丹参总酚酸提取物UPLC指纹图谱及成分定性研究

目的:建立丹参总酚酸提取物的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱方法,并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS)对其化学成分进行定性分析。方法:采用UPLC色谱系统,HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;流速0.4 mL.min-1;检测波长286 nm。质谱检测采用负离子V模式;电压2.5kV;离子源温度100℃;雾化温度300℃;雾化气600 L.h-1。结果:本方法在10 min内完成1次丹参总酚酸提取物的指纹图谱分析,各主要成分峰分离度良好,方法精密度、重复性的RSD均小于1.0%。对指纹图谱中的15个主要成分峰进行了鉴定,分别为丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸F、丹酚酸H/L、丹酚酸G、丹酚酸D、丹酚酸E、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、异丹酚酸B/E、丹酚酸C和丹酚酸A。结论:本方法实现了丹参总酚酸提取物指纹图谱的快速、高效测定,同时解析了提取物中的化学组成,为高效、快速、全面控制其质量提供了基础。     

丹参多酚酸HPLC指纹图谱研究

目的:建立丹参多酚酸原料的指纹图谱研究方法。方法:以丹酚酸B为参照物,采用高效液相色谱法,色谱柱为Luna C18(2)100A(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.026%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为286nm,柱温为30℃,流速为1mL.min-1。结果:从所建指纹图谱中确定了5个共有峰,建立了丹参多酚酸的共有模式;在10批丹参多酚酸中有6批样品的指纹图谱相似度在0.90以上。结论:本方法简便、准确、重现性好,可为评价丹参多酚酸原料药的质量提供依据。     

复方丹参方快速UPLC指纹图谱研究

目的:建立复方丹参方中丹参、三七指纹图谱。方法:采用Waters Acquity UPLC(色谱柱为50 mm×2.6 mm,1.7μm),流动相为0.02%磷酸(A)和0.02%磷酸的80%乙腈(B)进行梯度洗脱,柱温为40±0.15℃,流速为0.42mL·min^-1,检测波长:203nm,进样量:3μL。对10批不同丹参饮片进行分析,使用(2004A版)由国家药典委员会制定颁布的相似度软件评估其相似度。结果:建立了复方丹参方中丹参、三七提取液的指纹图谱,10批丹参饮片在此指纹图谱中的相似度均大于0.932。因人参皂苷Rg1信号强,峰形好,故以人参皂苷Rg1为参照峰,确定了15个共有峰,相对保留时间的RSD<1%,相对峰面积的RSD<3%,确定了5个特征峰,其中2个特征峰来源于组方中的丹参,3个特征峰来源于组方中的三七。结论:此色谱条件能将丹参、三七简单、方便的于同一图谱中展现出来,10批丹参饮片质量稳定。为复方丹参方的质量评价、指导临床用药、制剂设计提供科学的依据。     

不同产地黄芪药材的UPLC/Q-TOF-MS指纹图谱研究

目的:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF-MS)建立黄芪药材的指纹图谱,初步鉴定其主要色谱峰,并结合主成分分析(PCA)模式识别方法评价不同产地药材质量。方法:用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水-乙腈-异丙醇体系梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据。应用Markerlynx软件进行不同产地药材的PCA分析。结果:在18 min内建立了黄芪药材的UPLC/Q-TOF-MS指纹图谱,结合PCA分析,可以区分不同产地的药材,并找出包括毛蕊异黄酮,芒柄花素,黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ等8个差异最大的化合物。结论:UPLC/Q-TOF-MS方法所得谱图重现性和特征性较好,可以用于黄芪指纹图谱的快速鉴别。应用化学计量学方法可以较全面地反映不同产地药材学成分的差异,为其质量控制提供实验依据。     

