耐碳青霉烯类抗菌药物的肠杆菌科细菌耐药性与分子特征分析

目的了解对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的肠杆菌科细菌的发生及耐药情况,探讨耐药与产酶的关系。方法选取2011-2012年医院亚胺培南或美罗培南不敏感的肠杆菌科细菌15株,用琼脂稀释法测定最小抑菌浓度(MIC),改良Hodge试验和EDTA纸片协同试验筛选产碳青霉烯酶表型;PCR检测碳青霉烯酶基因及其他β-内酰胺酶基因,多位点序列分型(MLST)进行分子分型及同源分析。结果共收集碳青霉烯类抗菌药物不敏感肠杆菌科细菌15株;多黏菌素B和替加环素敏感性较高,均>90.00%;肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和黏质沙雷菌均检出产KPC酶菌株,占73.33%;11株产KPC酶菌中10株为KPC-2+ESBLs,1株为KPC-2+AmpC,其中3株为KPC-2+ESBLs+AmpC,4株非产KPC酶菌株中有2株ESBLs+AmpC,各有1株仅检测到ESBLs或AmpC酶,未检测到产金属酶及OXA酶菌株;MLST分型以ST11为主,共4株。结论医院产KPC-2酶细菌以肺炎克雷伯菌最多,产KPC菌株同时携带多种耐药基因与高度耐药相关;ST11型为医院优势流行型别。     

郑州市耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药趋势分析

目的了解本地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)表型并进一步分析其耐药机制,帮助临床合理使用抗菌药物。方法收集2014年1月-2017年8月细菌感染患者送检标本中分离的CRKP菌株82株,统计流行病学特征,用WHONET 5.6软件分析结果,EDTA双纸片协同法检测金属酶表型,PCR方法检测耐药基因。结果 82株CRKP中,科室主要分布在重症医学科和神经外科,标本主要为痰和尿。耐药特征表现为对包括碳青霉烯类在内的绝大部分β-内酰胺类抗菌药物耐药或敏感性降低,部分菌株对米诺环素、替加环素、磷霉素仍保持较高的敏感性。表型检测产金属酶的有20株,耐药机制检测结果显示有64株肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶(KPC)。结论本地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制主要以KPC为主,临床应加强对其监测,合理使用抗菌药物。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药性及耐药基因的研究

目的:研究耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及耐药基因类型,为合理使用抗菌药物及监测院内感染等提供有效的科学指导。方法:对医院收治的肺炎患者分离出的29株CRKP,采用改良碳青霉烯类失活(mCIM)试验法检测肺炎克雷伯菌中的碳青霉烯酶,通过聚合酶链反应(PCR)及测序方法对碳青霉烯酶基因KPC、IMP、NDM型、超广谱β内酰胺酶基因(ESBLs)、TEM、SHV、CTX-M型以及AmpC酶基因DHA进行检测。结果:29株耐药菌株对大部分临床常用抗菌药物高度耐药,对氟喹诺酮类抗菌药物和氨基糖苷类抗菌药物有较高的敏感性。表型确认试验中7株改良Hodge实验阳性,18株mCIM试验阳性。20株(占68.97%)菌检测到碳青霉烯酶基因,其中KPC为17.24%(5/29),IMP为13.79%(4/29),NDM为37.93%(11/29)。25株(占86.20%)菌检测到ESBLs菌株的基因,其中TEM型为62.07%(18/29),SHV型为79.31%(23/29),CTX-M型为62.07%(18/29)。3株菌检测到AmpC酶基因,其中DHA为10.34%(3/29)。29株CRKP中有14株既表达了碳青霉烯酶基因又表达了ESBLs的基因,共同表达率为48.28%。对耐药基因抽取其中部分阳性结果进行测序后均为目标基因,其中KPC为KPC-2、NDM为NDM-1。结论:29株CRKP对多种抗生素耐药率均较高,且对碳青霉类抗菌药物的耐药基因型主要为KPC-2和NDM-1,故加强院内感染预防控制措施,防止此类菌株的播散。     

