NK细胞、HLA-G、和HLA-DRB1等位基因在子痫前期发病机制中的作用研究

目的:研究子痫前期患者发病机制中相关的免疫学变化及基因背景。方法:SAP法检测血液中NK细胞数量。MTT珐检测NK细胞增殖能力。51Cr释放法测定NK细胞杀伤活性。免疫组化法检测胎盘蜕膜浸润的NK细胞数量及HLA-G蛋白表达水平。RT-PCR和real time PCR法检测胎盘蜕膜组织HLA-G mRNA。PCR-SSP法检测两组HLA-DRB1等位基因频率,并分析母/儿间所携带某些HLA-DRB1等位基因配伍的频率。结果:①子痫前期患者外周血及其新生儿脐血NK细胞数均显著高于正常晚孕者及其新生儿。②子痫前期患者外周血及其新生儿脐血NK细胞增殖活性及杀伤活性均明显高于正常晚孕组(P<0.05)。③轻度与重度子痫前期组胎盘蜕膜NK细胞均多于正常晚孕组,但仅重度子痫前期组蜕膜NK细胞数量增加有统计学意义(P<0.05)。④轻度子痫前期组、重度子痫前期组和正常晚孕组之间HLA-G mRNA水平两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。⑤轻度子痫前期组HLA-G蛋白表达水平与正常晚孕组无显著性差异,重度子痫前期组胎盘HLA-G蛋白表达水平较正常晚孕组显著降低(P<0.05)。⑥两组孕妇和新生儿均检出13个HLA-DRB1等位基因,各等位基因频率在两组间均无明显差异。子痫前期组母不携带HLA-DRB1*04基因/儿携带DRB1*04基因、均不携带HLA-DRB1*14基因的频率显著高于正常晚孕组(P<0.05);母/儿均不携带HLA-DRB1*10基因、均携带HLA-DRB1*14的频率显著低于正常晚孕组(P<0.05)。结论:①先兆子痫患者外周血、脐血及蜕膜的NK细胞数量增多,活性增强,在妊娠过程中影响母胎免疫耐受。②母婴所携带的某些HLA-DRB1基因配伍与子痫前期易感性或抗性相关;父源性HLA-DRB1*04基因与子痫前期易感性相关。     

妊娠期高血压疾病患者血浆组织型纤溶酶原激活物及其抑制物的活性变化

目的探讨妊娠期高血压疾病患者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI)的活性变化。方法采用发色底物法和酶联免疫吸附法测定40例妊娠期高血压疾病患者(妊娠期高血压疾病组)、20例正常非孕妇女(正常非孕组)及20例正常晚孕妇女(正常晚孕组)血浆组织纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI)活性,并进行比较。结果正常晚孕组和妊娠期高血压疾病组血浆t-PA水平显著高于正常非孕组(P<0.001),而妊娠期高血压疾病各组与正常晚孕组比较无统计学意义(P>0.05);正常晚孕组和妊娠期高血压疾病各组血浆PAI水平均显著高于正常非孕组(P<0.001),妊娠期高血压疾病各组血浆PAI水平显著高于正常晚孕组(P<0.01),子痫患者血浆PAI水平显著高于妊娠期高血压和子痫前期患者(P<0.05),子痫前期患者血浆PAI水平显著高于妊娠期高血压患者(P<0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者血液纤溶抑制系统水平升高。     

外周血NK，IL-12，CRP在子痫前期中的测定及意义

目的测定子痫前期孕妇外周血NK、IL-12、CRP水平的变化并探讨其意义。方法选择子痫前期患者42例，正常晚孕组20例，正常未孕育龄妇女20例，测定外周血NK细胞、IL-12及CRP水平并行统计学分析。结果子痫前期组NK细胞平均值及IL-12，CRP水平明显高于正常晚孕组和正常未孕组；各组血中NK细胞值与IL-12水平呈正相关关系，NK与CRP之间相关性不明显。结论NK细胞参与了子痫前期的发病，IL-12通过激活NK细胞，诱发免疫介导性血管内皮炎症、损伤引起子痫前期疾病；CRP水平在子痫前期时显著增加，可能成为临床早期发现子痫前期发病的一个灵敏指标。     

