磷脂酰胆碱及胆汁酸盐动物溶脂实验研究

目的:通过选用保脂妥(Lipostabil)、磷脂酰胆碱(PC)以及不同浓度脱氧胆酸盐(DC)在动物体内溶脂对照观察,以探讨其溶脂效果。方法:分别将1ml的Lipostabil、5%PC以及不同浓度DC注射到豚鼠皮下脂肪层,观察注射后不同时间点,各组注射区皮肤外观、皮下脂肪厚度、皮下脂肪组织病理学改变以及血清相关生化指标改变。结果:Lipostabil、5%PC以及1%~5%DC在动物体内对于脂肪细胞均具有明显的溶解破坏作用,且DC浓度越高,组织的炎性反应越强。结论:在合适的注射层次,1%浓度脱氧胆酸盐在动物体内具有较好的溶脂效果。     

烟酸对兔脂肪细胞分泌脂联素的影响

目的:探讨烟酸对高胆固醇血症兔血清脂联素及正常兔脂肪细胞分泌脂联素的影响.方法:将10只新西兰大白兔饲以高胆固醇饲料8周后,随机分为高脂淀粉组(5只)和高脂烟酸组(5只),后者在高胆固醇饮食基础上给予烟酸缓释片0.4 g/(kg·d)共6周;另设普通饲料对照组(5只),于第14周末取皮下脂肪组织行脂肪细胞培养,以不同浓度烟酸孵育兔脂肪细胞24 h后提取上清液.采用ELISA方法分别测定兔血清及上清液中脂联素的浓度.结果:高脂淀粉组兔血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显高于对照组(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)轻度升高;烟酸干预后,血TC和LDL-C明显降低(P＜0.001),HDL-C明显升高(P＜0.001).8周时高脂组血清脂联素浓度为(1.268±0.039)mg/L,明显低于对照组的(1.449±0.107)mg/L(P＜0.01),经治疗后,脂联素水平明显升高至(1.444±0.057)mg/L,且与HDL-C呈正相关,与TC和LDL-C呈负相关.体外干预实验发现,烟酸促进正常脂肪细胞分泌脂联素,呈浓度依赖性.结论:高胆固醇血症兔脂肪细胞脂联素分泌明显减少,烟酸能显著促进脂联素的分泌,提示烟酸可能有独立于降脂外的升高脂联素的作用.     

黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制研究

目的 :探讨黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制。方法 :2 4只 SD大鼠随机分为正常对照组、高脂对照组、高脂黄芪干预组 ,每组各 8只 ,分别予以标准饲料和高脂饲料 ,干预组同时灌服黄芪。 7周后采用葡萄糖 -胰岛素耐量试验测量大鼠胰岛素敏感性值 (K) ,并观察不同部位脂肪组织质量的变化及其与 K值的关系。应用 TU NEL 法观察腹腔脂肪细胞凋亡的变化。结果 :7周后 ,高脂干预组大鼠经黄芪治疗后与正常对照组相比 K值减小 (P<0 .0 1 ) ,腹腔脂肪组织质量及脂肪细胞凋亡数未见明显差异 ,但与高脂对照组相比 K值明显增大 (P<0 .0 1 ) ,腹腔脂肪组织质量明显减少 (P<0 .0 1 ) ,脂肪细胞凋亡增加 (P<0 .0 1 )。 结论 :胰岛素抵抗与脂肪组织分布关系密切 ;黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制可能是通过调控脂肪细胞凋亡 ,影响脂肪细胞的分布 ,从而改善胰岛素抵抗     

姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响及机制研究

目的:探讨姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法:以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积,实时定量荧光PC(real-time-PCR)检测脂肪细胞增殖、分化相关基因内脂素、抵抗素、脂联素mRNA的表达。结果:姜黄素组A值显著高于空白对照组并随着剂量增加而增大,且具有显著性差异(P0.05);姜黄素作用细胞48 h时,促进或抑制细胞增殖的作用最强,40μmol/L以上浓度的姜黄素出现细胞毒性作用,大部分细胞成片脱落死亡;72 h时,15~35μmol/L姜黄素组细胞的生长率有所增加,而40μmol/L以下姜黄素处理组细胞生长率仍维持在较低水平;脂肪细胞油红O染色分光光度法结果显示2.5,5,10,15和20μmol/L姜黄素剂量组的细胞吸光度值与空白对照组相比有显著性差异(P0.05);姜黄素组、吡格列酮组的内脂素、抵抗素mRNA表达均较对照组显著降低,而脂联素较对照组明显升高,且具有显著性差异(P0.05)。结论:姜黄素能够促进前脂肪细胞分化,低浓度时促进其增殖,高浓度时则抑制其增殖,降低内脂素、抵抗素mRNA表达,促进脂联素mRNA的表达。     

冠心病心功能不全患者PCⅢ、LN、HA的变化及对比研究

目的::探讨冠心病病人心功能不全改善前后血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)的含量变化及其临床意义。方法:将78例冠心病病人分为观察组和对照组,观察组行冠状动脉造影及左心室造影和超声心动图检查,并测定左室功能,术后每天用异舒吉20mg,共用14d,治疗结束后再次行超声心动图检查测定左心室功能。两组病人于治疗前后分别测定血清PCⅢ、LN、HA的浓度变化。结果:观察组病人的血清PCⅢ、LN、HA浓度较对照组明显增加(t=14.17~16.69,P<0.01),观察组病人治疗后血清PCⅢ、LN、HA浓度较治疗前明显下降(t=2.352~4.271,P<0.05,0.01)。结论:血清PCⅢ、LN、HA在冠心病心功能不全的发生、发展中起重要的作用,具有一定的临床参考价值。     

