降糖药二甲双胍对甲状腺未分化癌细胞增殖及凋亡的作用

目的:研究二甲双胍对甲状腺未分化癌细胞增殖及凋亡的作用,初步探讨其作用机制?方法:以不同浓度二甲双胍作用于未分化癌SW1736细胞,MTT法检测其增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况?结果:二甲双胍可显著抑制SW1736细胞增殖,其抑制作用呈剂量依赖性,并随着作用时间的延长抑制作用逐渐增强,于72 h达到最大抑制效果?流式细胞检测结果显示二甲双胍可阻滞未分化癌细胞周期至G0/G1期;并可促进肿瘤细胞凋亡,随着二甲双胍作用浓度的递增,肿瘤细胞的凋亡率逐渐增加,20 mmol/L二甲双胍作用48 h后,可使SW1736细胞凋亡率从8.3%增加至13.3%,与对照组相比,有显著统计学差异?结论:二甲双胍可抑制甲状腺未分化癌细胞的增殖活性,阻滞细胞周期进程,诱导细胞凋亡,为甲状腺未分化癌的治疗研究提供了新的方向?     

二甲双胍和紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：研究二甲双胍联合紫杉醇在体外对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,阐明二甲双胍与紫杉醇的药物协同效应。方法：将卵巢癌SKOV3细胞分为空白对照组、不同浓度（0.01、0.50、1.00、5.00和10.00 mmol·L^-1）二甲双胍组和联合用药组（不同浓度二甲双胍及紫杉醇联合用药）。MTT法检测各组SKOV3细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组SKOV3细胞凋亡率及细胞周期变化;MTT法检测各组SKOV3细胞增殖抑制率。结果：MTT法检测,不同浓度二甲双胍组SKOV3细胞增殖抑制率明显升高,并呈浓度和时间依赖性,与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术检测,不同浓度二甲双胍作用下SKOV3细胞凋亡率明显升高,与空白对照组比较,随着二甲双胍浓度的增加,药物作用48h后实验组SKOV3的细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;同时细胞周期发生明显变化,随着二甲双胍浓度的增加,G₀/G₁期细胞百分率降低（P<0.05）,而 G₂/M期细胞百分率升高（P<0.05）。MTT法检测,1.00 mmol·L^-1二甲双胍与紫杉醇联合用药组SKOV3细胞增殖抑制率高于0.50 mmol·L^-1二甲双胍与紫杉醇联合用药组（P<0.05）;二甲双胍与紫杉醇联合用药组SKOV3细胞增殖抑制率高于单独紫杉醇组（P<0.05）。结论：二甲双胍通过诱导细胞凋亡抑制卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖,二甲双胍能够增强紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制作用,二者具有药物协同效应。     

二甲双胍对结肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响

  目的 研究二甲双胍对人结肠癌细胞株SW480增殖、周期及凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法 体外培养人结肠癌细胞株SW480,给予不同浓度二甲双胍干预,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,Real time-PCR法检测相关基因mRNA的表达。结果 二甲双胍可以抑制SW480细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性。20mmol/L二甲双胍干预48h后与对照组相比,细胞G0/G1期比例升高,S及G2/M期比例均降低;细胞凋亡比率增高;Real time-PCR示周期相关基因CyclinD1 mRNA表达明显下调（P0.05),凋亡相关基因BCL-2 mRNA表达明显下调,CASP3及BAX mRNA 表达明显上调(P<0.01)。结论 二甲双胍能够抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,G0/G1期细胞周期阻滞,促进细胞凋亡;其机制可能与上调及下调某些周期、凋亡相关基因的mRNA表达有关。     

番茄红素抑制人脑胶质瘤U251细胞生长的实验研究

目的探讨番茄红素对体外培养的人脑胶质瘤U251细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法用CCK-8法检测不同浓度番茄红素作用于U251细胞24h、48h及72h后细胞的存活率;应用流式细胞术（FCM）检测细胞周期。结果番茄红素能抑制人脑胶质瘤U251细胞的生长,呈量-效及时-效关系（P〈0．01）;FCM检测表明,细胞主要被阻滞在G0／G1期;番茄红素诱导细胞凋亡率较对照组明显增加（P〈0．01）,具有浓度依赖性。结论番茄红素能抑制U251细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

