麻疯树叶提取物对恶性黑色素瘤A375细胞增殖抑制及诱导凋亡作用的研究

目的 研究麻疯树叶提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响.方法 用MTT法测定不同浓度麻疯树叶提取物对体外培养的人恶性黑色素瘤A375细胞增殖的抑制作用,采用倒置显微镜观察细胞形态学的改变,并用Annexin-V-FIFT/PI双染色法检测细胞的凋亡.结果 麻疯树叶提取物能抑制A375细胞增殖,诱导其凋亡,引起细胞形态学的改变,这些影响呈药物浓度剂量依赖性,并与药物作用时间正相关.结论 麻疯树叶提取物在体外对人恶性黑色素瘤A375细胞的增殖具有显著的抑制作用,并能诱导其发生凋亡.     

红凉伞提取物调控MNX1-AS1对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨红凉伞提取物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法：将乳腺癌细胞 MDA-MB-453 分为对照组、红凉伞提取物低、中、高剂量组、红凉伞提取物+pcDNA3.1 组和红凉伞提取物+pcDNA3.1-MNX1-AS1 组。四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell 检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量 PCR 检测 MNX1-AS1 表达水平;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1A （P21）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 （Caspase-3）、上皮钙黏蛋白 （E-cadherin）、基质金属蛋白酶-2 （MMP-2） 表达水平。结果：与对照组比较,红凉伞提取物低、中、高剂量组细胞增殖抑制率、凋亡率及 P21、Caspase-3、E-cadherin 表达水平均升高（P＜0.05）,细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数及 MNX1-AS1、MMP-2 表达水平均降低 （P＜0.05）。与红凉伞提取物+pcDNA3.1 组比较,红凉伞提取物+pcDNA3.1-MNX1-AS1 组细胞增殖抑制率、凋亡率及 P21、Caspase-3、E-cadherin 表达水平均降低 （P＜0.05）,细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数及 MNX1-AS1、MMP-2 表达水平均升高 （P＜0.05）。结论：红凉伞提取物可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-453 增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与 MNX1-AS1 有关。     

无尾果抗类风湿关节炎的有效部位筛选研究

目的观察无尾果不同提取部位对人风湿性关节炎成纤维滑膜细胞（MH7A）相关细胞因子分泌及凋亡的 影响,初步筛选其抗类风湿关节炎（RA）的有效部位。方法采用肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导MH7A 细胞建 立类风湿关节炎滑膜细胞模型,并以无尾果总提物、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位进行干 预。采用CCK8 法检测MH7A 细胞的增殖活性,并计算半数抑制浓度（IC50）;流式细胞术检测MH7A 细胞凋 亡;ELISA 法检测TNF-α 诱导MH7A 细胞分泌白细胞介素（IL）-6、IL-4、IL-1β、血管内皮生长因子 （VEGF）、NF-κB 受体活化因子配体（RANKL）水平;Western Blot 法检测MH7A 细胞的凋亡相关蛋白表达水 平。结果无尾果总提物、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位对MH7A 细胞的IC50 值分别为 223.9、99.4、123.7、497.9、＞1 000 μg·mL-1。与正常对照组比较,模型组细胞上清液中的IL-6、IL-1β、IL-4、 VEGF 和RANKL 含量显著升高（P＜0.01）,凋亡细胞显著增多（P＜0.01）,促调亡因子Bax、Caspase-9、 Caspase-3 和抗凋亡因子Bcl-2 的蛋白表达水平均显著升高（P＜0.01）。与模型组比较,无尾果总提物组、水部 位组和正丁醇部位组均可显著诱导MH7A 细胞凋亡（P＜0.01）;显著降低IL-6、IL-1β、VEGF 和RANKL 水平 （P＜0.01）,升高IL-4 水平（P＜0.01）;水部位组和正丁醇部位组能明显上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9 和 Caspase-3 的表达（P＜0.01）,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2 的表达（P＜0.01）。结论无尾果提取物诱导MH7A 细胞 凋亡及抗炎作用可能是其抗RA 的机制之一,水部位和正丁醇部位为其主要药效部位。     

