高效液相色谱法测定多烯磷脂酰胆碱软胶囊中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱的含量

目的建立HPLC法测定多烯磷脂酰胆碱软胶囊中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱的含量以及有关物质方法。方法采用蒸发光散射检测器SEDEX55,MERCK的Li Chrospher 100 Diol-5色谱柱(125mm×4.0 mm,5μm);流动相A为正己烷-异丙醇-冰醋酸-三乙胺(814∶170∶15∶0.8),流动相B为异丙醇-超纯水-冰醋酸-三乙胺(844∶140∶15∶0.8),梯度洗脱。结果磷脂酰胆碱在0.912~2.736mg·mL~(-1),溶血磷脂酰胆碱在0.072~0.216 mg·mL~(-1)内与峰面积线性关系良好(R~2均为0.999)。磷脂酰胆碱的平均回收率为101.2%,RSD为1.3%;溶血磷脂酰胆碱的平均回收率为100.5%,RSD为1.9%。溶血磷脂酰胆碱的检测限为0.57μg。结论本检测方法专属性强,结果可靠,专属性强,重复性良好,可用于多烯磷脂酰胆碱软胶囊的质量评价。     

丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定

目的建立HPLC法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:Lichrospher 100 DIOL(250 mm×4 mm,5μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)为流动相A,正己烷-异丙醇(18∶30)溶液为流动相B;梯度洗脱;柱温:35℃。结果溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为0.03~0.25(r1=0.9997)和0.01~0.10(r2=0.9962)mg·mL^-1,定量限分别为0.72和0.31μg。结论该方法准确、可行,精密度高,可用于溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定。     

苦丁茶对高胆固醇脂血症小鼠血清多不饱和溶血磷脂酰胆碱的改善作用

目的:研究苦丁茶水提取物对高胆固醇脂血症小鼠血清中多不饱和溶血磷脂酰胆碱的改善作用。方法:采用LCQTOF-MS/MS和LC-QTRAP-MS/MS建立小鼠血清中多不饱和溶血磷脂的液质联用定性和定量分析方法;采用高脂饲料喂养30 d诱发小鼠高胆固醇脂血症模型;以5,10,15 g·kg^-1·d^-1(按生药材量计算)苦丁茶水提取物连续灌胃给药4周,观察高胆固醇脂血症小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的变化;观察小鼠肝脏油红O染色后的病理切片;同时,利用上述建立的液-质联用分析方法检测给药后小鼠血清中多不饱和溶血磷脂酰胆碱相对含量的变化。结果:苦丁茶水提取物能够显著降低由高脂饲料诱发的胆固醇脂血症小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇;对小鼠肝脏的脂肪堆积具有明细的抑制作用;同时,与正常小鼠相比,模型小鼠血清中的多不饱和溶血磷脂酰胆碱的相对含量显著下降,而苦丁茶水提取物对该类脂质成分具有显著的回调作用。结论:苦丁茶水提取物对高胆固醇脂血症小鼠血清中多不饱和溶血磷脂的回调作用可能涉及苦丁茶降血脂的药效作用机制,值得深入研究。     

款冬花熏吸干预香烟诱导小鼠肺损伤的代谢组学研究

本研究旨在探讨款冬花熏吸疗法对香烟烟雾诱导的肺损伤模型小鼠的改善作用,并分析其对肺损伤小鼠肺组织代谢轮廓的影响。所有动物福利和实验过程均遵循山西大学动物伦理委员会的规定(批准号:SXULL2019014)。通过HS-GC-MS分析鉴定款冬花热挥发性成分23种。款冬花熏吸干预能够改善香烟烟雾诱导的肺损伤模型小鼠的肺组织形态,降低白介素-6 (interleukin-6, IL-6)和白介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)的水平。采集各组小鼠的肺组织进行基于UHPLC-QTOF MS的代谢组学分析,结果显示香烟暴露后肺组织中有70个代谢物水平显著变化,经款冬花熏吸干预后能回调溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine, LPC)、12-HETE、腺苷、黄嘌呤等35个差异代谢物水平。LPC、12-HETE、腺苷、黄嘌呤等代谢物与体内的炎症反应密切相关,这些回调的代谢物集中在嘌呤代谢、花生四烯酸代谢、磷脂代谢和丙酮酸代谢通路上。说明款冬花挥发性成分中含有的萜类物质可能通过调节肺组织中溶血磷脂酰胆碱、12-HETE、腺苷等炎性反应相关代谢物的水平,进而通...     

太平洋侧花海葵中四个新神经酰胺的鉴定

目的研究太平洋侧花海葵(Anthopleura pacifica)中的生物活性成分.方法采用稻瘟霉模型生物活性追踪方法,应用色谱技术进行分离,根据理化性质和波谱分析鉴定结构.结果得到了1个对稻瘟霉显示活性的组分,并鉴定为4个神经酰胺的混合物:N-羟乙基-N-十四酰-(2S,3R)-十八碳鞘氨醇-4(E),8(E)-二烯(a),N-羟乙基-N-(9Z-十六烯酰)-(2S,3R)-十八碳鞘氨醇-4(E),8(E)-二烯(b),N-羟乙基-N-十六酰-(2S,3R)-十八碳鞘氨醇-4(E),8(E)-二烯(c)和N-羟乙基-N-(13Z-二十二烯酰)-(2S,3R)-十八碳鞘氨醇-4(E),8(E)-二烯(d).结论化合物a～d均为新的神经鞘氨醇化合物.     

