致病性小肠结肠耶氏菌DNA多态性及其毒力表达

目的：探讨致病小肠结肠耶氏菌（简称：耶氏菌）DNA特征及其表达。方法：用聚合酶链反应（polymerase Chain Reaction;PCR）、DNA序 列分析、随机扩增多态性DNA(Randomly Amplified Polymorphic DNA;RAPD）检测耶氏菌致病基因（adherent invasion locus;ail）,并用自凝试验、刚果红试验检测其毒力表达。结果：PCR和DNA序列分析证实致病性耶氏菌O：3、O：9、O：5,27血清型含有ail致病基因,而非致病型O：4,33、O：7,8血清型不含有ail基因。此外,O：22血清型也含有ail基因与文献报告ail核苷酸序更列同源性为88.3％。O：3、O：9、O：5,27致病血清型DNA指纹图谱相类似,O：22血清型部分DNA片段与0：3血清型相似,而非致病O：4,33血清型DNA指纹图谱完全不同。毒力试验显示致病性耶氏菌全部阳性,3株O：22血清型均有少数菌落刚果试验阳性。结论：致病性耶氏菌含有ail致病基因,DNA指纹图谱相似,但表现为多态性。O：22血清型含有ail基因,DNA指纹图谱部分与O：3血清型相似,少数菌落毒力试验呈阳性反应,该血清型可能存在潜在致病性。     

小肠结肠耶氏菌0:22血清型致病性研究

小肠结肠耶氏菌能引起人类腹泻、关节炎、阑尾炎和败血症等疾病。常见的致病性耶氏菌为0:3、0:9血清型,而0:22血清型被视为非致病型。该文用聚合酶链反应、DNA序列分析、随机扩增多态性DNA及刚果红致病性试验对其致病性进行探讨。 1,材料和方法 1.1菌株:购于中国菌种保存中心,0:22血清型3株,菌号52229;0:3血清型3株,菌号52301;0:9     

利用J+H噬菌体鉴定小肠结肠炎耶氏菌的评价

使用J+H噬菌体检查192株通过生化反应作出鉴定的小肠结肠炎耶氏菌和类小肠结肠炎耶氏菌,其裂解率为77.1％,比血清定型率(73.5％)为高,属于致病性血清型的裂解率为95.7％,其中O:3和O:9血清型38株的裂解率为100％;属于非致病性血清型的裂解率为59.6 ％。实验证明这株J+H噬菌体用于临床和流行病学调查致病性小肠结肠炎耶氏菌,非常简便和实用。     

O:3型小肠结肠炎耶氏菌外膜蛋白用于布氏菌与O:9型耶氏菌感染的鉴别诊断

0:3型小肠结肠炎耶氏菌质粒编码的外膜蛋白的电泳性质及免疫原性与0:9型耶氏菌相同。利用0:3型耶氏菌外膜蛋白为抗原的免疫斑点试验或免疫印迹试验能够明确区别布氏菌与0:9型耶氏菌感染的血清学交叉反应,较通常用0:9型耶氏菌或布氏菌为抗原,更为明显。     

应用毒力因子血清凝集试验和VW抗原检测耶尔森氏菌毒力

本文报告采用小肠结肠炎耶氏菌毒力因子血清凝集试验和VW抗原测定等两种方法检测65株耶氏菌的毒力,结果完全一致。46株小肠结肠炎耶氏菌(包括O∶3,O∶8,O∶9,0∶6.30等血清型)有毒力,其余18株无毒力。实验表明,毒力因子血清无血清型的特异性,在耶氏菌病研究中有很大的实用价值。     

吉林省耶尔森氏菌O: 3和O: 9血清型主要毒力基因分布调查

目的 了解吉林省致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型毒力基因的分布情况。方法 利用聚合酶链反应（PCR）技术进行基因检测。结果 实验证实在吉林省分离到的主要流行血清型O：3和O：9小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因分布特征为：ail^＋、ystA^＋、ystB^-、yadA^＋、virF^＋占60％；ail^＋、ystA^＋、ystB^-、yadA^-、virF^-占26．2％；其他型占13．8％。结论 血清型O：3和O：9小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布主要为ail^＋、ystA^＋ vslB^-、yadA^＋、virF^＋型，其次是ail^＋、ystA^＋、ystB^-、yadA^-、virF^-型，其他型很有可能是非致病的菌株。     