秦皮素通过下调p70S6K抑制人黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭研究

目的研究秦皮素对人黑色素瘤A375细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法 A375细胞给予秦皮素和核糖体S6蛋白激酶(ribosome S6 protein kinase,P70S6K)抑制剂PF-4708671进行干预,采用细胞计数法考察秦皮素和PF-4708671对A375细胞增殖能力的影响;采用Western blotting法检测秦皮素和PF-4708671对m TORC1/p70S6K/S6通路关键蛋白及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验考察秦皮素和PF-4708671对A375细胞迁移和侵袭的影响。结果秦皮素与PF-4708671均可显著抑制A375细胞的增殖、迁移和侵袭(P0.05、0.01)。秦皮素与PF-4708671均显著抑制p70S6K/S6通路活性,下调间质细胞标志蛋白和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)表达水平(P0.05、0.01)。结论秦皮素可能通过下调p70S6K抑制A375细胞的增殖、迁移与侵袭。     

白藜芦醇对人恶性黑色素瘤细胞A375增殖和凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇对人黑色素瘤细胞A375体外增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法用不同浓度的白藜芦醇作用于人黑色素瘤细胞A375,通过MTT法和HE染色法检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;TUNEL末端标记法和Annexin V-FITC双标记流式法检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响。结果不同浓度白藜芦醇对人黑色素瘤A375细胞均有抑制增殖和促进凋亡的作用,并存在剂量和时间依赖性。结论达到一定浓度的白藜芦醇对人黑色素瘤A375细胞有明显的抑制增殖作用,主要通过诱导A375细胞凋亡(主要是早期凋亡)抑制其增殖。     

大黄酚调控Wnt/β-catenin 通路对胶质瘤U87细胞增殖、凋亡、侵袭能力及EMT 的影响

目的：探讨大黄酚调控Wnt/β-catenin 信号通路抑制胶质瘤细胞的作用机制。方法：体外培养人脑 胶质瘤细胞U87,用不同浓度（0、50、100、200 μmol/L） 的大黄酚处理后,采用CCK-8 法检测U87 细胞增 殖能力;划痕法检测细胞迁移能力;Transwell 法检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质 印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2 以及Wnt 通路上皮细胞-间充质转化（EMT） 相关蛋白β-catenin、 E-cadherin、vimentin、MMP-9 蛋白表达。结果：大黄酚能抑制U87 细胞增殖、迁移及侵袭,诱导凋亡（P＜ 0.05）,下调Bcl-2、β-catenin、vimentin 与MMP-9 的表达水平,上调Bax 与E-cadherin 的表达水平（P＜ 0.05）,并呈浓度依赖关系。结论：大黄酚能抑制胶质瘤细胞U87 增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与抑制 Wnt/β-catenin 信号通路有关。     

通关藤提取物通过调控上皮间充质转化抑制前列腺癌细胞的侵袭及迁移

目的探讨通关藤提取物对前列腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响,及其对上皮间充质转化（EMT）的作 用机制。方法采用CCK8 法检测通关藤提取物对前列腺癌细胞DU145、PC3、RM-1 和LNCaP 增殖的影响; 采用划痕实验和Transwell 法检测DU145、PC3 细胞迁移和侵袭情况;采用光学显微镜观察细胞形态学变化, 并用Western Blot 法检测EMT 相关核心蛋白E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、β-连环蛋白（β-Catenin）、波形蛋白 （Vimentin）的表达。结果通关藤提取物可以明显抑制PC3、DU145、RM-1 和LNCaP 细胞的增殖,并呈现一 定的时间和浓度依赖性,在作用72 h 后,通关藤提取物对PC3、DU145、RM-1 和LNCaP 细胞的半数抑制浓 度（IC50）值分别为53.45、57.22、44.82、50.95 mg·mL-1。与对照组比较,通关藤提取物（30、60 mg·mL-1）可以明 显抑制DU145 和PC3 细胞的迁移及侵袭能力（P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001）。通关藤提取物干预后, DU145、PC3 细胞的形态发生了明显改变,与对照组比较,EMT 标志物Vimentin 蛋白表达明显下调（P < 0.05,P < 0.01）。结论通关藤提取物能够抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能与其下调Vimentin 蛋 白表达,进而抑制EMT 有关。     

乳浆大戟提取物诱导HeLa细胞凋亡及其机制研究

目的研究乳浆大戟提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用MTT法和克隆形成实验检测乳浆大戟提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖抑制作用;利用Annexin V-FITC/PI双染和DAPI细胞核染色法检测乳浆大戟提取物诱导细胞凋亡情况;线粒体膜电位检测凋亡细胞的线粒体膜电位变化情况;流式细胞仪和Westernblot法分别分析细胞周期及细胞周期蛋白变化情况。结果①乳浆大戟提取物以时间和剂量依赖的方式显著抑制宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖;②乳浆大戟提取物能使宫颈癌HeLa细胞线粒体膜电位显著降低,诱导细胞发生凋亡性细胞死亡;③乳浆大戟提取物能够显著阻滞宫颈癌HeLa细胞在G0/G1期,降低Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达水平,增加P21的表达水平。结论乳浆大戟提取物通过下调Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达和上调P21的表达,使HeLa细胞阻滞在G0/G1期,进而显著抑制宫颈癌HeLa细胞生长和增殖,诱导细胞依赖线粒体通路的凋亡性死亡。     

