雷公藤内酯醇抑制卵巢癌细胞增殖并诱导凋亡作用初探

目的：初步探讨雷公藤内酯醇诱导人卵巢癌细胞株Caov-3细胞的凋亡作用及其分子机制。方法：采用MTT法检测雷公藤内酯醇对人卵巢癌细胞株Caov-3的生长抑制作用；用透射电镜观察细胞超微结构的变化；以AnnexinV—FITC标记法定量检测细胞凋亡；以蛋白印迹分析雷公藤内酯醇对Caspase3蛋白表达的影响。结果：雷公藤内酯醇能够抑制Caov-3细胞的增殖，且抑制率具有浓度和时间依赖性；雷公藤内酯醇处理Caov-3细胞后，光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞；Annexin V—FITC标记法的定量检测进一步证实了雷公藤内酯醇诱导细胞调亡的作用；蛋白印迹检测表明雷公藤内酯醇可使Caspase3表达变化。结论：雷公藤内酯醇对人Caov-3细胞系具有较强的直接抑制作用，可以诱导癌细胞凋亡，可能与其调节癌细胞Caspase-3蛋白活化有密切的关系。     

雷公藤内酯醇抑制卵巢癌细胞增殖并诱导凋亡作用初探

目的:初步探讨雷公藤内酯醇诱导人卵巢癌细胞株Caov-3细胞的凋亡作用及其分子机制。方法:采用MTT法检测雷公藤内酯醇对人卵巢癌细胞株Caov-3的生长抑制作用;用透射电镜观察细胞超微结构的变化;以AnnexinⅤ-FITC标记法定量检测细胞凋亡;以蛋白印迹分析雷公藤内酯醇对Caspase 3蛋白表达的影响。结果:雷公藤内酯醇能够抑制Caov-3细胞的增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性;雷公藤内酯醇处理Caov-3细胞后,光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞;AnnexinⅤ-FITC标记法的定量检测进一步证实了雷公藤内酯醇诱导细胞凋亡的作用;蛋白印迹检测表明雷公藤内酯醇可使Caspase 3表达变化。结论:雷公藤内酯醇对人Caov-3细胞系具有较强的直接抑制作用,可以诱导癌细胞凋亡,可能与其调节癌细胞Caspase-3蛋白活化有密切的关系。     

HPLC法测定雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇

目的建立雷公藤内酯醇生物贴的质量标准,雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇的定量测定方法。方法雷公藤内酯醇生物贴经甲醇超声提取。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(3∶7),检测波长为220 nm。结果雷公藤内酯醇在5~120μg/mL,线性关系良好(r=0.9981)。平均回收率96.5%(n=9)。RSD3%。结论本方法重现性好,灵敏度高。     

雷公藤氯内酯醇研究进展

雷公藤氯内酯醇是从雷公藤值物中分离得到的环氧二萜内酯化合物，足雷公藤中的主要活性物质，本文从生源、半合成、药理等三个方面对该化合物进行全面介绍。     

雷公藤内酯醇对人结肠癌细胞株SW-480、HT-29体内外作用的研究

 目的 探讨雷公藤内酯醇（triptolide,TPL）在体内外对人结肠癌细胞株SW-480、HT-29的作用。方法 体外运用噻唑蓝（MTT）比色法检测TPL对SW-480、HT-29的增殖抑制作用,细胞DNA片段化及Annexin-Ⅴ/FITC流式细胞术检测TPL对SW-480、HT-29细胞诱导凋亡的作用;体内建立荷人结肠癌细胞裸鼠模型,观察不同浓度TPL静脉注射治疗对肿瘤生长的影响。结果 在体外,TPL在10 μg·L-1时即对2种结肠癌细胞具有明显的抑制生长作用,且呈时间和剂量依赖性,40 μg·L-1时具有明显的诱导凋亡作用,凋亡比例分别达22.2%和27.3%;在体内,TPL能显著抑制2种肿瘤的生长,隔日0.4 mg·kg-1静脉给药时其抑瘤率分别达93.7%和94.5%。结论 TPL在体内外均具有明显的抗结肠癌作用。     

HPLC法检测雷公藤药材中雷公藤内酯醇的含量

目的：建立测定雷公藤药材中雷公藤内酯醇含量的方法。方法：雷公藤醇提物经中性氧化铝层析柱洗脱,采用HPLC法检测雷公藤内酯醇含量。色谱柱：PhenomenexLunaC18（4．6mm×250mm,5m）;流动相：甲醇-水;梯度洗脱：0min（甲醇40％）-30min（甲醇50％）;流速1．0mL·min^-1;检测波长218nm;柱温：35℃。结果：雷公藤内酯醇与其他成分分离效果良好,25～400μg·ml^-1范围内有良好的线性关系,平均回收率为98．17％。结论：该方法准确、灵敏,可作为雷公藤药材中雷公藤内酯醇的定量分析方法。     

