Ⅱ度烧伤病人皮肤角朊细胞ICAM-1的表达

目的探讨Ⅱ度烧伤创面愈合过程中角朊细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）的表达及其意义。方法应用免疫组织化学染色技术,对烧伤后不同时间Ⅱ度烧伤皮肤组织角朊细胞ＩＣＡＭ１的表达进行动态观察。８例健康人皮肤,６例烧伤病人正常皮肤及８例Ⅱ度烧伤愈合后增生性瘢痕组织为对照组。结果健康人正常皮肤基底层细胞ＩＣＡＭ１可低表达,烧伤病人正常皮肤基底层细胞ＩＣＡＭ１可表达增强。Ⅱ度创面基底层细胞伤后１周内ＩＣＡＭ１表达轻度增高,２周内明显增强,２～４周稳定高表达,ＩＣＡＭ１呈极性分布,新生上皮多层角朊细胞ＩＣＡＭ１表达显著增强,ＩＣＡＭ１阳性细胞呈长柱状排列。结论Ⅱ度烧伤皮肤角朊细胞ＩＣＡＭ１表达增强可能与创基炎性细胞浸润相关,具有诱导角朊细胞增殖、迁移,加速上皮化的作用。     

Ⅱ度烧伤病人皮肤角朊细胞ICAM-1的表达

目的探讨Ⅱ度烧伤创面愈合过程中角朊细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学染色技术,对烧伤后不同时间Ⅱ度烧伤皮肤组织角朊细胞 ICAM-1的表达进行动态观察。8例健康人皮肤,6例烧伤病人正常皮肤及8例Ⅱ度烧伤愈合后增生性瘢痕组织为对照组。结果健康人正常皮肤基底层细胞 ICAM-1可低表达,烧伤病人正常皮肤基底层细胞ICAM-1可表达增强。Ⅱ度创面基底层细胞伤后1周内 ICAM-1表达轻度增高,2周内明显增强,2～4周稳定高表达,ICAM-1呈极性分布,新生上皮多层角朊细胞 ICAM-1表达显著增强,ICAM-1阳性细胞呈长柱状排列。结论Ⅱ度烧伤皮肤角朊细胞 ICAM-1表达增强可能与创基炎性细胞浸润相关,具有诱导角朊细胞增殖、迁移,加速上皮化的作用。     

烧伤大鼠早期切痂对内皮细胞间粘附分子—1及E—选择素mRNA表？…

目的 研究烧伤血清对体外培养的内皮细胞的细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）及Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）ｍＲＮＡ表达的影响,探讨实施休克期切痂上述指标的变化。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠１７６只,３０％Ⅲ度烫伤,收集不同时间点血清,采用逆转录ＰＣＲ方法分别观察伤后不同时相点血清刺激内皮细胞ＩＣＡＭ－Ⅰ、Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ ｍＲＮＡ的表达的规律。结果 烫伤后血清可刺激内皮细胞ＩＣＡＭ－１、Ｓ－ｓｅ     

烧伤大鼠早期切痂对内皮细胞间粘附分子-1及E-选择素 mRNA表达影响

目的　研究烧伤血清对体外培养的内皮细胞的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）及Ｅ选择素（Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ）ｍＲＮＡ表达的影响,探讨实施休克期切痂上述指标的变化。　方法　Ｗｉｓｔａｒ 大鼠１７６ 只,３０％ Ⅲ度烫伤,收集不同时间点血清,采用逆转录ＰＣＲ 方法分别观察伤后不同时相点血清刺激内皮细胞ＩＣＡＭ１、Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ ｍＲＮＡ表达的规律。　结果　烫伤后血清可刺激内皮细胞ＩＣＡＭ１ 、ＥｓｅｌｅｃｔｉｎｍＲＮＡ表达上调,而且表达量与伤后时间呈正相关。伤后８ 及２４ 小时切痂动物血清不引起内皮细胞的上述变化,９６ 小时切痂（１－６０±０－１７）、（１－２０ ±０－０９） 效果不及休克期切痂组（０－９３ ±０－１４） 、（０－９３ ±０－２２）。　结论　及早切痂去除了坏死组织,避免了内皮细胞大量合成ＩＣＡＭ１、Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ 等粘附分子,减轻了由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律

