浓缩血小板的应用现状与进展

浓缩血小板（PC）的制备方法有富含血小板血浆（PRP）法、白膜层（BC）法和单采PC。我国临床应用的主要是单采PC，手工采集全血制备的PC在临床应用中占的比例很小。而国外尤其是欧美国家BC法制备的血小板添加液（PAS）汇集血小板（PAS汇集BC-PC）在临床应用中占有很大比例，而且还有增长趋势。我们就汇集BC-PC的起源及发展、国内外应用现状、具有的优势及发展前景介绍如下。     

白膜层细胞来源的富血小板血浆的制备及其对间充质干细胞增殖特性的影响

目的:从成分血分离过程中废弃的白膜层细胞中分离富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP),为实验研究和临床应用提供大量获得PRP的途径。方法:比较白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP的制备步骤,电镜观察不同PRP的形态特点,采用血细胞分析仪比较其成分构成,流式细胞术检测PRP中血小板特异标记CD41a和CD42b的表达情况,CCK-8法检测PRP对间充质干细胞增殖的影响。结果:白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP具有相似的形态,接近的成份构成,表达较高水平的CD41a和CD42b;更为重要的是白膜层细胞来源的PRP能够显著促进间充质干细胞增殖。结论:白膜层细胞可以用来制备PRP,其具有和全血来源PRP相似的生物学特性,且收获量更多。本研究探索了一种可以大量获取PRP的可能途径,这为PRP相关的实验研究提供有利的支持。     

去白膜法分离血小板的研究进展

目前,浓缩血小板的手工分离制备方法有:富含血小板血浆法(PRP法)和去白膜法(BC法)2种。我们就去白膜法分离血小板的研究进展做一综述。1富含血小板血浆法分离制备血小板(PRP法)20世纪70—80年代,富含血小板血浆法为血小板分离制备的标准方法。此方法是先将全血经轻离心后分离制     

富含血小板血浆法和白膜回浆法制备浓缩血小板比较

目前，浓缩血小板广泛应用于出血性疾病和肿瘤治疗及心脏外科病人，血小板浓缩液（PC）中的血小板质量对于临床治疗效果十分重要。1996～1997年，笔者采用了富含血小板血浆法（PRP－PC法）和白膜回浆法（BC－PC法）所制备的浓缩血小板分别是780u和850u，现就两种制作方法进行比较。1材料和方法1．1材料：大容量低温冷冻离心机（美国贝克曼J6－HC）、密闭采用连袋（由上海市血液中心生产）。1．2制备方法1．2．1PRP－PC法：（1）采用采集后4～6小时内的全血（内含ACD保养液）。全血采集要求一针见血，血流呈一直线，采4O0ml全血应…     

血小板制备和保存的新动向

由全血制备临床用血小板制剂的经典方法是首先制备富血小板血浆(PRP),再经第二步离心将血小板球聚并重悬于小量血浆中,欧洲则流行用另一种方法制备浓缩血小板(PC):首先沉降全部血细胞,回收上清血浆和“白膜(BC)”,再沉降BC中红细胞和白细胞,收获上清即得PC。后一方法的优点是在较柔和的初始离心条件下即可获得相当数量的血浆,PC成品悬浮于含少量血浆的添加液中,其中混杂的白细胞和红细胞很少。     

白膜法汇集浓缩血小板的研究进展

手工分离制备浓缩血小板有富含血小板血浆法（PRP法）和白膜法（BC法）2种。BC法制备的血小板被欧洲许多国家广泛应用，其优点在于：白细胞含量少、血小板膜表面CD62p的表达率及糖分解率显著降低、pH保持恒定等。目前，白膜法汇集浓缩血小板的辐照、过滤、洗涤、病毒灭活、冰冻保存已成为输血界研究的焦点。血小板膜微粒衍生物的制备研究也已初见成效。     

不同方法制备的浓缩血小板表面CD62分子的表达

目的　了解不同制备方法对浓缩血小板表面CD6 2表达的影响。方法　采用藻红素标记的抗CD6 2单抗 ,经流式细胞仪分析血小板表面CD6 2表达情况。结果　 (6 .5 5± 3.5 2 ) %的机采血小板表达CD6 2 ,(9.2 6± 5 .4 0 ) %的白膜回浆法 (BC法 )血小板表达CD6 2 ,高达 (5 0 .30± 2 0 .4 2 ) %的富血小板血浆法 (PRP)血小板表达CD6 2。结论　相对于PRP法 ,机采法和BC法更适合于浓缩血小板的制备。     

一种用国产设备和血袋制备血小板浓缩液的新方法

<正> 血小板输注在近10年来有了较大的发展,我国通常采用制备浓缩血小板(PC)的方法是先用全血制备富含血小板血浆(PRP),然后用PRP经重离心制备PC,这种PC制成时血小板沉积于袋底即压积血小板浓缩液(PPC),需静置1～2小时后方可混匀使用。曾有报道,PPC与PRP中的血小板比较,显示异常的聚集和分泌反应,提示离心后沉积的血小板可以引起血小板体外功能的降低。为此,近     