HPLC法检测雷公藤超声提取物中雷公藤内酯醇的含量

目的：建立雷公藤超声提取物中测定雷公藤内酯醇含量的方法。方法：雷公藤超声提取物经中性氧化铝层析柱洗脱,采用HPLC法检测雷公藤内酯醇含量。色谱柱：大连江申公司C 18柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：乙腈-水（25∶75）;检测波长：218nm;流速：1.0m l.min^-1;柱温：30℃;结果：雷公藤内酯醇与其他成分分离效果良好,线性范围为0.96-11.52μg/m l（r=0.9997）,平均回收率为97.82%。结论：该方法准确、灵敏,可作为雷公藤超声提取物中雷公藤内酯醇的定量分析方法。     

紫云金对雷公藤内酯醇引起静脉炎的作用

紫云金系紫草、白芷、冰片、银花等的醇提物,ig-紫云金2－4g/kg 对雷公藤内酯醇引起的小鼠尾静脉炎、大鼠足跖肿胀、小鼠耳廓水肿及疼痛反应均有显著的抑制作用。提示,紫云金对雷公藤内酯醇iv引起的静脉炎有防治作用。     

雷公藤微囊片中雷公藤内酯醇的含量测定

雷公藤微囊片主要有效成分为雷公藤内酯醇(以下简称T—d)。有关该成分的定量分析有报道用薄层扫描法,但薄层扫描仪在国内尚无法普及,测定波长用218nm,干扰因素较多;或用kedde试剂显色后扫描,显色剂的用量,颜色均匀度等等,都会影响测定结果。为此,我们改用薄层比色法,结果较满意,现报道如下。     

雷公藤内酯醇对大鼠脑局灶性缺血再灌注后脑神经细胞凋亡的影响

目的 :探讨雷公藤内酯醇 (triptolide,TL)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织内神经细胞凋亡的影响。方法 :采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。观察雷公藤内酯醇 (0.2～0.4mg·kg^-1,ip)对各组大鼠神经功能缺失评分的影响 ,应用免疫组化染色技术 ,观察大鼠大脑中动脉闭塞侧髓过氧化物酶 (MPO)免疫染色阳性细胞数、细胞原位凋亡 (TUNEL)染色阳性细胞数的变化。结果 :与损伤模型组比较 ,雷公藤内酯醇两治疗组可明显改善大鼠神经功能的受损程度 ,并减少MPO及TUNEL染色阳性细胞数。结论 :雷公藤内酯醇具有抑制局灶性脑缺血再灌注时白细胞浸润、抗神经细胞凋亡作用 ,从而改善受损的神经功能。     

雷公藤内酯醇研究进展

雷公藤内酯醇具有抗肿瘤,抗炎,免疫调节,抗生育等活性,广泛用于治疗肿瘤,肾炎,哮喘等疾病,但是在运用过程中也存在多种不良反应.综述了近几年来雷公藤内酯醇的药理研究,含量测定方法及不良反应的研究概况.     

雷公藤内酯醇作用机制研究进展

雷公藤内酯醇(triptolide,Tri;又称雷公藤甲素、PG-490),是从雷公藤中分离出的含有3个环氧基的二萜内酯化合物,外观呈无色针状结晶体,相对分子质量为360,分子式为C2OH24O6,在体内化学性质稳定,生理活性强,是雷公藤发挥免疫抑制作用的主要成分之一,其相关效价比雷公藤总苷高100～200倍[1]。相对雷公藤的其他单体而言,雷公藤内酯醇获得较易,全合成也已成功。近年来国内外学者对其药理作用机制进行了大量的研究,本文综述了近20年来国内外的研究进展。1理化性质和结构特点雷公藤内酯醇为白色晶体,熔点(mp)226～230℃,不溶于水,溶于二甲亚砜、…     

雷公藤内酯醇抗肿瘤分子机制研究进展

雷公藤内酯醇对血液系统肿瘤和实体肿瘤有较强的抗肿瘤活性,作用机制涉及到多个信号传导途径,通过激活caspase通路、诱导p53表达、活化MAPK信号通路、影响NF-κB功能诱导细胞凋亡,此外通过影响细胞周期、抑制血管形成等多种方式发挥抗肿瘤作用。对其抗肿瘤分子机制研究将为抗肿瘤治疗提供药物作用靶点。     

