灵芪胶囊含药血清对K562白血病细胞的诱导凋亡作用

[目的]观察灵芪胶囊含药血清在体外对K562白血病细胞凋亡的影响.[方法]采用血清药理学方法制备灵芪胶囊含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,采用流式细胞仪(FCM)及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡情况.[结果]不同浓度灵芪胶囊含药血清能够诱导K562细胞的凋亡,且凋亡率随着剂量的增加而增大,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见典型的DNA梯形带形成.[结论]灵芪胶囊含药血清具有诱导细胞凋亡的作用,其作用强度与时间-浓度呈正相关.灵芪胶囊含药血清对K562细胞发生细胞毒作用可能与诱导K562细胞凋亡有关.     

灵芪胶囊含药血清对人红白血病K562细胞增殖抑制作用影响的实验研究

1实验材料人红白血病K562细胞株,购自中科院上海生物细胞所。灵芪胶囊由黄芪、山慈菇、莪术、人参等组成,所需药材均购自黑龙江中医药大学附属第一医院药局,并经本校药学院生药鉴定室鉴定。浓缩煎液成2g/ml的生药浓度,灭菌后冷藏备用;脲嘧啶替加氟片,齐鲁制药有限公司,批号0502     

黄瓜香含药血清对K562白血病细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察黄瓜香含药血清在体外对K562白血病细胞增殖及凋亡的影响.方法:采用血清药理学方法制备黄瓜香含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,采用MTT比色法观察黄瓜香含药血清对K562细胞增殖的影响,采用wright-Giemsa染色观察肿瘤细胞形态学变化.采用caspase-3活性检测试剂盒检测K562细胞内caspase-3的酶活力水平.结果:不同浓度黄瓜香含药血清对K562细胞增殖具有抑制作用,并呈剂童依赖关系.高剂量黄瓜香含药血清对K562细胞形态学有明显的影响.在黄瓜香含药血清处理K562细胞24 h后,caspase-3活性均显著增加,随黄瓜香含药血清浓度的升高呈现较好的剂量依赖性.结论:黄瓜香含药血清具有抑制K562白血病细胞增殖及诱导凋亡的作用,其作用强度与时间一浓度呈正相关.其作用机理可能与其直接细胞毒作用及提高caspage-3酶的活性有关.     

姜黄素对白血病K562细胞增殖抑制作用的研究

目的:探讨姜黄素(curcumin)对白血病K562细胞增殖抑制的作用机制。方法:采用MTT法测定curcumin对K562细胞增殖的抑制作用;分别应用AO/EB和MDC荧光染色观察给药后凋亡和自噬的发生;检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-MA后curcumin抑瘤作用的变化。结果:Curcumin可显著抑制K562细胞生长,诱导其发生自噬和凋亡;给药后阻断自噬其细胞毒性作用减弱。结论:curcumin能诱导白血病K562细胞的自噬和凋亡从而提高了抗癌的敏感性。     

阿胶含药血清对白血病K562细胞P53基因表达的影响

目的:观察阿胶含药血清对K562细胞p53基因表达的影响.方法:采用阿胶含药血清作用于体外培养的白血病K562细胞,流式细胞仪检测癌细胞P53的表达变化.结果:阿胶可下调肿瘤细胞P53基因的表达.结论:阿胶对K562细胞诱导凋亡的机理可能是通过下调P53的表达,诱导细胞中止分裂转入凋亡而取得效果.     

清毒饮对白血病瘤株K562增殖动力学的影响

目的：通过观察清毒饮对白血病瘤株K562增殖动力学的影响，探讨清毒饮治疗血液肿瘤的疗效机理。方法：血清药理学方法进行细胞毒试验及增效试验，MTT法检测A590值，以每组测得先密度平均值，作为药物效应值，计算细胞存活率。结果：清毒饮低、中、高3个剂量组在细胞毒效价上存在量效与时效差异，清毒饮配合阿霉素共同作用于K562瘤株，同样存在量效与时效差异。结论：清毒饮对K562细胞增殖动力学确有较大影响，是配合化疗的有效药物。     

独角莲含药血清对肿瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用的研究

目的：观察独角莲含药血清在体外对K562白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用血清药理学方法制备独角莲含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,采用MTT比色法观察独角莲含药血清对K562细胞增殖的影响;采用流式细胞仪（FCM）及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡情况。结果：不同浓度独角莲含药血清对K562细胞增殖具有抑制作用,并呈剂量依赖关系。当含药血清作用96h后,其抑制作用开始减弱。流式细胞仪检测显示,独角莲含药血清能够诱导K562细胞的凋亡,且凋亡率随着剂量的增加而增大,与空白对照组比较（P〈0.01）;DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见典型的DNA梯形带形成。结论：独角莲含药血清具有抑制K562白血病细胞增殖、促进细胞分化和诱导细胞凋亡的作用,其作用强度与时间-浓度呈正相关。独角莲含药血清对K562细胞发生细胞毒作用可能与诱导K562细胞凋亡有关。     