太白蓼中酚酸类成分的UPLC/Q-TOF-MS研究

目的建立太白蓼(Polygonum taipaishanense Kung)酚酸类化学成分的超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的分析方法。方法采用UPLC-Q-TOF-MS法分析,Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm);流动相为1mL·L~(-1)冰醋酸(A)-乙腈(B)梯度洗脱;进样量为2μL;流速为0.3mL·min~(-1);柱温为30℃。飞行时间质谱采用负离子模式,扫描范围为100~1 100;Fragmentor 130V;Drying Gas 10L·min~(-1);Nebuilzer 45psi;Gas Temp 350℃;Skimmer 45V。结果鉴定了太白蓼中13个成分,其中4个成分通过对照品比对确认。结论建立了UPLC/Q-TOF-MS方法对太白蓼中化学成分进行了鉴定,为太白蓼的质量控制及标准建立奠定了基础。     

基于HPLC指纹图谱及UPLC-Q-TOF-MS法的3种不同来源大黄差异成分研究

目的:建立不同来源大黄药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并对其中差异成分进行定性鉴别。方法:采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)软件建立30批大黄药材(掌叶大黄20批、唐古特大黄和药用大黄各5批)的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,采用偏最小二乘判别法(PLS-DA)结合超高效液相色谱(UPLC)-四极杆-飞行时间串联质谱(Q-TOF-MS)法定性鉴别3种来源大黄的差异性成分。结果:30批大黄药材样品指纹图谱的相似度在0.609～0.960之间。经PLS-DA分析,大黄药材样品按来源明显聚集为3组,3组样品间差异性成分共有18个,经UPLC-Q-TOF-MS鉴别为白藜芦醇-4′-O-β-D-(6″-O-没食子酰)-葡萄糖苷、莲花掌苷、大黄酸-8-O-葡萄糖苷、表儿茶素没食子酸酯、4-(4′-羟苯基)-2-丁酮-4′-O-β-D-(2″-O-肉桂酰基-6″-O-没食子酰基)-葡萄糖苷等。结论:建立的方法可有效区分3种不同来源大黄药材,并对其差异成分进行鉴别,为多来源药材的鉴别和质量评价提供了参考。     

太白茶HPLC指纹图谱的建立及UHPLC-QExactive Focus MS/MS联用分析

目的:建立太白茶药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,并运用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)法对太白茶中的特征峰进行定性分析。方法:采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长254 nm,进样量10μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012年版”,建立指纹图谱并进行相似度评价。化学成分分析选用UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS技术,采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),负离子模式扫描,扫描范围m/z 80～1 200。结果:建立的太白茶特征指纹图谱中...     

基于指纹图谱联合化学计量学评价不同产地百蕊草质量的研究

目的:建立不同产地百蕊草的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,结合化学计量学分析方法对不同产地百蕊草的质量进行有效的评价和分析。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18色谱柱(150 mm×2.1 mm, 1.7μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,检测波长330 nm,柱温30℃;对不同产地的百蕊草样品进行分析并建立指纹图谱;运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q TOF MS)技术对其化学成分进行鉴定,同时联合层次聚类(HCA)、正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)分析方法筛选出造成不同产地质量差异的指标成分,以共有峰面积为指标构建灰色关联度模型对样品进行质量评价。结果:30批百蕊草指纹图谱中有8个共有峰,与对照指纹图谱的相似度均在0.99以上,不同产地的百蕊草药材整体质量相对稳定。HCA与OPLS-DA结果显示各产地样品的部分化学成分差异明显,并筛选出对分组贡献值较大的2个差异性成分,分别为百蕊草素Ⅰ(峰6)和山柰酚-3-O-(2”-O-α-鼠李糖基-6”-...     

丹参中酚酸类成分的HPLC和UFLC检测研究

目的促使丹参酚酸类成分检测和鉴定规范化、系统化。方法先对丹参生药进行鉴定,而后采用高效液相色谱法（HPLC）测定各产地丹参的水溶性丹酚酸类化合物含量,并用UFLC做指纹图谱研究。结果精密度和重复性实验中各共有峰相对峰面积的RSD均小于5%,符合有关规定。结论本方法可作为控制丹参药材内在质量的标准。     