雷公藤内酯醇半合成衍生物对人结肠癌细胞系荷瘤小鼠肿瘤抑制作用的研究

目的:观察和评价雷公藤内酯醇的半合成衍生物(MC002)对人结肠癌HCT-8小鼠模型的肿瘤抑制作用。方法:用BALB/C裸小鼠接种人结肠癌HCT-8瘤株造成小鼠肿瘤模型,以MC002对荷瘤小鼠的相对肿瘤增殖率、瘤重、抑瘤率为指标评价MC002对小鼠的抑瘤作用。结果:MC002各剂量组瘤体积明显小于模型对照组,瘤重均显著降低,在1.5mg.kg^-1、1.0mg·kg^-1给药10次后T/C%均小于40%(P<0.05),且具有量效关系。结论:MC002能有效抑制人结肠癌HCT-8荷瘤小鼠体内肿瘤生长。通过深入研究MC002有可能发展成为一种新型抗癌药。     

雷公藤甲素诱导H22细胞凋亡作用研究

目的研究雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。方法MTT法测定雷公藤甲素对H22肿瘤细胞的抑制率,并通过细胞形态学观测及DNA凝胶电泳分析检测雷公藤甲素对H22细胞的诱导凋亡作用。结果雷公藤甲素80μg/L抑制率达41.6%,与浓度成正相关,IC50为85.79μg/L;电镜结果表明,40μg/L以上浓度可明显诱导H22细胞出现凋亡特征;DNA电泳显示明显的梯状条带。结论雷公藤甲素能诱导H22细胞凋亡,表明其具有一定的抗肝癌作用。     

固体脂质纳米粒降低雷公藤内酯醇肝毒性的实验研究

目的 探讨固体脂质纳米粒降低雷公藤内酯醇(TP)对肝脏的毒性作用。方法 用雷公藤内酯醇固体脂质纳米粒(TP—SLN)小鼠ig60d后，测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH—Px)的活性以及丙二醛(MDA)的含量。结果与空白组相比，TP—SLN对ALT，AST，SOD，GSH—Px，MDA的活性或含量差异无显著性；中、高剂量(20，30μg／kg)的TP组则显著降低SOD和GSH—Px的活性，并能显著提高MDA，ALT和AST的含量。结论 TP—SLN能降低TP对肝脏的毒性。     

雷公藤贴剂中雷公藤内酯醇释放度的测定

目的 建立雷公藤贴剂中雷公藤内酯醇的释放度测定方法.方法采用HPLC法测定雷公藤内酯醇,Ultimate色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈—超纯水(3:7),检测波长为218nm,体积流量为l mL/min,柱温为35℃,进样量为20μL.采用《中国药典》释放度测定法第三法,释放介质为50％甲醇—生理盐水(1:1).结果雷公藤内酯醇在6～96 μg/mL线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为98.27％,RSD为1.68％.雷公藤贴剂中雷公藤内酯醇的释放过程符合Higuchi方程.结论本法操作方便,重现性好,适合于雷公藤贴剂中雷公藤内酯醇的释放度测定.     

雷公藤内酯醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的拮抗作用

目的:探讨雷公藤内酯醇对大鼠局灶性缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法:采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,雷公藤内酯醇0.2、0.4mg/kgip后,检测大脑中动脉闭塞侧的梗死体积、神经功能受损程度、脑组织含水量、脑微血管内中性粒细胞计数。同时光镜下观察脑组织损伤程度和脑神经细胞IL-1β免疫组化染色改变。结果:与模型组比较,雷公藤内酯醇两治疗组大脑中动脉闭塞侧脑梗死体积、脑含水量、微血管内中性粒细胞计数及光镜下脑神经细胞受损程度均明显减少或减轻。脑神经细胞IL-1β免疫组化染色阳性细胞数明显减少,神经功能受损程度也明显改善。结论:雷公藤内酯醇对大鼠缺血再灌注脑损伤有保护作用。     

雷公藤诱导细胞凋亡的研究进展

雷公藤Tripterygium wilfordii提取物在临床上常用于治疗类风湿关节炎等多种疾病，其疗效已被广泛认可，近5年来国内外学者从其提取物诱导细胞凋亡的角度，对其药理机制进行了细胞分子水平的探讨，现对其研究进展进行综述。     

雷公藤内酯醇对小鼠腹腔激活巨噬细胞释放一氧化氮的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(TP)抗炎及免疫抑制作用的机制。方法以 Criess 试剂检测 TP 对小鼠腹腔激活巨噬细胞在不同剂量和不同时间段一氧化氮(NO)分泌的影响。结果在1～10μg/ml 范围内,TP 对腹腔激活巨噬细胞 NO 产生具有明显抑制作用(P<0.01),呈剂量和时间依赖性,且无细胞毒性。结论 TP 能有效抑制小鼠腹腔液中激活巨噬细胞 NO 生成,提示 TP 的抗炎及免疫抑制作用与抑制 NO 的生成有关。