2011年住院患者分离病原菌对抗菌药物耐药监测

目的 了解东营市人民医院临床分离病原菌的种类及对常用药物的耐药性,为临床抗菌药物经验选用提供参考.方法 对医院2011年分离菌株的种类及其药敏结果采用WHONET5.4软件进行数据分析.结果 2011年共收集非重复临床分离菌株1272株,其中革兰阴性菌868株占68.24％,革兰阳性菌284株占22.33％;真菌120株占9.43％;除万古霉素、替考拉宁、夫西地酸、喹奴普汀/达福普汀外,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对其他测试药物的耐药率均＞60.0％;肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌检出率分别为50.8％、59.1％;除碳青霉烯类外产ESBLs菌对其他测试药物的耐药率均显著高于非产ESBLs株,未发现对碳青霉烯类耐药菌株;铜绿假单胞菌检出率与耐药性无明显变化,对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢西丁敏感性均＞70.0％;鲍氏不动杆菌检出率及耐药性明显增长,除碳青霉烯类外,其余测试药物敏感率均＜35.0％;首次发现4株同时耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍氏不动杆菌.结论 2011年临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性呈增长趋势,首次发现多药耐药的鲍氏不动杆菌,应加强抗菌药物的临床应用管理和医院感染的控制.     

产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的研究进展

产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)细菌在世界范围内广泛流行,此酶不仅见于克雷伯菌属,在诸多革兰阴性细菌中皆可检测到.产KPC细菌除了对β-内酰胺类抗菌药物耐药,对其他类抗菌药物如氟喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类也多表现为耐药,受到广泛关注.此文对产KPC肺炎克雷伯菌的流行病学、检测方法、感染的治疗及控制进行了综述.     

产KPC型碳青霉烯酶细菌的耐药基因研究

目的检测乌鲁木齐市地区两所综合型大型三级甲等医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的KPC型耐药基因,分析耐碳青霉烯类的耐药机制。方法收集2014年8月-2015年5月45株对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肠杆菌科细菌;通过全自动细菌鉴定分析仪VITEK-2和MS筛选出耐亚胺培南或美罗培南或亚胺培南美罗培南同时耐药的肠杆菌科细菌,采用改良Hodge试验和聚合酶链反应(PCR)扩增检测细菌产KPC型碳青霉烯酶,对KPC酶阳性的菌株做质粒转移接合试验,并将质粒转移接合成功的菌株进行测序,分析其基因型别。结果针对碳青霉烯类抗菌药物耐药的45株菌,用改良的Hodge试验23株阳性,有26株经PCR基因扩增后的产物经DNA基因测序后,比对结果为KPC-2型碳青霉烯酶,质粒转移接合试验有9株转移成功;测序结果均为KPC-2型碳青霉烯酶。结论乌鲁木齐两所综合型医院耐碳青霉烯类的抗菌药物肠杆菌科细菌耐药机制主要携带KPC-2型碳青霉烯酶耐药基因,临床与实验室应给予重视。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌多重β-内酰胺酶基因型研究

目的:研究医院感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒介导的AmpC酶基因型的分布。方法:筛选出产KPC酶肺炎克雷伯菌,采用改良的Hodge试验、接合试验、聚合酶链反应(PCR)等方法确定多重β-内酰胺酶基因型。结果:收集并证实产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌26株,其中CTX-M型ESBL检出率最高;3株细菌同时编码ESBL和AmpC基因,其中2株细菌同时携带blaCTX-M-3、blaSHV-12和blaDHA-1三种β-内酰胺酶基因。结论:产KPC酶肺炎克雷伯菌同时携带有其他β-内酰胺酶耐药基因,CTX-M型ESBL最为常见,使细菌耐药性更为严重。     

改良Hodge试验检测KPC型碳青霉烯酶的临床应用

目的 探讨改良Hodge试验检测KPC型碳青霉烯酶最佳底物以及这种检测方法在临床上的应用.方法 收集213株多药耐药的肠杆菌科细菌,选用亚胺培南、美罗培南、厄他培南为改良Hodge试验的不同底物筛选产碳青霉烯酶表型株;采用聚合酶链反应(PCR)及耐药基因测序分析细菌的耐药基因型.结果 从213株肠杆菌科细菌中检出12株改良Hodge试验阳性株,其中7株为大肠埃希菌,2株为弗氏柠檬酸杆菌,臭鼻克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、聚团泛菌各1株;12株改良Hodge试验阳性菌体外药敏试验结果显示,对临床常用抗菌药物均耐药;PCR法扩增出5株阳性株,分别为2株大肠埃希菌,臭鼻克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、聚团泛菌各1株;扩增产物经基因测序Blast比对均为KPC-2型碳青霉烯酶.结论 改良Hodge试验的最佳底物为厄他培南,美罗培南效果较差;5株耐碳青霉烯类抗菌药物的肠杆菌携带KPC-2型碳青霉烯酶.     

