K—ras基因在胰腺癌诊断中的应用（文献综述）

K-ras基因近年来已成功地应用于胰腺癌的细针穿刺标本、纯胰液、十二指肠液、ERCP刷检物、粪便、外周血等标本的检测,在不同程度上补充了常规脱落细胞病理学和肿瘤标志物的不足,本文综述了近年来的研究结果。     

PCR—SSP快速检测胰腺癌K—ras基因第12位密码子点突变

为研究简便、快速、特异、灵敏的检测胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因突变和突变方式的方法及其在胰腺肿块术前定性诊断中的价值，我们采用针对Ｋ－ｒａｓ基因点突变方式（ＣＧＴ、ＧＴＴ、ＧＡＴ）设计的顺序特异性引物（ＳＳＰ），对冰冻胰腺癌组织进行ＰＣＲ，产物借助常规电泳即可知有无Ｋ－ｒａｓ基因突变及突变方式，无露酶切、杂文、放射性及非放射性显影。结果发现：３４例胰腺癌标本皆存在Ｋ－ｒａｓ基因点突变，其中８例存在两种方式突变，１３例正常胰腺组织、１７例胰腺良性疾病、７例胆管癌、５例壶腹癌及４例十二指肠乳头癌均未见Ｋ－ｒａｓ基因点突变。结果说明该法简便、快速、特异、灵敏，对于胰腺肿块术前定性诊断具有重要参考价值。     

睾丸癌组织中K—ras基因点突变和ras基因产物P21表达的评价

睾丸癌组织中Ｋｒａｓ基因点突变和ｒａｓ基因产物Ｐ２１表达的评价丁强张元芳孙逊邹宇ｒａｓ基因家族分Ｈｒａｓ、Ｋｒａｓ和Ｎｒａｓ三种基因。点突变是ｒａｓ基因激活的主要方式。ｒａｓ基因第１２、１３和６１位密码子突变在人类正常细胞恶性转化过程中起着重...     

胰腺癌患者血浆K-raS基因突变检测的研究

目的 检测胰腺癌患者血浆ＤＮＡ中Ｋ－ｒａｓ基因突变,并探讨将之用于胰腺癌早期诊断的可能性。方法 本研究包括胰腺癌患者２２例和正常对照者２０例。以外周静脉血为标本,分离血浆ＤＮＡ,采用突变富集聚合酶链反应－限制性片断长度多态性法检测Ｋ－ｒａｓ基因密码码子１２突变。部分扩增产物行ＤＮＡ顺序分析。分析血浆Ｋ－ｒａｓ突变与肿瘤临床病理特征的关系。结果 ７７．３％（１７／２２）的胰腺癌患者血浆ＤＮＡ中含有Ｋ     

外周血浆K-ras基因突变的检测在胰腺癌诊断中的作用

目的 探讨检测K－ras基因突变在胰腺癌诊断中的作用。方法 收集15例胰腺癌,33例非胰腺癌病人的外周血标本,提取血浆DNA。采用限制性酶切片段长度多态性- 多聚酶链反应（RFLP－PCR）方法检测突变的K－ras基因,直接测序方法测出K－ras基因的突变类型。结果 胰腺吕病人外周血浆K-ras基因突变率为73％（11／15）,非胰腺癌组中有2例胰头肿块型慢性胰炎患者发生K-ras基因突变,其余均为阴性;血浆K－ras基因突变与肿瘤部位、大小及分期无关。结论 检测外周血浆K－ras基因突变可用于胰腺癌的辅助诊断和胰腺癌高危人群的筛选。     

临床应用ras基因突变检测诊断和鉴别诊断胰腺癌

用PCR-RFLP技术对36例胰腺及其邻近器官细针穿刺标本进行c-ki-ras第12密码子突变检测，应用于胰腺癌的临床诊断。结果19例胰腺癌中18例有c-ki-ras第12密码子突变，阳性率选94．7％，而17例慢性胰腺炎、壶腹癌、胆管癌、肝癌及胃淋巴瘤等均无c-ki-ras第12密码子突变。本研究结果证实胰腺c-ki-ras第12密码子突变检测是诊断和鉴别诊断胰腺癌的有效方法。     

