白血病免疫学分型的新进展

自从单克隆抗体(McAb)问世以来,血液学的诊断和治疗也有了重要进展.McAb 的运用,可以更细致地分析正常细胞和恶性细胞的表现型,准确鉴别正常不成熟白细胞和白血病母细胞;更明确地划分细胞的发育阶段,这对于诊断、治疗和判断预后都是重要的。近3年来,新的抗人白细胞分化抗原 McAb 的不断出现,使白血病的免疫学分型又有许多新的     

血清肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶ELISA检验方法的建立及临床应用

目的 应用抗人肝癌组织中蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰转移酶(GGT)单克隆抗体(MeAb),建立其血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 ,并探讨其在原发性肝癌(PHC)诊断的应用价值.方法 通过McAb技术制备的抗DSA-GGT的McAb,采用蛋白G亲和层析柱色谱纯化;纯化的McAb经生物素标记后,构建血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 .用建立的方法 对39例PHC患者和122例非PHC患者进行初步临床应用研究,用P-P概率图检验119例健康对照血清DSA-GGT分布状态,依据受试者工作曲线(ROC)确定DSA-GGT诊断PHC的cut-off值.结果 获取5株分泌McAb杂交瘤细胞制备的腹腔积液,经纯化后McAb蛋白总量在2.12～6.70 mg之间;McAb的生物素标记率为48.6%～72.2%.所构建的血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 的最低检出限为2μg/L;平均批内、批间变异分别为8.9%和11.5%.119份健康对照血清DSA-GGT水平呈正态分布,x±s为(1.50±0.51)μg/L;经ROC分析确定其诊断PHC的临界值为3.25μg/L.39例PHC患者26例DSA-GGT阳性,其诊断PHC敏感度为66.7%;122例非PHC患者10例DSA-GGT阳性,其诊断特异度为91.8%.结论 所建立的血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法 具有良好的重复性和可靠性.临床初步应用表明其诊断PHC的敏感度、特异度良好,且方法 操作简便,便于临床推广应用,为PHC实验室诊断提供了新方法 .     

抗HCMV不同多肽的6株McAb的研究

目有：为了制备人巨细胞病毒（HCMV）单特异性可溶性多肽的单克隆抗体。方法：采用细胞杂交技术建立了分泌单克隆抗体（McAb）的13株杂交瘤细胞,本文选取6株杂交癌细胞作了进一步研究。结果：6株杂交瘤细胞分泌的McAb均为IgGl,重链、轻链分子量分别为50KD、25KD。间接免疫荧光试验表明：McAb8B8相应的多肽为即刻早期抗原;而McAb7B4、7D7、7E7、7E11、8D6的相应病毒多肽为晚期抗原。免疫印迹试验表明：McAb7B4、7D7、7E7、7E11、8B8、8D6相应的病毒多肽分子量分别为46、150、38、51、72、65KDO结论：6株McAb可用作HCMV感染的诊断。     

脑囊虫单克隆抗体Dot—ELISA检测循环抗原的临床应用

检测宿主体液中的循环抗原(CAg)则可准确判断宿主体内有无活虫存在,从而提供治疗依据.脑囊虫病的特异性CAg 测定已有报道.本文用McAb Dot-ELISA 检测CAg 诊断脑囊虫病.1 材料与方法1.1 猪囊尾蚴囊液抗原的制备按张洪花等报道的方法进行.1.2 抗猪囊尾蚴抗原McAb 的制备按常规方法进行.1F11 McAb 系IgG_1亚类;其与包虫抗原及肝吸     

单克隆抗体在实验诊断中应用进展

McAb技术正广泛应用于生物化学、微生物学、免疫学、血液学、遗传学、药物学等各个领域，它不仅为生物细胞学、免疫学的研究提供了有力的手段，而且为细菌、病毒、寄生虫、癌症的诊断提供了快速、准确、敏感的实验方法。下面介绍McAb在实验诊断几个方面的应用。     