瓜蒌含药血清对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的研究瓜蒌水煎剂含药血清对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用,探讨其抗癌作用机制。方法采用血清药理学方法制备瓜蒌含药血清,MTT法检测含药血清对HeLa细胞生长的抑制作用,Wright’s-Giemsa染色和吖啶橙-EB染色在倒置显微镜和荧光显微镜下观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA Ladder。结果 HeLa细胞经不同剂量的瓜蒌含药血清作用24,48 h后,细胞体外抑制作用明显,呈量效、时效关系;倒置显微镜观察可见HeLa细胞膜皱缩,细胞核固缩,核染色质边缘化,并出现凋亡小体;荧光显微镜下可见晚期的凋亡细胞被染成红色,细胞固缩成球状;琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞发生了DNA断裂,呈梯状条带。结论瓜蒌含药血清对HeLa细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡相关。     

茅莓及其含药血清对K562白血病细胞抑制作用的实验研究

目的：观察茅莓及其含药血清体内及体外对K562细胞的抑制增殖作用。方法：通过建立荷白血病瘤裸鼠模型,观察不同浓度的茅莓水煎液对荷白血病瘤裸鼠瘤体体积、重量、组织病理学改变的影响;通过半固体琼脂培养观察不同浓度的茅莓含药血清对K562细胞集落生长的抑制作用;通过MTT法观察不同浓度的含药血清对K562白血病细胞的抑制增殖作用。结果：茅莓水煎液高、中、低剂量组瘤体体积、瘤重均较模型对照组明显减少;茅莓水煎液组及阿糖胞苷（Ara—c）组光镜下可见多个坏死灶,瘤细胞肿胀、破裂,细胞核溶解,消失等现象。终浓度为10％和20％的含药血清做琼脂半固体集落培养,显示随着浓度增加,K562细胞集落形成明显减少,抑制作用呈刺量依赖性,MTT法显示终浓度10％和20％含药血清能明显抑制K562细胞增殖。结论：茅莓在荷白血病瘤裸鼠体内具有显著抑制瘤体生长的作用,在一定浓度下,其含药血清对K562细胞也有明显的抑制增殖作用。     

升血颗粒含药血清对人白血病K562/ADR细胞多药耐药的逆转作用

目的:观察升血颗粒(PG)含药血清对人白血病K562/ADR细胞多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制。方法:采用MTT法测定细胞的药敏性及耐药逆转性,应用流式细胞仪检测非细胞毒性的含药血清处理后K562/ADR细胞内阿霉素(ADM)的浓度。结果:低、中、高剂量含药血清对K562/ADR细胞无明显细胞毒性。低、中、高剂量含药血清作用后,ADM对K562/ADR细胞的半数抑制浓度(I C50)显著下降,逆转倍数分别为1.34、1.71、1.82倍;ADM外渗试验显示,低、中、高剂量含药血清处理后K562/ADR细胞内ADM浓度显著增加,增加倍数分别为1.41、1.67、2.04倍。结论:升血颗粒含药血清对人白血病K562/ADR细胞耐药性有一定的逆转作用。     

青蒿琥酯对人慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响

目的研究中药青蒿琥酯体外诱导K562细胞凋亡的作用及其Fas/FasL蛋白的表达。方法采用MTT法、光学显微镜、透射电镜技术、流式细胞术对青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡进行了系统观察,并应用流式细胞术检测了Fas/FasL蛋白表达水平的改变。结果青蒿琥酯抑制K562细胞的增殖,IC50值为12.41μg/ml,其有时间、剂量-效应关系;50μg/ml的青蒿琥酯可诱导K562细胞凋亡,且具有时间-效应关系,同时上调K562细胞Fas蛋白的表达,下调FasL的表达。结论青蒿琥酯可诱导K562细胞凋亡,Fas/FasL表达的改变可能是青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡的机制之一。     

鬼臼酰肼对白血病K562细胞株作用的实验研究

目的:研究鬼臼毒素衍生物鬼臼酰肼对K562白血病细胞的抑制增殖、诱导细胞凋亡作用.方法:采用集落形成实验、MTT比色法观察鬼臼酰肼对K562白血病细胞增殖的影响;流式细胞仪等技术手段研究鬼臼酰肼对K562细胞凋亡的影响.结果:鬼臼酰肼能抑制K562白血病细胞增殖,与对照组相比有显著性差异(P＜0.01),抑制作用与剂量呈显著性正相关.鬼臼酰肼可诱导K562细胞的凋亡,在5.0 μg/ml处理48 h,鬼臼酰肼组凋亡百分率33.5%.结论:鬼臼酰肼具有抗肿瘤活性,鬼臼毒素衍生物的不同结构对抗肿瘤活性有一定影响.     