小儿解表颗粒指纹图谱的建立及化学成分分析

目的:建立小儿解表颗粒的超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF MS)指纹图谱,确认其化学成分并同时测定17个指标性物质的含量,结合聚类分析技术,对其进行系统、科学地质量评价。方法:采用UPLC-QTOF MS法对不同厂家的小儿解表颗粒进行分析,绘制10批样品的指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度软件进行相似度评价,并通过SPSS 23.0软件进行聚类分析;采用提取离子色谱测定17种化学成分的含量。结果:10批样品共确定28个共有峰,相似度均大于0.98,样品共聚为2类,指认了17种成分,这些成分的定量分析方法具有良好的线性关系(R²>0.999 1)、极低的检出限(0.02～0.94μg·mL^-1)、精密度和重现性较好(RSD<2%)、加标回收率在97.81%～102.48%(RSD<2.88%)。结论:建立的UPLC-QTOF MS方法准确实用,可用于小儿解表颗粒的质量评价。     

注射用丹酚酸A相关物质分析研究

目的:建立高效液相色谱法测定注射用丹酚酸A中相关物质。方法:采用德国MN-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2%乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长286 nm,对杂质进行了定量研究。并采用制备液相色谱对主要杂质进行分离,进行了结构确证。结果:建立注射用丹酚酸A的相关物质检测方法,并分离确定了2个杂质的结构。结论:本法可用于注射用丹酚酸A相关物质的检测。     

疏血通注射液中游离氨基酸的UPLC指纹图谱研究

目的 建立疏血通注射液中游离氨基酸的UPLC指纹图谱分析方法。方法 采用异硫氰酸苯酯（PITC）衍生化方法,使用Waters Acquity超高效液相色谱仪,以CORTECS^® C₁₈柱（150 mm×2.1 mm,1.6 μm）,乙腈-0.1%甲酸水进行梯度洗脱,体积流量为0.1 mL/min,柱温为25℃,进样量为2 μL,检测波长为254 nm。结果 33批不同批次疏血通注射液中有28个共有峰,其中有15个已知峰,分别为组氨酸（His）、精氨酸（Arg）、丝氨酸（Ser）、甘氨酸（Gly）、谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、苏氨酸（Thr）、脯氨酸（Pro）、丙氨酸（Ala）、酪氨酸（Tyr）、甲硫氨酸（Met）、缬氨酸（Val）、亮氨酸（Leu）、赖氨酸（Lys）、苯丙氨酸（Phe）,不同批次的样品与标准指纹图谱相似度均在0.994以上。结论 本实验建立的UPLC指纹图谱分析方法稳定、精密度高,可应用于疏血通注射液的质量控制和评价。     

肾康栓中丹酚酸B的含量测定及指纹图谱研究

目的建立肾康栓中丹酚酸B的含量测定方法及HPLC指纹图谱。方法采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C_(18)(250mm×4.6mm,5μm);甲醇-1mL·L~(-1)甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0mL·min~(-1);检测波长为286nm;柱温为30℃。结果建立了肾康栓的HPLC指纹图谱,共标定16个共有峰并进行归属,10批样品中丹酚酸B含量在1.925～4.259mg·粒~(-1)之间。结论该方法建立的指纹图谱灵敏度高、稳定性好,为肾康栓的质量控制提供了科学依据。     

UPLC和HPLC方法对丹参药材中丹酚酸B含量测定结果的比对

目的:比对超高效液相色谱与高效液相色谱方法测定丹参药材中丹酚酸 B 的含量结果。方法:采用中国药典2005年版(一部)丹参药材含量测定项下有关标准对原高效液相色谱方法进行转换并优化为超高效液相色谱方法。原高效液相色谱方法色潜柱为 Waters X-Bridge~(TM)BEH C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(10:30:59:1),流速:1mL·min~(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃;超高效液相色谱方法色潜柱为 Waters ACQUITY UPLC~(TM)。BEH C_(18)柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(8:25:66:1),流速:0.4 mL·min~(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃。结果:2种方法所得含量测定结果一致。结论:超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定丹参药材中丹酚酸 B 含量,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度。     