HPLC-ELSD多烯磷脂酰胆碱质量标准研究

目的 建立多烯磷脂酰胆碱胶囊中多烯磷脂酰胆碱含量及溶血磷脂酰胆碱的限量检查.方法 丙二醇键合硅胶色谱柱(5μM,4.6 ×250 mm,Hanbon),柱温:55℃,流动相:A为正己烷-异丙醇-冰醋酸-三乙胺(814∶170∶15∶1.4),B为异丙醇-水-冰醋酸-三乙胺(844∶140∶15∶1.4),梯度洗脱,流速:1ml·min-1,蒸发光散射检测器物化温度50℃,蒸发温度90℃,载气流速2.0ml·min-1.结果 多烯磷脂酰胆碱在0.1～1 mg·mL-1范围内呈良好线性,r=0.9999;平均回收率为100.1%,RSD为1.7%;中间精密度RSD为1.4%;三批样品中多烯磷脂酰胆碱的标示量%分别为100.9%,99.84%,100.2%,溶血磷脂酰胆碱的含量占多烯磷脂酰胆碱表示量的3.9%,4.4%,3.9%.本样品中磷脂酰乙醇胺未检出.结论 所建立的方法可准确的测定胶囊中多烯磷脂酰胆碱的含量及溶血磷脂酰胆碱的限量检查,可用于该制剂的质量控制.     

柚皮苷改善东莨菪碱模型小鼠学习认知能力的血液代谢组学研究

目的:从代谢组学角度研究骨碎补总黄酮中柚皮苷对东莨菪碱致记忆损伤模型小鼠的学习记忆、认知能力的保护机制。方法:取3月龄雄性昆明种小鼠按体质量随机分为空白组、模型组和给药组。采用东莨菪碱构建记忆损伤模型,新物体识别实验和水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,然后对小鼠血液样品进行代谢物图谱及血液代谢物变化分析。结果:行为学实验结果显示,给药后小鼠的学习记忆能力较模型组明显改善。代谢组学研究结果显示,给药后小鼠血液的代谢轮廓都有显著的回调趋势,共鉴定出差异代谢物21个,其中L-乙酰肉碱、柠檬酸水平给药后显著上升,脯氨酸、色氨酸、溶血磷脂酰胆碱(14∶0)、溶血磷脂酰碱(15∶0)、脱氧胞苷、4-氨基苯酚水平给药后显著降低,涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢、色氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、维生素B₆代谢、酪氨酸代谢、柠檬酸循环。结论:柚皮苷能够改善东莨菪碱模型小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与改善能量代谢,减少β样淀粉蛋白(Aβ)产生,降低Tau蛋白过度磷酸化,促进神经突触可塑性,改善乙酰胆碱系统紊乱,抗氧化应激和抗细胞凋亡等作用有关。     

脂肪乳注射液中磷脂酰胆碱的稳定性测定

目的 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱的含量变化。方法 以丙二醇键合硅胶柱,正己烷∶异丙醇(40∶60)为流动相A,异丙醇∶水(80∶20)为流动相B,梯度洗脱,ELSD检测。结果 温度对本品质量影响较大,宜在25 ℃条件下贮存。结论 脂肪乳注射液在加速试验和长期试验中溶血磷脂酰胆碱的限量符合相关药品标准。     

基于代谢组学研究甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎的个体差异

目的:寻找与甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎个体差异相关的生物标志物，从代谢调控角度解释甲氨蝶呤的个体差异。方法:选取2018年1月1日至2019年12月31日南京大学医学院附属鼓楼医院风湿免疫科接受甲氨蝶呤规范化治疗的成年类风湿关节炎患者，收集患者的临床信息，依据治疗前后28个关节疾病活动度-血沉(DAS28-ESR)评分划分成甲氨蝶呤治疗有效组(22例)和无效组(17例)。借助超高效液相-四极杆-飞行时间质谱法采集2组患者的血清代谢轮廓谱，采用主成分分析和偏最小二乘判别分析等方法进行数据处理，筛选出甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎个体差异相关的生物标志物和代谢通路。结果:有效组和无效组患者接受甲氨蝶呤治疗前的红细胞沉降率、C反应蛋白和DAS28-ESR评分均无统计学差异；接受甲氨蝶呤治疗6个月后，有效组红细胞沉降率、C反应蛋白和DAS28-ESR评分显著低于无效组。甲氨蝶呤治疗有效组和无效组的血清代谢轮廓谱差异明显，与无效组相比，有效组9个差异代谢物水平下降，包括肉豆蔻酸、棕榈酸、色氨酸和尿苷等；27个代谢物水平上升，包括甘氨胆酸、鞘氨醇-1-磷酸、溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺等。这些差异代谢...     

神经酰胺在紫外光诱导细胞凋亡中作用

近年研究发现 ,紫外光诱导的凋亡与神经酰胺密切相关。１神经酰胺的代谢神经酰胺是疏水性最强的分子之一。神经酰胺的来源途径［１］:（１）二氢鞘氨醇在神经酰胺合成酶催化下发生酰化作用 ,形成二氢神经酰胺 ,后者经二氢神经酰胺还原酶作用 ,转化为神经酰胺 ;(２)鞘髓磷脂经鞘髓磷脂酶催化分解为神经酰胺 ;(３)复合物糖鞘脂经酸性水解酶作用产生神经酰胺。神经酰胺分解途径有 :(１)经神经酰胺激酶作用 ,分解为神经酰胺—１—磷酸 ;(２)经鞘髓磷脂合成酶作用 ,分解为鞘髓磷脂 ;(３)在Ｇｏｌｇｉ结构 ,经糖基神经酰胺合成酶作用 ,神经酰胺发…