肝细胞癌中癌-睾丸抗原SSX2与SCP-1mRNA表达的研究

目的 检测癌-睾丸抗原滑膜肉瘤X断裂点2（SSX2）与联会复合体蛋白1（SCP-1）在肝细胞癌组织中的表达.方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对45例肝细胞癌组织和相应癌旁肝组织中SSX2与SCP-1的mRNA进行检测.结果 在肝细胞癌组织中SSX2 mRNA表达阳性率28.9％（13/45）,SCP-1mRNA表达阳性率22.2％（10/45）,相应的癌旁肝组织均无表达,组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.SSX2与SCP-1的mRNA表达与AFP阳性率、HbsAg阳性率、肿瘤大小、有无肝硬化情况和病理分级等无相关性（P＞0.05）.SSX2 mRNA与SCP-1 mRNA表达的相关性分析提示两者无相关性（P＞0.05）.结论 SSX2与SCP-1在HCC中呈低频率的表达.     

癌-睾丸抗原SSX基因在肝细胞癌中mRNA水平的表达及意义

目的观察癌-睾丸抗原SSX基因在肝癌组织和肝癌细胞株中mRNA水平的表达情况,探究该基因家族的表达与肝癌的诊断、治疗的关系,进而评价该基因家族作为肝癌免疫治疗靶点和多价肿瘤疫苗研制的可行性。方法对28例肝细胞癌和癌旁组织、3例肝硬化组织以及肝癌细胞株7404、HePG2、7721采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法检测癌-睾丸抗原SSX基因在mRNA水平的表达情况。结果SSX-1、SSX-2、SSX-3在肝癌癌旁组织和肝硬化组织中均不表达。在收集的肝细胞癌组织中SSX-1、SSX-3基因表达阳性率较高（53．6％、57．1％）,SSX-2表达阳性率相对较低（35．7％）,其中SSX-1、SSX-2、SSX-3三种基因共同表达的有6例（21．4％）,至少有两种SSX基因表达的有23例（82．1％）。结论癌-睾丸抗原某些SSX基因在肝细胞癌中高频率表达与肝癌的发生、发展有关,同时基因的共同表达结果又为多价瘤苗的研究提供了实验方向。     

肿瘤睾丸抗原在肝细胞癌中的研究进展

肿瘤睾丸抗原(CTA)是一组肿瘤相关抗原,在不同癌症中均有表达,而在睾丸除外的正常组织中不表达.由于CTA呈现限制性表达模式,并具有引起患者产生免疫应答的能力,使CTA成为肿瘤免疫治疗中有应用前景的一类抗原.有研究表明在肝细胞癌(HCC)患者组织和外周血样品中存在CTA的表达,而癌旁组织和正常肝组织中均未表达,为CTA成为HCC患者免疫治疗的潜在靶向标志物奠定了基础.本综述旨在探讨CTA有望作为HCC生物标志物和免疫治疗靶点的临床意义.     

膀胱癌肿瘤/睾丸抗原相关基因的表达

目的：检测多种肿瘤／睾丸抗原相关基因在膀胱癌中的表达状况．方法：用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对33例膀胱癌患癌组织和癌旁正常膀胱组织进行MA-GEA1,SSX2,NY-ESO-1,MAGEC1,MAGEE1和HAGE的mRNA表达检测．随机抽取每种CTA基因的3例阳性RT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定．结果：33例膀胱癌标本中MAGEA1,SSX2,NY-ESO-1,MAGEC1,MAGEE1和HAGE的表达频率分别为21．2％(7／33),39．4％(13／33),69．7％(23／33),42．4％(14／33),36．4％(12／33)和24．2％(8／33)．正常膀胱组织中6种CTA基本无表达．肿瘤组织中6种基因至少有1种表达的频率是75．8％(25／33),两种或两种以上同时表达几率是69．7％(23／33)．测序结果表明RT-PCR产物确为CTA目的基因序列．结论：CTA在膀胱癌主动免疫治疗中是一种合适的、有前景的攻击靶点．同时,多种CTA的联合表达为多效价CTA疫苗在膀胱癌免疫治疗中的应用提供了理论基础．     