RP—HPLC法同时测定冠心宁冻干粉针剂中丹酚酸B和阿魏酸的含量

目的:建立了同时测定冠心宁冻干粉针剂中丹酚酸 B 和阿魏酸含量的方法。方法:采用 RP-HPLC 法,Hypersil ODS2C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-1.7%甲酸水溶液(11:12:77),流速1.0 mL·min~(-1),检测波长为320nm。结果:丹酚酸 B 和阿魏酸浓度分别在1.70～25.47μg·mL~(-1)(r=0.9997,n=6)和0.05～0.68μg·mL~(-1)(r=0.9994,n=6)内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率(n=9)分别为101.1%和99.2%。结论:测定方法准确、重复性好,为冠心宁冻干粉针剂质量评价提供可靠方法。     

生物标志物检测法评价注射用丹参多酚酸对血小板活性的影响

目的：采用生物标志物检测法评价注射用丹参多酚酸对血小板活性的影响。方法：用检测生物标志物（血小板膜糖蛋白CD62p）的方法测定经二磷酸腺苷(ADP)激活的血小板活化率,判定受试物是否具有抑制血小板活化的作用。体内法比较大鼠给予受试物后和给药前抗凝血的血小板活化率,体外法比较添加受试物与未加受试物混合的大鼠抗凝血的血小板活化率。结果：在体内和体外模型中,注射用丹参多酚酸可明显抑制血小板上由ADP激活的CD62p高表达,血小板的活化受到抑制。结论：采用生物标志物检测的方法,简单快捷,可有效的评价药物对血小板活性的影响,体外法更适合建立检测标准。     

川参通注射液HPLC指纹图谱的研究

目的建立川参通注射液的指纹图谱,作为川参通注射液的质量评价指标。方法采用高效液相色谱法,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 ml/min,检测波长281 nm。结果采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004A版)对11批川参通注射液的指纹图进行处理,确定了11个共有峰,11批样品的相似度均大于0.970。结论该方法简便,稳定,重复性好,可作为川参通注射液的质量评价指标。     

UPLC 法测定白花蛇舌草注射液中对香豆酸的含量

目的：建立白花蛇舌草注射液中对香豆酸的含量测定方法。方法采用 ACQUITY UPLC BEH C18柱（2．1 mm ×50 mm,1．7μm）为色谱柱,以甲醇—0．3％醋酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0．4 mL·min －1,检测波长为308 nm。结果对香豆酸进样量在1．68～67．12 ng 范围内与峰面积线性关系良好,r ＝0．99999,平均加样回收率为99．8％,RSD 为0．7％。测得16批样品中对香豆酸的平均含量为0．204 g·L －1。结论该方法简便准确,快速可靠,能够用于白花蛇舌草注射液的含量测定和质量控制。     

苏陈合剂UPLC指纹图谱及含量测定

目的:建立苏陈合剂指纹图谱及6种成分的定量分析方法,为其质量控制提供科学依据。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC);色谱柱为Waters CORTECS UPLC T₃ (2.1 mm×150 mm,1.6 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),柱温为30 ℃,流速为0.2 mL·min^-1,进样量为1 μL,检测波长为280 nm。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》拟合苏陈合剂UPLC指纹图谱,确定共有峰,并进行相似度评价;采用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别法及TOPSIS分析建立多元统计分析方法,并测定其中6个化学成分含量。结果:建立了苏陈合剂UPLC指纹图谱,共确定23个共有峰,指认其中8个成分,并建立没食子酸、咖啡酸、野黄芩苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、迷迭香酸6个成分的定量分析方法。12批苏陈合剂样品可聚为2类,S1~S8聚为Ⅰ类,S9~S12聚为Ⅱ类。主成分1~3是影响苏陈合剂质量差异的主要因子。峰2、19、22、1、23、20、21可作为质量差异标志物。TOPSIS分析结果表明,S1质量最佳,S9质量较次。结论:建立的苏陈合剂指纹图谱及含量测定方法精密度高、稳定性好,结合多元统计分析方法可用于其质量评价。