神经生长因子对坐骨神经挤压伤后的促再生作用

目的:观察肌注神经生长因子(NGF)对大鼠坐骨神经挤压伤后的促再生作用。方法:40只大鼠随机分成NGF高、中、低剂量组,正常对照和模型对照组。距坐骨切迹远端6mm处钳夹坐骨神经,使产生-4mm宽的挤压伤。NGF高、中、低剂量组分别给予8,4和2μg·kg~(-1)(1.6×10~3,8×10~2和4×10~2IU·kg~(-1)NGF,im,qd,连续56d。手术后不同时间,检测运动神经传导速度(MNCV)、坐骨神经功能指数(SFI)以及进行组织形态学评价。结果:与模型对照组相比,高剂量组在d35和d56,中剂量组在d35的MNCV均显著加快;高、中、低3个剂量组在术后d14后的SFI与模型组相比,均有统计学意义,且高剂量组恢复较明显,至d56各剂量组SFI均无明显差异;组织形态学显示,NGF治疗组神经髓鞘、轴索与正常对照组相比,未见明显差异;而模型组髓鞘出现脱失,细微结构不清晰,许旺氏细胞变性坏死。结论:肌注神经生长因子能明显促进大鼠坐骨神经纤维的再生,促进其神经功能的恢复。     

ELISA法对神经生长因子在大鼠体内药代动力学的研究

目的研究神经生长因子（ＮＧＦ）在大鼠体内的药代动力学。方法制备兔抗ＮＧＦ抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）法测定大鼠血浆ＮＧＦ浓度。结果大鼠ｉｖ３２μｇ·ｋｇ－１后血药浓度时间曲线符合二室开放模型,Ｔ１／２α为０３３０ｈ,Ｔ１／２β为１５ｈ。大鼠ＮＧＦｉｍ３２μｇ·ｋｇ－１后血药浓度时间曲线符合一室一级吸收,血浆ＮＧＦ浓度达峰时间为３７１ｈ,Ｔ１／２（Ｋｅ）为４３０ｈ,２４ｈ吸收百分率为６９１％。结论ＮＧＦ肌注吸收良好,血浆ＮＧＦ浓度可在较长时间内维持在有效浓度以上。     

ELISA法对神经生长因子在大鼠体内药代动力学的研究

目的研究神经生长因子（ＮＧＦ）在大鼠体内的药代动力学。方法制备兔抗ＮＧＦ抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）法测定大鼠血浆ＮＧＦ浓度。结果大鼠ｉｖ３２μｇ·ｋｇ－１后血药浓度 时间曲线符合二室开放模型,Ｔ１／２α为０３３０ｈ,Ｔ１／２β为１５ｈ。大鼠ＮＧＦｉｍ３２μｇ·ｋｇ－１后血药浓度 时间曲线符合一室一级吸收,血浆ＮＧＦ浓度达峰时间为３７１ｈ,Ｔ１／２（Ｋｅ）为４３０ｈ,２４ｈ吸收百分率为６９１％。结论ＮＧＦ肌注吸收良好,血浆ＮＧＦ浓度可在较长时间内维持在有效浓度以上。     

神经生长因子在异丙酚对大鼠海马神经元缺氧/复氧损伤中的作用及机制

目的探讨不同浓度的异丙酚预处理对大鼠海马神经元缺氧/复氧损伤的保护及神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)的作用。方法取离体培养的大鼠海马神经元,随机分成7组:对照组(Con组);CoC l2组(CoC l2组):加入300μM CoC l2处理1 h,然后更换正常的培养基培养24 h,之后更换无血清的培养基培养;脂肪乳剂组(Intralipid,Intra组):加入10%脂肪乳剂90μL预处理1 h后加入300μM CoC l2;异丙酚组(prop组)培养孔中加入10、20、50、100μM浓度的异丙酚预处理1 h后,同CoC l2组。MTT法测定细胞增殖,流式细胞技术测定细胞的凋亡。为进一步研究不同浓度的异丙酚对NGF及其受体TrkA表达的影响,本研究将大鼠海马神经元分为6组,分别为对照组,CoC l2组,10、20、50、100μM浓度异丙酚组,用RT-PCR检测NGF mRNA和TrkA mRNA表达。为探讨NGF/TrkA的作用,将细胞随机分为4组:对照组,CoC l2组,50μM异丙酚组,1.0μmol/L K252a组。结果脂肪乳剂组与CoC l2组比较,细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),50μM异丙酚预处理可以明显增加大鼠海马神经元的增殖能力,减少凋亡(P<0.01),50μM异丙酚预处理上调NGF mRNA和TrkA mRNA的表达(P<0.05或P<0.01),10、20、100μM异丙酚组与缺氧/复氧组相比差异无统计学意义(P>0.05),异丙酚对海马神经元的保护作用被K252a抑制(P<0.01)。结论 50μM异丙酚预处理对缺氧/复氧后的大鼠海马神经元有保护作用,NGF及其受体TrkA在异丙酚的预处理中起到重要的作用。     

