230例甲胎蛋白阳性原发性肝癌病人血清HBV抗原抗体模式分析

原发性肝癌 (ＰＨＣ)与乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)感染的相关性已较明确 ,为探讨肝癌病人ＨＢＶ感染状态 ,我们对 2 30例甲胎蛋白 (ＡＦＰ)阳性确诊为ＰＨＣ病人的ＨＢＶ血清标志物进行了检测与分析。1　材料和方法2 30例ＰＨＣ患者中 ,男 2 0 0例 ,女 30例 ,年龄 2 8～ 77岁 ,平均 5 2 .84岁 ,为解放军 30 2医院 1995年至 1998收治的病例 ,根据肝癌诊断标准 ,经临床、Ｂ超及ＣＴ证实且ＡＦＰ阳性的ＰＨＣ病人。ＡＦＰ的检测采用放射免疫测定法 ,以ＡＦＰ >40 0ｎｇ/ｍｌ判定为阳性 ;ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｂ的检测用双抗体夹心法。Ｈ…     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV前C区的序列分析

为了解ＨＢｅＡｇ阴性慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ前Ｃ区突变株流行情况 ,本研究对 31例ＨＢｅＡｇ阴性慢性乙型肝炎住院患者血清ＨＢＶ前Ｃ区序列进行了分析 ,血清标本采自广西南宁市各大医院 ,按 2 0 0 0年全国第 10次病毒性肝炎和肝病学术会议修订的“病毒性肝炎防治方案”诊断。其中男性2 5例 ,女性 6例 ,年龄为 18～ 36岁。ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ检测应由美国Ａｂｂｏｔｔ公司酶联免疫试剂盒 ;按常规法提取血清中ＨＢＶＤＮＡ ,并用美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司ＤＮＡ试剂纯化 ;应用套式ＰＣＲ扩增ＨＢＶ…     

无症状、无体征乙肝病毒携带者CG测定的临床意义

为了探讨甘胆酸在无症状、无体征乙型肝炎病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)阳性血清中的水平及临床意义 ,我们随机检测了14 2例乙肝五项查体者的血清甘胆酸 (ＣＧ) ,现将结果报告如下。资料和方法一、资料一 )正常对照组 :4 2人 (其中五项全阴者 30人 ,仅抗 -ＨＢｓ阳性者 12人 ) ,年龄 18～ 5 6岁 ,肝肾功能 (ＴＢ、ＤＢ、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＢＵＮ、Ｃｒ等 )检查正常。(二 )无症状、无体征乙肝病毒携带者 10 0人 ,其中大三阳 (ＨＢｓＡｇ +ＨＢｅＡｇ +抗 -ＨＢｃ +) 6 0人 ,小三阳 (ＨＢｓＡｇ +抗 -ＨＢｅ +抗 -ＨＢｃ +) 4 0人 ,年龄 12～ 5 0…     

泉州地区肝炎患者TT病毒感染状况调查

ＴＴ病毒(ＴＴＶ)是新近发现的一种被认为可能与肝炎有关的新型病毒。为了解闽南地区ＴＴＶ感染情况,我们采用ＰＣＲ技术对泉州地区43例肝炎患者血清ＴＴＶＤＮＡ进行检测。43例为1998年1～4月住院的肝炎患者,男34例,女9例,年龄22～70岁。临床类型:急性肝炎11例,慢性肝炎21例,重型肝炎4例;肝炎肝硬化5例,洒精性肝炎2例。收集血清标本47份,采用ＥＬＩＳＡ法检测抗ＨＡＶＩｇＭ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃＨＢｃＩｇＭ(以上为上海荣盛公司试剂)、抗ＨＣＶ(华美公司)、ＨＤＡｇ、抗ＨＤＶＩｇＭ(河南瑞安公司)、抗…     

1212例献血员乙肝六项指标和抗－HCVRIA

１２１２例献血员乙肝六项指标和抗－ＨＣＶＲＩＡ王绪玲，蒋光霞，康诵均，盛春永，刘合营为了确保供血质量，我们在筛选献血员时，对献血员血清ＨＢＶ六项指标（ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、ＨＢｃＡｇ和抗ＨＢｃ）和抗ＨＣＶ同时作了检测，现将结果...     