塞来昔布对高表达Her-2/neu的人乳腺癌SKBr3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人乳腺癌细胞SKB r3的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法4种不同浓度的塞来昔布处理乳腺癌细胞系SKB r3细胞24、48 h,MTT法测定24、48 h后SKB r3细胞的增殖活性,流式细胞仪（FCM）检测48 h后各浓度塞来昔布诱导细胞凋亡情况及对细胞周期的影响。结果与对照组相比,塞来昔布以时间、剂量依赖性方式抑制SKB r3细胞增殖（P〈0.05）。作用48 h后,塞来昔布诱导SKB r3细胞凋亡并阻断了细胞周期进展,凋亡率随塞来昔布浓度的增加而增加（P〈0.05）,且随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞比例逐渐增加、S期及G2/M期细胞比例逐渐下降（P（0.05）。结论塞来昔布抑制高表达Her-2/neu的SKB r3细胞的增殖,诱导其凋亡。     

二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及机制

目的 探索不同浓度二甲双胍对人胰腺癌Panc-1 细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 用不同浓度的二甲双胍处理人胰腺癌Panc-1 细胞后,采用MTT 法检测其对癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡和细胞周期的影响,Western blot 观察PTEN、p-Akt（Ser473）、mTOR 蛋白表达水平的变化。结果 干预48 h 时,不同浓度二甲双胍（0.5、2.0 和8.0 mmol）对细胞生长的抑制率依次为（7.20±5.92）%、（18.35±4.77）% 和（33.45±4.10）% ;72 h 时对细胞生长的抑制率分别为（24.81±4.04）%、（53.42±4.18）% 和（61.36±2.00）%。该抑制作用随着药物浓度增加和干预时间延长而增强,呈药物浓度依赖性和时间依赖性。流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预48 h时,8.0 mmol 组G1 期细胞比例与对照组和0.5 mmol 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,8.0 mmol 组低于对照组和0.5 mmol 组;G2/M 期细胞比例与对照组和0.5 mmol 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,8.0 mmol 组高于对照组和0.5 mmol 组。二甲双胍作用48 h 时8.0 mmol 组细胞的中晚期凋亡率为（12.64±2.74）%,与对照组（7.01±1.14）% 和0.5 mmol 组（6.19±0.32）% 比较,差异有统计学意义（P <0.05）,8.0 mmol 组高于对照组和0.5 mmol 组。Western blot 检测结果显示二甲双胍作用48 h 时,2.0 mmol 组和8.0 mmol 组与对照组和0.5 mmol 组比较,PTEN 蛋白表达量差异有统计学意义（P <0.05）,2.0 mmol 组和8.0 mmol 组升高,而p-Akt（Ser473）和mTOR 的表达水平降低。结论 二甲双胍能抑制人胰腺癌Panc-1 细胞的增殖能力,引起G2/M 细胞周期阻滞,同时诱导胰腺癌细胞的凋亡,其可能的机制是通过激活PTEN 的表达,抑制PI3K/Akt/mTOR 通路。     

二甲双胍对人鼻咽癌C666-1细胞的增殖与凋亡作用

目的：探讨二甲双胍对人鼻咽癌C666-1细胞增殖和调亡的作用,并初步研究其作用机制.方法：体外培养人鼻咽癌C666-1细胞,以剂量5,10,20 mM的二甲双胍干预细胞24 h或48 h.采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Real-time PCR检测Bax、Bcl-2和Caspase-3表达.结果：二甲双胍抑制C666-1细胞增殖,随剂量增加和干预时间延长,细胞增殖的抑制作用增强（P＜0.05）.二甲双胍诱导C666-1细胞早期凋亡,有剂量效应关系,20 mM的二甲双胍干预细胞24 h,细胞早期凋亡率（12.40±1.01）％,高于对照组的（7.20±0.53）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.二甲双胍诱导C666-1细胞Caspase-3表达上调,降低Bcl-2/Bax比值.结论：二甲双胍抑制人鼻咽癌C666-1细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达有关.     

小檗碱对胃癌AGS细胞增殖和凋亡影响的初步研究

目的初步探讨小檗碱对胃癌细胞系AGS细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT的方法检测不同浓度小檗碱作用48h后对AGS细胞的抑制率,并计算半抑制浓度（50％inhibitingcon—centration,IC50）值;采用流式细胞技术检测不同浓度小檗碱作用48h后胃癌细胞系AGS凋亡的发生率和细胞周期的变化。结果小檗碱对胃癌细胞AGS生长的抑制作用呈现出剂量依赖性,48hIC。。为39．15umol／L。IC50浓度小檗碱干预48h后,AGS凋亡率发生率明显增加,与对照组比较差异有统计学意义（23．18％±3．47％vs10．05％±2．96％,P〈0．05）;IC50浓度的小檗碱作用后,AGS胃癌细胞GO／G1期细胞比例较对照组明显升高,两组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）,而S期细胞及G2／M期比例减少,但无明显统计学意义。结论小檗碱对胃癌细胞系AGS细胞具有浓度依赖性的抑制作用,抑制作用与阻滞细胞周期于G0／G1期有关,其作用机制可能与抑制DNA合成和诱导凋亡有关。     