肝细胞癌中BLU基因甲基化状态

目的了解肝细胞癌（HCC）中BLU基因的甲基化状态及临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术，检测50例HCC癌组织及相应的癌旁组织，4个HCC细胞系，8例肝血管瘤旁和4例供肝组织，了解BLU基因在上述组织中的甲基化状态，并分析其与临床资料间的相关性。结果4例供肝组织均未发生甲基化，8例肝血管瘤旁组织有1例发生甲基化，4个HCC细胞系有3个出现甲基化。50例HCC癌组织及其相应的癌旁组织中，分别检测到33例（66％）、18例（36％）发生甲基化；癌组织与癌旁组织甲基化率比较，差异有显著性（P=0．003）；肝功能Child B级患者甲基化率高于Child A级患者（P=0．041）；甲基化阳性患者的肿瘤直径大于阴性患者（P=0．004）；甲基化阳性患者的半年无瘤生存率低于阴性患者，但差异无显著性（P=0．058）。结论BLU基因甲基化是HCC中的频发事件，可能参与HCC的发展。     

SOAT1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察甾醇O-酰基转移酶1（SOAT1）在肝细胞癌（HCC）组织及癌旁组织中的表达,探索其与患者预后及临床病理特征之间的相关性。方法：从癌症基因组图谱（TCGA）数据库收集HCC数据集,下载SOAT1 mRNA表达谱及预后资料,比较SOAT1 mRNA在50例正常肝组织与374例HCC组织中的表达,分析表达量与患者预后相关性。收集53例HCC患者石蜡组织标本,采用免疫组织化学方法检测癌和癌旁组织中SOAT1的蛋白表达水平,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果：TCGA数据库数据分析显示,与癌旁正常组织比较,SOAT1在HCC中表达显著升高（P＜0.01）。预后生存分析发现SOAT1高表达患者的5年生存率较低（P＜ 0.05）。免疫组织化学结果显示,与癌旁组织相比,HCC组织中SOAT1蛋白表达量显著升高（P＜0.05）。癌组织中SOAT1蛋白表达量与肿瘤临床分期及微血管癌栓形成相关（P＜0.05）。结论：SOAT1在HCC组织中表达增高,并与HCC癌患者的临床病理特征密切相关,其表达与肿瘤恶性程度高度相关。     

肝细胞肝癌中OY-TES-1基因mRNA表达水平的研究

目的 检测OY-TES-1基因mRNA在肝细胞肝癌(HCC)与癌旁组织中的表达水平.方法 建立实时定量PCR方法,检测37例HCC及配对癌旁组织中目的 基因OY-TES-1及管家基因HPRT的表达,OY-TES-1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示,应用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析.结果 ①经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为72.97%(27/37),癌旁阳性率为64.86%(24/37),有17对HCC及癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织两者的定性表达无差异(P＞0.05);②在37例HCC及配对癌旁组织中,HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的癌旁组织(P＜0.05),但与HCC患者的年龄、性别等临床资料无相关.结论 OY-TES-1 mRNA在HCC中有较高的表达频率,其表达水平高于对应的癌旁组织,它有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原,OY-TES-1蛋白在肝癌及癌旁组织中的表达及相关意义尚值得做进一步的研究.     

应用组织芯片技术检测GPC3蛋白在肝细胞癌及其它肿瘤中的表达

目的 研究GPC3蛋白在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及其他人类常见肿瘤组织中的表达。方法 应用组织芯片及免疫组化技术检测36例HCC组织、33例HCC癌旁组织以及其他人类常见肿瘤组织及其癌旁组织中GPC3蛋白的表达。结果 ①GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌、癌旁慢性浅表性胃炎组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌组织中无表达;②36例HCC组织及33例HCC癌旁组织中GPC3蛋白的表达率分别为66.7% (24/36),3.0%（1/33）,二者之间差异有显著性（P＜0.001）;③HCC组织中GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、病理分级无相关性（P＞0.05）。结论 GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌中表达沉默,GPC3是一个值得期待的多种肿瘤特异性标志物。     

肝细胞癌中Thr157磷酸化p27^kip1的表达和意义

目的研究肝细胞肝癌（HCC）组织中157号位苏氨酸磷酸化的p27kip1（p-27kip1Thr157）和增殖细胞核抗原（PCNA、Ki67）的表达,探讨其间相互关系及与临床病理的关系,并分析其与临床预后的关系。方法免疫组化方法检测51例HCC及其癌旁组织、10例肝血管瘤旁肝组织中P-p27^kip1Thr157和Ki67蛋白的表达。免疫印迹技术检测8例HCC及其癌旁肝新鲜组织中P-p27^kip1Thr157和PCNA的表达情况。结果 （1）P-p27^kip1Thr157在HCC组织对应的癌旁组织和血管瘤旁肝组织低或缺失表达,PCNA在HCC中显著高表达（P〈0.001）。（2）在HCC中,P-p27^kip1Thr157的表达强度与肿瘤病理分级明显相关（P〈0.05）,Ki67的表达强度与HCC的分化程度、有无坏死和AFP值均明显相关（均P〈0.05）;HCC中P-p27^kip1Thr157与Ki67表达成显著正相关（r=0.604,P〈0.001）。（3）Kaplan-Meier和多因素COX回归分析,显示P-p27^kip1Thr157可作为HCC患者显著的一个独立的预后指标（P〈0.05）。结论 P-p27^kip1Thr157可能在HCC的发生发展中发挥重要的作用并有一定的预后评估价值。     