目的 了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律,探讨其机制.方法 选择2004年1月-2007年12月,江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例.收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块.采用免疫组织化学双染色法,观察细胞角蛋白10(CK10)、CK14、CK19、bel-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中的表达情况.结果 正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10,基底层肌上皮细胞微弱表达P63和CK14,CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63.浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中,其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常.深Ⅱ度烧伤后7 d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强;伤后8～10 d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状上皮化,形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构,并随肉芽组织向创面浅层迁移,经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化.深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30 d,超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63. 结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖,这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一.     

血小板活化因子及其受体对颈髓损伤后血脊髓屏障损害的分子机制研究

目的：探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）及其受体对颈髓损伤后血脊髓屏障损害的分子机制。方法：采用蛛网膜下腔注射ＰＡＦ及静脉注射ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１，应用地高辛标记ｃＤＮＡ探针原位杂交技术检测颈髓损伤后颈髓血管内皮细胞细胞间粘附分子－１ｍＲＮＡ（ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ）和内皮细胞白细胞粘附分子－１ｍＲＮＡ（ＥＬＡＭ－１ｍＲＮＡ）表达。观察ＰＡＦ及其受体拮抗剂对颈髓损伤后血脊髓屏障、ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ、ＥＬＡＭ－１ｍＲＮＡ表达的影响。结果：伤后颈髓血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ、ＥＬＡＭ－１ｍＲＮＡ表达、伊文思蓝含量、水含量呈不同程度的增加；ＰＡＦ可使伤后血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ、ＥＬＡＭ－１ｍＲＮＡ表达、伊文思蓝含量、水含量增加更为显著，ＰＡＦ受体拮抗剂可抑制ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ、ＥＬＡＭ－１ｍＲＮＡ表达，降低颈髓组织伊文思蓝含量及水含量。结论：ＰＡＦ通过增加伤后颈髓血管内皮细胞粘附分子的表达是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础。ＰＡＦ受体对伤后血管内皮细胞细胞粘附分子的表达具有调控作用。     

应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析兔Ⅰ型和Ⅲ型胶原的含量

应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳）分析了兔皮中Ⅲ型胶原的含量。采用此法检测了正常兔皮伤后７２ｈ深Ⅱ度创面、伤后１月及１．５月的已愈创面组织中胶原成分的改变，旨在探讨深Ⅱ度烧伤早期及愈后皮肤胶原的变化，结果表明创面在伤后及愈合后组织中Ⅲ型胶原含量均显著减少。提示在创面愈合过程中，胶原修复的同时伴有Ⅲ型胶原的减少。     

细胞间粘附分子-1和血管细胞粘附分子-1在慢性排斥反应中的表达

为了探讨移植肾慢性排斥反应的发病机制，应用免疫组化技术（ＡＢＣ法）对１６例肾移植术后发生慢性排斥反应患者的移植肾组织及５例正常肾组织行细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）、血管细胞粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）染色及ＨＥ染色。结果表明ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１在正常肾脏和慢性排斥反应移植肾脏上的表达分布不同；结果提示，它们在移植肾慢性排斥反应的发生、发展过程中起重要作用     

应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析兔Ⅰ型和…

应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了兔皮中Ⅲ型胶原的含量。采用此法检测了正常兔皮伤后７２ｈ深Ⅱ度创面，伤后１月及１．５月的已愈创面组织中胶原成分的改变，旨在探讨深Ⅱ度烧伤早期及愈后皮肤胶原的变化，结果表明创面在伤后及愈合后组织中Ⅲ型胶原含量均显著减少，提示在创面愈合过程中，胶原修复的同时伴有Ⅲ型胶原的减少。     

细胞间粘附分子-1(ICAM-1)与肾脏移植排斥反应

ＩＣＡＭ－１是介导肾移植急性排斥反应的重要细胞粘附分子。肾移植急性排斥反应时肾脏组织ＩＣＡＭ－１表达增加，血、尿中可溶性的ＩＣＡＭ－１（ｓＩＣＡＭ－１）升高。动态监测肾移植术后患者血、尿中ｓＩＣＡＭ－１的变化，有助于肾移植急性排斥反应的诊断和抗排斥反应的疗效评价，应用ＩＣＡＭ－１单克隆抗体，可以提高肾移植成功率。     