K-ras基因与胰腺癌诊断的研究进展

胰腺癌发病隐匿 ,是预后最差的恶性肿瘤之一。如能在发病初期及时、准确地作出判断 ,将大大增加手术切除的机会 ,提高 5年生存率 ,改善预后。ｒａｓ基因家族包含Ｈ ｒａｓ、Ｋ ｒａｓ和Ｎ ｒａｓ 3种功能基因。近年来研究发现 ,胰腺癌Ｋ ｒａｓ基因第 12密码子点突变率高达 6 0 9%～ 10 0 0 % [1～ 14 ] ,并认为是胰腺癌发生的早期事件[8,13～ 17] ,其较高的敏感性和特异性可以弥补目前临床诊断方法的不足 ,有望成为胰腺癌诊断的基因标志物 ,本文就近年来Ｋ ｒａｓ基因与胰腺癌诊断的研究进展作一综述。1　不同取材标本的Ｋ ｒａｓ基因突…     

前列腺癌组织中ras基因产物P21表达和H—ras基因点突变探讨

应用聚合酶链反应结合寡聚核苷酸探针杂交技术及免疫组化及方法检测前列腺癌组织中Ｈ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变及其基因产物Ｐ２１蛋白表达水平。２８例前列腺癌中仅发２例这种点突变和１３例Ｐ２１蛋白表达阳性，５例正常组织及癌旁组织Ｐ２１２表达有性     

检测胆汁P53和K—ras突变基因对诊断大肠癌肝转移的价值

探讨检测胆汁ｐ５３和Ｋ－ｒａｓ基因突变对诊断大肠癌肝转移的价值２。方法采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对６２例大肠癌病的原发生和胆汁标本进行检测Ｐ５３和Ｋ－ｒａｓ基因突变的结果进行分析。     

甲状腺肿瘤中H—ras基因12密码子和p53基因248密码子突变

目的 探讨甲状腺癌是否存在Ｈ－ｒａｓ基因１２密码子和ｐ５３基因２４８密码子突变。方法 用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法分析８０例甲状腺肿瘤标本中Ｈ－ｒａｓ基因１２密码子和ｐ５３基因第２４８位密码子的突变，包括甲状腺癌５４例，甲状腺滤泡性腺瘤１０例、结节性甲状腺肿１０例和桥本氏甲状腺炎６例。结果 Ｈ－ｒａｓ基因１２密码子突变在甲状腺癌为３３．３％（１８／５４），在良性甲     

胰腺癌基因诊断及研究的最近进展

胰腺癌基因研究已进入分子生物学水平，与胰腺癌有关的基因有癌基因Ｋ－ｒａｓ的点突变和抗癌基ＡＰＣ、ＤＤＣ、Ｐ５３、Ｒｂ－１、Ｃ－ｅｒｂＢ２、ｎｍ２３等的改变。胰腺癌是Ｋ－ｒａｓ突变发生率最高的癌肿，高达７２－１００％，其突变主要发生在第１２位密码子上。检测Ｋ－ｒａｓ点突变作为胰腺癌的诊断、鉴别诊断已有大量的尝试、其前景是乐观的。     

巢式PCR—RFLP检测直肠癌K—ras癌基因第12位密码子点突变及意义

采用巢式ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术,对２６例直肠癌患者标本进行了Ｋ－ｒａｓ第１２位密码子点突变进行检测,结果显示,２６例直肠癌患者中有１３例有Ｋ－ｒａｓ点突变,突变发生与年龄相关,与性别、Ｄｕｋｅｓ分期及有无转移无关,发化程度越差突变率越高,发生Ｋ－ｒａｓ点突变者预后较差。     