吉林省耶尔森氏菌O∶3和O∶9血清型主要毒力基因分布调查

目的了解吉林省致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型毒力基因的分布情况。方法利用聚合酶链反应(PCR)技术进行基因检测。结果实验证实在吉林省分离到的主要流行血清型O∶3和O∶9小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因分布特征为:ail 、ystA 、ystB-、yadA 、virF 占60%;ail 、ystA 、ystB-、yadA-、virF-占26.2%;其他型占13.8%。结论血清型O∶3和O∶9小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布主要为ail 、ystA 、ystB-、yadA 、virF 型,其次是ail 、ystA 、ystB-、yadA-、virF-型,其他型很有可能是非致病的菌株。     

广东省65株耶氏菌的系统鉴定与鼠疫疫源地性质的探讨

目的鉴定65株耶氏菌,了解菌株的生物学特性,抗原抗体与鼠疫菌的相关性,探讨疫源地的现状和性质。方法65株菌用3种致病性耶氏菌诊断血清,分别做玻片、试管凝集试验、生化试验、生长特性,挑选14株菌做毒力因子、毒力基因、致病性、交叉免疫原性、动物试验和血清学、药敏试验。结果 63株小肠结肠炎耶氏菌血清型42株O∶3、21株O∶9,中间型1株,假结核血清II型1株;VW+2株,VW±10株,VW-2株;14株菌F1Ag、F1Ab全阴;小肠结肠炎5株菌均有2个毒力基因(ail、ystA)阳性,VW+和VW±对小白鼠、家兔有致病性,动物感染一种耶氏菌后有交叉免疫力,抗原、活菌交叉吸收鼠疫抗血清后血清学IHA、RIHA没有交叉性,常用抗菌素敏感。结论目前动物感染小肠结肠炎菌普遍,猪感染最高,局部已爆发流行,假结核菌偏低,鼠疫处于静息期。     

小肠结肠炎耶氏菌毒力型测定法

<正> 小肠结肠炎耶氏菌广泛存在于自然界和动物肠道内,它们的型别很多,少数菌株有毒力,大多数没有致病力,对人畜不构成什么威胁。即使公认有致病力的O∶3,O∶8,O∶9,O∶5等血清型菌株,也有丢失毒力的无毒株,因此检出的菌株均应测定毒力,测定毒力的方法很多,这里介绍几种有实用价值的。 一、质粒测定:有毒株均有40～50×10~6道尔顿质粒,故称此为毒力质粒,其它大质粒均与致病力无关,但近年有人报告一个致病株的质粒为80×10~6道尔顿,这是例外,有待进一步研究,这里介绍两种比较简单的测定法:     

小肠结肠炎耶氏菌动物致病性简便测定法

<正> 小肠结肠炎耶氏菌(简称耶氏菌)对动物的致病性多用小白鼠测定。但除少数从病人分离的O:8血清型菌株外,其他多数型菌株均不使小白鼠发病或死亡。为此,有人把细菌悬浮于10％葡聚德铁盐水中注射,或者用环磷酰胺处理小白鼠后再注射菌液观察其致病性。这种测定方法改变了机体的抵抗力,其结果不能代表正常条件下的致病作用。我们根据感染鼠粪便的带菌状况来判定致病株和非致病株,与其他毒力因子的测定结果完全一致,是一种简便的动物致病性鉴别方法。     

河南省2007-2010年小肠结肠炎耶尔森菌监测分析

目的 监测河南省小肠结肠炎耶尔森菌在腹泻病人和宿主动物中带菌情况,分析其血清学分布及毒力基因情况,探索疾病发生的原因。方法 对2007-2010年河南省监测点的标本进行初步鉴定,鉴定后菌株送中国疾病预防控制中心传染病所进行最后鉴定,对部分菌株进行血清分型,并进行ail、ystA、ystB、yadA、verF、rfbC毒力基因检测。结果 河南省2007-2010年共监测各类标本8 561份,检出小肠结肠炎耶尔森菌株273株,检出率为3.19%;各年份菌株检出率之间有统计学差异。血清分型中O∶5血清型占比最高(31.63%),其次为O∶8(17.35%),O∶3型占比也较高(11.22%),O∶9则未发现。猪的血清型分布最广,共涉及9个血清型,人的血清型主要为O∶3,O∶8,O∶10。毒力基因测定在病人、猪、牛、犬中检出致病菌株。结论 河南省小肠结肠炎耶尔森菌在人群和各类动物中均有存在。人群中流行的血清型与全国流行情况一致。河南省最重要的动物宿主是猪、牛、犬,其在人类感染该病中可能会起到比较重要的作用。     