洗涤汇集白膜层血小板的临床应用

目的观测汇集白膜层（BC）法制备的洗涤汇集血小板（洗涤汇集BC—PC）的临床输注效果。方法400ml／袋新鲜全血在4～6h内分离出的BC在22℃静置过夜，6袋同血型的BCs混合制备的混合BC—PC再用生理盐水洗涤，制备的洗涤混合BC—PC用血细胞计数仪测定血小板含量和红细胞残留量、用Nageotte白细胞计数板测定白细胞残留量，用比浊法测定最大聚集率，用流式细胞计数仪测定CD41和CD62p阳性表达率，同时检测洗涤产品的pH值和血浆蛋白清除率；通过测定输注洗涤血小板患者的血小板校正计数增加值（CCI）来确定血小板的输注效果，针对有输血性过敏反应史或血小板输注无效患者输注洗涤血小板后是否发生输血性不良反应来确定纠正输血性不良反应的效果。结果患者输注洗涤血小板后1h CCI〉10占87．5％，没有发生输血性不良反应。结论患者输注洗涤汇集血小板能够达到血小板的输注效果和纠正、预防输注血小板引起的输血性过敏反应、血小板输注无效及其他输血性不良反应。     

白膜放置时间对制备手工浓缩血小板质量的影响

目的评价全血当天分离的白膜(BC)在不同时间分离制备的浓缩血小板(PC)的质量,为手工制备PC提供参考。方法将80袋400 mL全血于采集6 h内分离出BC,将5袋同血型BC由无菌接驳机对接合并成1袋(1个治疗量)后,再均分在3个血小板保存袋内,1袋即刻(0 h组)轻离心分离制备PC,另2袋在22℃血小板保存箱分别振摇4 h(4 h组)和16 h(16 h组)后再分离PC。对所有标本留样进行血小板质量检测,包括Plt、血小板回收率、CD62P、聚集率、RBC混入量、WBC混入量、FHb含量。结果 3组PC制剂RBC混入量、Plt、血小板回收率、CD62P、聚集率差异无统计学意义;WBC混入量:0 h(6.76±1.29)和4 h组变化不明显,16 h(3.78±0.45)组降低明显(P<0.05);FHb含量:随BC处理时间延长有增高趋势,16 h(65.62±11.11)与0 h(33.45±6.95)比差异具统计学意义(P<0.05)。结论随BC放置时间延长对制备PC制剂的质量有一定影响。     

用白膜回浆法制备浓缩血小板

<正> 目前制备浓缩血小板大多采用富含血小板血浆法(简称PRP)。这种工艺制备的浓缩血小板中含有较多的红细胞和大量的白细胞,制备后的浓缩血小板要经过再悬浮处理,得率也不稳定。国内有人作过这方面研究,发现全血离心后的白膜中含有90%以上的血小板,于是便以白膜作为浓缩血小板。以上两种方法制备的浓缩血小板在输注前都必须进行交叉配血试验。这不仅使输注过程繁琐,更为不利的是,大量白细胞的混入更易引起病人发生输血反应。国外已有学者用多联袋从白膜中分     

血小板贮存在合成介质保养液期间乙酸盐的作用

白膜法制备的血小板浓缩物(BC—PCs)贮存于一种合成介质保养液(PL)中9～12天后,输给病人仍有效。该文研究PL的两个主要成份——葡萄糖酸盐和乙酸盐在血小板新陈代谢中的作用。制备BC—PC:用四联袋采集400～450ml血液2小时内5000g离心5分钟,压出25～35ml白膜(BC)到附属聚氯乙烯袋内,在血小板翻滚仪上以6转/每分钟过夜(22±2℃),将这样制备的18人份ABO和Rh血型相同的BC混合,分成三等份,每份再1000g离心7分钟,挤出的上层血小板浓缩物(PC),与300ml,PL或缺少乙酸盐的PL(PL—A)、或     

血小板添加液延长血小板保存期的研究

目的探讨血小板浓缩液(PC)加入血小板添加液延时贮存后的质量。方法将新鲜全血(400ml/袋)在4—6h内分离出的白膜层(BC)于22℃静置过夜,取同血型的7袋BCs汇集制备成PC后滤白,用血小板添加液(PAS-ⅢM+血浆)贮存21d,并在存储期内分时间段测定其血小板含量、红细胞和白细胞残留量、最大聚集率、CD41和CD62p阳性表达率、代谢产物和pH值等。结果血小板含量≥2.5×1011/袋,WBC残留量≤3.0×105/袋;贮存至d10,其pH值维持在7.00左右,CD62p阳性表达率45%,ADP和肾上腺素合用诱导的聚集反应率为15%—88%,凝血酶诱导的聚集反应率为89%—99%,HSR恢复率为41%—69%。10d内有可供血小板代谢需要的葡萄糖,乳酸盐浓度随着葡萄糖含量降低而升高,PO2随着PCO2降低而增加。结论加入PAS-ⅢM+血浆的PC贮存10d仍含有可供血小板正常代谢的能量物质,具有较好的聚集功能和抗低渗休克反应的能力。     

