肽基脯氨酰顺反异构酶1 和细胞周期蛋白D1 在食管鳞状细胞癌中的 表达

目的研究肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法通过免疫组织化学SP法检测37例食管鳞状细胞癌标本癌组织及癌旁组织中Pin1与Cyclin D1蛋白的表达,分析各临床病理参数对食管鳞状细胞癌组织中Pin1及Cyclin D1表达的影响。结果 Pin1在癌旁正常组织中不表达或呈微弱的核表达,在癌组织中呈阳性表达;Cyclin D1在癌旁正常组织中不表达,在癌细胞的细胞质或细胞核内呈阳性或强阳性表达。有淋巴结转移者Pin1表达较未转移者高,差异有统计学意义(P<0.05),分化程度、年龄、性别及TNM分期等临床病理参数对Pin1的表达无影响(P>0.05)。分化程度高者Cyclin D1表达较低,分化程度低者Cyclin D1表达较高,差异有统计学意义(P<0.05),年龄、性别及肿瘤分期等临床病理参数对Cyclin D1的表达无明显影响(P>0.05)。结论 Pin1和Cyclin D1在食管鳞状细胞癌中的表达明显增高,二者相互作用调节细胞周期,促进食管鳞状细胞癌的发生。     

雷帕霉素抑制mTOR信号通路对EC9706细胞生长及凋亡的影响

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的活性及雷帕霉素(rapa)对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706细胞生长及凋亡的影响.方法:采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织及15例正常食管组织中mTOR蛋白的表达.分别用不同浓度(20、50和100 nmol/L)的rapa处理食管鳞状细胞癌EC9706细胞系,以未处理组作为阴性对照,采用流式细胞术测定细胞周期和凋亡率.结果:食管鳞状细胞癌组织中mTOR蛋白的阳性表达率为64.0%(32/50),高于正常组织的13.3%(2/15)(χ2=11.873,P=0.001).与对照组比较,rapa可使细胞停滞于G0/G1期(F=102.609,P=0.001),且明显促进细胞凋亡(F=916.882,P=0.001).结论:mTOR信号通路在食管鳞状细胞癌中被显著激活,rapa能抑制食管鳞状细胞癌细胞生长并诱导细胞凋亡.     

食管鳞状细胞癌组织中Netrin-1的表达

目的:探讨Netrin-1在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达情况及其与ESCC发生发展的关系。方法:采用免疫组化和原位杂交法分别检测40例ESCC及40例正常食管黏膜组织中Netrin-1蛋白和mRNA的表达。结果:ESCC组织中Netrin-1蛋白的阳性表达率为47.5%(19/40),高于正常食管黏膜组织的5.0%(2/40)(χ2=18.660,P<0.001)。ESCC组织中Netrin-1mRNA的阳性表达率为52.5%(21/40),高于正常食管黏膜组织的5.0%(2/40)(χ2=22.029,P<0.001)。Netrin-1mRNA和蛋白的表达与ESCC的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期均有关(χ2mRNA=12.420、12.477、9.528、10.566,χ2蛋白=8.878、8.021、8.338、9.950,P均<0.05)。ESCC组织中Netrin-1蛋白与mRNA的表达有关联(rP=0.517,P<0.001)。结论:Netrin-1表达与ESCC的发生发展有关,可作为ESCC预后判断的辅助指标。     

食管鳞状细胞癌组织中Tollip蛋白的表达

Tollip(Toll-interacting protein)是一种衔接蛋白,充当TOLL样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的抑制因子在白细胞介素1介导的炎性反应中起作用<'[1-2]>.研究<'[3-4]>显示其可能与乳癌及头颈部肿瘤的发生发展有关.作者采用免疫组织化学SP法检测了食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cellcarcinoma,ECSS)组织中Tollip蛋白的表达情况,探讨其在ECSS发生发展中的作用.     

