安体舒通和缬沙坦对肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨醛固酮受体拮抗剂和血管紧张素П-1型受体拮抗剂（AT1Ra）对大鼠单侧输尿管梗阻（UU0）模型肾间质纤维化的影响及其可能机制。方法Wistar大鼠行左侧输尿管结扎术，分为UU0模型组（n=11），安体舒通治疗组（12=12），缬沙坦治疗组（n=11）和[安体舒通＋缬沙坦治疗组（n=10）]，同时设假手术对照组（n=7）。术后第14天处死各组大鼠，进行HE和Massod染色，观察肾脏病理变化；比色法测定肾组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量；原位末端标记法（TUNEL）与DNA电泳观察肾小管上皮细胞凋亡情况；Western blotting检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的蛋白表达。结果UU0组与其它组大鼠比较，肾组织MDA含量明显升高，SOD含量显著下降，肾脏病理改变加重，TUNEL染色及DNA琼脂糖凝胶电泳可见大量的肾小管上皮细胞凋亡，肾组织caspase-3的表达明显增加（P〈0．05）。各用药组与UU0组大鼠比较，肾组织MDA含量明显降低，SOD含量升高，肾小管上皮细胞凋亡和肾间质纤维化显著减轻，caspase-3的表达显著减少（P〈0．05）。结论安体舒通和缬沙坦均可显著改善UU0所致的肾间质纤维化，减轻肾小管上皮细胞的凋亡，部分下调肾组织caspase-3的表达，且联合用药效果更为显著。上述作用可能与该药物抑制氧化应激有关。     

黄芩素对H_2O_2诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响机制研究

目的探究黄芩素对过氧化氢(H_2O_2)诱导肾小管上皮细胞活性、凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的肾小管上皮NRK52E细胞株随机分为5组,对照组为正常培养,H_2O_2组为500μmol/L H_2O_2干预细胞24 h,H_2O_2组+黄芩素(50μmol/L)、H_2O_2组+黄芩素(100μmol/L)、H_2O_2组+黄芩素(200μmol/L)为加入不同浓度黄芩素和500μmol/L H_2O_2处理细胞;四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞的活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3),试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果 H_2O_2诱导NRK52E细胞活性降低(P0.05)、凋亡率增加(P0.05),SOD活性降低(P0.05),MDA活性增加(P0.05),Cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);与H_2O_2组相比,不同浓度黄芩素提高NRK52E细胞的活性(P0.05),降低凋亡率(P0.05),提高SOD活性(P0.05),降低MDA活性和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P0.05)。结论黄芩素可抑制肾上腺上皮细胞氧化应激反应,并通过下调磷酸化Caspase-3蛋白水平,从而抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤。     

保肾宁提取液糖尿病大鼠的防治作用

目的 观察保肾宁提取液对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏细胞凋亡及相关基因蛋白Bax与Bcl-2表达的影响.方法 将SD大鼠单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DN模型,每日灌胃保肾宁提取液,8周后检测24 h尿蛋白及肾功能,流式细胞术检测大鼠肾组织Bax及Bcl-2的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠肾皮质细胞凋亡.结果 保肾宁提取液能明显改善糖尿病肾病大鼠肾功能,大鼠肾皮质细胞Bcl-2表达增强,Bax表达减弱;肾小管和肾小球内凋亡细胞数明显减少.结论 保肾宁提取液可通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用.     

黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

背景：干细胞移植用于治疗急性肾损伤的有效性已经被多个研究证实,但其对肾小管上皮细胞损伤的修复机制尚不明确。目的：观察黄芪甲苷孵育后的脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。方法：实验分为4组。2.5μmol/L顺铂诱导肾小管上皮细胞24 h,建立肾小管细胞损伤模型（顺铂损伤组）;将脂肪源性干细胞与损伤肾小管上皮细胞共培养（脂肪源性干细胞＋损伤肾小管上皮细胞组）;利用 Transwel小室将20 mg/L黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞48 h后与损伤肾小管上皮细胞共培养（黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞＋损伤肾小管上皮细胞组）;以正常肾小管上皮细胞做对照（正常对照组）。结果与结论：与肾小管上皮细胞损伤组相比,AV/PI和TUNEL结果均显示脂肪源性干细胞＋肾小管上皮细胞组和20 mg/L 黄芪甲苷脂肪源性干细胞＋肾小管上皮细胞组肾小管上皮细胞发生凋亡的比例和数量明显减少;ELISA结果表明20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞＋肾小管上皮细胞组胰岛素样生长因子1分泌显著提高（P＆lt;0.05）;Western blot进一步显示20 mg/L 黄芪甲苷脂肪源性干细胞＋肾小管上皮细胞组caspase-3蛋白水平明显下降,而Bcl-2的表达量明显增加（P＆lt;0.05）。表明黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与增加胰岛素样生长因子1分泌,抑制caspase-3表达、上调Bcl-2水平有关。     