NK细胞与早发型重度子痫前期疾病进展的相关性研究

目的探讨自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)与早发型重度子痫前期发生、发展的相关关系。方法选取2012年1月至2014年12月在北京潞河医院定期孕检的重度子痫前期患者44例(早发型重度子痫前期20例,晚发型重度子痫前期24例)为研究对象。选取同时期正常无合并症的患者20例为对照组。采集母亲外周血2 m L,胎儿脐带血2 m L及蜕膜组织。采用流式细胞学方法检测外周血和脐带血中的CD3-CD16-CD56+的百分率;蜕膜组织应用免疫组织化学方法,计算CD3-CD16-CD56+的数量取均值,应用计算机图像分析法读取CD56+细胞平均灰度值。结果重度子痫前期组外周血、脐血、蜕膜组织中的NK细胞数量高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);早发型重度子痫前期组脐血、蜕膜组织中NK细胞数量高于晚发型重度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期外周血、蜕膜组织中的NK细胞数量与病程进展呈负相关(r=-0.397,P=0.040;r=-0.391,P=0.044),与血压升高幅度呈正相关(r=-0.597,P=0.001;r=-0.416,P=0.031)。蜕膜组织中的NK细胞数量与确诊重度子痫前期的孕周呈负相关(r=-0.594,P=0.003)。结论重度子痫前期患者外周血、脐血、蜕膜中NK细胞数量增加,早发型重度子痫前期增加更为显著。外周血、蜕膜中NK细胞数量与早发型重度子痫前期的发生、发展相关。     

子痫前期患者胎盘和母血中高迁移率族蛋白1及TLR4的表达

目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1和Toll样受体(TLR)4与子痫前期的关系。方法:选取60例子痫前期患者(其中轻度30例,重度30例)作为研究对象,以30例正常晚孕妇女作为正常对照,采用RT-PCR及免疫组化法测定胎盘组织中HMGB1及TLR4mRNA和蛋白的表达,ELISA法测定母血血浆中HMGB1和TLR4蛋白水平。结果:HMGB1主要定位于滋养细胞的胞质中,TLR4主要定位于胎盘合体滋养细胞的胞膜及胞质中。3组胎盘组织中HMGB1、TLR4mRNA和蛋白的表达水平、母血中2种蛋白的水平差异均有统计学意义(F=79.143、35.155、6.030、10.080、12.493和11.856,P均<0.05);轻、重度子痫前期患者胎盘组织中HMGB1及TLR4mRNA和蛋白的表达水平、母血中HMGB1和TLR4蛋白水平均高于正常晚孕妇女(P<0.05),但轻、重度子痫前期组之间差异无统计学意义(P<0.05)。子痫前期患者胎盘组织中HMGB1与TLR4mRNA相对表达量、母血中2个蛋白的表达水平呈正相关(r分别为0.862和0.783,P<0.001),胎盘组织中2个蛋白的表达亦呈正相关(rs=0.825,P<0.001)。结论:HMGB1和TLR4表达增高与子痫前期发病密切相关,可能是子痫前期的发病机制之一。     

重度子痫前期患者血清对NK细胞杀伤活性影响

 摘要 目的：研究重度子痫前期患者血清对NK细胞杀伤活性影响。方法：重度子痫前期重度组、正常妊娠组各15例,采用1：1配比的病历对照研究。采用Percoll不连续密度梯度方法分离健康非孕妇女NK细胞,并用20%浓度重度子痫前期及正常妊娠妇女血清孵育NK细胞20小时。 采用MTT法检测不同浓度子痫前期重度患者血清对NK细胞杀伤活性影响。结果：在20%子痫前期重度及正常妊娠血清孵育20小时后,重度子痫前期组NK细胞杀伤活性为48.68±8.47%,正常妊娠组为35.21±8.24%。与正常妊娠组相比,重度子痫前期组NK细胞杀伤活性增强,差异显著,P<0.01。在重度子痫前期组,用10%浓度血清孵育20小时后,NK细胞杀伤活性为39.98±7.65%, 40%血清浓度组为58.33±7.45%,,与20%浓度血清组相比,差异均显著,P<0.01。结论：子痫前期重度患者血清可使NK细胞杀伤活性增强,随血清浓度的增加,NK细胞杀伤活性逐渐增高。     

