肾上腺嗜铬细胞的超微结构与多巴胺-β-羟化酶,苯乙胺-N-甲基转移酶的免疫细胞化学定位

以一般电镜技术,及用抗大鼠多巴胺-β-羟化酶(DβH)、苯乙胺-N-甲基转移酶(PNMT)血清作免疫细胞化学染色后,对大鼠、猫和豚鼠肾上腺嗜铬细胞进行电镜观察。结果显示:大鼠和猫嗜铬细胞,按所含颗粒的不同电子密度,可明显区分为肾上腺素细胞、去甲肾上腺素细胞和混合颗粒细胞。猫还有小颗粒嗜铬样细胞。DβH和PNMT阳性反应产物均定位于大鼠、豚鼠和猫嗜铬细胞的嗜铬颗粒内,颗粒形状有环形和致密两种。细胞基质和细胞器均无免疫反应产物沉着。     

大鼠颈上神经节胺类贮存细胞的荧光组化和超微结构细胞化学的研究

本研究用乙醛酸荧光组化方法和改良的嗜铬反应电镜细胞化学技术对大鼠颈上神经节的胺贮存细胞进行了研究。用乙醛酸处理后,在大部分主神经元和小强荧光(SIF)细胞观察到指示儿茶酚胺(CA)可能主要是肾上腺素(NA)存在的特异绿色荧光。SIF 细胞常以小群分布,并多数紧靠毛细血管。主神经元的荧光从弱到中等强度,而 SIF 细胞荧光极强,并观察到肾上腺素能细胞突起的荧光膨体网。用利血平处理动物之后,主神经元的 NA 特异荧光显著减弱,表明非颗粒的 NA 更易为利血平所消耗。由特异的嗜铬反应电镜细胞化学技术揭示了主神经元含有散在的小致密芯小泡。根据我们的荧光组化和超微结构观察,存在两种类型的 SIF 细胞,它们在形态学上与 Williams 提出的Ⅰ型 SIF 细胞相当于中间神经元和Ⅱ型 SIF 细胞是内分泌机能的细胞相一致。对它们的机能意义和所含的化学物质进行了讨论。     

去甲肾上腺素和激动蛋白2α在大鼠蒲肯野细胞的共表达

目的观察大鼠小脑浦肯野细胞内去甲肾上腺素(NA)和激动蛋白-2α(AP-2α)的共存状况。方法利用免疫组化、Western bloting和免疫荧光双重标记技术,观察神经递质NA的特异性标志酶-多巴胺β羟化酶(DBH)和AP-2α在成年大鼠浦肯野细胞中的表达及共存。结果免疫组化和免疫荧光显示大鼠小脑浦肯野细胞DBH和AP-2α表达呈阳性;Western blot检测结果表明小脑中有DBH和AP-2α的表达;免疫荧光双标显示DBH和AP-2α共存于浦肯野细胞胞浆内。结论小脑浦肯野细胞同时含有NA和AP-2α,NA可能作为神经调质参与小脑蒲肯野细胞的功能调节;AP-2α作为调节因子,可能参与NA的表达调控。     

小白鼠肾上腺髓质发育分化的组织学和组织化学观察

本文报道了雄性BALB/c小白鼠胚胎14d至生后成年的肾上腺髓质发育分化的组织学和10种组织化学指标的观察结果。胚胎15d时髓质原基贴近并开始穿入皮质原基,17d时完全穿入皮质原基内。生后1周末出现间接嗜铬反应,并能清楚地区别肾上腺素细胞和去甲肾上腺素细胞。生后2周末时髓质细胞在组织学上和组织化学上发生了比较明显的变化,4周末时接近成年水平。作者根据上述结果对小白鼠肾上腺髓质的结构和功能分化进行了讨论,并将其发育分化过程分为生长分化、机能分化和成熟分化三个阶段。     

大鼠生后发育期胰高血糖素细胞超微结构的观察

①目的观察正常Wistar大鼠生后发育期间胰岛胰高血糖素细胞(A细胞)超微结构的变化,探讨其发育规律。②方法正常Wistar大鼠9只,雌雄兼有。分为生后7,19d和成年3组。常规透射电镜技术观察。③结果A细胞以多边形为主,胞核多为圆形。常见有胞质突起伸达附近毛细血管壁及其它胰岛细胞之间。成年大鼠A细胞内细胞器不发达,只有少量粗面内质网、小型高尔基复合体及线粒体、胞质内空泡多见;膜包颗粒较多,或散布于整个胞质中,或呈极性分布于细胞靠近毛细血管的一侧及突起内;分泌颗粒多呈圆形,含有高电子密度圆蕊,周围有窄晕。生后7d,A细胞内粗面内质网、高尔基复合体及线粒体均较成年组发达,并常见呈同心圆排列的板层髓样体;分泌颗粒也较多见;胞核大而圆,核质较大。生后19d,A细胞内细胞器最为发达,常见呈扩张状态的粗面内质网及核周池、扁平囊状的高尔基复合体及长短不一的杆状线粒体;次级溶酶体较多见;分泌颗粒较少,导管上皮细胞间、腺细胞间及间质内有的细胞含有类似于A细胞的分泌颗粒。④结论大鼠生后发育期间胰岛A细胞不断发育,约在生后18d达高峰。     