神经内科住院患者感染肺炎克雷伯菌耐药性分析与产ESBLs酶耐药基因检测

目的了解神经内科住院患者感染肺炎克雷伯菌的耐药性及存在状况,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用VITEK-60型、肉汤稀释法测定86株肺炎克雷伯菌的药敏结果;采用PCR分析ESBLs基因型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药率明显高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌,产ESBLs肺炎克雷伯菌首选亚胺培南,其敏感率为100.0%,对其他抗菌药物均有不同程度的耐药;对27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌菌株耐药基因检测,100.0%检出TEM基因,81.5%检出CTX-MⅠ基因,63.0%检出SHV基因与CTX-MⅢ基因。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌表现多药耐药,碳青霉烯类药物亚胺培南是治疗效果最好的药物,同时存在2~3种不同类型的耐药基因。     

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌KPC-2与NDM-1基因的研究

目的检测耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况以及KPC-2和NDM-1耐药基因的检出,分析耐碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制。方法采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA纸片协同试验和AmpC酶三维试验检测29株耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况;PCR法检测KPC-2及NDM-1两种碳青霉烯酶耐药基因。结果 29株分离菌中26株菌改良Hodge试验阳性,7株亚胺培南-EDTA纸片协同试验阳性,7株AmpC酶三维试验阳性,16株携带KPC-2型碳青霉烯酶耐药基因,占55.17%,未扩增出NDM-1碳青霉烯酶耐药基因。结论耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的耐药机制主要是产碳青霉烯酶。     

肺炎克雷伯菌的分布与药敏性分析

目的 统计2009-2010年肺炎克雷伯菌的分布、药敏性及流行状况,指导临床用药,控制医院感染.方法 对2010年分离出肺炎克雷伯菌的162例住院患者进行标本、科室分布的统计及药敏分析;对其中多药耐药肺炎克雷伯菌作ESBLs、AmpC酶、碳青霉烯酶、新德里金属β-内酰胺酶(NDM)-1等试验.结果 162株肺炎克雷伯菌主要来自痰液,占76.54％,其次为尿液及伤口分泌物,分别占8.64％、6.79％;主要分布于ICU、呼吸内科,分别占51.23％、22.84％;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出84株,检出率为51.85％,产AmpC酶检出20株,检出率为12.355％,产KPC酶检出17株,检出率为10.49％,没有检测到产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)-1菌株.结论 肺炎克雷伯菌耐药率比较高并且耐药因子多样,对多药耐药肺炎克雷伯菌有必要进行耐药机制的检测,以便控制医院感染.     

产AmpC酶革兰阴性杆菌的分布与耐药性研究

目的了解产AmpC酶革兰阴性杆菌的分布及其耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物. 方法采用双纸片法检测了493株革兰阴性杆菌的AmpC酶,并用仪器法测定了产酶菌对17种抗菌药物的耐药性. 结果革兰阴性杆菌产AmpC酶总阳性率为38.3%,以铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌为主,分别占产酶菌的54.0%和24.3%;病区分布以重症监护病房为最高(34.4%),感染部位以呼吸道多见(55.6%);产AmpC酶菌对青霉素类和一至三代头孢类抗菌药物耐药率高达37%～100%;对亚胺培南、头孢吡肟和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率较低,在9%～28%之间;其他抗菌药物耐药率各有差异. 结论产AmpC酶革兰阴性杆菌有较严重的耐药性,合理使用抗菌药物十分重要.     

南京地区耐亚胺培南肠杆菌科细菌碳青霉烯酶及整合子调查

目的 了解南京地区耐亚胺培南肠杆菌科细菌碳青霉烯酶(KPC酶)及整合子分布.方法 收集南京地区3所三级甲等医院共55株耐亚胺培南肠杆菌科细菌,进行改良Hodge试验,PCR扩增检测细菌KPC酶与整合子基因并行序列分析.结果 55株待检菌中,改良Hodge试验阳性39株,阳性率为70.9％;KPC酶PCR扩增阳性39株,阳性率为70.9％;整合子PCR扩增阳性19株,阳性率为34.5％.结论 KPC酶引起的碳青霉烯类耐药需引起临床及实验室的关注.     