食管鳞状细胞癌组织中骨形成蛋白7的表达

目的:探讨骨形成蛋白7(BMP7)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测56例ESCC及其相应远端正常食管黏膜鳞状上皮中BMP7蛋白的表达,采用RT-PCR法检测BMP7mRNA的表达。结果:ESCC组织中BMP7蛋白阳性表达率和mRNA表达率分别为73.2%(41/56)和76.8%(43/56),高于正常食管黏膜组织中的12.5%(7/56)和14.3%(8/56)(χ2=28.900,29.878,P均<0.001)。ESCC组织中BMP7mRNA与蛋白的表达差异无统计学意义(χ2=0.167,P=0.688)。BMP7蛋白表达与ESCC浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(χ2=6.330,5.547和9.143,P均<0.05),而与性别、年龄和组织学分级无关(P>0.05)。结论:BMP7可能在ESCC的发生、发展中起重要作用。     

食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达

目的:探讨食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白家族新成员Livin 及其2种异构体Livinα和Livinβ的表达情况.方法:采用实时逆转录PCR(real-time RT-PCR)方法检测46例食管鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁正常组织中Livinα mRNA 和Livinβ mRNA 的表达,并用免疫组织化学方法检测Livin 蛋白的表达.结果:46例食管鳞状细胞癌组织中Livinα mRNA、Livinβ mRNA和蛋白的阳性表达率分别为82.6%(38/46)、82.6%(38/46)和93.5%(43/46),而对应癌旁正常组织中Livinα mRNA、Livinβ mRNA和蛋白的阳性表达率分别为43%(2/46)、6.5%(3/46)和6.5%(3/46),均低于癌组织中的表达(P＜0.05).食管鳞状细胞癌组织中Livin 2种异构体同时表达,且Livinβ mRNA与Livinα mRNA表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:食管鳞状细胞癌组织中存在Livin mRNA及蛋白高表达现象,可能与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关.     

食管鳞状细胞癌组织中PTEN和VEGF蛋白的表达

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中PTEN、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学SP法检测49例食管鳞状细胞癌组织中PTEN、VEGF的表达.结果:PTEN蛋白的表达与癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05),VEGF蛋白的表达与淋巴结转移有关(P＜0.05);食管鳞状细胞癌组织中PTEN与VEGF的表达呈负相关(rs=-0.342).结论:PTEN蛋白表达的降低或缺失可能上调VEGF的表达,从而促进肿瘤血管生成.2者在食管鳞状细胞癌的发生发展中可能起重要作用.     

食管鳞状细胞癌组织中Ras蛋白表达及其临床意义

目的探讨Ras蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系。方法选取50例病理检查证实为食管鳞状细胞癌的患者,所有入选者均具有完整的临床资料,术前未接受过放射治疗、化学治疗及免疫治疗。采用免疫组织化学技术检测其组织中Ras蛋白的表达水平。结果 16例患者Ras蛋白高表达,阳性表达率为32.00%。Ras蛋白高表达者3 a生存率为12.50%(2/16),低表达者3 a生存率为44.11%(15/34),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Ras蛋白高表达者中位生存期为10.20个月,而低表达者中位生存期为26.04个月,相对危险度为0.373,95%可信区间为(0.175,0.793)。结论 Ras蛋白的表达程度可作为食管鳞状细胞癌患者预后的评价指标。     

Pin1、CyclinD1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨肽基脯氨酰顺反异构酶(Pin1)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及意义.方法 用免疫组化Envision方法对40例NSCLC组织进行染色,并与其癌旁正常肺组织作对照,对其表达情况进行检测分析.结果 Pin1和CyclinD1在正常组织中不表达或者低表达,而在癌组织中表达率分别为:47.5％和55.0％.Pin1和CyclinD1在癌组织中的表达明显高于正常组织中的表达(P＜0.05)且二者表达呈显著正相关(P＜0.05),他们的表达与分化程度有关,而与其他病理特征无关.结论 Pin1和CyclinD1的过表达与肺癌的发生有关.     

食管鳞状细胞癌中p53蛋白和PCNA表达的研究

目的：研究p53蛋白和PCNA在食管鳞状细胞癌中表达的意义。方法：应用免疫组化S－P法检测94例食管鳞状细胞癌中p53蛋白和PCNA表达情况。结果：p53蛋白阳性率为65．96％，PCNA阳性率为85．11％，p53蛋白阳性、PCNA阳性与肿块的大小、肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、病人生存期有关，与肿瘤的分级无关。结论：临床检测p53蛋白和PCN评价食管癌病人预后有意义。     