烫伤大鼠不同深度创面组织中表皮干细胞分布的初步研究

目的初步观察烫伤大鼠不同深度创面组织中表皮干细胞的分布情况。方法将32只SD大鼠分别造成Ⅰ、浅Ⅱ、深Ⅱ和Ⅲ度烫伤，伤后24h取创面组织标本，制作切片。采用细菌蛋白一生物素标记法(LSAB)进行免疫组织化学染色，以α2、β1整合素及角蛋白10(K10)作为一抗，观察不同创面组织中表皮干细胞的表达和分布情况。结果Ⅰ度烧伤创面组织中，K10阳性细胞分布于表皮的棘细胞层、颗粒层、透明层，α2、β1整合素阳性细胞分布于表皮基底层，数量多。浅Ⅱ度创面中，α2、β1整合素阳性细胞位于残留的基底层和皮肤附属器(主要是毛囊)中，数量较少。深Ⅱ度创面中，α2、β1整合素阳性细胞仅存在于真皮深层健存的皮肤附属器中，数量很少。Ⅲ度创面中，罕见α2、β1整合素阳性细胞。结论表皮干细胞在烧伤创面中的分布与烧伤深度有关，残存的表皮干细胞可能是创伤修复过程中再上皮化的细胞来源。     

成纤维细胞生长因子在烧伤创面内变化的临床观察

目的 探讨临床烧伤创面愈合过程中成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）的变化及其作用。方法采用免疫组织化学方法,对烧伤创面肉芽中心部、肉芽与愈合皮肤的交界部、愈合皮肤和自身正常皮肤,以及Ⅲ度烧伤创面不同部位和Ⅱ度烧伤创面愈合过程中ＦＧＦ表达变化进行了观察。结果 Ⅲ度烧伤创面不同部位ＦＧＦ表达强度不同,以创面的肉芽中心部ＦＧＦ含量最多,肉芽与愈合皮肤的交界部ＦＧＦ含量次之,愈合皮肤ＦＧＦ含量较少;每个创面ＦＧ     

Neutrophil extracellular traps coincide with a pro‐coagulant status of microcirculatory endothelium in burn wounds

Burn‐induced tissue loss is partly related to secondary expansion of necrosis into vital dermis neighboring the initial burn injury. An important factor herein is the severe loss of perfusion of the burn wound, probably caused by microvascular damage induced by the intense local inflammatory responses as well as burn‐induced hypercoagulation. We hypothesize that the formation of neutrophilic extracellular traps (NETs) play an important role in this. The purpose of this study was to investigate postburn intravascular thrombosis, NETs formation and the coagulant state in the microvasculature of burns in both animal models and patients. We used two in vivo burn wound models: rats and pigs. In rats, the entire wound was excised at day 14 postburn and in pigs burn wound biopsies were collected at different time points up to 60 days postburn. To confirm the data in patients, eschar from the burn wound was obtained from burn wound patients at different time points after wounding. The number of intravascular thrombi, the presence of intravascular NETs and the number of tissue factor (TF) positive blood vessels in the burn wound was determined. In rats, a significant increase in intravascular thrombi and TF expression was observed 14 days postburn, that in majority coincided with NETs. In pigs, a significant increase in intravascular thrombi and TF expression was found over time up to 60 days postburn, that in majority coincided with NETs too. Also in eschar of burn wound patients, a significant increase in intravascular thrombi was noted, that in majority coincided with NETs, already 0.5 days postburn and remained elevated up to 46 days postburn. This study shows the presence of NETosis in microcirculatory thrombosis of burn wounds and a switch in the microcirculatory endothelium toward a procoagulant phenotype.     