瑞芬太尼预处理对鼠肝缺血再灌注损伤时肾细胞凋亡及Bcl-2、caspase-3的影响

[目的]探讨瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)时远隔脏器肾脏细胞凋亡及 Bcl-2、半胱天冬酶家族3(caspase-3)的影响.[方法]健康雄性 SD 大鼠72只,随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、瑞芬太尼组(RPC 组),每组24只.采用Pringle''s maneuver法建立肝IR模型,检测各组缺血30 min(T1)、再灌注时间1 h(T2)、3 h(T3)、6 h(T4)时血清谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)水平,再灌6 h取肾组织光镜观察肾脏病理损伤,同时TUNEL法检测肾脏细胞的凋亡,Western blot检测各组肾组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和caspase-3蛋白的表达水平.[结果]IR组、RPC组从缺血30 min开始各时点血清ALT、Cr依次升高,均显著高于S组,但RPC组又明显低于IR组,其差异均有统计学意义(P<0.05).S组大鼠肾组织结构正常;IR组可见肾脏组织不同程度的病理损伤:肾小管上皮细胞肿胀、结构欠清、核浓缩、肾小管内有上皮坏死脱落细胞的形成,间质炎性细胞浸润及充血;RPC组损伤明显改善.S组仅有极少量的凋亡阳性细胞,IR组、RPC组凋亡阳性细胞均显著高于S组(P<0.05),且IR组明显高于RPC组,其差异均有统计学意义(P<0.05).与S组比较,肾组织Bcl-2、caspase-3表达水平显著增高(P<0.05);与IR组比较,RPC组Bcl-2水平增高(P<0.05),caspase-3表达量明显下降(P<0.05).[结论]瑞芬太尼对肝IR时肾脏损伤有保护作用,而其保护机制可能与调控肾细胞凋亡和Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达有关.     

Shh在糖尿病肾病患者肾组织中的表达及对肾小管上皮细胞凋亡的影响研究

目的探讨音猥因子(Shh)在糖尿病肾病患者肾组织中的表达水平及对肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法Western blot检测糖尿病肾病患者肾组织和肾癌患者正常肾组织中Shh的水平。实验分为5组,依次为低糖组、对照组、PCDNA3.1组、PCDNA3.1-Shh组、抑制剂组。低糖组用葡萄糖浓度为5.8 mmol/L的细胞培养液培养细胞,PCDNA3.1组、PCDNA3.1-Shh组、抑制剂组、对照组均用葡萄糖浓度为30 mmol/L的细胞培养液培养细胞,PCDNA3.1-Shh组细胞转染Shh过表达载体PCDNA3.1-Shh,PCDNA3.1-Shh组细胞转染空载体PCDNA3.1,抑制剂组细胞与JNK信号通路抑制剂作用。Western blot检测对照组、PCDNA3.1组、PCDNA3.1-Shh组细胞中Shh水平。流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bax、JNK、p-JNK表达水平。结果 Shh在糖尿病肾病患者肾组织中的表达水平明显低于正常肾组织(P0.05)。PCDNA3.1-Shh组细胞中Shh表达水平明显高于对照组和PCDNA3.1组(P0.05)。对照组细胞凋亡率明显高于低糖组(P0.05)。PCDNA3.1-Shh组细胞凋亡率明显低于对照组和PCDNA3.1组(P0.05)。对照组Bax和p-JNK水平明显高于低糖组,而Bcl-2水平明显低于低糖组(P0.05)。PCDNA3.1-Shh组细胞Bax和p-JNK水平明显低于对照组,而Bcl-2水平明显高于对照组(P0.05)。抑制剂组细胞凋亡趋势与PCDNA3.1-Shh组细胞相一致。结论 Shh在糖尿病肾病患者肾组织中表达下调。Shh能够明显改善高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,作用机制与JNK信号通路有关。     