食管鳞状细胞癌组织中Livin与半胱氨酸蛋白酶-3的表达

目的：检测食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中Livin与半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测53例ESCC及53例癌旁正常食管组织中Livin及Caspase-3蛋白的表达。结果：ESCC组织中Livin蛋白的阳性表达率（52.8%）高于癌旁正常食管组织（7.5%,χ2=20.346,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Caspase-3的阳性表达率（39.6%）低于癌旁正常食管组织（83.0%,χ2=16.690,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Livin与Caspase-3蛋白的表达负关联（rP=-0.302,P=0.021）。结论：Livin和Caspase-3蛋白参与了ESCC的发生与发展;Livin蛋白可能通过抑制Caspase-3蛋白的活性发挥作用。     

食管鳞癌中Ets-1 mRNA和蛋白的表达

目的检测转录因子Ets-1 mRNA和蛋白在食管不同病变组织中的表达。方法采用原位杂交和免疫组织化学SP法检测62例食管鳞癌、31例癌旁不典型增生组织及62例食管正常黏膜组织中Ets-1 mRNA和蛋白的表达情况。结果 Ets-1 mRNA和蛋白表达阳性率在正常食管黏膜、癌旁不典型增生及食管鳞癌组织中均依次升高,组间比较差别均具有统计学意义(P<0.01)。Ets-1 mRNA的阳性表达率随着食管鳞癌分级的增高而增高,但差别无统计学意义(P>0.05),而与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);Ets-1蛋白的表达与食管鳞癌的分级、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P<0.05);二者的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05)。Ets-1 mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.343,P<0.05)。结论 Ets-1基因表达增强可能是食管鳞癌发生的早期事件,可作为判定食管鳞癌侵袭和转移能力的一项指标。     

转移抑制因子1和钙激活蛋白43在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨转移抑制因子1（MTSS1）和钙激活蛋白43(Cap43)在食管鳞状细胞癌(鳞癌)组织中表达,阐明其与食管鳞癌临床病理特征间的关
系。方法：收集食管鳞癌标本80例和癌旁正常组织30例,采用免疫组织化学SP染色法和RT-PCR法检测食管鳞癌组织和正常组织中MTSS1、Cap43蛋白和mRNA的表达情况,分析MTSS1和Cap43表达与食管鳞癌临床病理特征之间的关系,分析两者在食管鳞癌组织中表达的相关性。结果：免疫组织化学SP染色法,MTSS1和C
ap43在癌细胞的胞浆/细胞膜呈现棕黄色,MTSS1在正常组织和食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为83.3%（25/30）和21.3%（17/80）,Cap43在正常组织和食管癌组织中的阳性表达率分别为16.7%（5/30）和76.3%（61/80）,组间比较差异均有统计学意义（P<0.01）。RT-PCR法检测,MTSS1 mRNA在正常组织和食管鳞癌组织中表达水平分别为0.703±0.085和0.295±0.065,而Cap43 mRNA在正常组织和食管鳞癌组织中的表达水平分别为0.236±0.052和0.693±0.078,组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。食管鳞癌组织中MTSS1和Cap43的表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移和临床TNM分期有关联（P<0.05）,而与食管鳞癌患者的性别、年龄、肿瘤大小和组织类型均无关联（P>0.05）;MTSS1与Cap43的表达呈负相关关系（r＝－0.457,P<0.05）。结论：食管鳞癌组织中MTSS1的低表达和Cap43的高表达可能促进
了肿瘤的浸润和转移,二者之间的平衡失调可能是食管鳞癌侵袭和转移的重要机制之一。     

食管鳞癌组织中磷酸化表皮生长因子受体和Akt蛋白的表达

目的:探讨磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)及其下游信号磷酸化蛋白激酶Akt(p-Akt)在食管鳞癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组化法检测50例食管鳞癌组织和50例相应癌旁正常食管黏膜组织中p-EGFR和p-Akt蛋白的表达,并分析二者与食管鳞癌患者临床病理特征的关系以及二者在食管鳞癌组织中表达的相关性。结果:食管癌组织中p-EGFR和p-Akt蛋白表达水平均高于癌旁正常食管黏膜组织(χ2配对=9.818和33.390,P<0.05)。p-EGFR和p-Akt蛋白的表达与食管鳞癌的分化程度(χ2=18.083和11.049,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=7.284和5.817,P<0.05)有关,与患者的性别、肿瘤直径及TNM分期无关(P>0.05)。此外,p-EGFR和p-Akt蛋白在食管鳞癌中的表达呈正关联(rP=0.501,P<0.001)。结论:p-EGFR和p-Akt蛋白的高表达可能与食管鳞癌的恶性程度密切相关。     