可溶性血管细胞粘附分子-1在妊娠肝内胆汁淤积症患者中的变化及意义

目的 :了解可溶性血管细胞粘附分子 1(sVCAM 1)在妊娠肝内肝汁淤积症 (ICP)患者母血、脐血的变化 ,揭示ICP可能的发病机制。方法 :采用ELISA方法检测sVCAM 1的浓度。结果 :ICP患者血清、脐血中sVCAM 1的浓度明显高于正常孕妇组 (P<0 .0 1) ;两组孕妇产后 1周母血sVCAM 1逐渐降到正常非孕水平 (P>0 .0 5 )。结论 :ICP患者粘附分子的异常表达可能是ICP发病机制的一个重要环节     

30例妊娠高血压综合征患者锌、铜、镉的测定分析

本文研究了30例不同程度的妊高征患者,并以同期正常孕妇30例作相应对照。共采集母血清、脐血清、胎盘标本各60份,采用原子吸收分光光度计测定其中锌、铜、镉的含量。结果表明:妊高征孕产妇组(实验组)母血清锌明显低于正常孕产妇组(对照组),(P<0.01),铜及铜/锌比值高于正常孕产妇组(铜值P<0.05,铜/锌比值P<0.01)。实验组母血清和胎盘中镉高于对照组(P<0.05);实验组与对照组的脐血清和胎盘中锌、铜及铜/锌比值无统计学差异,(P>0.05);实验组和对照组母血清、脐血清和胎盘中锌、铜、铜/锌比值无相关关系(r<0.05,P>0.05);脐血清与胎盘中锌及铜/锌比值部分呈现相关关系(锌值r=0.44,P<0.05;铜/锌比值r=0.38,P<0.05)。两组的胎盘锌含量明显高于母血清和脐血清锌含量,(P<0.01)。结果提示:母血清锌、铜/锌比值,母血清镉及胎盘镉可能与妊高征的发生有一定关系;胎盘有积锌现象;妊高征患者母血清锌降低并不影响胎盘和胎儿锌水平;胎盘锌、铜变化可能较母血清锌、铜变化更能反映胎儿锌状况。     

PAPP-A、脐动脉S/D比值与子痫前期的相关性研究

目的 研究子痫前期孕妇外周血、脐血和胎盘组织妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)水平及脐动脉S/D,探讨PAPP-A、脐动脉S/D与子痫前期的关系。方法 52例子痫前期孕妇,按发病孕周不同分为早发型组(≤32周)30例和晚发型组(>32周)22例,相匹配孕周正常孕妇各14例为对照组1、2;彩超测胎儿脐动脉S/D;ELISA法和免疫组化法分别测血清及胎盘PAPP-A水平。结果 ①早发型组及晚发型组外周血PAPP-A均高于对照组1、2(P<0.05),且早发型组高于晚发型组(P<0.05);早发型组及晚发型组脐血PAPP-A均高于对照组2(P<0.05);②早发型组胎盘PAPP-A高于对照组2和晚发型组(P<0.05);③早发型组及晚发型组胎儿脐动脉S/D均高于对照组1、2(P<0.05),且早发型组高于晚发型组(P<0.05);④早发型组外周血PAPP-A水平与脐动脉S/D呈正相关(P<0.05)。结论 早发型子痫前期孕妇外周血PAPP-A和脐动脉S/D均升高,提示PAPP-A与早发型子痫前期的胎盘功能紊乱及子痫前期预后有关。     

Annexin Ⅴ、ET-1在子痫前期患者母血及脐血的表达及其与胎儿生长受限的关系

目的:研究子痫前期患者母血及脐血中AnnexinⅤ、ET-1的表达水平及与胎儿生长受限相关性,并探讨子痫前期发病机理及其与胎儿生长受限的关系。方法:采用ELISA方法检测子痫前期患者84例、FGR患者24例及对照组29例患者母血及脐血中AnnexinⅤ、ET-1的表达水平。结果:1子痫前期各组母血、脐血中annexinⅤ的蛋白表达水平均低于对照组,各组分别比较,差异均有高度统计学意义(P0.01)。在母血及脐血中均是早发组晚发组轻度组,但母血中晚发组与轻度组比较,差异无统计学意义(P0.05)。余各组两两分别比较,差异均有高度统计学意义(P0.01)。各组与FGR组比较,FGR组母血及脐血中annexinⅤ的表达水平均低于轻度组、晚发重度组、对照组,分别与各组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。但FGR组与早发重度组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2各组孕妇母血及脐血中ET-1水平变化,子痫前期各组均明显高于对照组,分别比较,差异均有高度统计学意义(P0.01)。在母血中早发重度型晚发重度型轻度子痫前期患者,差异仍有统计学意义(P0.05)。但在脐血中轻度组与重度组比较,差异均有高度统计学意义(P0.01);但早发组与晚发组比较,差异无统计学意义(P0.05)。各组与FGR组比较,FGR组ET-1表达高于对照组及轻度组,且分别比较差异有高度统计学意义(P0.01)。但早发型FGR组晚发型,但分别比较,差异均无统计学意义(P0.05)。3AnnexinⅤ子痫前期各组及FGR组在孕妇外周血与脐血中的表达均呈明显正相关(P0.01);ET-1子痫前期各组及FGR组在孕妇外周血与脐血中的表达均呈明显正相关(P0.01)。结论:患者母血及脐血中AnnexinⅤ、ET-1的表达可能与子痫前期发病机制有关,通过影响胎盘中凝血-纤溶系统及血管内皮系统,参与子痫前期及胎儿生长受限发生、发展的病理生理过程。     