TNFα-在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机理研究

目的研究TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机制。方法建立小鼠叶酸诱导肾病模型,运用抗TNF-α多克隆抗体及对照抗体干预治疗,检测小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平,肾小管上皮细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白的表达水平。结果在CD1小鼠叶酸诱导肾病模型中,尿素氮水平显著升高,肾小管上皮细胞坏死和凋亡增加,小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平显著升高,肾皮质组织中Bcl-xL表达水平显著下降,运用抗TNF-α多克隆抗体干预治疗可保持Bcl-xL在肾组织中的表达水平,减少肾小管上皮细胞凋亡,有效减轻小鼠肾功能损害。结论TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病发病机制中具有重要作用,阻断TNF-α是治疗急性肾衰的一种潜在有效手段。     

姜黄素预防造影剂对大鼠肾小管上皮细胞的损伤

目的:探讨姜黄素对优维显370诱导的大鼠造影剂肾病(CIN)的预防作用。方法:雌性SD大鼠随机分为正常对照组(C)、造影剂肾病组(CIN)和姜黄素防治组(CUR),每组各5只。分别每隔15 min尾静脉注射吲哚美辛、L-NAME和优维显370(8 mL/kg)建立大鼠CIN模型。姜黄素在注射优维显370前5 d开始灌胃。所有大鼠均在注射造影剂后24h杀检。用TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡,硫代巴比妥酸法(TBA)测定肾脏丙二醛(MDA)水平。结果:姜黄素预防治疗显著降低造影剂肾病大鼠肾小管上皮细胞坏死指数、肾小管上皮细胞凋亡率、肾髓质淤血程度、肾脏MDA水平、血肌酐和肾重指数(均P<0.05)。结论:姜黄素可通过抗氧化活性而预防造影剂对大鼠肾小管上皮细胞损伤,从而预防CIN发病。     

电针曲池、足三里穴对缺血再灌注损伤大鼠线粒体Caspase-3途径诱导细胞凋亡的影响

目的观察电针曲池、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血周围区皮质神经细胞超微结构和caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 36只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,每组12只。采用Longa线栓法制作左侧大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。电针偏瘫侧曲池、足三里穴30 min。治疗前后分别进行神经行为学评分,采用透射电镜观察神经细胞超微结构,Western blotting法检测caspase-3、Bcl-2及Bax的表达。结果电针治疗后,电针组大鼠神经行为学评分较模型组降低(P0.05);电镜下电针组较模型组核染色质均匀,线粒体数量增加;电针组Bcl-2蛋白表达水平明显高于模型组(P0.01),caspase-3、Bax蛋白表达低于模型组(P0.05)。结论电针曲池、足三里穴可通过线粒体-caspase-3途径抑制缺血周围区皮质神经细胞凋亡。     

TNFα-在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机理研究

目的研究TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机制。方法建立小鼠叶酸诱导肾病模型，运用抗TNF-α多克隆抗体及对照抗体干预治疗，检测小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平，肾小管上皮细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白的表达水平。结果在CD1小鼠叶酸诱导肾病模型中，尿素氮水平显著升高，肾小管上皮细胞坏死和凋亡增加，小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平显著升高，肾皮质组织中Bcl-xL表达水平显著下降，运用抗TNF-α多克隆抗体干预治疗可保持Bcl—xL在肾组织中的表达水平，减少肾小管上皮细胞凋亡，有效减轻小鼠肾功能损害。结论TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病发病机制中具有重要作用，阻断TNF-α是治疗急性肾衰的一种潜在有效手段。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）对糖尿病肾病发生、发展的影响及其作用机制。方法 在单侧肾切除的大鼠腹腔注射链尿佐菌素（STZ）、诱发糖尿病模型,每日灌胃给予ACEI苯那普利（10mg/kg),共12周。采用原位末端标记法检测肾细胞凋亡情况,流式细胞术检测肾皮质Bax和Bcl-2表达,并观察血糖及尿蛋白、BUN、Ccr等反映肾功能的有关指标。结果 糖尿病组较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,Bax和Bcl-2蛋白表达增强,Bax/Bcl-2增高;苯那普利治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少,Bax表达减弱,Bcl-2表达增强,Bax/Bcl-2降低。结论 苯那普利可能通过影响凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