食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA表达

目的:检测食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA的表达.方法:应用免疫组化SP法和原位杂交方法检测49例食管鳞癌组织及其相应的30例癌旁不典型增生组织和49例正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白及其mRNA的表达.结果:①正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白和mRNA均为阳性表达.食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA阳性表达率均低于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织(P均＜0.05).②淋巴结转移者食管鳞癌组织与不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA阳性表达率均低于无淋巴结转移组(P均＜0.05).③浸润至外膜的食管鳞癌组织及不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA的阳性表达率分别低于深肌层及浅肌层(P均＜0.05).结论:人食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA均呈低表达,Syndecan-1与食管鳞癌的发生发展及浸润转移有关.     

食管鳞癌组织中Bmi-1的表达及临床意义

目的 探讨Bmi-1 表达与食管鳞癌生物学行为之间的关系。方法 应用免疫组化SP 法和荧光定量PCR 方法从蛋白和mRNA 水平检测48 例食管鳞癌组织中Bmi-1 的表达。结果 食管鳞癌组织中Bmi-1 蛋白的表达量显著高于癌旁食管黏膜组织（P ＜0.01）,mRNA 水平表达与蛋白一致;Bmi-1 蛋白高表达与组织分化程度及淋巴结转移有关（P ＜0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小无关（P ＞0.05）。结论 Bmi-1 在食管鳞癌中高表达,与疾病进展密切相关,可作为预测食管癌生物学行为、判断预后的一个参考指标。     

食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子蛋白的表达

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子(NS)蛋白的表达.方法:应用免疫组化SABC法检测62例食管鳞状细胞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中NS蛋白的表达,并分析其与食管鳞状细胞癌患者病理分级、淋巴结转移等临床指标的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中NS蛋白的阳性表达率分别为69.4%,41.9%和17.7%,3组间比较差异有统计学意义(x2=33.676,P＜0.01).NS蛋白阳性表达率与食管鳞状细胞癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(P均＜0.05),与年龄、性别无关(P＞0.05).结论:NS在食管癌的发生发展和增殖过程中起重要作用,NS蛋白检测可望成为食管鳞状细胞癌早期诊断的重要指标之一.     

食管鳞癌组织中NDRGl mRNA和蛋白的表达

目的：探讨食管鳞癌组织中NDRGlmRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系。方法：分别采用RT-PCR和免疫组织化学SP法检测49例食管鳞癌组织（分化程度Ⅰ级14例，Ⅱ级23例，Ⅲ级12例；有淋巴结转移2l例，无淋巴结转移28例）、23例癌旁不典型增生黏膜组织及49例正常食管黏膜组织中NDRG1 mRNA和蛋白的表达。结果：食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA相对含量低于癌旁不典型增生黏膜组织及正常食管黏膜组织（P〈0．05或0．01）；不同分化程度的食管鳞癌组织之间NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义（P〉0．05）；伴淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移的食管鳞癌组织NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义（P〉0．05）。癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中NDRG1蛋白（＋＋）阳性率（3／23和4／49）均低于正常黏膜组织的43／49（P〈0．01）；食管鳞癌组织中NDRG1蛋白表达与癌组织的分级及有、无淋巴结转移无关（P均〉0．05）。结论：食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA和蛋白表达降低，其低表达可能与食管鳞癌发生有关。     

食管鳞癌组织中端粒长度测定

目的:检测不同病变食管组织中端粒长度并探讨其与临床病理因素的关系.方法:应用Southern印迹杂交和化学发光检测技术对38例食管鳞癌组织、15例不典型增生组织及12例正常食管黏膜组织标本进行端粒长度测定.结果:食管鳞癌、不典型增生和正常食管黏膜组织中端粒长度分别为6.095±2.841、7.847±1.908及9.833±2.140,3组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).正常食管黏膜组织中端粒长度与患者年龄无关(P＞0.05).食管中度不典型增生与重度不典型增生组织比较,端粒长度差异无统计学意义(P＞0.05).食管鳞癌组织中端粒长度与患者年龄、性别、肿瘤大体类型、肿瘤大小、组织学分级、浸润深度、淋巴结有无转移均无关(P＞0.05).结论:端粒长度的异常改变不仅与食管鳞癌的发生发展有关,而且也可能是食管黏膜癌变的早期表现之一.