单克隆荧光抗体优化检测沙眼衣原体

实验室诊断病毒和某些细菌感染的传统作法是组织培养分离(TC)。这种方法费用昂贵,需几天时间才能完成,并且还要取决于临床标本中被检微生物的活力。最近,一些直接检测临床标本中的病毒或细菌抗原的试验问世。其中,用特异性单克隆抗体(McAb)进行的免疫荧光试验诊断病毒感染优于TC,快速且易于操作。结合荧光素的McAb可用于诊断衣原体感染。用种特异性或属特异性     

国际各类品种血小板膜糖蛋白单克隆抗体试剂对血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术的影响

本研究按国际输血学会第14届国际血小板免疫学研讨会和合作研究项目的要求,分析比较国际常用血小板膜糖蛋白单免隆抗体（McAb）各类品种对血小板抗原McAb特异性免疫固定检测技术（MAIPA）检测血小板抗体结果的影响。向参加该研究的30个实验室发放10份含已知血小板抗体特异性的血清和1份阴性对照血清样本,以及9份不同类别（GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／,Ⅱa、GPⅠb／Ⅸ及GPⅣ）及克隆编号的血小板膜糖蛋白McAb和统一的实验研究技术方案,各参加实验室按方案进行检测并反馈结果数据,比较同一糖蛋白种类不同的McAb对MAIPA检测结果的影响。结果表明：GPⅡb／Ⅲa中AP2,Gi-5,PL2—73等几种McAb的平均S／CO值较高;GPⅠa／Ⅱa的McAb中MBC202．2和143．1的平均S／CO值较高;GPⅠb／Ⅸ的McAb中142．11和CLB—MB45（C042b）的平均S／CO值较高;GPⅣ的McAb中131．4的平均S／CO值较高。结论不同的McAb品种对样本的检测结果存在差异,McAb对MAIPA的灵敏度有重要影响。用MAIPA法检测血小板抗体时应同时使用相同糖蛋白种类而不同克隆号的McAb,以防止血小板抗体的漏检。     

人中性粒细胞防御素单克隆抗体制备及初步应用

目的　制备人中性粒细胞防御素 1单克隆抗体 (HNP 1McAb) ,并用HNP 1McAb建立直接免疫荧光法对正常人及一系列髓性白血病患者中性粒细胞进行免疫细胞化学染色。方法　用连续酸 尿素 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化人中性粒细胞防御素组份 (HNP 1～ 3) ,以纯化的HNP 1为抗原制备特异性的HNP 1McAb ,并建立了HNP 1McAb直接免疫荧光染色法。将分离纯化的正常人和兔外周血中性粒细胞、淋巴细胞 ,粒细胞白血病、淋巴细胞白血病患者的骨髓和外周血分别制成涂片 ,进行免疫荧光染色。结果　HNP 1McAb与正常人外周血中性粒细胞及急、慢性粒细胞白血病骨髓和外周血涂片的原、早幼、中幼、晚幼和成熟的中性粒细胞均呈特异的阳性反应。人红细胞、淋巴细胞及其他非粒细胞系统的有核细胞均呈阴性反应。对兔的中性粒细胞无交叉反应。结论　HNP 1可作为粒细胞系统的特异性分化标志 ,其相应的HNP 1McAb可作为粒细胞的标志性抗体用于髓性白血病的鉴别诊断和分型     

单克隆抗体在急性白血病免疫分型中的临床意义

应用单克隆抗体（monoclonalantibody．McAb）技术研究造血系统各类型细胞的表面分子标记，为白血病免疫分型增添了新的手段，提高了白血病的诊断率。现将McAb在急性白血病（AL）免疫分型中的临床意义作一综述。1McAb在AL中的应用，提高了AL诊断的准确性AL的分型多采用FAB分类法[1]及辅以细胞化学染色法作为诊断AL的基本方法。由于白血病系造血细胞在分化过程中阻滞于某一分化阶段，并呈恶性增殖，恶性增殖的细胞形态复杂多变，尤其是分化早期的AL细胞，更不易识别，临床k上常出现因FAB分型标准难以分类，或由于判断上的主观因素…     