我国小肠结肠炎耶氏菌毒力株的特征

本文对我国各地分离的小肠结肠炎耶氏菌的毒力特征进行测定,所有毒力株除个别外,均有VW抗原、Vi抗原和毒力因子,它们的检测结果一致。有毒株还有一条40～50MDa的质粒带,即所谓毒力质粒,但有此毒力质粒的菌株并非都是有毒株,视其有否特异性外膜蛋白(约200KDa)而定。自凝性也是检测耶氏菌毒力的一种方法,但其敏感性与特异性均不及VW抗原测定。因此测定菌株毒力,以VW抗原、Vi抗原和毒力因子测定最特异而敏感,特别后两种方法简单、易行、可靠,可在基层单位推广使用。     

Serotyping and evaluation of the virulence in mice of Streptococcus suis strains isolated from diseased pigs

A total of 110 strains of Streptococcus suis, isolated from diseased pigs in Brazil were serotyped and analyzed for virulence. Serotyping of the strains resulted in the following classification: 42 strains of serotype 2 (38.2%), 10 strains of serotype 14 (9.1%), seven strains of serotype 9 (6.4%), three strains each of serotype 7 and 11 (2.7%), two strains each of serotype 1 and 8 (1.8%) and one strain each of serotypes 1/2, 3, 5, 6 and 10 (0.9%). Cross reactions among serotypes 1, 14 and 7 were observed in 21 strains (19.1%). Only 41.9% of the strains were lethal for mice using the pathogenicity test.     

不同肺炎链球菌株毒力基因携带与转录水平差异及其与血清型的关系

目的探讨不同血清型肺炎链球菌株的毒力基因携带与转录水平差异。方法收集宜宾市第二人民医院于2015年3月-2018年12月间从临床感染患者中分离的肺炎链球菌126株,采用多重PCR进行肺炎链球菌株血清分型,采用PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳法观察毒力基因类型,荧光定量PCR检测psaA、ply、lytA、cbpA、nanA毒力基因转录水平。结果126株肺炎链球菌中,血清19F型27株(21.43%),3型21株(16.7%),23F型16株(12.7%),6A/B型14株(11.1%),14型11株(8.7%),19A型7株(5.6%),15A型4株(3.2%);毒力基因lytA阳性115株(91.3%),ply阳性118株(93.7%),nanA阳性120株(95.2%),psaA阳性112株(88.9%),cbpA阳性114株(90.5%)。3型血清型的nanA、ply、psaA和cbpA基因转录水平较其他血清型水平更高(P均<0.05),不同血清型之间的lytA基因转录水平并无显著差异(P均>0.05)。结论lytA、ply、nanA、psaA、cbpA毒力基因在7种常见血清型肺炎链球菌中普遍存在,不同血清型的毒力基因检出率存在不同程度的差异。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌主要毒力基因分析

目的了解南京地区从不同来源分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布情况。方法聚合酶链反应(PCR)技术进行不同血清生物型菌株的毒力基因检测。结果从血清型来看,分离到的9株血清型O:3菌株有7株的基因型分布为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。从生物型来看,共分离到致病生物型(3,4)菌株12株,其中9株毒力基因分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。结论本市小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型O:3菌均包含毒力基因,毒力基因主要分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。所有的致病生物型(3,4)菌株,均包含染色体上的毒力基因ail,毒力基因主要分布特征亦为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。ail与致病生物型之间存在明显关联。     

福氏志贺菌临床分离株毒力基因的研究

目的研究在一种快速、特异的mPCR方法在检出福氏志贺菌的同时对其毒力进行监测。方法选取福氏志贺菌三种毒力基因ipaH,ial,set1B作为扩增目标,在同一mPCR体系中对86株福氏志贺菌临床分离株进行了检测,并选取12株进行了噬斑形成试验,观察了扩增产物不同的福氏志贺菌对Hela细胞的毒力作用。结果86株福氏志贺菌临床分离株均检测到ipaH基因,阳性率为100%;45株检测到ial基因,阳性率为52%;69株检测到set1B基因,阳性率为80%。噬斑形成试验证明,mPCR结果不同的菌株对Hela细胞的感染能力存在明显差异。结论应用上述mPCR体系在检出福氏志贺菌的同时能够对菌株的毒力进行初步判别,对于临床诊断及治疗具有重要意义。     