乙肝病毒前C基因/C启动子变异与不同症状乙型肝炎患者的相关性

乙型肝炎的病情与宿主及病毒均有关。乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)Ｃ区编码ＨＢｃＡｇ及ＨＢｅＡｇ ,其调控序列位于前Ｃ区及Ｃ基因启动子 (ＣＰ) ,ＨＢＶ前Ｃ/ＣＰ区变异可以通过阻止或减少ＨＢｅＡｇ合成和分泌来影响宿主的免疫应答。我们采用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)直接测序法 ,测定 4 5例慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者血清ＨＢＶ前Ｃ/ＣＰ区核苷酸序列 ,以探明ＨＢＶ前Ｃ/ＣＰ基因区变异的临床意义。材料和方法病例选择 :共 4 5例 ,其中慢性乙型肝炎 (Ａ组 ) 2 0例 ,男 12例 ,女 8例 ,年龄 2 1～ 5 7岁 ,其中ＨＢｅＡｇ阳性 6例 ,抗 Ｈ…     

乙丙型肝炎病毒重叠感染时病毒的相互作用

目的　探讨乙、丙型肝炎病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ） 重叠感染时,病毒之间的相互作用。方法　检测３０ 例ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染患者血清病毒标志物的变化、ＨＢＶ前Ｃ区１ ８９６ 位点突变的发生比率及血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α、白细胞介素（ＩＬ）６ 含量。结果　与单纯ＨＢＶ或ＨＣＶ 感染者相比,重叠感染患者乙肝表面抗原（ＨＢｅＡｇ） 、ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ 阳性比率明显降低,乙肝ｅ 抗体（ 抗ＨＢｅ） 阳性比率明显升高,ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ ＩｇＧ 及抗ＨＣＶ 几何平均滴度也明显降低,部分患者ＨＢｓＡｇ 阴转。而ＨＢＶ前Ｃ区１ ８９６ 位点突变发生率及血清ＴＮＦα、ＩＬ６ 含量却明显高于单纯感染者。结论　ＨＢＶ、ＨＣＶ感染同一宿主时,存在相互干扰、抑制;ＨＢｅＡｇ 的消失、抗ＨＢｅ 的阳转既与ＨＣＶ对ＨＢＶ 复制的直接抑制有关,又与ＨＢＶ的前Ｃ区变异有关,且ＨＣＶ 的重叠感染可能是导致ＨＢＶ 前Ｃ区变异的原因之一,其作用机制可能与导致机体免疫压力升高有关     

用热启动聚合酶链反应检测血清中乙型肝炎病毒DNA技术的建立和应用

建立了热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的技术。ＰＣＲ所有反应成分被２次加样。先加Ａ液（含ｄＮＴＰｓ、一对引物和ＭｇＣｌ＿２）与一粒石蜡珠。７０℃加热后冷却至室温，使蜡珠先融化后凝固形成蜡盖封住Ａ液，然后在向其上加入Ｂ液（含耐热性ＤＮＡ聚合酶、ＨＢＶＤＮＡ模板和ＫＣｌ）并开始循环扩增。当反应管内第一次变性温度升至６０℃以上时，中隔蜡层融化，蜡上浮形成防蒸发屏障，Ａ、Ｂ两液则由于热分子运动而混匀，从而保证引物与靶基因在较高温度下严格退火以减少错导非特异性扩增和引物聚体形成。提高了ＰＣＲ的特异性和灵敏性，应用这种技术对７６例肝炎血清进行了检测，结果ＨＢＶＤＮＡ检出率为６８％，其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为１００％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢｅ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为７０％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢＣ（＋）血清检出率为８９％；抗ＨＢＣ（＋）血清检出率为对％；标记全阴性血清检出率为３３％。     

慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测

为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。     

乙二胺修饰法标记生物素化HBVDNA探针及其应用

采取将核酸用乙二胺作化学修饰后标记生物素的方法制备了生物素化ＨＢＶＤＮＡ探针．该探针的检测敏感性达到０．２５ｐｇ。用它作斑点杂交检测血清ＨＢＶＤＮＡ，结果４１份ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阳性的血清有３６份显示斑点阳性；在９份ＨＢｓＡｇ阳性而ＨＢｅＡｇ阴性的血清中，有２份显示斑点阳性；而在５份ＨＢｓＡｇ阴性的正常人血清中未检出ＨＢＶＤＮＡ。     

乙型肝炎病毒前C/C基因准种与变异特点的研究

近年来的研究提出ＨＢＶ感染者体内存在有准种的假说 ,我们以前Ｃ/Ｃ基因为研究靶区域 ,应用多聚酶链反应(ＰＣＲ)技术扩增慢性乙型肝炎患者血清中的靶序列 ,随机选择克隆测序 ,比较其结果 ,证明了ＨＢＶ准种的存在 ,并发现多种基因突变形式。试验用 4例患者诊断为病毒性肝炎 ,乙型、慢性 ,临床检测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｃ阳性。提取 2 0 0 μｌ血清中的ＨＢＶＤＮＡ ,用于多聚酶链反应 (ＰＣＲ)。以甘人宝等发表的ＨＢＶａｄｒ亚型序列为依据 ,设计引物序列。其上游引物为 :5′ＡＣＴＧＣＡＧＧＣＡＣＣＡＴＧＣＡＡＣＴＴＴＴ…     