Studies on Activity of NK Cells in Preeclampsia Patients

Preeclampsiaisoneofseverepregnantsyndromeandcharacterizedwithpregnantwomen ,withahighmorbidityupto 9.4 %inChinesepopulation .Preeclampsiabadlycompromisesthehealthofmoth ersandinfants .However ,itsetiologyandpathogene sisisnotknownclearly .Somepreviousrepo…     

抗滋养细胞膜抗原抗体水平与妊娠期高血压疾病的关系

目的：探讨抗滋养细胞膜抗原(TA)抗体水平与妊娠期高血压疾病(HDCP)的关系。方法：应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测40例正常妇女和92例HDCP晚孕妇女［包括妊娠期高血压或轻度子痫前期23例，重度子痫前期41例，子痫28例；并发胎儿生长迟缓(FGR)21例］外周静脉血和新生儿脐血血清中抗TA IgG、IgM水平。结果： HDCP组、子痫组及重度子痫前期组母血中抗TAIgG、IgM阳性率均比正常组显著增加，且随HDCP 加重IgM阳性率显著增加(P<0.05)。 HDCP组、子痫组及重度子痫前期组脐血中抗TA IgG、IgM阳性率均比正常组显著增加，且HDCP组及子痫组IgM阳性率均比正常组显著增加(P<0.05) 。HDCP未并发FGR组脐血中IgM阳性率低于并发FGR组(P<0.05)。结论：HDCP患者母血及脐血中 抗TA IgG、IgM升高可能是妊娠期高血压疾病发生的主要原因。     

妊娠期糖尿病病人脐血瘦素水平与母血瘦素水平及新生儿体质量的关系

①目的　探讨妊娠期糖尿病 (GDM )病人新生儿脐血瘦素水平与母血瘦素及新生儿体质量的关系。②方法　用放射免疫方法测定 30例GDM孕妇血清和其新生儿脐血瘦素浓度及 2 4例正常孕妇脐血瘦素浓度 ,同时测量新生儿的体质量、胎盘质量、孕妇体质量的增加情况等。③结果　GDM孕妇血清瘦素水平明显高于新生儿脐血 (t=3.5 1,P <0 .0 0 1) ,但二者无相关性 ;GDM孕妇血清瘦素水平与体质量指数 (BMI)和孕期体质量的增加呈正相关 (r=0 .5 83、0 .4 13,P <0 .0 5 ) ;GDM孕妇新生儿脐血瘦素水平与新生儿出生体质量和胎盘质量呈正相关(r =0 .5 0 8、0 .4 84 ,P <0 .0 5 ) ;与正常孕妇新生儿脐血瘦素水平相比 ,GDM孕妇新生儿脐血瘦素水平无明显增高(t=0 .6 5 3,P >0 .0 5 )。④结论　GDM孕妇新生儿脐血瘦素水平明显低于母血瘦素水平 ,且与新生儿体质量及胎盘质量呈正相关关系 ,有望成为预测胎儿体质量的指标之一     