碳青霉烯类抗生素敏感性下降尿道致病性大肠埃希菌的耐药性和同源性研究

目的：了解绍兴地区碳青霉烯类抗生素敏感性下降尿道致病性大肠埃希菌（UPEC）的耐药性和同源性。方法收集绍兴市人民医院2013年1月至2015年6月对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的UPEC 53株,全自动微生物鉴定仪检测细菌对常见抗生素的最低抑菌浓度（MIC）。使用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型确证,使用PCR方法进行肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（KPC）的检测。通过肠杆菌基因间重复一致序列（ERIC）对菌株进行基因分型。结果 UPEC对除替加环素以外的抗菌药物均有较高的耐药率;53株细菌中,改良Hodge试验阳性44株（83.0%）,38株检出KPC-2酶（71.7%）;ERIC将菌株分为18个谱型。结论碳青霉烯类敏感性下降UPEC菌株对绝大多数抗菌药物均存在较高的耐药率,KPC是造成菌株对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的主要原因,部分科室存在克隆株流行。     

鲍曼不动杆菌产AmpC酶的耐药性分析

目的 探讨鲍曼不动杆菌分布特征及耐药性。方法 对临床分离的142株鲍曼不动杆菌分布科室、感染部位及对13种抗生素耐药性进行分析，并通过酶粗提物头孢西丁三维试验结合PCR法检测AmpC酶。结果 标本来源主要为患者的痰液、创口分泌物、尿液、血液等，科室以重症监护室为多，感染部位以下呼吸道为主，耐药性较高的抗生素为头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南等，142株鲍曼不动杆菌中产AmpC酶菌株共23株，产AmpC酶阳性率占总菌株数16．2％，产AmpC酶菌株对各种抗生素的耐药率比不产AmpC酶的明显增高，治疗首选泰能。结论 鲍曼不动杆菌的多重耐药率高，应采取针对性的控制措施。     

69株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌耐药基因检测分析

目的了解耐碳青霉烯类抗生素的肺炎克雷伯菌耐药基因的携带情况。方法收集69株浙江省人民医院住院病人耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌株,改良Hodge试验进行KPC型碳青霉烯酶初筛检测,PCR法进行HSV、OXA-1群、OXA-2群、OXA-10群、GES、VEB、IMP、VIM、SME、KPC、IMI/NMC、NDM基因检测,并对部分阳性基因进行测序。结果 69株肺炎克雷伯菌改良Hodge试验阳性48株,阳性率63.8%。PCR检测结果为56株(81.2%)携带KPC基因,60株(87%)携带HSV,20株(29.0%)携带OXA-3基因;3株(4.35%)肺炎克雷伯菌携带OXA-1基因。对KPC基因测序结果为KPC-2亚型。结论本次检测的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌携带KPC-2基因为主,应加强院感监测和预防。     

心脏外科监护病房革兰阴性杆菌感染监测

目的了解医院心脏外科重症监护病房（ICU）革兰阴性杆菌感染情况。方法回顾医院ICU2000年1月--2005年12月，感染患者各种标本分离到的革兰阴性杆菌的药敏结果。结果共分离出革兰阴性杆菌349株，大多数感染源于呼吸道（308株，88％），前4位革兰阴性致病菌为不动杆菌属、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽寡养单胞菌，药敏结果显示碳青酶烯类抗菌药物、头孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟保持较高抗菌活性。结论医院ICU革兰阴性致病菌呈现多重耐药，嗜麦芽寡养单胞菌以及ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌感染不容忽视。     

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌研究进展

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌自1998年被发现后，迅速在世界各地传播流行；其耐药机制主要与外膜蛋白缺失、产KPC酶有关；检测须经过表型筛选、菌株确证试验、基因检测等技术确定；替加环素联合多粘菌素B治疗产KPC肺炎克雷伯菌是常规方法；产KPC肺炎克雷伯菌传播速度快，须加强预防控制。     

鲍曼不动杆菌耐药性及产β-内酰胺酶分析

目的调查我院分离鲍曼不动杆菌的耐药性及产β-内酰胺酶情况。方法用K-B法进行药物敏感性检测,表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,表型筛选法检测高产AmpC酶。结果86株鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率分别为25.6%、9.2%、17.4%和15.1%。对其他10种抗菌药物耐药率（39.5%～67.4%）较高。21株菌（24.4%）检出ESBLs、31株菌（36.0%）检出AmpC酶。结论我院鲍曼不动杆菌耐药率高,应加强药敏检测,指导临床合理应用抗菌药物;其对β-内酰胺类药物耐药与ESBLs、AmpC酶有关。