六味地黄汤对慢性肾衰大鼠肾组织中HIF-1α、CTGF表达的影响

目的 探讨HIF-1α、CTGF在慢性肾衰大鼠肾组织中的表达及作用,观察六味地黄汤对其表达的影响.方法 用5/6肾切除法制作慢性肾衰模型,分假手术组、模型组和六味地黄汤组.造模后12周,检测各组肾功能指标;HE染色观察肾组织病理变化,Masson染色观察肾组织胶原的沉积;免疫组化法和RT-PCR法分别检测HIF-1α、CTGF在肾组织中的蛋白水平和基因表达.结果 与假手术组比较,模型组肾组织中HIF-1α、CTGF蛋白水平和基因表达均明显升高(P＜0.01).与模型组比较,六味地黄汤组肾组织中HIF-1α、CTGF蛋白水平和基因表达均明显降低(P＜0.01).结论 HIF-1α上调CTGF的表达促进肾间质纤维化,六味地黄汤可下调HIF-1α的表达,从而抑制肾间质纤维化.     

青蒿琥酯对UUO模型大鼠肾组织CTGF和α-SMA表达的影响

目的探讨青蒿琥酯对单侧输尿管梗阻（UUO）模型大鼠肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平的的影响,初步探讨青蒿琥酯抗肾间质纤维化的作用机制。方法雄性W istar大鼠80只随机分为假手术组、UUO模型组、青蒿琥酯小剂量组、大剂量组和科素亚组,采用免疫组化半定量方法检测肾组织中CTGF和α-SM A的表达水平。结果UUO模型组和各治疗组中,术后3天肾间质即出现CTGF和α-SMA表达,术后14天表达最高;不同剂量青蒿琥酯组和科素亚组CTGF和-αSM A表达均低于UUO模型组,且大剂量组疗效优于小剂量组,而与科素亚组相似。结论青蒿琥酯可以降低肾间质中CTGF和α-SMA的表达,这可能是青蒿琥酯抗肾间质纤维化的作用机制之一。     

HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:免疫组化法检测61例大肠癌组织中H IF-1α及VEGF蛋白表达,并与15例正常大肠组织比较。结果:大肠癌组织中H IF-1α和VEGF的阳性表达率分别为54.10%(33/61)和62.30%(38/61),均明显高于正常对照组(P<0.05);两者呈正相关(r=0.505,P<0.05);Dukes分期中的表达存在显著差异(P<0.05);组织学分级中的表达则无差异性(P>0.05)。结论:H IF-1α及VEGF在肿瘤血管生成和转移中起重要作用,联合检测H IF-1α和VEGF可作为判断大肠癌转移潜能和预后的重要指标。     

诱导性大鼠肝癌模型中HIF-1α、VEGF的表达

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)在诱导性大鼠肝癌模型中的表达及其相关性.方法 70只SD大鼠分为模型组(60只)和正常对照组(10只),联合应用二乙基亚硝胺(DEN)和N-亚硝基吗啉(NMOR)诱发大鼠实验性肝癌,于诱癌第4、8、12、16周分批处死实验大鼠,常规制作肝脏病理切片.用免疫组织化学法检测大鼠肝脏癌变过程中不同时期的HIF-1α及VEGF的表达情况.结果 实验第8、12、20周,模型组大鼠肝脏呈现典型的脂肪变性,炎性细胞浸润、肝硬化、肝癌的病理变化;肝脏HIF-1 α及VEGF在大鼠肝脏癌变过程中表达明显增强(P＜0.01);且HIF-1α与VEGF之间存在着显著正相关(r=0.953,P＜0.01).结论 HIF-1α及VEGF参与大鼠肝癌的发生与发展,其机制可能与HIF-1α、VEGF促进肿瘤血管生成有关.     

