉｃｔｏｒｉａｂｌｕｅ改造染色液 ,能显示冰冻切片组织中的弹力纤维。经过二种试剂组合染色后 ,能够同时显示血管组织内的脂质和管壁弹力纤维成分 ,色彩鲜艳 ,是较为理想的组合染色方法。1　材料和方法1 1　材料选用　材料来源于本学校实验动物中心的兔脂质代谢模型组织 ,经过 1 5 %中性甲醛固定液 ,能够使组织得到充分的固定[1] ,再进行冰冻切片和染色。1 2　试剂配制　 (1 )…