黑色素瘤抗原—1基因在胃癌组织中的表达

目的：检测黑色素瘤抗原－1（MAGE－1）基因在胃癌组织中的表达，为应用MAGE－1基因产物对胃癌病人进行特异性抗肿瘤免疫治疗提供理论依据。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测30例胃癌组织及相应癌旁组织中MAGE－1基因的表达，并对1例RT－PCR阳性扩增产物进行DNA序列测定。结果：30例胃癌组织标本中有14例（46．7％）表达MAGE－1基因，而相应的癌旁组织均不表达MAGE－1，两组比较差异有显著性（P＝0．001）；DNA序列测定证实1例RT－PCR扩增产物中的目的基因片段为MAGE－1cDNA序列。结论：MAGE－1基因在胃癌组织中有较高表达，这使得以该基因编码蛋白作为疫苗用于胃癌的免疫治疗成为可能。     

MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达

目的 研究MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达.方法 利用RT-PCR检测28例肝细胞癌及其相对应的癌旁肝组织中MTLC mRNA的表达.结果 28例肝细胞癌组织中,24例MTLC mRNA表达下调,其下调与肝细胞癌的分化程度无关.结论 本结果提示MTLC基因在肝细胞癌组织中表达下调,进一步说明MTLC表达降低可能与肿瘤发生发展关系密切.     

hOGG1和PARP在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的 检测DNA修复酶hOGG1及PARP在原发性肝癌及肝硬化组织中的表达,探讨hOGG1和PARP在HCC和肝硬化组织中的表达特点及其与临床病理的关系.方法 应用EnVision免疫组化法检测41例非HCC正常肝组织、99例HCC组织、51例HCC癌旁肝硬化组织中hOGG1和PARP表达情况.结果 在HCC组织中hOGG1和PARP在细胞核与细胞质中均有表达,其中hOGG1细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之间依次增高(P＜0.001);PARP细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之同依次降低(P＜0.001).多因素分析显示:hOGG1蛋白在细胞核表达与ALT有关(相对危险度为1.022,P=0.041),hOGG1蛋白在细胞浆表达与总胆红素有关(相对危险度为1.155,P=0.018),PARP蛋白在细胞浆表达与外周血白细胞数(相对危险度为0.757,P=0.037)有关.结论 在HCC发生过程中hOGG1蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而增强,PARP蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而降低,可能反应了从肝硬化到肝癌进程中肝细胞内氧化应激状态的改变.     

蛋白激酶PRKX在肝癌组织中的表达及意义

目的 研究PRKX在肝癌组织中的表达和临床意义. 方法 收集36例肝癌患者肝癌组织(肝癌组)和癌旁肝组织(对照组).分别采用RT-PCR和Western blot的方法检测PRKX mRNA和蛋白在肝癌组和对照组中的表达. 结果 RT-PCR和Western blot结果显示,PRKX mRNA和蛋白在人肝组织有表达,且在肝癌组的表达显著高于对照组(mRNA肝癌组／mRNA对照组=1.48;蛋白肝癌组／蛋白对照组=1.14). 结论 PRKX在肝癌组织表达高于癌旁肝组织,可能与肝癌发生、发展相关.     

脆性位点基因WWOX mRNA在肝细胞癌中的表达及临床病理意义

目的 检测WWOX野生型mRNA及其异常转录剪接体在肝细胞癌中的表达情况,并分析其临床病理意义.方法 采用Real-time RT-PCR和RT-PCR方法检测44例肝细胞癌(HCC)、相应癌旁肝组织和5例正常肝组织中WWOX野生型mRNA及转录剪接体Variant1、Variant4及Variant6的表达,同时分析...     