二甲双胍抑制Fo xp 3的表达诱导乳腺癌细胞凋亡

目的：研究二甲双胍对于人乳腺癌细胞 MCF-7增殖与调亡的效应,并探讨 Foxp3在其中的作用。方法分别以二甲双胍（5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L）干预人乳腺癌细胞 MCF-748 h 后,采用 MTT 法检测细胞增殖抑制率;Hoechst 33258染色和流式细胞仪分析细胞凋亡;实时（real-time）PCR检测 Foxp3和 caspase-3 mRNA 表达水平;Western blot 法检测Foxp3蛋白的表达。结果与对照组（未经二甲双胍处理）相比,二甲双胍作用 MCF-7细胞48 h后,对细胞增殖有明显抑制作用（P＜0．05）;并可明显诱导 MCF-7细胞凋亡,早期凋亡率分别为3．76％、8．96％和18．67％;经二甲双胍处理后,MCF-7细胞中caspase-3 mRNA表达水平显著上调（P＜0．05）,而 Foxp3 mRNA和 Foxp3蛋白表达水平降低（P＜0．05）。结论二甲双胍有抑制 MCF-7增殖并诱导其凋亡的作用,其机制可能与 Foxp3表达下调有关。     

二甲双胍对类风湿性关节炎患者滑膜细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨二甲双胍对类风湿性关节炎患者滑膜细胞增殖与凋亡的影响.方法 取类风湿性关节炎患者滑膜组织,用胰酶消化法分离其滑膜细胞,分别用流式细胞术和CCK-8法检测三种浓度的二甲双胍(10、20、30 mmol/L)对滑膜细胞增殖的影响,TUNEL和流式细胞仪检测滑膜细胞凋亡情况,ELISA法检测二甲双胍处理的滑膜细胞上清中的炎性因子和抗炎性因子.结果 三种浓度(10、20、30 mmol/L)的二甲双胍分别干预滑膜细胞24、48、72 h,均不同程度抑制了滑膜细胞的增殖,且成时间-浓度依赖性.CCK-8法检测结果显示20、30 mmol/L二甲双胍处理显著抑制了滑膜细胞的增殖(P＜0.05),流式细胞术结果表明20 mmol/L二甲双胍处理48 h后,Go/G1期滑膜细胞的百分比与对照组相比显著增加了约20％ (P ＜0.05),S期和G2/M期的细胞比例分别显著下降了9％和11％ (P ＜0.05).凋亡结果表明,20、30 mmol/L二甲双胍处理48、72 h,较对照组显著促进滑膜细胞的凋亡(P＜0.05),流式细胞术显示早期和晚期的滑膜细胞凋亡率约17.5％.检测炎性因子发现,20、30 mmol/L二甲双胍处理后显著降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平(P＜0.05),增加抗炎因子IL-10水平约66％和76％ (P ＜0.05).结论 二甲双胍可显著抑制体外培养的人滑膜细胞的增殖,诱导其凋亡,可能与二甲双胍降低炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平和增加抗炎因子IL-10水平有关.     

二甲双胍在体外对人子宫内膜癌细胞增殖的影响

目的流行病学研究表明二甲双胍可以降低糖尿病患者患癌的风险性和癌症相关的死亡率,本实验进一步探讨二甲双胍在体外对人子宫内膜癌细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法二甲双胍干预人子宫内膜癌Ishikawa和HEC-1A细胞不同时间后,采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western blotting法检测ERα及PTEN的表达。结果二甲双胍显著抑制两种子宫内膜癌Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖。流式细胞术检测显示二甲双胍使子宫内膜癌细胞停滞在G0/G1期,并且可以诱导细胞的凋亡。Western blotting法检测显示二甲双胍能够促进子宫内膜癌细胞ERα的表达;Ishikawa细胞无PTEN蛋白的表达,HEC-1A细胞则高表达PTEN。结论二甲双胍能抑制子宫内膜癌细胞的生长,其作用机制可能与促进ERα的表达有关。     