蒲公英提取物调控DPC4对大肠癌细胞凋亡、迁移、 侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨蒲公英提取物通过调控胰腺癌缺失位点4 (DPC4)表达对大肠癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响和机制。方法:用不同终浓度(1.5、3.0、7.5、15.0 mg/mL)的蒲公英提取物处理HT-29细胞48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测DPC4蛋白的表达。将pcDNA3.1-DPC4转染HT-29细胞,观察过表达DPC4对HT-29细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。将si-DPC4转染HT-29细胞,给予蒲公英提取物处理后,观察抑制DPC4表达对HT-29细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:蒲公英提取物在体外可诱导HT-29细胞凋亡,抑制HT-29细胞的迁移和侵袭,并呈明显的浓度依赖性。15.0 mg/mL的蒲公英提取物可促进DPC4蛋白的表达。过表达DPC4可显著促进HT-29细胞凋亡,抑制HT-29细胞的迁移和侵袭。抑制DPC4表达能逆转蒲公英提取物对HT-29细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。结论:蒲公英提取物通过上调DPC4表达进而促进大肠癌细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭能力。     

冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的影响及机制研究

目的研究冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的抑制作用及其作用机制。方法采用细胞培养技术体外培养A375细胞,用不同浓度冬凌草甲素处理细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖率;划痕实验分析细胞的迁移能力;Transwell小室实验研究细胞的侵袭能力;黏附实验评价细胞的黏附能力;Western blotting法检测转录因子Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。结果冬凌草甲素对A375细胞48 h半数抑制浓度(IC50)为47.94μmol/L;与对照组比较,5、10、20μmol/L冬凌草甲素可明显降低A375细胞的体外迁移、侵袭及黏附能力(P0.05),且具有量效关系。冬凌草甲素作用于细胞后,E-cadherin蛋白表达水平明显上调(P0.05),Snail、N-cadherin、vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显下调(P0.05)。结论冬凌草甲素具有体外抑制A375细胞侵袭和转移的作用,其机制可能与调控上皮-间质转化(EMT)及MMPs有关。     

水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究

目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡情况。结果水蛭液氮快速冻融法提取物药物浓度为6-15mg／mL时,对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,细胞数目明显下降,并呈剂量依赖性,与水提醇沉法提取物比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。吖啶橙染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。结论水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖并诱导凋亡,其作用明显优于水蛭水提醇沉法提取物。     

黄芩苷对人肺腺癌A549细胞的体内外研究

目的:探讨黄芩苷在体外对人肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移、对脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)新生血管形成的影响,在体内对A549细胞裸鼠移植瘤的作用.方法:调整细胞密度为1×104/mL,应用25,50,100,200,400 μmol·L-1黄芩苷作用于A549细胞24,48,72 h,采用MTT法检测黄芩苷对A549细胞的增殖抑制作用;Transwell小室法观察12.5,25,50μmol·L-1黄芩苷对A549细胞侵袭及迁移的影响;小管形成实验观察12.5,25,50μmol·L-1黄芩苷对HUVEC小管形成的影响;将A549细胞移植瘤裸鼠分为黄芩苷高剂量组(100 mg·kg-1)、黄芩苷低剂量组(50 mg·kg-1)、溶剂对照组、顺铂组(1 mg· kg-1),前3组通过ig方式给予,连续21 d;顺铂组ip连用10 d.观察黄芩苷对A549细胞裸鼠移植瘤的作用.结果:①黄芩苷能抑制A549细胞增殖,其增殖抑制率与药物浓度及作用时间呈依赖性,24,48,72 h的IC50分别为100.77,75.02,55.81 μmol·L-1.②25,50μmol·L-1黄芩苷能抑制A549细胞的侵袭及迁移,从而抑制癌细胞转移.③25,50μmol·L-1黄芩苷能抑制HUVEC小管生成,与对照组比较具有统计学意义(P＜0.05).④体内实验表明50 mg·kg-黄芩苷对A549细胞移植瘤具有一定的抑制作用.结论:黄芩苷体外可以抑制A549细胞的增殖、侵袭、迁移,抑制HUVEC小管形成,体内对A549细胞裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用.     