严重烧伤患者早期几种细胞因子的变化意义

目的　观察细胞间粘附分子 1、白细胞介素 10及肿瘤坏死因子α在烧伤后并发症中的变化。方法　采用ELISA法检测严重烧伤早期 ,19例患者不同时相点外周血 3种细胞因子的水平及其变化 ,另选 11名健康志愿者为对照。　结果　 3种细胞因子的含量在伤后明显升高 ,合并有低血容量休克、脓毒血症或多器官功能障碍综合征 (MODS)时 ,升高更加明显 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论烧伤后早期动态监测 3种细胞因子的变化 ,对脓毒症及MODS的发生、发展具有一定预警意义     

严重烧伤早期粘附分子的表达对中性粒细胞在肝脏中聚集的影响

研究严重烧伤后早期中性粒细胞在肝脏中的聚集机制及相关粘附分子表达变化。结论严重烧伤后早期粘附分子Ｐ－选择素和ＩＣＡＭ－１在肝窦内皮细胞和肝细胞表面的增加是中性粒细胞在肝脏中聚集的关键，介导了中性料细胞对脏功能的损害。     

Clinical significance of leukocyte infiltrative response in deep wound of patients with major burns

OBJECTIVE: To investigate the time course of infiltrated leukocytes and the subpopulations of infiltrated lymphocytes in deep wounds, and their relationship with injury severity in seriously burned patients. METHODS: Six patients with major burns were enrolled in the study. Specimens were taken from deep partial-thickness burn wounds of all patients at 3 days, 1 week, 2 weeks and 3 weeks after burn. The appearance time and cellular components of infiltrated leukocyte zone in the burn wound were evaluated by histological and immunohistochemistry examination with lymphocyte monoclonal antibodies. RESULTS: The infiltrated leukocyte zone of burn wound formed 1-2 weeks after burn. The more severe the degree of injury (including burn area, depth and combined injuries) was, the later the infiltrated leukocyte zone appeared. The infiltrated cells mainly consisted of polymorphonuclear leukocytes (PMN) during the early period after burn while macrophages and lymphocytes appeared later. There were some changes of the T lymphocyte subsets and their activation degree in the burn wound. CONCLUSION: The changes of infiltrated leukocyte zone of wound following burns were closely related to the injury severity, and represented alteration of the anti-infection ability and immune rejection of local wound. These results provide important evidence for appropriate wound treatment and prolonging the survival of skin allograft.     

烧伤后24小时内削痂对深Ⅱ度创面局部炎症反应的影响

目的探讨烧伤后24h内行削痂手术对深Ⅱ度创面局部炎症反应以及组织损害的影响。方法选择12例烧伤患者,伤后24h内对深Ⅱ度创面行削痂手术,将患者同一创面分为3个标本采集区,即手术前、手术后和未手术区。手术前标本取自削痂术前创面,手术后和未手术区创面标本于伤后5—7d获取。采用组织培养和比色法测定创面组织释放白细胞介素(IL)8、髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)的水平,通过HE和Masson染色对创面组织坏死程度进行形态学观察。结果削痂手术后,患者创面组织局部释放IL8、MPO、MDA的水平分别为(6.83±1.85)μg/L、(4.07±0.87)U/g、(8.94±5.66)μmol/g,与未手术创面比较明显降低(P<0.01)。形态学观察显示,手术前创面有凝固性坏死灶;未手术创面炎症反应明显,坏死组织范围扩大;削痂手术后创面局部的炎症反应得到改善,未见坏死组织范围扩大。结论伤后24h内行削痂手术,可以改善深Ⅱ度烧伤创面局部的炎症反应,防止创面进行性加深,有利于创面及早愈合。     

烧伤创面羟脯氨酸含量动态变化的实验研究

为探讨浅Ⅱ度烧伤创面胶原含量的变化及其与创面上皮化的关系,我们对浅Ⅱ度烧伤创面的羟脯氨酸(OHP)水平及创面的形态学变化作了动态检测。结果发现烧伤后早期创面表皮缺损,OHP含量增高,伤后第3天达峰值,继之随着上皮化的完善,OHP 水平逐渐下降至正常。我们认为,浅Ⅱ度烧伤创面胶原的含量与上皮化程度有关,良好的上皮化过程有利于控制胶原的过度增生。表皮细胞源因子(EDF)可能是表皮细胞调控抑制胶原合成的主要因素。