不同生理状态人血浆多巴胺-β-羟化酶活性变化

在儿茶酚胺生物合成中,多巴胺—β—羟化酶(DBH)促使多巴胺β位上羟化而形成去甲肾上腺素。见图1。它在肾上腺素能交感神经系统的神经传递中起重要作用。DBH存在于肾上腺髓质嗜铬颗粒和交感神经末梢的贮存囊泡内。交感神经兴奋时 DBH 与去甲肾上腺素通过细胞外溢方式,成比例地同时从交感神经末梢释放。许多学者认为血浆     

小白鼠肾上腺髓质发育分化的超微结构观察

本实验对小白鼠肾上腺髓质的发育分化进行了超微结构观察。胚胎16 d时髓质细胞胞质内已可观察到少量不典型的分泌颗粒,出生前已可观察到典型的肾上腺素颗粒和去甲肾上腺素颗粒,但到生后1周末才出现典型的肾上腺素细胞和去甲肾上腺素细胞,生后4周末肾上腺髓质细胞已基本发育成熟。     

同种异体肾上腺髓质植入蛛网膜下腔治疗大鼠慢性痛的实验研究

目的：研究同种异体肾上朱髓质植入蛛网膜下腔对慢性痛模型大鼠痛行为的影响及其发生机制,方法：将同种大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞异体移植入脊髓背角蛛网膜下腔,6w后进行组织学检查,并用高压液相色谱法检测脑脊液中嗜铬细胞释放的肾上腺素（E）,同时观察移植的嗜 细胞在1－8w内减轻痛行为的表现。结果：移植6W后,铬细胞浆内有明显的嗜铬颗粒,分泌的肾上腺素明显高于对照组。移植后1－8w内动物 屈关节嘶叫反应评分,关节的肿胀程度,体重的减轻程度,移植组均明显低于对照组（P＜0．05）,结论：移植的嗜铬细胞在蛛网膜下腔能够存活并释放肾上腺素镇痛活性物质,减轻慢性痛模型大量的痛表现。     

同种异体肾上腺髓质植人蛛网膜下腔治疗大鼠慢性痛的实验研究

目的研究同种异体肾上腺髓质植入蛛网膜下腔对慢性痛模型大鼠痛行为的影响及其发生机制.方法将同种大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞异体移植入脊髓背角蛛网膜下腔,6w后进行组织学检查,并用高压液相色谱法检测脑脊液中嗜铬细胞释放的肾上腺素(E),同时观察移植的嗜铬细胞在1～8w内减轻痛行为的表现.结果移植6w后,嗜铬细胞浆内有明显的嗜铬颗粒,分泌的肾上腺素明显高于对照组.移植后1～8w内动物的屈关节嘶叫反应评分、关节的肿胀程度、体重的减轻程度,移植组均明显低于对照组(P<0.05).结论移植的嗜铬细胞在蛛网膜下腔能够存活并释放肾上腺素镇痛活性物质,减轻慢性痛模型大鼠的痛表现.     

大鼠颌下腺内神经元特异性烯醇酶阳性细胞的分化

用神经元特异性烯醇酶(NSE)免疫组织化学染色法,观察生后各发育阶段大鼠的颌下腺,发现NSE阳性反应主要定位于颌下腺的纹状管和颗粒曲管(GCT)细胞,染色强度随年龄增长而加强。电镜观察表明NSE阳性反应在多颗粒细胞最强;少颗粒细胞次之;无颗粒细胞极弱或阴性。NSE阳性反应产物主要分布在分泌颗粒之间的胞质中,以及线粒体和内质网膜的表面,细胞核和分泌颗粒以及其他细胞器均为阴性。显微分光光度计测定显示纹状管与GCT中NSE相对含量从生后2周的1.61±0.11增加到成年时的5.95±0.81。各年龄组间酶含量的差异有显著的统计学意义(p<0.01)。     