福建省沙门菌毒力基因sitC及iroN分布特征分析

目的 比较福建省腹泻患者与健康人群分离的沙门菌毒力基因sitC及iroN分布特征;同时分析两种毒力基因在福建省分离率较高的4种常见血清型沙门菌中的分布差异,为进一步有效防控沙门菌病提供依据。方法 选择福建省从腹泻患者和健康人群中分离到的沙门菌166株,其中腹泻患者121株、健康人群45株,包括鼠伤寒、肠炎、德尔卑和斯坦利四种血清型,运用常规PCR方法扩增毒力基因sitC及iroN。结果 毒力基因sitC及iroN在166株沙门菌分离株中的总检出率分别为51.81%(86株)和39.76%(66株)。在腹泻患者和健康人群两个组别中,sitC及iroN的检出率差异无统计学意义(χsitC2=0.347,P=0.556;χiroN2=3.322,P=0.068)。在鼠伤寒、肠炎、德尔卑和斯坦利四种血清型中,sitC及iroN的检出率差异有统计学意义(χsitC2=11.634,P=0.009;χiroN2=15.020,P=0.002)。sitC+iroN+及sitC-iroN-是最常见的基因携带模式。结论 福建省沙门菌分离株中均检出了一定比例的sitC和iroN毒力基因。这两个毒力基因的分布存在血清型差异,但在健康人群和腹泻病人的沙门菌分离株中不存在分布差异。所以健康人群的沙门菌分离株与腹泻病人的沙门菌分离株一样都具有较强的生存能力和一定的致病潜能。     

Virulence characteristics of Escherichia coli strains causing acute cystitis in young adults in Iran

BACKGROUND: Escherichia coli strains that cause cystitis posses virulence properties that facilitate their colonisation and persistence in the bladder. In Iran, despite the high number of the urinary tract infections, very few studies has been done to determine the role of these virulence properties in the pathogenesis of E. coli cyctitis. PATIENTS AND METHODS: Eighty-seven strains of E. coli, isolated from young adults with cystitis in Shiraz, Iran, were examined for the expression of type 1 and P-fimbriae, mannose resistant haemagglutination, haemolysin production, aerobactin-mediated iron uptake, O:K serotypes, biochemical phenotypes (BPTs) and their antibiotic susceptibility patterns. RESULTS: Seventy-six percent of the strains expressed multiple virulence properties. There was a significant correlation between the presence of aerobactin and the expression of type 1 fimbriae. All P-fimbriated strains produced aerobactin with 50% of them also coexpressing haemolysin. Of the 29 different O:K serotypes identified, 42% belonged to serotypes not commonly found among European serotypes associated with UTI. Strains of O groups 4 and 6 expressed more virulence factors than the others. A high resistance against ampicillin, trimethoprim and cotrimoxasol was observed among the isolates with 53% of the isolates showing multiresistance to these three antibiotics. Certain BPTs were also found among O:K serotypes with some containing strains of the same virulence profile. CONCLUSION: We conclude that certain colonal groups of E. coli are commonly associated with cystitis in young adults in Iran with strains possessing a combination of aerobactin and type 1 fimbriae being the dominant ones and belonging to serotypes not commonly found in Europe. We also conclude that the multiple antibiotic resistant E. coli strains causing cyctitis are highly prevalent in this part of the country.     

中国小肠结肠炎耶尔森菌分布及分子流行病学特征

目的 通过中国1980-2019年不同地区小肠结肠炎耶尔森菌的病原学与PFGE分子型别特征分析,为小肠结肠炎耶尔森菌病的防控提供依据。方法 对中国不同区域,不同来源标本分离到的6 847株小肠结肠炎耶尔森菌,进行血清型别、生化表型、毒力基因分布研究,对致病性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析。结果 小肠结肠炎耶尔森菌中致病性菌株2 047株、非致病菌4 800株。致病性菌株仅存在两种血清型,O∶3占比88.96%(1 821/2 047)、O∶9占比11.04%(226/2 047)。18个省市自治区的致病株以O∶3血清型为主,宁夏回族自治区以O∶9血清型为主。非致病菌血清型众多,普遍比致病株具有更多的阳性生化反应。1 821株O∶3致病株分为93个PFGE型别,分布于19个省市自治区,其中K6GN11C30021、K6GN11C30012为优势带型(分别占比46.35%、22.5%),75.38%的人源菌株与分离自当地的动物、食品菌株带型一致;226株O∶9致病株共分为14个PFGE型别,分布于8个省市自治区,77.78%人源菌株与分离自当地的动物、食品菌株带型一致。结论 我国小肠结肠炎耶尔森菌分布广泛、宿主众多,致病株仅有两个血清型,非致病株血清型众多、可能比致病株具有更强的生化代谢能力与环境适应力。致病性菌株PFGE优势带型相对集中,地域分布广泛,多数人源菌株与分离自当地的动物、食品菌株带型一致,应警惕通过家畜家禽、食品及外环境等多种来源感染人的风险。