髓过氧化物酶双抗体夹心光激化学发光检测法的建立

目的建立一种定量检测血浆中髓过氧化物酶(MPO)浓度的双抗体夹心光激化学发光检测法(LiCA),用于心血管疾病的辅助诊断。方法采用棋盘格滴定法,从针对MPO抗原的12株单克隆抗体(McAb)中筛选出最佳双抗体组合(1株McAb包被发光微粒,另1株McAb进行生物素化),进而探索2种抗体最适反应浓度及MPO LiCA的最适反应条件,评价该法的重复性、敏感性、抗干扰性及回收率,并与经典的CardioMPOTM酶联免疫吸附试验(ELISA)进行平行比较分析。结果筛选到2株最适McAb,并与链霉亲和素包被的感光微粒连接,建立用于MPO定量测定的LiCA。该法敏感性为1.76 ng/mL,批内变异系数(CV)和天间CV分别为2.73%、3.76%,平均回收率为102.5%±8.6%,与CardioMPOTMELISA具有良好的相关性(r=0.961,P<0.01),正常参考范围为13.16～128.79 ng/mL。结论成功建立了一种用于MPO定量检测的LiCA,该法具有高的敏感性和好的稳定性,试剂有效期长,并且操作流程简便,耗时短,在心血管疾病的辅助诊断中具有很好的应用前景。     

红细胞血型单克隆抗体的应用研究现状

红细胞血型单克隆抗体问世迄今已逾十年,已制备出多种不同特异性的McAb,并进行了大量的应用研究。国内外已开始以McAb 作为血型鉴定试剂,试用于临床医学和法医学的血型检测。但由于红细胞血型抗原的复杂性,用McAb 作为血型检测试剂还存在一些问题,目前还不能用McAb 完全替代多克隆抗体作为常规血型鉴定试剂。而在法医血清学中,McAb 显示了较多克隆抗体明显的优点,使种属及个体识别更特异。     

ABC—ELISA定量检测血小板相关IgG

本文介绍应用国产BAS试剂建立检测PAIgG的ABC-ELISA方法。实验因素探讨表明。ABC-ELISA灵敏度较Pc Ab-ELISA次8倍、较McAb高2倍,因而用血量较少;同时,本法还具有重复性好、简便、稳定等优点。应用于临床对ITP的诊断及疗效观察很有意义。     

用单克隆抗体建立的 ELISA 技术诊断囊虫病

我们用单克隆抗体(McAb)建立的ELISA 技术诊断囊尾蚴病,有较好的效果,现报告如下.一、材料1.猪囊尾蚴囊液抗原致敏的PVC 载体.     

HCG 酶免疫诊断试剂和血球诊断试剂的制备和应用

目前国内妊娠诊断主要采用乳胶凝集抑制试验(LAIT),只能测出2500IU/L 浓度以上的人绒毛膜促性腺激素(HCG),故大多数停经40天以内和部分停经40～60天、HCG 分泌偏低的妊娠,以及宫外孕等不能及时确诊。我们在建立β-HCG 单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株后,选择与黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)交叉反应低,但能识别明显不同的抗原位点的两种McAb(C_3和C_4),制备成HCG     

无血清培养条件下丝裂原和单抗对rIL-2激活的淋巴细胞活性的影响

采用无血清培养体系,探索了PHA-P,PWM、Con-A及CD3McAb对rIL-2激活的正常人外周血淋巴细胞增殖及细胞毒活性的影响,并同合优质新生牛血清的培养体系进行了比较。结果表明,在无血清培养条件下:①rIL-2、rIL-2 PHA-P及rIL-2 CD3McAb激活的淋巴细胞的增殖及细胞毒活性均高于有血清培养;rIL-2 PWM激活的淋巴细胞仅在细胞毒活性方面高于有血清培养。②PHA-P、PWM、Con-A及CD3McAb对rIL-2激活的淋巴细胞的增殖均有促进作用,CD3McAb可增强其对K562及HL60的细胞毒活性,而PHA-P仅能增强其对K562的细胞毒活性。     