HBV DNA含量与HBV标志物表现形式的初步研究

1　资料与方法ＨＢＶ感染者 6 6例 ,诊断按 1995年北京会议标准 ,其ＨＢＶＭ表现形式为 :ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ均阳性 (大三阳 )4 2例 ,ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ阳性 (小三阳 ) 14例 ,仅抗ＨＢｃ阳性 10例。抗病毒治疗方法 :无环鸟苷 (湖北潜江制药厂 )每日 2 0 /ｋｇ体重、分两次静滴、15ｄ后给予干扰素 (深圳科兴公司 ) 30 0万Ｕ/支、隔日 1支 ,共 5 0支。ＨＢＶＭ检测采用ＥＩＡ法 ,斑点杂交试剂为北京医科大学肝病研究所产品 ,操作按说明书进行。ＨＢＶＤＮＡ定量测定采用信号引物能量转移ＰＣＲ法 (ＱＰＣＲ) ,统计…     

不同慢性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA定量检测及其临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒ＤＮＡ含量的临床意义。了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫标志不同状态的慢性肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ浓度及其临床意义。方法应用建立的竞争性聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法定量检测慢性肝炎（ＣＨ）５１例、肝硬化（ＬＣ）３６例、原发性肝癌（ＰＨＣ）３８例的血清ＨＢＶＤＮＡ浓度。结果ＨＢＶＤＮＡ阳性的ＣＨ患者血清ＨＢＶＤＮＡ浓度为４．３６ｌｏｇ１０ＨＢＶＤＮＡ拷贝５０μｌ（下同），ＬＣ为４．５５，ＰＨＣ为４．４３，三组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；血清ＨＢＶ五项免疫标志均阴性或抗－ＨＢｓ阳性的慢性肝病患者中，有３７．５％患者存在低水平ＨＢＶ复制；ＨＢｅＡｇ阳性患者的ＨＢＶＤＮＡ浓度总体上明显高于抗－ＨＢｅ阳性组，但其中部分患者的ＨＢＶＤＮＡ浓度也很高。结论提示ＨＢＶ的复制状态与慢性肝病的病期无明显关系；在抗－ＨＢｅ阳性的患者中存在个体差异，故不能仅依据抗－ＨＢｅ阳转来判断ＨＢＶ复制减少或停止。     

乙型肝炎血清诱导人外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

本实验选取我院10例健康献血员(男6例,女4例,年龄20～45岁,平均年龄3340±696岁,甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒标志皆阴性,肝功正常)。ＨＢＶ阳性血清来自本科一慢性乙型肝炎患者,该患者血清病毒标志检测为ＨＢｓＡｇ( )、ＨＢｅＡｇ( )、抗ＨＢｃ( )、抗ＨＢｃＩｇＭ( ),经ＨＢＶ定量ＰＣＲ检测,含ＨＢＶ498×104拷贝/ｍｌ,无菌采集血清后80℃冰箱冻存,用前经56℃30ｍｉｎ灭活补体。抽取健康献血员静脉血8ｍｌ(肝素抗凝),用淋巴细胞分离液按常规分离外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ),将ＰＢＭＣ调成1×106/ｍｌ浓度,每孔接种1ｍｌ于12孔培养板上…     

HBsAg低值弱阳性的检测及其临床意义

在ＨＢｓＡｇ的ＥＬＩＳＡ法检测中 ,因试剂盒间的敏感度差异 ,常出现ＨＢｓＡｇ含量在 0 5～ 2 0ｎｇ/ｍｌ的低值弱阳性而被判为阴性的现象。为此 ,我们选用上海科华生物技术公司的ＥＬＩＳＡ法试剂盒将近 3年随访的 5 0例ＨＢｓＡｇ低值弱阳性乙肝患者的标本作如下分析。采用ＲＩＡ法测定ＨＢｓＡｇ为弱阳性标本 5 0例 ,ＨＢｓＡｇ含量为 1 5 81± 0 32 5 ( ｘ±ｓ ,下同 )。用ＰＣＲ定性检测ＨＢＶ ,仅有 3例患者为阳性 ,这 3例均为肝癌患者 ,抗 ＨＢｅ,抗ＨＢｃ ,ＨＢｃＡｇ亦为阳性。循环免疫复合物 (ＣＩＣ)的检测 ,阳性率为35 0…     

乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）血清学标志（ＨＢＶ Ｍ）与ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果的相关性与临床意义。方法 对４１４例乙型肝炎的ＨＢＶ Ｍ和ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果进行比较。ＨＢＶ Ｍ用ＥＬＩＳＡ定量分析法检测,ＨＢＶ ＤＮＡ用斑点杂交法检测。结果 急性、慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性率与乙型肝炎肝硬化患者的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异有显著性;ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异无显著性;ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｅＡｇ的滴度与ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率呈正相关关系。结论 ＨＢＶ ＤＮＡ是评价ＨＢＶ活动最理想的标志;抗－ＨＢｅ的出现不能作为ＨＢＶ复制停止的指标;ＨＢｓＡｇ的滴度和ＨＢｅＡｇ的滴度变化可作为临床评价病毒复制程度和     

HBcAg/HBeAg对慢性乙型肝炎患者PBMC中Th1/Th2类细胞应答的影响

目的 探讨ＨＢｃＡｇ／ＨＢｅＡｇ对慢性乙型肝炎患者ＰＢＭＣ中Ｔｈ１／Ｔｈ２类细胞应答的影响。方法 用套式ＰＣＲ法检测６４便慢性ＨＢＶ感染者ＰＢＭＣ中ＨＶＢ ＤＮＡ;分别用ＰＨＡ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢｅＡｇ体外培养;ＥＬＩＳＡ法检测ＰＢＭＣ产生Ｔｈ１类细胞因子（ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ）和Ｔｈ２类细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－１０）的含量。结果 表明ＨＢＶ ＤＮＡ阳性组和阴性组相比,无论是在ＰＨＡ还是在ＨＢｃＡ     

广西不同人群庚型肝炎病毒感染状况的调查

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染在广西柳州地区不同人群中的感染状况，并比较静脉毒瘾者与健康体检者ＨＧＶ，乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＧＶ共同感染的特点，方法 应用酶联免疫法（ＥＬＡ）检测抗－ＨＧＶ，抗－ＨＣＶ，ＨＢＶＭ（ＨＢｓＡｇ，ＨＢｓＡｂ，ＨＢｅＡｇ，ＨＢｅＡｂ，ＨＢｃＡｂ），并对抗－ＨＧＶ阳性者随机抽取２０例（１９％）进一步用逆转录套式ＰＣＲ（ＰＴ－ｎＰＣＲ）法检测     

乙型肝炎患者表面抗原与抗体检测和分析

我们采用Ａｂｂｏｔｔ公司的ＩＭｘ自动免疫分析仪及其微粒子酶免分析法进行ＨＢ ｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ和抗 ＨＢｃ的检测 ;采用美国Ｂｉａｔｒｏｎｉｃｓ公司建立的Ａｍ ｐｌｉｓｅｎｓｏｒ法进行ＰＣＲ定量检测 ;采用ＰＣＲ产物直接测序。统计学方法 ,率采用ｘ2 检验 ;均数采用ｔ检验 ;相关性采用直线回归分析。共调查 317例 ,男 2 5 4例 ,女 6 3例 ,年龄 2～77岁 ,平均 (32 9± 14 7)岁 ,共检出ＨＢｓＡｇ与抗 ＨＢｓ同时阳性者 2 9例 ,总检出率 9 15 % ,其中无症状感染者 4 6 9% (3/6 4)、急性肝炎 0 (0 / 16 )、…     

血清CG、HA RIA在慢性HBsAg携带者中的应用价值

应用ＲＩＡ的方法对 40 2例慢性ＨＢｓＡｇ携带者进行了血清甘胆酸 (ＣＧ)、透明质酸 (ＨＡ)检测 ,旨在探讨慢性ＨＢｓＡｇ携带者肝脏功能的变化及其临床意义。资料和方法一、对象 :(一 )实验组 :按 1995年 5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议讨论修订的《病毒性肝炎防治方案 (试行 )》标准选择的慢性ＨＢｓＡｇ携带者 40 2例 (男 2 74,女 12 8) ,年龄 11～78岁 ,平均 39.5岁。检测ＣＧ、ＨＡ的同时均做了ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ·ＩｇＭ复合物ＲＩＡ。(二 )正常对照组 :10 3例 (男 83 ,女 2 0 ) ,年龄 19～ 5 2岁 ,平均 32 3岁。均系…