补气活血药含药血清对血管内皮细胞迁移的影响

目的:观察补气活血类中药含药血清对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）迁移的影响,并初步筛选出对HUVEC 迁移能力具有较明显的促进、抑制作用的药物。方法：建立HUVEC的体外培养的细胞模型,将赤芍、川芎、丹皮、丹参、莪术、三棱、黄芪、人参按照1∶2,1∶1,2∶1 3种配比两两配伍组合,组成13对补气活血药药对,采用血清药理学方法,制备含药血清,应用划痕法观察不同活血化瘀药和补气活血药药对的10%含药血清对HUVEC（5×105/mL 密度）作用24 h后迁移能力的影响。结果：与空白血清组相比较,丹参组、川芎组、赤芍组,丹参黄芪（1∶2）组、丹参黄芪（1∶1）组、川芎黄芪（1∶2）组对血管内皮细胞的迁移能力具有明显促进作用（P＜0.05或P＜0.01）;三棱组、莪术组、丹皮组,莪术黄芪（2∶1）组、三棱人参（2∶1）组、莪术黄芪（1∶1）组对血管内皮细胞的迁移能力具有明显抑制作用（P＜0.05或P＜0.01）。结论：不同的活血化瘀药和补气活血药配伍组成对HUVEC 的迁移能力具有不同的促进或抑制作用,这可能是这些药物在细胞层面上促进或抑制血管生成的作用机制之一。     

苦参碱对人恶性黑色素瘤A375细胞株增殖和凋亡的影响

 目的研究苦参碱对人恶性黑色素瘤A375细胞株增殖和凋亡的影响。方法用MTT法观察不同浓度苦参碱对培养的人恶性黑色素瘤A375细胞增殖的抑制作用,采用Annexin-V-FIFT/PI双染色法检测其凋亡细胞,并用倒置显微镜和透射电镜观察细胞形态学的改变。结果苦参碱明显抑制A375细胞增殖,其抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。凋亡细胞的比例与药物浓度呈剂量依赖性。光镜和电镜观察证实随着苦参碱浓度的增加,A375凋亡细胞增多。结论苦参碱对人恶性黑色素瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用,并能诱导其发生凋亡。     

丹参酚酸B调节miR-210保护HUVEC过氧化损伤机制研究

目的:研究丹参酚酸调节miR-210对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)过氧损伤的保护作用机制。方法:采用H-DMEM完全培养基培养HUVEC细胞株,3次传代后分为对照组(正常培养)、模型组(过氧化损伤)、中药组(丹参酚酸B干预)和沉默组(miR-210基因沉默+中药干预组)。采用过氧化氢诱导细胞过氧化损伤模型,LipofectamineRNAi MAX脂质体法转染miR-210-3P inhibitor诱导miR-210基因沉默,丹参酚酸B给药浓度是10-5mol/L。qRT-PCR法检测细胞miR-210、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,荧光标记免疫组化法检测CD31分子的表达,ELISA法检测细胞液中内皮型一氧化氮合酶(eNOs)和内皮素-1(ET-1)的含量。结果:与对照组比较,模型组miR-210、VEGF和CD31分子的表达水平显著降低,细胞液中eNOs含量降低、ET-1的含量明显升高(P0.01或P0.001)。与模型组比较,中药组miR-210、VEGF和CD31分子的表达水平均显著升高,细胞液中eNOs含量升高、ET-1的含量明显降低(P0.001)。与中药组比较,沉默组miR-210、VEGF和CD31分子的表达水平均显著降低,但细胞液中eNOs和ET-1的含量差异无显著性(P0.001)。结论:丹参酚酸B能维持过氧化损伤HUVEC的血管新生功能和内皮收缩稳态,其促进血管新生作用被miR-210基因沉默阻断,维持收缩功能不被miR-210基因沉默所阻断,说明丹参酚酸B具有多靶点保护作用,miR-210是其作用靶点之一。     