雄黄诱导K562细胞凋亡的研究

目的检测雄黄诱导Ｋ５６２细胞的能力。方法应用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪（ＦＣＭ）检测细胞凋亡。利用ＦＣＭ分析细胞周期并测定Ｋ５６２细胞线粒体膜ＡＰＯ２．７蛋白表达。结果雄黄可以诱导Ｋ５６２细胞产生凋亡现象,并导致Ｓ期细胞降低。结论雄黄具有诱导Ｋ５６２细胞凋亡的作用     

补骨脂素加长波紫外线对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562作用的研究

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562的作用。方法以NB4、HL-60、K562细胞株为研究对象,以细胞抑制率、凋亡率及在电镜下细胞超微结构改变为检测指标,观察PSO加波长360nm的UVA对人白血病细胞株的影响,并分析各因素间的交互作用。结果当PSO浓度均为80μg/ml,UVA照射时间分别为10min、15min和15min时,NB4、HL-60、和K562细胞的抑制率分别达峰值;当PSO浓度分别为40μg/ml、80μg/ml和80μg/ml,UVA照射时间为10min、15min和15min时,NB4、HL-60和K562细胞的凋亡率达峰值。不同PSO浓度、不同UVA照射时间对不同白血病细胞株的抑制率、凋亡率的差异有统计学意义,且各因素之间有交互作用。电镜下观察经PSO和UVA处理后的NB4、HL-60及K562细胞超微结构,均可见明显的凋亡形态学改变。结论PSO加UVA(PUVA)可抑制白血病细胞株NB4、HL-60、K562的生长,并可诱导其凋亡。浓度为40～80μg/mlPSO与波长为360nm的UVA照射10～15min是PUVA抗NB4、HL-60、K562白血病细胞的最佳作用点。     

17-羟-岩大戟内酯B对K562细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人白血病K562细胞增殖及凋亡的影响.方法:将K562细胞分为3组,分别为:空白对照组,5-氟脲嘧啶组(浓度为100μmol·L-1),HJB组(浓度为6.25,12.5,25,50,100,200,400μmol·L-1).用不同浓度的药物作用24 h和200 μmol·L-1的HJB浓度作用不同时间(12,24,48 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,并与空白对照组和5-氟脲嘧啶组作对比;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的相对活性.结果:与空白对照组相比,HJB对K562细胞的增殖有显著性抑制作用,并呈浓度依赖关系及时间依赖关系(P＜0.05),作用24 h后IC50为158.7μmol·L-1.HJB可诱导K562细胞凋亡,用50,100,200 μmol·L-药物分别处理细胞24h后,早期凋亡率较空白组明显升高(P＜0.05),且呈浓度依赖关系;Caspase-3及Caspase8的相对活性均较空白对照组升高(P＜0.05),并呈浓度依赖关系.结论:HJB明显抑制体外K562细胞生长并诱导其发生凋亡,且死亡受体途径可能是诱导其凋亡的一个机制.     

补骨脂素加长波紫外线诱导K562细胞凋亡时对FasL表达的影响

目的探讨补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病细胞K562凋亡时对FasL表达的影响。方法以K562细胞为研究对象，以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞FasL基因表达水平、蛋白表达水平为检测指标，观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径，并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可诱导K562细胞发生凋亡，PUVA的作用显著强于前两者；电镜下观察经PUVA处理后的K562细胞超微结构，可见明显的凋亡形态学改变；单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可下调FasL基因表达水平，PUVA的作用显著强于前两者；单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可下调FasL蛋白表达水平，PUVA的作用显著强于前两者。结论PUVA可诱导白血病细胞K562发生凋亡，作用强于单纯PSO及单纯UVA照射。PUVA诱导K562凋亡的途径之一为下调FasL基因表达水平。     

雷公藤内酯醇对K562细胞增殖周期的影响及对比研究

目的探讨雷公藤内酯醇抑制 K562细胞增殖的机理。方法选用 K562细胞株,运用细胞培养、MTT 法及流式细胞仪研究不同浓度雷公藤内酯醇、足叶乙甙(VP-16)对 K562细胞增殖及细胞周期的影响。结果雷公藤内酯醇能抑制 K562细胞的增殖,呈时间与剂量依赖性,且具有上调 K562细胞 G_1/S 检测点的能力。而 VP-16作用点是 G_2/M 期。结论雷公藤内酯醇有明确的抗白血病细胞增殖的能力,能干扰 K562细胞 G_1/S 检测点的转换,与 VP-16作用点不同。