测定病人抗同种型或独特型决定簇抗球蛋白反应的简易方法

临床上将单克隆抗体(McAb)作为免疫抑制剂或肿瘤治疗剂已较普遍,但病人体内可能产生抗球蛋白反应。如果产生的抗球蛋白反应是只针对McAb 独特型(Id)的,则可换其它型别的McAb 继续使用,因为同一抗体具有不同型的Id 决定簇。如果产生的抗球蛋白反应是针对同种型(Iso)或同种异型(Allo)决定簇的,则不能继续使用这类McAb。测定抗球蛋白反     

桥本甲状腺炎临床综合分析

目的 提高对桥本甲状腺炎的认识。方法 对40例桥本甲状腺炎进行长期随访。结果 首诊时16例表现为甲状腺功能亢进症（甲亢）,14例甲状腺功能正常,10例诊断为甲状腺功能减退症（甲减）;有28例最终演变甲减,占70％,所有患者抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPoAb）,抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）,抗甲状腺微粒体抗体（McAb）滴度均偏高,并有逐步升高趋势。结论 桥本甲状腺炎的甲状腺功能可正常,也可表现为甲亢或甲减,但其本身有自然发生甲减的趋势,故最终归为甲减;TPoAb、TGAb、McAb高滴度持续时间较长,可达10年以上,其峰值比发病年龄晚10－20年;肿大的甲状腺或甲状腺结节在随访中可缩小或消失。     

介绍人白细胞分化抗原的国际命名法

杂交瘤技术的迅速发展,导致越来越多的抗人白细胞分化抗原单克隆抗体(McAb)出现。这些抗体包括抗 T、B 淋巴细胞,NK 细胞,粒细胞,抗血小板以及其它造血细胞等McAb。1982年11月巴黎会议上第一届白细胞分化抗原研究小组报告了对139种 McAb 的鉴     

McAb检测循环抗原用于脑囊虫病的诊断

脑囊虫病特异性循环抗原(CAg)的检测近年来已有报道,方法多为多抗ELISA,多抗Dot-ELISA及单抗抑制性ELISA。本文建立了用McAb间接ELISA检测该病CAg的方法。     

缺凝血因子Ⅶ血浆的研制及初步性能评价

目的制备缺凝血因子Ⅶ血浆(FⅦDP)并初步评价该FⅦDP的性能。方法利用本实验室建立的抗人凝血因子Ⅶ单克隆抗体(FⅦMcAb)杂交瘤细胞株,采用小鼠体内诱生腹水法和亲和层析法制备高亲和力的FⅦMcAb,并将其偶联至CNBr-Activated Sepharose 4B上,制成FⅦMcAb免疫亲和层析柱,制备FⅦDP;采用凝血一期法检测自制FⅦDP中各凝血因子促凝活性并考察自制FⅦDP的精密度,对比自制FⅦDP和同类进口FⅦDP制品的测定线性范围、比较二者检测不同FⅦ水平样品的效果。结果所制备的FⅦMcAb亚类均被鉴定为IgG1型,利用该FⅦMcAb制备的FⅦDP中FⅦ促凝活性(FⅦ∶C)<1%,而FⅡ∶C、FⅤ∶C、FⅧ∶C、FⅨ∶C及FⅩ∶C都>70%,均满足正常凝血所需水平;该FⅦDP线性范围在1.625%—200%,3批次自制FⅦDP批内精密度(Sr)分别为3.30、3.36和3.30,批内变异系数分别为4.12%,4.11%,3.98%;批间精密度(Srr)4.20,批间变异系数4.99%,标准曲线的相关系数(r)分别为-0.998、-0.996和-0.996与同类进口制品(r=-0.998)基本一致;经相关分析,该FⅦDP对于不同FⅦ水平的样品的检测效果与同类进口产品一致,r分别为0.97、0.96和0.97。结论初步评价显示FⅦMcAb免疫亲和层析柱研制出FⅦDP性能良好,可作为FⅦ检测试剂使用。