六味地黄汤对慢性肾衰大鼠肾组织中HIF-1α和PAI-1表达的影响

目的探讨六味地黄汤抗肾间质纤维化的作用机制。方法 5/6肾切除法制备慢性肾衰模型,分假手术组、模型组、六味地黄汤组和依那普利组。六味地黄汤组予以6.25 g/（kg·d）六味地黄汤灌胃,依那普利组予以10 mg/（kg·d）依那普利灌胃,假手术组和模型组予以10 m L/（kg·d）蒸馏水灌胃,每天1次,连续灌胃12周。造模12周后,应用免疫组化法和RT-PCR法分别检测HIF-1α、PAI-1在肾组织中蛋白水平和基因表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中HIF-1α、PAI-1蛋白水平和基因表达均明显升高（P〈0.05）;与模型组比较,六味地黄汤组和依那普利组大鼠肾组织中HIF-1α、PAI-1蛋白水平和基因表达均明显降低（P〈0.05）,且六味地黄汤组低于依那普利组（P〈0.05）。结论六味地黄汤可能通过降低HIF-1α,进而下调PAI-1的表达抑制肾间质纤维化,且治疗效果优于依那普利。     

HIF-1α在缺氧性心搏骤停大鼠的表达和变化研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在缺氧性心搏骤停大鼠肺脏和脑组织的表达变化。方法将45只雄性SD大鼠随机分为3组,分别为CO中毒心搏骤停组(CO中毒组)、气管夹闭窒息性心搏骤停组(气管夹闭组)和对照组。大鼠心搏骤停模型制备成功后,免疫荧光和ELISA检测HIF-1α在大鼠心搏骤停15 min时血浆、肺和脑组织中的表达和变化情况。结果 CO中毒组及气管夹闭组血浆HIF-1α水平明显增加,且显著高于对照组(P<0.01),其中CO中毒组明显高于气管夹闭组(P<0.05)。CO中毒组及气管夹闭组肺组织HIF-1α表达明显高于对照组(P<0.05),其中CO中毒组高于气管夹闭组(P<0.05);CO中毒组大脑皮层HIF-1α表达明显高于对照组和气管夹闭组(P<0.05),但气管夹闭组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HIF-1α在缺氧性心搏骤停早期表达明显增强,其表达强度与缺氧程度、快慢速度等相关,可作为评价心搏骤停预后的参照指标。     

胃肠道腺癌组织中HIF-1α的表达及意义

目的探讨HIF-1α在胃肠道腺癌组织中的表达及其临床意义。方法本课题以经病理证实的胃肠道腺癌组织21例为研究组,以其胃肠道腺癌淋巴结转移组织21例和正常胃肠道黏膜组织21例为对照组。采用链霉素-生物素（S-P）免疫组化技术,测定胃肠道腺癌、正常胃肠道黏膜、淋巴结转移的癌组织中HIF-1α的表达。采用Wilcoxon秩和检验进行组间比较。结果胃肠道腺癌、胃肠道腺癌淋巴结转移组织中HIF-1α蛋白阳性表达率均明显高于正常胃肠道黏膜组织,差异具有统计学意义;胃肠道腺癌组织淋巴结转移的癌组织中HIF-1α蛋白阳性表达率高于胃肠道腺癌组织,但二者之间差异无统计学意义。结论 HIF-1α在胃肠道腺癌及其淋巴结转移癌的组织中表达水平高于正常胃肠道黏膜,其表达水平与肿瘤的发生、发展、浸润、转移相关,检测上述标志物有一定的临床及病理意义。     

磷酸肌酸钠对缺氧窒息幼鼠肾组织HIF-1α和VEGF表达的影响

目的:研究磷酸肌酸钠(PCr)对缺氧窒息幼鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:24只幼鼠随机分为PCr干预组(PCr组)、模型组和正常对照组,每组8只。PCr和模型组幼鼠制作缺氧窒息模型,PCr组幼鼠在制作模型前0.5h和缺氧窒息后即刻腹腔注射1.4mg/g的PCr。模型组在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水。正常对照组不作处理。缺氧窒息后6h,切除各组幼鼠肾脏,采用HE染色法观察肾组织病理形态变化,RT-PCR和免疫组织化学法检测肾组织HIF-1α和VEGFmRNA和蛋白的表达。结果:模型组幼鼠肾组织可见肾小管上皮细胞肿胀,大量炎性细胞浸润,部分上皮细胞变性坏死,肾小球出现水肿、甚至固缩;PCr组幼鼠肾小管和肾小球受损状况明显减轻。3组幼鼠肾组织HIF-1α和VEGFmRNA及蛋白的表达比较,差异有统计学意义(F=196.805、484.734、90.410和79.329,P均<0.001),PCr和模型组均较正常对照组升高,PCr组较模型组降低(P<0.05)。结论:PCr可能通过下调HIF-1α、VEGF的表达减轻肾组织的缺氧性损伤。     