白膜回浆法和富血小板血浆法制备浓缩血小板的比较

<正> 输注血小板对白血病、DIC等疾病引起的出血有肯定的治疗作用。血小板浓缩液(PC)中血小板的数量和质量对于临床输注效果十分重要。传统上,由全血制备用于临床输注血小板的方法为富血小板血浆法(PRP-PC法);近年来欧洲以及国内一些单位采用了白膜回浆法(BC-PC法)。本文对这两种方法进行比较。     

浓缩血小板输血:两种制备方法的临床效果评估

本研究的目的是比较去白膜层(BC)制备的浓缩血小板(PC)和通过单采单一供者(SD)制备的PC的临床效果,也研究了在保存期内的变化和一系列临床使用状况。32例血液肿     

不同模式汇集白膜层法制备浓缩血小板的临床应用

目的探讨不同模式汇集白膜层(PBC)法制备浓缩血小板(PC)的临床应用。方法对120例患者使用3种不同模式PBC法制备PC,依据患者输入不同模式制备的PC分为3组:A组(即时PBC组)、B组(白膜法室温过夜组)和C组(全血室温过夜组),对输注3组PC后患者的止血效果和过敏反应进行比较分析。结果在保存期5 d内,A组、B组和C组患者的血小板输注后止血效果的差异无统计学意义(P0.05),3组患者输注不同模式制备的血小板后止血有效率及不良反应率的差异均无统计学意义(P0.05)。结论白膜法室温过夜PBC法和全血室温过夜PBC法均能达到临床止血效果。     

两种白膜制备汇集血小板方法的比较

目的对两种白膜分离方法,以及制备汇集血小板的效果进行对比。方法分别用手工法和全血分离机自动分离法,从全血中收集白膜制备汇集血小板。采用血细胞计数仪对血小板产量和残余RBC计数,用Nageotte法对残余WBC手工计数。结果两种方法制备红细胞悬液中的红细胞量的差异有统计学意义(P<0.001),白膜中白细胞数、血小板数的差异无统计学意义(P>0.05),汇集血小板数的差异有统计学意义(P<0.001)。结论手工法损失红细胞较多,两种方法分离白膜的效果无差异,但制备汇集血小板的效果以自动法高于手工法。     

全血或白膜混合过滤制备的血小板浓缩物的体外功能

背景和方法由白膜制备保存5天后的血小板浓缩物(PC) 质量的数据不多,作者用去除白细胞的全血(Terumo WBSP,n =10)或白膜(Pall Autostop,n=10)制备的PCs在血浆中保存 7天,测定血小板参数和血小板激活标志物来评估PCs质量。结果两种类型的PC在保存过程中葡萄糖水平降低,但不是完全消失(>11 mmol／L,保存的第7天)。在保存中乳酸水平增加,一直<20 mmol／L,所有单位在第7天时pH维持>6．8,低渗休克反应计分>47％。第1天血小板激活标志高于WBSP PC,但到     

过滤对血小板浓缩物贮存的影响

作者采用混合的白膜层(BC)制备血小板浓缩液(PC):用含有CPD抗凝剂和氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇添加剂的三联袋采集全血450～500ml,于2小时内冷至20℃。血袋于室温放置约20小时,经2960g离心5分钟,分出50±5ml白膜层。将4单位ABO血M型相同的BC于300ml带6个接头的PVC袋中混合,再加入这4名献血者之一的血浆200ml,充分混匀,并再连接一个300mlPVC空袋。混合物于22℃、400g离心7分钟,将富血小板血浆慢慢转移到300ml空袋中,当红细胞距袋子的出口约0.5～1cm时,中止转移。 为了减少差异,将上述3份PC混匀后再分成重量、体积等同的3份PC作为一组试验,其中1份     

普通血袋常温保存分离后富含血小板血浆24 h再制备浓缩血小板的质量观察

目的探讨普通血袋常温分离富含血小板血浆(PRP)后保存24 h再制备的浓缩血小板(PC)质量。方法将采集的400 mL全血50袋,保存在20-24℃的恒温保存箱内,采集后4 h经1次轻离心分离出PRP,容量(200±10)mL/份,再每份均分成2袋存放于普通血袋中,分别标识为实验组:将PRP放置20-24℃的恒温保存箱内过夜,次日2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,24 h完成制备;对照组:将PRP立即2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,6 h完成制备。采集后24和48 h,分别检测2组PC中血小板、红细胞含量和pH值。结果 2组PC中红细胞混入量和pH值差异甚小(P0.05),实验组与对照组血小板含量(×1010/袋)分别为1.36±0.33和2.63±0.46(P0.05);对照组3项指标均合格,实验组只有红细胞混入量与pH值合格。结论分离PRP后,在普通血袋常温保存24 h再制备浓缩血小板,质量达不到《全血与成分血质量要求》。