P21ras蛋白表达在胰腺癌中的临床意义

为探讨癌蛋白p2 1ras在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌的临床和病理特征的关系 ,笔者采用 p2 1ras的单克隆抗体和免疫组织化学EnVision方法分别检测石蜡包埋的 3 7例胰腺癌、17例胰腺癌远处淋巴结转移组织、5例正常胰腺组织共 5 9例标本中的p2 1ras蛋白表达情况 ,所有被检标本均经病理诊断证实。结果 :胰腺癌中 ,p2 1ras蛋白在胰腺癌中的表达率为 78.3 8% (2 9/3 7) ;胰腺癌远处淋巴结转移组织中的表达率为 47.0 6% (8/17) ;正常胰腺中未发现该蛋白表达。胰腺癌患者年龄、性别、症状、肿块大小、肿瘤部位、病理分级、临床分期和淋巴结转移各因素之间p2 1ras蛋白表达率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。提示用免疫组织化学方法检测 p2 1ras蛋白是了解胰腺癌中K ras基因改变的非常敏感、特异的方法。该蛋白的检测有助于胰腺癌诊断。     

直肠癌K－ras基因突变检测及临床意义

我们采取聚合酶链式反应技术（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅｅｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性分析法（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｙｓｍｓａｎａｌｙｓｉｓ，ＲＦＬＰｓ）对３６例直肠癌患者的癌组织、肉眼观察“正常”的癌旁远端２ｃｍ肠组织和降结肠切端正常粘膜组织，进行Ｋ－ｒａｓ基因１２位密码子（ｃｏｄｏｎ）点突变的基因检测，证明基因突变是癌变发生的早期行为，为临床早期诊断和确定合理的手术治疗方案提供依据。     

胰液细胞学检查与PCR-SSP诊断胰腺癌之比较

目的评价胰液细胞学检测与聚合酶链反应一顺序特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）检测Ｋ－ｒａｓ基因点突变诊断胰腺癌的价值。方法１．胰液离心沉淀物涂片,ＨＥ染色细胞学检查;２．采用针对胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变方式（ＯＧＴ、ＧＴＴ、ＧＡＴ）设计的顺序特异性引物（ＳＳＰ）,对胰液标本进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）,产物借助常规电泳和染色检测有无Ｋ－ｒａｓ基因突变及突变方式。结果胰液细胞学检查对胰腺癌的确诊率为２３．６％（４／１７）,ＰＣＲ－ＳＳＰ对胰腺癌的确诊率为９４．１％（１６／１７）。结论ＰＣＲ－ＳＳＰ检测胰液Ｋ－ｒａｓ基因突变诊断胰腺癌特异、敏感,其价值优于胰液细胞学检查。     

野生型P16例基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H—ras基因表达 …

目的 观察野生型Ｐ１６基因对膀胱肿瘤细胞恶性表型及Ｈ－ｒａｓ基因表达的影响。方法 构建Ｐ１６基因逆转录病毒表达载体，转染膀胱肿瘤细胞系ＥＪ；应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交交检测外源Ｐ１６基因及Ｈ－ｒａｓ基因表达；流式细胞仪检测细胞周期；双层软琼脂培养检测细胞在体外形成克隆能力。结果 转染Ｐ１６基因后，肿瘤细胞生长速率降低，体外形成克隆的能力下降，细胞被抑制在Ｇ０＋Ｇ１期，细胞内Ｈ－ｒａｓ ｍＲＮＡ表达低     

癌基基ras产物P21在胰腺癌,胰腺导管上皮不典型增生及胰腺…

采用免疫组织化学方法对５３例胰腺癌，５例癌旁胰腺导管上皮不典型增生，１１例胰腺内分中瘤进行癌基因产物Ｐ２１表达的研究。结果发现，Ｐ２１阳性表达率分别为８８．７％，１００％和９％，胰腺癌中Ｐ２１弥漫阳性表达者较局限或片状阳性表达及阴性表达者预后好（Ｐ〈０．０１），结果提示ｒａｓ癌基因突变性胰腺癌早期发生起重要作用，Ｐ２１表达与否及表达类型可作为胰腺癌预后的指标。