原发性肝癌组织中陷井受体3基因表达与扩增的临床意义

目的　观察原发性肝癌组织中陷井受体 3(DcR3)基因的表达和扩增 ,探讨该基因在肝癌组织中过度表达的原因 ,分析临床病理学因素在肝癌DcR3基因表达和扩增中的作用。方法　对4 8例病理学证实的原发性肝癌患者的组织 ,利用RT -PCR检测癌组织及癌旁组织DcR3基因mRNA表达 ,荧光定量PCR检测该基因的扩增倍数 ,统计分析肝癌组织中DcR3基因表达与扩增的相关性 ,比较不同临床病理学类型肝癌中该基因表达及扩增的差异。结果　 4 8例肝癌组织中DcR3基因mRNA阳性表达 2 9例 ,阳性率为 6 0 4 % ;癌旁组织无阳性表达。mRNA表达与肿瘤大小、临床分期及肿瘤的浸润和转移有关 (P <0 0 5 )。mRNA阳性表达组的基因扩增倍数为 1 5 3± 0 82 ,阴性组为 0 75± 0 33,其差异有显著意义 (P <0 0 1)。 4 8例患者的DcR3基因扩增倍数为 0 18～ 3 86 ,平均值为 1 2 2± 0 77,扩增倍数超过 2的患者共 7例 ,占 14 6 %。不同扩增倍数肝癌患者该基因mRNA的表达差异有显著意义 (P <0 0 1) ;不同临床病理学特征肝癌间DcR3基因的扩增倍数差异无显著意义 (P >0 0 5 )。序列分析发现其mRNA序列与源序列有 3个碱基改变。结论　 (1)原发性肝癌组织中存在DcR3基因的高表达 ,对应的癌旁组织中未见表达 ;(2 )原发性肝癌组织中存在DcR3基     

SUMO-1基因在肝癌中的表达及意义

目的 研究肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达及意义.方法 采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达.结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在肝癌传代细胞SMMC-7721、Hep3B、HepG2及肝癌标本中均明显高表达,而癌旁肝组织中SUMO-1基因明显低表达,肝癌组织和癌旁肝组织中SUMO-1表达差异有统计学意义(P<0.001).结论 SUMO-1基因在肝癌中高表达,SUMO-1可能为肝癌诊断和治疗中的一个靶点.     

肝癌患者高表达神经细胞黏附分子 L1预后差

目的：神经细胞黏附分子 L1(L1 CAM)在肝癌中的表达及其与临床预后的关系。方法对110例肝癌样本用Western blot 及 qRT-PCR 方法检测 L1CAM 蛋白和 mRNA 的表达,分析了 L1CAM 表达与肝癌患者总体生存率的关系。结果肝癌组织 L1CAM 蛋白、mRNA 表达水平显著高于对应非肿瘤组织(P <0.01);在中-低分化肝癌患者 L1CAM 表达量高于高分化肝癌患者(P <0.01);L1CAM mRNA 的表达与肿瘤的分化程度、TNM 分期密切相关(P <0.05);采用 Kaplan-Meier 法生存分析,高表达 L1CAM 患者预后差(P <0.01)。结论L1CAM 与肝癌的发生、发展具有相关性,或许可作为评估肝癌患者预后的指标之一。     

乳腺癌中RIZ1的表达及其临床意义初探

目的研究RIZ1基因mRNA表达的改变与乳腺癌发生及与患者相关临床和病理特征之间的关系。方法采用半定量RT-PCR方法检测34例乳腺癌标本及相应癌旁组织、15例乳腺良性肿瘤RIZ1基因mRNA的表达状况，并结合相关指标进行分析。结果RIZ1基因mRNA在乳腺癌中的表达明显低于癌旁乳腺组织与乳腺良性肿瘤组织，差异均有显著性（均P〈0．05）。RIZ1基因mRNA在乳腺癌中的表达与年龄、肿瘤TNM分期、淋巴结转移、激素受体（ER）状况无相关关系（均P〉0．05）。结论：RIZ1基因mRNA表达降低可能与乳腺癌的发生相关。     

SPP-1、GDF-15和CXCL-1在人小肝癌中表达的初步研究

目的:针对前期应用基因芯片(Affymetrix Rat Genome 230.2.0)筛选出的大鼠早期肝癌中高表达的人同源分泌蛋白基因SPP-1、GDF-15和CXCL-1,定量验证其在人小肝癌中mRNA和血清蛋白的表达水平,并探讨其临床应用价值。方法:应用实时定量PCR和双抗体夹心法ELISA,检测15例小肝癌及正常肝脏组织(癌旁正常肝脏组织)的mRNA水平及对应小肝癌血清和正常人血清中的蛋白表达水平。结果:①SPP-1、GDF-15和CXCL-1基因在小肝癌组织中较对照组表达显著上调,其差异有统计学意义(P<0.05);②SPP-1血清蛋白检测值与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);GDF-15血清蛋白含量在小肝癌组中表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小肝癌组中CXCL-1血清蛋白含量较正常对照组表达下调,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①NF-κB信号通路基因(CXCL-1)、P53信号通路基因(GDF-15)和SPP-1基因在人小肝癌组织中高表达,可能与肝癌发生的早期过程相关;②分泌性蛋白GDF-15和CXCL-1显示出小肝癌筛选诊断的潜在价值。