银杏总黄酮对肾缺血再灌注大鼠p-JNK表达的影响

目的观察肾缺血再灌注损伤(IRI)后JNK活化的变化,并探讨银杏总黄酮(TFG)对其影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=12)、缺血再灌注组(IR,n=30)和银杏总黄酮处理组(TFG,n=12)。采用夹闭双侧肾动静脉45min然后松开动脉夹制备肾IRI模型。蛋白免疫印迹检测肾组织中p-JNK的表达,并用细胞凋亡原位末端标记(TUNEL法)检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 IR组肾组织中p-JNK的表达在再灌注10 min开始升高,再灌注30 min达到高峰,再灌注1 h有所降低,再灌注24 h再次升高,同时该时段有大量肾小管上皮细胞凋亡;给予TFG处理,再灌注30 min p-JNK表达明显减弱,再灌注24 h细胞凋亡明显减少。结论 TFG防治肾IRI机制可能与抑制肾组织中JNK磷酸化的程度,减少肾小管上皮细胞凋亡有关。     

NGAL对大鼠肾脏缺血再灌注损伤作用机制的体内研究

目的:观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatisase-associated lipocalin,NGAL)对大鼠缺血再灌注肾损伤(I/R)的作用机制。方法:通过切除一侧肾脏,夹闭对侧肾蒂45min的方法来建立大鼠I/R模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、I/R组、缺血再灌注给药组(NGAL组),对照组、I/R组、NGAL组实验结束时分别用HE染色观察3组动物肾组织病理变化;再灌注24h后测血肌酐(Scr)和尿素氮(Bun),TUNEL观察肾小管上皮细胞凋亡情况,免疫组化检测Bax与激活的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3,CC3)的表达;Western Blot技术检测凋亡蛋白Fas、Bcl-2表达的变化。结果:与I/R组比较,NGAL组Scr、Bun分别为(63.400±11.908vs121.857±17.151)μmol/L、(14.840±2.868vs28.557±6.434)mmol/L,肾小管上皮细胞凋亡数量减少(7.800±1.924vs15.400±3.049);NGAL组肾组织Fas mRNA(2.34±0.51vs6.84±2.34)表达降低、Bax蛋白[(7.440±1.640)%vs(15.456±1.955)%]表达降低、CC3蛋白[(3.171±0.321)%vs(7.291±1.059)%]表达降低、Bcl-2蛋白(6.91±1.64vs5.30±1.48)表达升高(P<0.05)。结论:NGAL对大鼠I/R的肾小管上皮细胞有保护作用,其作用与减少细胞凋亡、改变凋亡蛋白的表达,从而减轻组织损伤,发挥肾脏保护作用有关。     

人参皂甙Rg3对糖尿病肾病大鼠肾组织Bax和B淋巴细胞瘤-2蛋白表达及肾细胞凋亡的影响

目的探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠应用人参皂甙Rg3处理后肾组织Bax、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达变化及肾细胞凋亡情况。方法120只雄性SD大鼠,随机分为模型组、治疗组和对照组各40只。模型组、治疗组腹腔注射质量分数2%链尿佐菌素溶液制备DN模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后,治疗组将0.5 mg/kg人参皂甙Rg3与生理盐水混合溶液灌胃,模型组、对照组大鼠给予等量生理盐水灌胃,均1次/d,连续28 d。疗程结束后大鼠麻醉处死,取肾组织行病理检查,采用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡,Western blot法检测肾组织Bax、Bcl-2蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测肾组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA相对表达量。结果对照组大鼠肾组织系膜结构、肾小管均正常,小管膜完整光滑,间质未增生;模型组大鼠肾组织系膜结构异常,间质严重增生,肾小管萎缩严重,小管膜粗糙;与模型组比较,治疗组大鼠肾组织系膜细胞增生减轻,肾小管萎缩减少,纤维组织减少;模型组、治疗组、对照组大鼠肾细胞凋亡率[(0.91±0.23)%、(0.56±0.14)%、(0.21±0.03)%]依次降低(P<0.05);模型组、治疗组、对照组肾组织Bax蛋白相对表达量(1.79±0.31、2.73±0.24、3.26±0.12)、Bcl-2蛋白相对表达量(1.42±0.12、2.59±0.25、4.40±0.31)、Bax mRNA相对表达量(0.35±0.02、1.45±0.91、3.12±1.17)、Bcl-2 mRNA相对表达量(1.34±0.87、1.73±0.67、3.91±0.75)依次增高(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3对DN大鼠有显著治疗作用,可明显改善大鼠肾组织形态,降低肾细胞凋亡率,上调Bax、Bcl-2表达。     