重度子痫前期胎儿脐动脉血流动力学变化与围产儿预后关系探讨

目的探讨重度子痫前期胎儿脐动脉血流动力学变化与围产儿预后关系。方法应用彩色多普勒超声显像技术检测重度子痫前期孕妇100例（观察组）、同期正常孕妇100例（对照组）的胎儿脐动脉（UA）收缩期峰值流速（S）和舒张末期流速（D）的比值（S／D）、搏动指数（PI）、阻力指数（RI）值的变化,同时观察胎儿宫内生长发育情况及追踪围产儿结局。结果观察组胎儿脐动脉血流动力学异常发生率明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．005）。观察组围产儿结局不良发生率明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．005）。在观察组中脐动脉血流动力学异常组围产儿不良结局发生率高于血流动力学正常组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论重度子痫前期因胎儿一胎盘循环障碍,脐动脉血流阻力增加,与围产儿不良预后有关。彩色超声多普勒检测重度子痈前期患者胎儿脐动脉血流动力学变化,对预测胎儿宫内状况及围产儿预后有重要的临床价值。     

血管内皮生长因子及其可溶性Flt-1在子痫前期患者血清中的水平及意义

目的:探讨子痫前期患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)及其可溶性受体1(Flt-1)的水平及意义。方法:采用酶联免疫吸附试验法测定30例子痫前期患者孕晚期及临产前、产后血清VEGF及其sFlt-1水平,并与正常孕妇30例对照比较。结果:两组在孕晚期及临产前的VEGF、sFlt-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。轻度子痫前期与重度子痫前期患者在孕晚期及临产前的VEGF、sFlt-1水平比较,差异也均有统计学意义(P<0.01)。两组在产后的VEGF、sFlt-1水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:子痫前期患者血清中sFlt-1水平于孕晚期及临产前较正常孕妇明显增高,而VEGF水平降低,提示VEGF、sFlt-1可作为诊断子痫前期的指标。     

可溶性白细胞抗原-G在子痫前期患者的表达及意义

目的探讨可溶性人类白细胞抗原-G（SHLA-G）在子痫前期发病中的意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定45例子痫前期患者（轻度20例,重度25例）,正常足月妊娠者49例外周静脉血及靠近胎盘处脐静脉血中SHLA-G水平。结果子痫前期外周血SHLA-G浓度（6.61±2.51）μg/L,正常组外周血SHLA-G浓度（22.03±3.12）μg/L,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;子痫前期脐静脉血SHLA-G浓度（7.23±2.12）μg/L,正常组脐静脉血SHLA-G浓度（25.21±3.70）μg/L,差异有统计学意义（P〈0.05）。子痫前期外周血SHLA-G浓度：重度（5.38±2.38）μg/L,轻度（7.17±2.41）μg/L,差异有统计学意义（P〈0.05）,子痫前期脐静脉血SHLA-G：重度（6.08±1.90）μg/L,轻度（8.09±1.87）μg/L,差异有统计学意义（P〈0.05）;子痫前期血清SHLA-G表达水平与胎儿发育无相关性（r=0.065、0.270,P=0.711、0.116）;子痫前期血清SHLA-G的表达水平与子痫前期发病时间无相关性（r=0.565、0.923,P=0.586、0.380）。结论 SHLA-G水平的下降可能导致子痫前期的发病,且与子痫前期疾病的严重程度相一致,而与疾病发生早晚和胎儿宫内生长情况无相关性。     

妊娠梅毒患者外周血T/B/NK淋巴细胞亚群检测及分析

目的:检测妊娠梅毒患者外周血中淋巴细胞亚群及NK细胞的表达情况,探讨其在妊娠梅毒发病机制中的作用。方法:采用流式细胞仪对12例未经驱梅治疗的妊娠梅毒患者及16例血清固定的妊娠梅毒患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+、NK细胞进行检测,并与12例梅毒非妊娠女性、32例健康孕妇、25例健康非妊娠女性进行比较。结果:与其他4组相比,血清固定组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+细胞比例均显著降低（P＜0.05）,CD8+细胞比例显著升高（P＜0.05）;未治疗组CD4+细胞比例低于健康孕妇组（P＜0.05）,CD8+细胞比例高于梅毒非孕妇组、健康孕妇组和健康非孕妇组（P＜0.05）;未治疗组和血清固定组CD19+细胞比例均高于梅毒非孕妇组、健康孕妇组和健康非孕妇组（P＜0.05）;血清固定组NK细胞比例高于未治疗组（P＜0.05）;梅毒非孕妇组、健康孕妇组和正常非孕妇组各项淋巴细胞亚群水平无统计学差异（P＞0.05）。结论:妊娠梅毒患者存在细胞免疫抑制,体液免疫受到影响;血清固定组出现免疫失衡,NK细胞水平下降,引起机体对梅毒螺旋体的清除能力下降。