帕金森病模型大鼠纹状体肾上腺髓质移植后突触结构的观察

目的 :对移植到帕金森病模型大鼠纹状体内的嗜铬细胞与脑细胞之间形成的突触结构进行观察。方法 :实验用Wistar大鼠 4 0只 ,注射 6羟多巴胺 ( 6 -OHDA)破坏大鼠一侧黑质纹状体系统 ,制成实验性帕金森病 (PD)动物模型。将肾上腺髓质植入PD模型大鼠纹状体内 ,移植后定期检测大鼠阿朴吗啡诱发旋转行为 ,并用电镜观察嗜铬细胞与脑细胞之间形成的突触结构。结果 :移植组大鼠的阿朴吗啡诱发旋转行为明显改善 (P <0 0 5)。电镜观察发现嗜铬细胞与脑细胞之间形成突触结构 ,以嗜铬细胞为突触前膜的占 72 88% ;以嗜铬细胞为突触后膜的占 2 7 12 %。结论 :移植肾上腺髓质后 ,模型大鼠阿朴吗啡诱发旋转行为明显改善 ,嗜铬细胞与宿主脑细胞之间形成突触联系 ,并以嗜铬细胞为突触前膜的为多。     

血小板54kD钙结合蛋白诱导嗜铬颗粒聚集的特性研究

猪血小板分子量为9.0×10~(-23)kg钙结合蛋白(简称54kD钙结合蛋白)具有诱导猪肾上腺髓质嗜铬颗粒聚集的活性。嗜铬颗粒聚集与蛋白浓度呈正相关。溶液中游离钙浓度在10~(-6)～10~(-3)mol/L范围内,该蛋白的活性与游离钙浓度成正比,显示该蛋白活性呈显著钙依赖性。镁离子对之有拮抗作用,而钡离子则呈正协同效应,但镁、钡离子并不引起54kD钙结合蛋白(以下简称54kD蛋白)诱导嗜铬颗粒聚集,因此该蛋白诱导嗜铬颗粒聚集的活性是钙特异性的。以上性质提示54kD蛋白与Annexin家族钙结合蛋白的性质非常相似,它可能作为血小板胞内的一种钙受体,介导血小板颗粒之间的相互融合以及颗粒与胞膜的相互作用,在血小板分泌时起重要作用。     

Neural plasticity occurs in the adrenal medulla of asthmatic rats

Background Airway symptoms in asthma are related to decrease of epinephrine secretion, which may be ascribed to elevated nerve growth factor （NGF） in the organism. The aim of this study was to monitor the neuroendocrine alteration in the adrenal medulla of asthmatic rats. Methods Sixteen rats were randomly divided into two groups （n=-8）, control group and asthma group, and the asthmatic rats were sensitized and challenged with ovalbumin （OVA）. The levels of NGF, epinephrine and norepinephrine in serum were detected by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）, the NGF expression in adrenal medulla was detected by immunohistochemistry, and the changes in the ultrastructure of the adrenal medulla was observed by electron microscopy. Results The NGF expression was increased in asthmatic rats compared with control rats. Compared with control rats, the results indicated that the epinephrine level was decreased in asthmatic rats, but no significant difference was found in norepinephrine levels. We found more ganglion cells in the adrenal medulla of asthmatic rats than in control rats, with NGF immunostaining mainly located in these ganglion cells. Electron microscopic images showed the density of chromaffin granula decreased and there was shrunken nucleolemma in the adrenal medullary cells of asthmatic rats. Conclusion The innervation of the adrenal medulla is changed in asthmatic rats, and it may contribute to the epinephrine decrease in asthma.     

创伤应激大鼠甲状腺肾上腺皮质形态学研究

目的　探讨创伤应激情况下应激器官甲状腺和肾上腺的形态与功能变化。方法　对大鼠爆炸伤后不同时相点的肾上腺和甲状腺进行光、电镜观察。结果　爆炸损伤后引起动物强烈应激反应 ,应激器官肾上腺和甲状腺发生一系列病理变化 ,病理过程表现为 3期 :伤后早期 (第 1～ 3天 )为过度应激期 ,表现为细胞内颗粒大量排空 ,甚至引起细胞破裂 ,皮质激素和甲状腺素过度释放 ;继之 (第 7天 )为功能衰竭期 ,滤泡塌陷、细胞退变和萎缩 ;以后 (第 2 0～ 2 6天 )出现修复改变。结论　爆炸伤后引起动物过度应激反应 ,创伤后应激性疾病 (PTSD)与应激器官的结构和功能变化过程密切相关     

NPY在仓鼠肾上腺髓质的免疫组织化学定位研究

应用PAP免疫组织化学方法发现:NPY样免疫活性广泛分布在仓鼠肾上腺髓质的嗜铬细胞中,NPY阳性细胞占髓质细胞总数的25％～30％。经连续切片以不同第一抗体孵育结果得出:NPY与亮啡肽在肾上腺髓质中的分布特点不一致,部分NPY阳性细胞与亮啡肽有细胞内共存现象。结合免疫金标记技术进行超微结构观察进一步证实:NPY、亮啡肽样免疫活性反应颗粒出现在部分去甲肾上腺素细胞内。从光镜、电镜观察结果中推测;仓鼠肾上腺髓质中的去甲肾上腺素细胞具有4种亚型。     