二甲双胍可能通过Hippo-YAP通路抑制HER-2阳性乳腺癌细胞的增殖和促进凋亡

目的 观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法 分别用0、20、40、60、80、100、120 μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成的影响;计算IC50值。以该浓度二甲双胍处理细胞,与空白对照相比,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的改变;实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）检测 YAP、TAZ、EGFR、CTGF、CYR61、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin 及 Fibronectin 等关键基因的mRNA水平表达;Western blotting 实验检测YAP、TAZ蛋白水平的表达;免疫荧光观察二甲双胍对SKBR3细胞中YAP/TAZ核易位的改变。结果 CCK-8和细胞克隆实验显示二甲双胍对SKBR3细胞增殖活力具有明显的抑制作用（P<0.05）,呈浓度和时间依赖性。与对照组相比,二甲双胍处理后的SKBR3细胞凋亡明显增加;G1期细胞比例增多,而G2/M期细胞比例减少。N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达降低,而E-cadherin的表达上调（P<0.05）。qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,二甲双胍处理后YAP、TAZ、EGFR、CTGF和CYR61的表达明显下调（P<0.05）。免疫荧光实验显示：实验组较对照组的YAP或TAZ,其荧光的定位更多地聚集于胞浆,而细胞核中荧光的量明显的减少。结论 二甲双胍能抑制HER-2阳性乳腺癌细胞SKBR3的增殖,促进其凋亡和上皮－间质转化,其机制可能与抑制YAP/TAZ的表达和核定位有关。     

二甲双胍对人子宫内膜癌细胞增殖的影响

目的探讨二甲双胍在体外对人子宫内膜癌细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法二甲双胍干预人子宫内膜癌RL95-2和KLE细胞不同时间后,采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,Western印迹法检测IGF-1Rβ、Akt和p-Akt的表达。结果二甲双胍显著抑制子宫内膜癌RL95-2和KLE细胞的增殖。流式细胞术检测显示二甲双胍使G_0/G_1期细胞比例升高,S期细胞比例降低。Western印迹法检测显示二甲双胍能够降低IGF-1Rβ和p-Akt的表达。结论二甲双胍能抑制子宫内膜癌细胞生长,其作用机制可能与下调IGF-1Rβ表达和抑制Akt活性有关。     

二甲双胍影响人结直肠癌细胞增殖和凋亡的机制研究

目的 探讨二甲双胍对人结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 二甲双胍处理体外常规培养人结直肠癌细胞HCT-15、COLO205,通过MTT检测结直肠癌细胞的生长活力;流式细胞仪检测细胞的周期及凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bad、Bcl-2、Cleaved caspase-3及信号通路蛋白Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、S6K、p-S6K的表达变化.结果 不同浓度的二甲双胍作用HCT-15、COLO205细胞72 h后细胞活力明显受到抑制,并呈现浓度依赖性;经流式细胞术分析,二甲双胍能够促使细胞停滞于G0/G1期,同时上调细胞早期及晚期凋亡所占比率;Western blot分析发现,Bad、cleaved caspase-3表达量随着二甲双胍浓度的升高而上调,Bcl-2表达量随着二甲双胍浓度升高而下降;同时,p-Akt及p-mTOR、p-S6K的表达量均明显被抑制,但Akt、mTOR、S6K总蛋白表达量无明显变化.结论 二甲双胍能够抑制结直肠癌细胞增殖,促进细胞凋亡;而具体机制可能与抑制Akt及mTOR通路活性有关.     

低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的时间效应

目的：研究低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的时间效应，以揭示低剂量辐射生物效应及其诱导适应性反应的可能机制。方法：实验分D2组（攻击剂量）、D1（诱导剂量）+ D2组和假照组。用X射线照射离体EL-4淋巴瘤细胞，其D1为75 mGy（剂量率12.5 mGy•min^-1），D2为1.5 Gy（剂量率287 mGy•min^-1），D1和D2间隔为3~60 h。通过流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期进程的变化。结果：当D1和D2间隔为3~24 h时，D1+D2组细胞凋亡百分数明显低于D2组（P<0.05或P<0.01），G₀/G₁期细胞百分数不同程度低于D2组，而S期细胞百分数明显高于D2组（P<0.05）。结论：75 mGy（12.5 mGy•min^-1）照射后3~24 h，进行1.5 Gy（287 mGy•min^-1）照射，可诱导体外EL-4淋巴瘤细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。     

低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应

目的：观察低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应,以揭示低剂量辐射生物效应及其诱导适应性反应的可能机制。方法：实验分D2组（攻击剂量）、D1（诱导剂量）+ D2组和假照组。用X射线照射离体EL-4淋巴瘤细胞,其D1为75 mGy（剂量率6.25~200.00 mGy•min^-1）,D2为1.5 Gy（剂量率287 mGy/min）,D1和D2间隔6 h。通过流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期进程的变化。结果：当D1剂量率为6.25~50.00 mGy,D1 + D2组细胞凋亡百分数明显低于D2组（P<0.05）G₀/G₁期细胞百分数明显低于D2组（P<0.01）,而S期细胞百分数不同程度高于D2组。结论：D1为75 mGy（剂量率6.25~50.00 mGy•min^-1）,D2为1.5 Gy（剂量率287 mGy•min^-1）、D1和D2间隔6 h,可诱导体外EL-4淋巴瘤细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。