阿霉素肾病大鼠肾小管MMP-2、TIMP-2的免疫组织化学观察

【摘　要】目的 探讨MMP－2和TIMP－2在阿霉素肾病大鼠肾小管中的作用。方法 采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素7. 5 mg/kg建立阿霉素肾病模型，免疫组织化学检测正常对照组、阿霉素肾病组肾组织MMP－2及TIMP－2的表达变化。结果 阿霉素肾病组大鼠肾小管上皮细胞MMP－2和TIMP-2的表达明显下降,与对照组相比差异显著( P < 0. 01)。结论 MMP－2和TIMP－2在阿霉素肾病的发病过程中可能起重要的作用。     

低剂量电离辐射对Ⅰ型糖尿病大鼠海马神经元细胞凋亡和氧化损伤的影响

目的探讨低剂量电离辐射(LDR)对Ⅰ型糖尿病模型大鼠海马神经元细胞凋亡和氧化损伤的影响,阐明二者的关系。方法利用链尿佐菌素(STZ)建立Wistar大鼠糖尿病模型(DM)后,造模完成后分为正常组、模型组、模型+25mGy、模型+50mGy和模型+75mGy组,每组20只。给予25、50和75mGy隔日照射,共计12次,继续饲养4周后麻醉后处死大鼠,取出海马组织利用生化法检测海马中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力;并利用流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)含量,并利用Western blot检测Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达。结果Ⅰ型DM模型血糖显著高于正常对照组,而LDR可以显著降低模型大鼠的血糖(P0.05)。同时,与正常组比较,DM模型海马细胞ROS水平和MDA含量显著增加(P0.05),SOD和CAT活力未见显著变化;LDR照射后DM模型海马中ROS水平和MDA含量显著降低(P0.05),但对SOD和CAT活力仍处于较低水平;另外,DM模型海马细胞凋亡百分比较正常对照组显著增加(P0.05),Bcl-2蛋白表达降低,Bax和caspase-3蛋白表达增加,而LDR照射能够降低DM大鼠海马神经细胞的凋亡百分比,且升高Bcl-2蛋白表达,降低Bax和caspase-3蛋白表达。结论Ⅰ型糖尿病大鼠海马神经元细胞氧化损伤和凋亡增加,而LDR能显著降低这种作用,且涉及到Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的表达。     

黄芩素通过抗氧化及调节细胞内钙离子浓度抑制大鼠缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡

背景:黄芩素对缺氧复氧损伤的心血管有保护作,但机制至今不清。目的:探讨中药黄芩素对心肌细胞缺氧/复氧损伤导致心肌细胞凋亡的保护作用机制。方法:体外培养大鼠乳鼠心肌细胞培养。实验分3组:正常对照组为正常培养的心肌细胞未做处理;缺氧/复氧组为应用缺氧/复氧方法诱导心肌细胞凋亡损伤;黄芩素预处理组为经黄芩素预处理30min后经缺氧/复氧诱导的心肌细胞。通过检测培养基上清液中乳酸脱氢酶活力检测细胞损伤程度及黄芩苷保护作用;应用原位末端标记细胞法标记细胞后,流式细胞检测心肌细胞凋亡率;应用免疫印迹方法检测心肌细胞凋亡蛋白Bax与抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平;应用Fura-2-AM负载心肌细胞,实时检测心肌细胞内Ca2+浓度变化。结果与结论:与正常对照组相比,缺氧/复氧组上清液乳酸脱氢酶活性、心肌细胞凋亡率、Bax蛋白含量、心肌细胞Ca2+浓度均增加(P<0.05),Bcl-2蛋白含量降低(P<0.05)。与缺氧/复氧组相比,黄芩素预处理组乳酸脱氢酶含量、心肌细胞凋亡率、Bax蛋白含量及心肌细胞Ca2+浓度均降低(P<0.05),Bcl-2蛋白含量增加(P<0.05)。证实黄芩素能抑制缺氧/复氧导致的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抗氧化与调节心肌细胞内钙离子浓度有关     