血清中VEGF、TSGF在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:分析血管内皮细胞生长因子(VEGF),恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)在乳腺癌患者中的表达及它们与乳腺癌临床特征关系.方法:采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对50例乳腺癌和20例乳腺良性肿瘤患者血清中VEGF、TSGF的表达进行检测.结果:VEGF与病理类型、临床分期无关,但与腋窝淋巴结转移相关(P＜0.05),在乳腺癌患者中高表达率为84.0%(42/50),在乳腺良性肿瘤中高表达率为30.0%(6/20).TSGF与病理类型无关,但与临床分期相关,晚期乳腺癌患者明显高于早期患者,与淋巴结转移相关(P＜0.05),在乳腺癌中高表达率为80.0%(40/50),乳腺良性肿瘤中表达率为25.0%(5/20).两种因子联合检测其检出率更高,具有显著性差异(P＜0.01).结论:VEGF 、TSGF在诊断乳腺癌疾病及在乳腺良恶性鉴别中具有临床意义,恶性肿瘤中其两种因子明显高于良性肿瘤患者且特异性优于其他因子.     

神经生长因子颅内注射治疗颅内血肿微创清除术后高血压性脑出血的疗效评价

目的对神经生长因子颅内注射治疗颅内血肿微创清除术后高血压性脑出血的疗效进行评价。方法将90例颅内血肿微创清除术后的高血压性脑出血患者随机分为3组,每组30例对照组,微创清除术后每日给予生理盐水2ml颅内注射,4d后改为每日注射用水2ml肌注;治疗1组,微创清除术后每日给予生理盐水2ml颅内注射,4d后改为每日神经生长因子2ml肌肉注射;治疗2组,微创清除术后每日给予神经生长因子2ml颅内注射,4d后改为每日神经生长因子2ml肌肉注射,3组疗程均为14d。采用卒中临床神经功能缺损评分、日常生活活动(ADL)量表评分及死亡率等方法对治疗1月后进行疗效评定。结果3组病例死亡率分别为对照组(13.3%)、治疗1组(10.0%)、治疗2组(10.0%)(P>0.05);治疗1组和治疗2组的显效率和总有效率分别为(40%,66.67%)和(70%,80%),比对照组(20%、36.67%)高(P<0.05);治疗1组和治疗2组ADL量表评分比对照组好(P<0.05)。结论神经生长因子能提高颅内血肿微创清除术后高血压性脑出血的临床疗效,降低致残率,明显提高病人的生活质量,颅内注射效果更好。     

神经生长因子(NGF)对骨折愈合影响的初步临床观察

目的探讨神经生长因子(NGF)局部注射促进骨折愈合的临床作用。方法对48例四肢新鲜骨折病人进行骨折端经皮局部注射NGF促进骨折愈合的临床治疗观察,其中股骨骨折11例、肱骨骨折7例、胫腓骨骨折16例、尺桡骨骨折14例。据骨折类型、治疗方法相同或相似的原则设立相应的对照组,对骨痂生长情况、骨折临床愈合的时间进行对比研究分析。结果2组病例均获随访,时间为3~9个月,2组骨痂出现的时间、骨痂量的多少2周内无明显不同,3周后骨痂量治疗组多于对照组,治疗组各类型骨折临床愈合时间均较对照组有不同程度的缩短,疗效优于对照组,经统计学处理(P<0.01),2组对比有极显著差异。结论临床应用神经生长因子(NGF)经皮局部注射在骨折中后期有促进骨折愈合修复的作用。     

Synthesis of the trypsin fragment 10–25/75–88 of mouse nerve growth factor*

Cyanogen bromide cleavage followed by trypsin digestion of mouse nerve growth factor (NGF) allowed the isolation of a double chain unsymmetrical cystine peptide of high neurotrophic activity. The presence of tryptophan residues severely limits the synthetic approaches for selective disulfide bridging. The strategy applied for such a purpose as well as the preparation of the suitably protected tetradecapeptide corresponding to sequence 75–88 as key intermediate for the synthesis of the NGF fragment 10–25/75–88 are described.     