白杨素调控Wnt/β-catenin 通路对前列腺癌PC-3 细胞株侵袭和迁移的影响

目的：探讨白杨素调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin） 通路对前列腺癌PC-3 细胞株侵袭和迁移的影响。方法：设PC-3 细胞组、5-氟尿嘧啶组、白杨素低剂量组、白杨素高剂量组。5-氟尿嘧啶组加入5-氟尿嘧啶使最终浓度为80.0 μg/mL,白杨素低、高剂量组加入白杨素使最终浓度分别为60.0 μg/mL、120.0 μg/mL,培养72 h。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT） 及结晶紫染色测定细胞存活率及克隆形成数目,Transwell 法测定细胞侵袭水平,annexinV-FITC/PI 试剂盒测定细胞凋亡水平,逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR） 法及蛋白质印迹法（Western blot） 测定细胞β-catenin 基因和蛋白水平。结果：与PC-3 细胞组比较,其余3 组细胞存活率、克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平均降低（P＜0.05）,凋亡率升高（P＜0.05）。与白杨素低剂量组比较,白杨素高剂量组细胞、存活率、克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平降低（P＜0.05）,凋亡率升高（P＜0.05）。与5-氟尿嘧啶组比较,白杨素低剂量组细胞、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平升高（P＜0.05）,凋亡率降低（P＜0.05）;白杨素高剂量组细胞、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、β-catenin mRNA 和蛋白表达水平降低（P＜0.05）,凋亡率升高（P＜0.05）。结论：白杨素能抑制前列腺癌PC-3细胞株增殖、侵袭,诱导前列腺癌PC-3 细胞株凋亡,其机制与白杨素可通过抑制β-catenin mRNA 及蛋白的表达进而抑制Wnt/β-catenin 通路有关。     

驱虫斑鸠菊提取物体外对肿瘤细胞生长抑制作用的初步研究

目的:观察驱虫斑鸠菊提取物在体外对肿瘤细胞生长抑制的影响。方法:用四甲基噻唑氮蓝比色法测定驱虫斑鸠菊提取物对人恶性黑色素瘤细胞株A375、小鼠黑色素瘤B 16细胞、人乳腺癌细胞BCF-7、人胃癌细胞BGC-823、人肝癌细胞HepG-2生长抑制的影响。结果:驱虫斑鸠菊提取物在体外对5种肿瘤细胞生长有不同程度的抑制作用。结论:驱虫斑鸠菊提取物在体外对多种肿瘤细胞有不同程度的生长抑制作用,尤以对恶性黑色素瘤A375细胞较为明显。     

地骨皮提取液对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨地骨皮醇提液对H2O2诱导的HUVEC细胞凋亡的影响,探讨地骨皮醇提液对血管内皮的保护作用,为研究糖尿病并发症治疗的新药提供新的理论基础。方法：将HUVEC细胞分为正常对照组、高药物浓度组、H2O2组和药物预处理＋H2O2作用组,作用18-24h后,用显微镜观察细胞形态改变,用流式细胞仪通过Annexin V/PI双染法检测各组细胞的凋亡百分比,用RT-PCR检测Bcl-2基因的表达变化。结果：地骨皮醇提液有效降低H2O2引起的细胞凋亡率;地骨皮醇提液可以增加凋亡相关基因Bcl-2的表达。结论：地骨皮醇提液对H2O2诱导的HUVEC细胞凋亡有不同程度的抑制作用,对血管内皮具有保护作用。     

三叶青脂溶性提取物对A375细胞增殖及黑色素合成的影响

目的探讨三叶青三氯甲烷提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。方法采用MTT比色法,测定不同浓度三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞体外抑制作用;比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量;采用光学显微镜法观察其对细胞形态的影响。结果三叶青三氯甲烷提取物在6～500μg/ml浓度范围内对A375细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.01),且呈时间-剂量依赖性;浓度小于50μg/ml时,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加趋势;在100～500μg/ml时,对A375肿瘤细胞有较强的抑制作用;光学显微镜下可见典型凋亡细胞形态学改变。结论三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成具有抑制作用。     

黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移的影响

目的 筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位.方法 以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药.IEC-6细胞接种于6孔板并培养24 h,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各受试药,24 h后观察细胞迁移情况;并进一步观察具有促进细胞迁移的有效部位对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致细胞迁移抑制的影响.结果 50 mg·L-1的黄芪糖复合物或白术糖复合物能促进细胞迁移(P＜0.01);黄芪、白术的正丁醇萃取物、醇沉上清液、大孔树脂吸附后醇洗脱部位对细胞迁移均无明显影响;2.5 mmol·L-1的DFMO能抑制细胞迁移(P＜0.01),加入DFMO同时加入100 mg·L-1黄芪糖复合物或200 mg·L-1白术糖复合物能使细胞迁移恢复至接近正常水平.结论 黄芪糖复合物和白术糖复合物能促进IEC-6细胞迁移,还能使DFMO所致的细胞迁移抑制恢复至接近正常水平.