维拉帕米对前体脂肪细胞3T3-L1分化及脂质积聚的影响

目的:观察钙离子通道阻滞剂盐酸维拉帕米对3T3鄄L1前体脂肪细胞分化及脂质积聚的影响。方法:体外培养3T3鄄L1前体脂肪细胞,在常规诱导分化方案基础上加用维拉帕米(终浓度30μmol/L),采用油红O染色各分化时段脂肪细胞,计数含脂滴脂肪细胞数。结果:维拉帕米干预后,脂肪细胞分化速度低于正常对照,虽未影响脂滴出现的时间(第4天),但含脂滴脂肪细胞数均显著低于同期正常对照(P<0.001)。结论:维拉帕米具有抑制脂肪细胞分化及脂质积聚的作用。     

BVT.2733与肥胖小鼠中MCP-1表达的相关性研究

目的:研究BVT.2733对MCP-1表达的影响以及探讨其改善胰岛素抵抗的作用机制。方法:建立高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型,随机分为三组:正常对照组、肥胖对照组、BVT.2733治疗组。分别给予安慰剂、BVT.2733灌胃14天,采用生化法检测血糖,放免法检测小鼠空腹胰岛素水平,Real-time PCR检测内脏脂肪中MCP-1的mRNA表达。观察各组胰岛素抵抗相关指标表达差异情况。结果:肥胖组小鼠体重明显增加,空腹血糖及胰岛素水平升高(P<0.05),形态学上发现小鼠脂肪细胞体积增大。与肥胖对照组相比较,治疗组小鼠脂肪细胞体积减小,空腹胰岛素水平下降明显(P<0.01),脂肪组织MCP-1 mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论:BVT.2733能够降低MCP-1的表达水平,其可能通过抑制炎症来改善胰岛素抵抗。     

姜黄素对单纯性肥胖大鼠模型血清胰岛素、瘦素、肿瘤坏死因子α的影响

目的:观察姜黄素对单纯性肥胖大鼠模型血清胰岛素(INS)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:将32只雄性大鼠随机分为对照组、高脂饲料 姜黄素组,基础饲料 姜黄素组,模型组。对照组喂饲基础饲料,高脂饲料 姜黄素组喂饲高脂饲料和姜黄素;基础饲料 姜黄素组喂饲基础饲料和姜黄素;模型组喂饲高脂饲料。分别于给予姜黄素0周和四周后测定胰岛素、瘦素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)。并测定肾周脂肪重量,用组织病理及透射电镜观察脂肪组织结构的变化。结果:①胰岛素与瘦素:造模成功时,基础饲料 姜黄素组与对照组胰岛素与瘦素水平均无明显差异(P>0.05),高脂饲料 姜黄素组及模型组与对照组比较均显著升高,给予姜黄素四周后,高脂饲料 姜黄素组与模型组比较明显降低(P<0.01);②肿瘤坏死因子α:模型建立成功时及给予姜黄素四周后,高脂饲料 姜黄素组与模型组肿瘤坏死因子α水平比较均存在显著性差异(P<0.05),③姜黄素可显著降低肥胖模型动物体脂(p<0.05);④微观结构观察显示,给予姜黄素后,脂肪细胞的体积明显减小,核膜、细胞间质等脂肪含量明显减少。结论:①姜黄素可以降低大鼠血清胰岛素和瘦素浓度;②姜黄素可以抑制脂肪组织分泌肿瘤坏死因子α;③姜黄素可能是通过多种途径和机制达到减少脂肪细胞中脂肪含量,降低体内脂肪水平的。     

氧化应激对3T3-L1脂肪细胞MCP-1、PAI-1、脂联素表达的影响

目的观察氧化物质第三丁基过氧化氢(t-BHP)对3T3-L1脂肪细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、脂联素的影响初步探讨氧化应激引发脂肪细胞功能障碍的可能作用机制。方法培养3T3-L1脂肪细胞,将其诱导分化为成熟的脂肪细胞,不同浓度t-BHP(100,200,300,400,500μmol/L)作用10min后继续培养。MTT比色法检测24h时3T3-L1脂肪细胞的存活率;荧光定量PCR检测8h时MCP-1、PAI-1、脂联素的表达,Real-time PCR检测t-BHP(500μmol/L,10min)作用于3T3-L1脂肪细胞后不同时间点(2,4,8,12,24h)MCP-1、PAI-1、脂联素的表达。结果 (1)t-BHP对3T3-L1脂肪细胞的存活状态无明显影响;(2)t-BHP可剂量依赖性的降低脂联素而增加MCP-1、PAI-1mRNA的表达;(3)500μmol/L的t-BHP对脂联素、MCP-1、PAI-1的调节具有时间相关性。结论氧化损伤能够促进MCP-1、PAI-1的表达、抑制脂联素的表达,这是其介导脂肪细胞功能障碍的可能机制之一。     

神经生长因子对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的:研究神经生长因子(NGF)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导鼠肾上腺嗜咯瘤细胞(PC12)凋亡的作用,从而探讨NGF对阿尔茨海默病的治疗作用。方法:以PC12细胞为神经元的细胞模型,将Aβ和NGF+Aβ分别加入培养的PC12细胞中,采用MTT法观察细胞存活率,相差显微镜观察细胞形态改变,hochest33258观察细胞核变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较两组间差异。结果:Aβ组细胞存活率随作用时间延长而下降(P<0.01),胞体变小,轴突退化变形,可见特征性的凋亡细胞核,并检测到典型的凋亡峰;而NGF+Aβ组细胞存活率明显增高,凋亡率明显减少(P<0.01)。结论:一定浓度的Aβ2535能诱导PC12细胞凋亡,NGF对Aβ诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用。