Antiangiogenic agents targeting vascular endothelial growth factor and its receptors in clinical development

There is ample therapeutic opportunity for the use of antiangiogenic inhibitors in the clinic, as there are several human diseases that are dependent upon angiogenesis [1]. However, no disease has attracted as much attention as a target for antiangiogenic therapy as malignant disorders. There is a vast amount of literature acting as proof-of-principle for the use of angiogenic inhibitors as effective agents for blocking tumour-induced angiogenesis and subverting tumour growth and disease dissemination. One of the unique attractions of targeting tumour angiogenesis is that vascular endothelial cells are a genetically stable population in which acquisition of therapeutic resistance might be less efficient than in genetically unstable tumour cells [2,3]. This review covers inhibitors that target the tumour angiogenic agent vascular endothelial growth factor and its receptors as one such antiangiogenic approach. Many agents in this class are in clinical trials with limited reports of toxicity and some early evidence of clinical benefit.     

人神经生长因子治疗糖尿病性多发性神经病的疗效和安全性

目的:考察人神经生长因子(hNGF)对糖尿病性多发性神经病(DPN)的疗效和安全性.方法:采用随机双盲对照研究,60例DPN患者分hNGF治疗组30例,给予hNGF 4mL·d-1(1 000U)肌内注射,对照组30例给予安慰剂4mL肌内注射,2组疗程均为12周.主要观察指标为神经体征(密西根糖尿病神经评分,MDNS),辅助观察指标为神经症状(自觉感觉异常)和神经传导速度(NCV).结果:治疗84d后2组中度和重度患者的MDNS评分显效率比较差异均有显著性(P<0.05),治疗后84d和168d,治疗组NCV异常率均显著低于对照组(44.00% vs 72.67%,P<0.01;39.23% vs 62.86%,P<0.01).治疗组疗效确切,未发现严重不良反应.结论:hNGF治疗DPN安全有效,其疗效和NCV的改善与hNGF治疗开始时间、疗程长短、DPN病变的程度密切相关.     

无肋马尾藻多肽的制备及其促进大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)分化特性的研究

目的 从无肋马尾藻中提取分离一种生物活性多肽(SFPP),分析其理化特性及对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞分化的促进作用.方法 采用葡聚糖凝胶层析分离和透析脱盐纯化无肋马尾藻的水浸提物,应用Tricine-SDS-PAGE电泳和差示扫描量热法(DSC)分析SFPP的分子量和热变性温度,检测其对PC12细胞分化的促进作...     

神经生长因子结合骨基质明胶修复兔颅骨缺损的实验研究

目的运用引导性骨再生技术,将结合神经生长因子的骨基质明胶与海藻酸钙膜联合使用,促进兔颅骨缺损的修复。方法将神经生长因子（NGF）与骨基质明胶（BMG）制成神经生长因子-骨基质明胶复合体（NGF-BMG）。48只新西兰兔的颅骨上制成双侧顶骨缺损,直径10mm,骨缺损区内外均覆盖海藻酸钙膜。随机分成A（NGF-BMG）组、B（BMG）组、C（NGF）组和D（空白）组4组。术后第4、8、12周作形态学观察、X线片图像分析、组织学观察及图像分析、生物力学检测及统计分析。结果术后4、8、12周,A组在新骨生成、X线片新生骨的灰度值、组织切片新生骨所占比例和三点抗弯强度方面,均优于B、C、D组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 （1）NGF-BMG复合体具有良好的生物相容性,既能持续释放NGF,又具有良好的修复骨缺损的能力;（2）NGF具有促进骨再生的作用,但单独使用无法在骨折部位达到有效浓度。     

APP17肽对心肺复苏大鼠海马神经元NGF、BDNF表达的影响

目的观察心肺复苏术后大鼠海马神经元神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的变化,以及APP17肽对NGF、BDNF表达的影响。方法采用窒息法制作大鼠呼吸心跳骤停模型,然后行心肺复苏术(cardiopulmonary re-suscitation,CPR)。♂性Wistar大鼠18只,随机分3组:手术对照组(A组)、心肺复苏组(B组)、心肺复苏+APP17肽组(C组),复苏至自主循环恢复(return of spontaneous circula-tion,ROSC)时静脉注射APP17肽10μg·(300g)-1。应用免疫组化方法观察各组大鼠复苏2h后海马神经元表达NGF、BDNF情况。结果与对照组(A组)相比心肺复苏组(B组)大鼠海马神经元NGF、BDNF表达明显降低(P<0.05);心肺复苏+APP17肽组(C组)NGF、BDNF表达明显增加,高于B组和A组(P<0.01)。结论心肺复苏模型大鼠自主循环恢复2h海马神经元NGF、BDNF表达降低,APP17肽能恢复神经元NGF、BDNF的表达,对缺血、缺氧性神经元损伤有保护作用。     