α平滑肌肌动蛋白和转化生长因子β1在小管间质纤维化模型大鼠肾组织中的表达

目的 探讨肾小管上皮细胞－肌纤维母细胞表型转化在肾间质纤维化形成中的作用。方法 制备大鼠单输尿管梗阻模型，在光学显微镜下观察大鼠肾组织病理变化，采用免疫组化法检测肾组织中α平滑肌肌动蛋白（α－SMA）和转化生长因子β1（TGF－β1）的表达，并采用计算机图像软件进行定量分析。结果 肾脏病理检查显示形态学改变符合肾小管间质纤维化的病理变化；在输尿管梗阻14、28d后肾组织α－SMA和TGF－β1表达较对照组增加（P＜0.05）。结论 α－SMA可作为肾小管上皮细胞－肌纤维母细胞表型转化的重要标志物，TGF－β1可能参与了肾小管上皮细胞－肌纤维母细胞表型转化，且是进一步导致肾间质纤维化的重要因素。     

HIF-1α在5/6肾切除大鼠慢性肾纤维化模型中的表达

目的：探讨低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α）在慢性肾脏纤维化中的表达及作用,观察培跺普利对其表达的影响。方法：大鼠慢性肾纤维化模型用5/6肾切除法制作,假手术组为对照组,模型组随机分为手术组和培跺普利治疗组。治疗5周后,用天狼猩红苦味酸染色法检测胶原在肾脏的沉积;Western印迹检测HIF-1α蛋白在肾组织中的表达;实时荧光定量PCR法检测HIF-1α与CTGF (connective tissue growth factor) mRNA在肾组织中的表达。结果：与对照组比较,手术组的胶原、HIF-1α蛋白、HIF- 1α与CTGF mRNA表达明显增加（P＜0.01）。与手术组比较,治疗组的胶原、HIF-1α蛋白、HIF- 1α与CTGF mRNA表达明显减少（P＜0.01）。CTGF的表达与HIF-1α呈正相关（r=0.68,P＜0.01）。结论：HIF-1α通过调节CTGF的表达参与肾脏纤维化,培跺普利可通过减少HIF-1α的表达来减轻肾脏纤维化。     

HIF-1α在肝癌组织中表达及临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)在肝癌组织中表达的意义。方法:采用免疫组化S-P法检测75例石蜡包埋的人体肝癌组织(术前均未行放疗及化疗)H IF-1α的表达。结果:H IF-1α主要表达于肝癌细胞浆,部分于胞核,肿瘤间质细胞也可见少量表达。肿瘤坏死区周围及肿瘤浸润边缘部的癌细胞H IF-1α表达明显增多。H IF-1α的表达强度与肝癌细胞恶性程度、淋巴结转移及预后有关,而与病人年龄、性别及原发肿瘤大小均无关。其阳性强度随癌细胞分化程度的降低、淋巴结转移、术后生存期短而增高。结论:H IF-1α可作为评估肝癌淋巴结转移和预后的重要指标之一。     

食管鳞癌组织中HIF-1α和VEGF-C的表达及意义

目的研究食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor,VEGF-C)的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法检测116例ESCC及20例癌旁组织组织中HIF-1α、VEGF-C蛋白的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 HIF-1α与VEGF-C在ESCC组织中的阳性表达率均高于癌旁组织(P<0.05)。HIF-1α蛋白的阳性表达与T分期相关(P<0.05)。VEGF-C与分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。HIF-1α与VEGF-C蛋白表达之间存在着显著的正相关关系(r=0.331,P=0.000)。结论 HIF-1α、VEGF-C蛋白在ESCC组织中高表达,可能在ESCC发生发展中有重要作用。VEGF-C表达与淋巴结转移有关,可作为预测ESCC预后的重要指标。     