对衰老雌性大鼠肾上腺皮质的组化观察

本文取30只雌性wistar大鼠,分为青年组(3～4月龄),中年组(12～15月龄)和老年组(24～28月龄),每组10只。观察其肾上腺皮质组织化学的年龄变化。观察到AKP、ATPase、3β-HSD和LDH活性随增龄下降;脂滴减少;球状带ACP活性增强而NSE活性下降;网状带细胞内脂褐素增多、增粗。上述结果可能与衰老大鼠肾上腺皮质合成、分泌类固醇激素的功能下降有关。     

Effects of graft placement site on the survival of adrenal medulla transplants into the brain and its relation with the recovery of motor function

BACKGROUND: Because of their lack of long-term viability, adrenal tissue transplants have shown limited success in alleviating the motor disturbances associated with experimental and pathologic striatal dopamine denervation. In this study, we examined how the graft placement site influences adrenal medulla transplant survival and its relation with the reduction of motor deficits in rats bearing unilateral 6-OHDA lesion. METHODS: One or 5 microL of fetal adrenal medullar tissue was grafted either inside the striatal parenchyma or into the lateral ventricle in contact with the dopamine-denervated striatum. Motor disturbances, as assessed by apomorphine-induced rotation, were correlated to the graft morphologic survival features. RESULTS: Apomorphine-induced rotation showed a marginal reduction of 11% in all groups independently of graft survival features or placement site. Intrastriatal transplants showed limited viability characterized by a substantial loss of graft initial volume as well as fewer and smaller chromaffin cells compared to ventricular grafts, which had a reduced loss of graft initial volume and more and larger chromaffin cells. CONCLUSIONS: Although the lateral ventricle may favor adrenal medulla transplant viability, their induced motor outcome is comparable to that induced by less viable intrastriatal grafts, suggesting that the implanted dopamine-producing cells may interact and influence striatal neurons better when placed in close proximity.     

海洛因戒断、复吸对大鼠肾上腺髓质细胞神经肽Y表达的影响

目的:探讨海洛因戒断、脱毒、复吸对大鼠肾上腺髓质细胞神经肽Y(NPY)表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠63只,随机分为实验组、盐水对照组和正常对照组,实验组又分为戒断组、脱毒组和复吸组,采用免疫组织化学及图像分析法,观察3组大鼠肾上腺髓质NPY的表达。结果:光镜下,肾上腺髓质NPY免疫反应(IR)细胞免疫反应产物呈棕黄色细颗粒状,存在于胞质内;与正常对照组及盐水对照组比较,戒断组和复吸组肾上腺髓质NPY-IR细胞免疫染色加深,图像分析平均灰度值低于正常对照组及盐水对照组(P<0.05);脱毒组与正常对照组比较,NPY-IR细胞染色强度、平均灰度值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在海洛因戒断及复吸期间,NPY在肾上腺髓质细胞表达增强,提示肾上腺髓质细胞分泌的NPY增多;脱毒治疗组大鼠NPY表达与正常组NPY差异无显著性,提示脱毒治疗后肾上腺髓质细胞分泌的NPY减少可能与其功能逐步趋于正常有关。     

Renin in adrenal: an overview of its synthesis, subcellular localization, and functions.

Specific renin has been identified in the outer layers of the adrenal of rat, mouse and human. Nephrectomy causes a marked elevation of adrenal renin, presumably through hyperkalemia. The subcellular distribution of adrenal renin was investigated by Percoll density gradient. The renin activity in the dense granules from the capsules of nephrectomized rats was 15 times greater than that of intact rats. Most of the active form renin was found in the dense renin granules. Immunohistochemical studies revealed that the dense granules increased in number after bilateral nephrectomy. Immunogold staining of these granules showed unequivocally the presence of renin therein. Adrenal capsules in organ culture were found to release renin at a steady rate. Renin release from bilaterally nephrectomized rat adrenals was 4.6 times greater than from the organs of intact animals. Further, adrenal slices from human adrenocortical tumor tissues which contained specific renin in a sizable quantity were found to release renin in a similar fashion to rats. The mechanism of the control of renin secretion from the adrenal gland was different from the kidney in that the release was stimulated by potassium chloride or angiotensin II but not by ACTH, suggesting stimulation by intracellular calcium. These results provide convincing evidence that the adrenal synthesizes renin, stores it in specific secretory granules, and secretes it in a regulated manner. It is most likely that the adrenal renin plays a role in the production of aldosterone in the adrenal cortex or in the secretion of catecholamines from the adrenal medulla through intra- and/or extracellular formation of angiotensin II.