Cholinergic but not monoaminergic denervation increases nerve growth factor content in the adult rat hippocampus and cerebral cortex

Summary We have investigated whether degeneration of basal forebrain cholinergic neurons is a potential trigger for increased NGF production in the adult rat brain. Electrolytic lesions of cholinergic neurons in the septum-diagonal band and in the nucleus basalis of Meynert induced a transient increase in NGF in the ventral hippocampus (+70%) and cerebral cortex (+125%), respectively. In contrast, selective aminergic denervation of the forebrain by electrolytic lesion of the medial forebrain bundle, did not increase NGF levels in hippocampus and cerebral cortex. Thus, a cholinergic mechanism appears to regulate NGF production in adult rat basal forebrain.     

Inhibitors targeting hepatocyte growth factor receptor and vascular endothelial growth factor receptor tyrosine kinases

Amgen disclosed a series of 4-heteroaryloxy quinoline/quinazoline compounds as multiple kinase inhibitors, including hepatocyte growth factor (HGF) receptor tyrosine kinase c-Met and vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor tyrosine kinase. These compounds are stated to have wide therapeutic applications for the treatment of a variety of cancers, hypertension, arteriosclerosis, myocardial infarction and rheumatoid arthritis.     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠脊髓损伤后的表达及意义

目的:探讨脊髓损伤后的自我保护修复机制.方法:采用改良的Allen’s法建立SD大鼠T11节段脊髓损伤模型,观察术后不同时间段脊髓内碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白表达分布及变化情况.结果:脊髓损伤各时间段bFGF阳性神经元数较正常组显著增加.7 d达高峰,21 d恢复正常.结论:脊髓损伤后bFGF表达,提示其参与了脊髓损伤后神经元的保护作用.     

神经生长因子抗体对哮喘模型大鼠肺中趋化素样因子1表达的影响

目的观察神经生长因子(NGF)抗体对OVA诱导的哮喘模型大鼠肺中趋化因子CKLF1的表达变化。方法采用OVA诱导的大鼠哮喘模型,通过腹腔给予NGF(8 ng.kg-1)及NGF抗体(0.1 mg.L-1),采用Western blot、ELISA和免疫组化观察CKLF1在支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中的表达变化。结果 CKLF1在OVA诱导的哮喘模型大鼠肺组织中的蛋白表达升高(P<0.05);NGF抗体能够降低CKLF1的表达;CKLF1在哮喘大鼠BALF中的含量升高(P<0.05),NGF抗体能够降低BALF中CKLF1的含量(P<0.05);NGF对肺组织及BALF中CKLF1的表达没有明显的影响。结论 NGF抗体能够抑制哮喘模型大鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液中CKLF1的表达和释放,改善哮喘症状。     

造血细胞表达血管内皮生长因子及其受体基因的研究

目的 探控血管内皮生长因子（VEGF）及其受体Flt-1和KDR基因在造血细胞中的表达。方法 提取正常外周血、骨髓单个核细胞及血液肿瘤细胞系的总RNA,以β2-微球蛋白基因为内标,用单定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析VEGF,Flt-1和KDR基因的表达。结果 在22份正常外周血和22份非恶性骨髓标本中,分别有18份和19份表达,VEGF基因,而10种人类血液肿瘤细胞系均有VEGF基因的高度表达。在12份外周血中,有4份检测到Flt-1基因表达,但均未见有KDR基因表达;在22份骨髓中,分别有9份和14份表达Flt-1基因或KDR基因。10种血液肿瘤细胞系有6种表达Flt-1基因,而KDR基因表达仅见于Raji细胞。血小板也有VEGF和Flt-1基因的低度表达。结论 VEGF作为血管生成的介导物,可能具有调节正常造血细胞和血液肿瘤细胞生长的作用。     

以血管内皮生长因子及其受体为靶点的肿瘤疫苗研究进展

肿瘤的生长、侵袭和迁移依赖于血管新生.因此,以抑制肿瘤血管形成为目标的抗肿瘤治疗策略是当前研究的热点.血管内皮生长因子及其受体在肿瘤血管新生这一病理性血管形成过程中起关键作用,从而使它们成为研发肿瘤疫苗的靶点.此文就疫苗的研发基础、免疫机制及研究进展做一综述.