冬虫夏草对糖尿病肾病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达的影响

目的：观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)干预后对其的影响,探讨冬虫夏草的抗缺氧损伤的肾保护机制。方法：健康雄性Wistar大鼠通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制作成糖尿病模型,4周时测定24 h尿蛋白>30 mg/d为DN模型大鼠(n=30),随机分为糖尿病肾病组(DN组,n=15)和冬虫夏草组(CS组,n=15),另取15只正常大鼠作为对照组(NC,n=15)。CS组予CS提取原液5.0 g/(kg?d)灌胃,NC和DN组均予以等量饮用水灌胃,分别于灌胃2,4,6周时随机处死三组大鼠各5只,检测24 h尿蛋白定量、尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl glucosaminidase,NAG酶)、血清肌酐水平;HE及MASSON染色观察肾脏组织形态学变化;反转录PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA表达;免疫组织化学方法检测肾组织中HIF-1α及VEGF蛋白的表达。结果：与NC组相比较,DN组肾小管空泡变性明显,肾小球系膜区基质增多,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐显著升高,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均显著增加(均P<0.05),两者的表达均随着病程延长而逐渐增强,且两组HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.850,r=0.887,均P<0.05);与DN组相比较,CS组大鼠肾小管病变程度减轻,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐降低,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均下调(均P<0.05),但仍明显高于NC组(P<0.05),但CS治疗第4周、第6周HIF-1α的mRNA及蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论：DN病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达上调,两者呈正相关,提示DN肾组织存在慢性缺氧。CS可通过下调DN肾组织HIF-1α及VEGF的表达起到抗慢性缺氧损伤的肾保护作用。     

儿童先天性巨输尿管组织中HIF-1α、VEGF和TGF-β1蛋白的表达

目的:检测儿童先天性巨输尿管组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达.方法:取25例先天性巨输尿管末端组织,按年龄分为<1岁组(10例),1-3岁组(8例)和>3岁组(7例);取28例肾母细胞瘤输尿管下端无肿瘤细胞浸润的组织作为对照,按年龄分为<1岁组(8例),1-3岁组(10例)和>3岁组(10例).采用免疫组化SP法检测两种组织中HIF-1α、VEGF和TGF-β1蛋白的表达.结果:>3岁组对照组织和先天性巨输尿管末端组织中HIF-1α、VEGF和TGF-β1的表达极少或呈阴性.<1岁组和1-3岁组先天性巨输尿管末端组织中3指标均高于对照组织(HIF-1α:Z=3.593和3.721;VEGF:Z=3.554和3.465;TGF-β1:Z=3.554和3.552,P均<0.001).结论:HIF-1α、VEGF和TGF-β1的异常表达可能参与了儿童先天性巨输尿管症的发病过程.     

HIF-1α和survivin在胃癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和凋亡抑制蛋白survivin在胃癌发展过程中的意义及其对肿瘤血管生成的影响.方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测HW-1α和survivin在70例胃癌组织、14例癌旁组织和15例正常组织中的表达,并计数CD105标记癌组织的微血管密度(MVD).结果:HIF-1α和survivin在胃癌组织中的表达明显高于正常组织及癌旁组织(P<0.05);HIF-1α和survivin的表达均与胃癌的浸润深度、临床分期及局部淋巴结转移之间存在相关性(P<0.05);HIF-1α和survivin表达阳性组的MVD均高于各自的阴性组(P<0.05);HIF-1α和survivin在胃癌中表达存在正相关性(r=0.285,P<0.05).结论:HIF-1α和survivin在胃癌的发展和转移过程中具有重要意义;联合检测两者的表达可用于评价胃癌的恶性生物学行为.     

宫颈癌组织HIF-1α和IGF-2表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及胰岛紊样生长因子-2(IGF-2)在宫颈癌(ICC)发生、发展中表达及意义.方法 应用免疫组织化学S-P方法,检测20例正常宫颈(NCE)、28例宫颈上皮内瘤变(CIN)、70 例ICC组织 HIF-1α和IGF-2蛋白表达.结果 NCE、CIN、ICC组织 HIF-1α蛋白的表达阳性率分别为0、32.14%、72.86%,IGF-2 蛋白表达的阳性率分别为10.oo%、28.57%、68.57%,各组间比较差异均有显著性(Hc=39.487,q=5.782～35.582,P<0.01;χ2=25.570,P<0.01).ICC组织中 HIF-1α和IGF-2表达呈正相关(r=0.629,P<0.01).结论 HIF-1α及IGF-2的表达与宫颈癌的发生发展密切相关,二者在ICC发展中可能起协同作用.     