冬虫夏草菌粉对糖尿病大鼠对比剂肾损伤的影响

目的观察冬虫夏草菌粉对糖尿病大鼠对比剂肾病的影响,探讨其可能的肾保护机制。方法将100只雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)制备成糖尿病模型,造模成功大鼠84只,随机分为对照组(N组),对比剂肾病组(M组),冬虫夏草干预组(C组),普罗布考干预组(P组,阳性对照组)4组。糖尿病造模饲养9周后,C组大鼠给予冬虫夏草菌粉(3g/kg/d)灌胃,P组给予普罗布考(500mg/kg)灌胃,其余各组给予等量的生理盐水灌胃,连续7天;第8天经尾静脉注射碘克沙醇注射液(2.0g iodine/kg)制备CIN模型,于注射对比剂前及注射24h后,血标本检测Scr、BUN;尿标本检测NGAL、KIM-1。开腹后采集双侧肾脏,取左肾用于病理;右肾用于Western blotting检测抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白在肾内的表达量变化水平。结果(1)与M组相比,C、P组BUN、Scr均明显减低(P均0.05)。(2)与M组比较,C、P组肾脏Bax、caspase-3表达水平降低,Bcl-2表达升高(P均0.05)。结论冬虫夏草可减轻糖尿病大鼠CIN的早期肾脏损伤,其机制可能与下调Bax、caspase-3表达,上调Bcl-2/Bax比值,抗细胞凋亡有关,且效果与普罗布考相当。     

胰岛素强化治疗拮抗烫伤大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的 探讨大鼠重度烫伤后胰岛素强化治疗拮抗心肌细胞凋亡的作用及机制.方法 将18只SD大鼠按随机数字表法分为假伤组、烫伤组和胰岛素强化治疗组(强化治疗组),每组6只.制作30％总体表面积(TBSA)Ⅱ度烫伤模型及胰岛素强化治疗模型.伤后6h取大鼠左室心肌组织,采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,用免疫组化和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分别观察3种凋亡相关基因天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果 与假伤组比较,烫伤后心肌凋亡细胞明显增多[(13.1±3.4)％比(0.6±0.4)％,P＜0.01];caspase-3、Bax的蛋白表达明显增高(免疫组化caspase-3:13.72±4.13比1.36±0.95,Bax:29.64±5.42比2.24±1.04; Western blotting caspase-3:5.72±2.13比1,Bax:4.64±1.42比1),而Bcl-2表达水平显著降低(免疫组化:3.39±1.52比8.01±2.56;Western blotting:0.69±0.42比1,均P＜0.01).经胰岛素强化治疗后,心肌细胞的凋亡率较烫伤组明显降低[(6.7±1.8)％比(13.1±3.4)％,P＜0.01],3种凋亡相关基因的蛋白表达水平正好与烫伤组的变化相反(免疫组化caspase-3:8.88±3.36比13.72±4.13,Bax:14.43±3.69比29.64±5.42,Bcl-2:8.61±3.72比3.39±1.52;Western blotting caspase-3:2.18±0.86比5.72±2.13,Bax:2.87±1.35比4.64±1.42,Bcl-2:3.57±1.70比0.69±0.42,P＜0.05或P＜0.01).结论胰岛素强化治疗可能通过调节caspase-3、Bax和Bcl-2 3种细胞凋亡相关基因的表达,对烫伤后心肌细胞发挥抗凋亡作用.     

肾茶总黄酮调节肾缺血再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用和机制

目的:探究肾茶总黄酮调节实验大鼠肾缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞凋亡的作用和机制。方法:选用60只雄性实验SD大鼠,采用信封法随机编码分为对照组、模型组、肾茶总黄酮小剂量治疗组和肾茶总黄酮大剂量治疗组,每组15只。模型组、肾茶总黄酮小剂量治疗组和肾茶总黄酮大剂量治疗组均采用手术摘除实验大鼠右侧肾脏,持续阻断左肾动脉1 h后恢复灌注的方法建立急性肾缺血再灌注损伤模型,采用酶偶联法测定模型大鼠血肌酐、尿素氮的变化,确认模型建立成功;对照组、模型组以0.9%氯化钠溶液灌胃,肾茶总黄酮小剂量治疗组和肾茶总黄酮大剂量治疗组以肾茶总黄酮溶液灌胃(大剂量组400 mg/kg、小剂量组100 mg/kg),治疗4 d;采用DNA断裂的原位末端标记法检测大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数;取肾组织匀浆后,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶,化学比色法测定一氧化氮合成酶,硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量。结果:模型组肌酐、尿素氮水平与对照组相比较显著升高(P0.05),显示造模成功;经肾茶总黄酮大剂量治疗后,肾茶总黄酮大剂量治疗组肌酐、尿素氮、肾小管上皮细胞凋亡指数、一氧化氮合成酶和丙二醛均显著降低(P0.05),超氧化物歧化酶显著升高,与模型组相比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:肾茶总黄酮能够减轻肾缺血再灌注损伤大鼠的急性肾损伤,这种作用可能通过抑制肾小管上皮细胞的凋亡来实现,其机制可能是减少大鼠肾组织内自由基生成,增强其抗自由基损伤的能力。