HIF-1α在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在视网膜母细胞瘤组织中的表达情况及其在肿瘤血管形成、浸润及转移等生物学行为中的作用.方法 应用免疫组织化学方法检测视网膜母细胞瘤组织中HIF-1α蛋白的表达情况,并探讨其表达与肿瘤分级的相关性.结果 HIF-1α蛋白在视网膜母细胞瘤中呈高表达,HIF-1α阳性细胞为肿瘤细胞核染色、部分胞浆染色,HIF-1α表达在不同临床分期间差异有显著性(P<0.05).且其表达和临床分期密切相关(P<0.05);HIF-1α二者表达存在正相关(rs=0.946,P<0.001).结论 HIF-1α的高表达与视网膜母细胞瘤的临床分期呈正相关,在视网膜母细胞瘤新生血管形成、肿瘤的浸润、转移中可能发挥重要作用.     

肺癌组织中VHL和HIF-1α表达及其临床意义

目的：研究肺癌组织中希佩尔林道（VHL）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达并探讨其临床意义。方法：将80例肺癌及20例正常肺组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,采用免疫组化EnVisionTM二步法测定VHL和HIF-1α的表达。分析VHL和HIF-1α的表达与临床分期、分化程度、有无淋巴结转移间的关系。结果：肺癌组织VHL表达阳性率（56.3%）明显低于正常肺组织（90.0%）(P＜0.01）;HIF-1α表达阳性率（65.0%）明显高于正常肺组织（20.0%）(P＜0.01）;中高分化、Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移的肺癌组织VHL表达阳性率明显高于低分化和未分化、Ⅲ～Ⅳ期及有淋巴结转移者（P＜0.01～0.05）,而HIF-1α表达阳性率则相反（P＜0.05）;肺癌组织中VHL和HIF-1α表达水平呈高度负相关（P＜0.01）。结论：VHL和HIF-1α可能是反映肺癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标志物。     

β-胡萝卜素对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白和转化生长因子-β_1表达的影响

目的探讨β-胡萝卜素对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法将48只大鼠随机分为对照组、肝纤维化模型组和肝纤维化β-胡萝卜素干预组,SABC法免疫组织化学染色显示α-SMA及TGF-β1,HE染色显示肝的显微结构,透射电镜观察肝超微结构。结果肝纤维化模型组、对照组和β-胡萝卜素干预组α-SMA和TGF-β1表达的平均灰度值比较均有显著性差异(P<0.01)。电镜结果显示,对照组肝星形细胞内充满脂滴,其周围无明显胶原纤维沉积;肝纤维化组肝星形细胞内的脂滴较对照组减少;肝纤维化β-胡萝卜素干预组肝星形细胞内脂滴的量介于对照组与肝纤维化组之间。结论β-胡萝卜素抑制α-SMA和TGF-β1的表达,能降低由CC l4诱导的大鼠肝纤维化的程度,其作用途径与抑制肝脏星形细胞中的脂滴丢失有关。     

LPS对小鼠巨噬细胞HIF-1α表达的影响

目的观察在体外常氧条件下，LPS的刺激是否影响巨噬细胞HIF-1α的表达及其机制。方法收集Balb／c小鼠的腹腔巨噬细胞并分组进行体外培养，刺激组给予LPS、对照组给予PBS并作用10h后。采用RT-PCR法检测HIF-1α、VEGF基因的表达水平，应用细胞免疫化学染色法检测HIF-1α蛋白的表达水平。结果LPS刺激组HIF-1α基因表达无明显改变，但HIF-1α蛋白表达显著增加且VEGF基因表达上调（均P〈0．01）。结论常氧条件下，LPS刺激下的巨噬细胞可以在转录后水平上调HIF-1α蛋白的表达，并可通过上调靶基因VEGF的表达参与急性炎症反应。