免疫抑制豚鼠肺部炎症反应中TNF-α的表达

目的探讨免疫抑制宿主(ICH)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的肺部炎症机制。方法采用醋酸可的松联合环磷酰胺建立ICH动物模型,ICH活体肺经气管给予内毒素(LPS)诱导ICH肺部炎症反应,刺激前及刺激后1、3、5、8、24h行支气管肺泡灌洗(BAL),异硫氰酸胍一步法抽提肺组织总RNA。随机引物DNA标记方法制备TNF-αcDNA探针,点杂交测定TNF-αmRNA。结果LPS刺激后肺组织病理发现有急性炎症反应,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数随LPS刺激时间延长而增加,于5h达高峰,肺泡巨噬细胞(PAM)和中性粒细胞(PMN)数量均增高,但PAM比例因PMN比例升高而降低。TNF-α在LPS刺激后5h达高峰,24h降至接近刺激后1h的水平。BALF中TNF浓度明显高于血清的浓度。BALF中TNF水平的增高与PMN进入肺泡腔在动力学上基本平行。肺脏组织TNF-αmRNA于LPS刺激后逐渐上升,于3h达高峰(45.47±2.04),之后缓慢下降,其表达超前于TNF分泌峰值。结论TNF可能是介导PMN内流和炎症的细胞因子(CKs)之一。ICH过高的TNF释放会引起肺损伤。在受到LPS刺激后ICH系统性炎症免疫反应抑制而肺部炎症依然剧烈,反映了“腔室化”现象存在。     

血清TNF—α变化在小儿全身炎症反应综合征中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF－α）在全身炎症反应综合征（SIRS）中的作用。方法 用酶联免疫吸附法（ELISA）检测46例感染性疾病患儿（其中SIRS 26例、非SIRS20例）及20例健康体检儿的血清TNF－α含量。结果 SIRS组患儿血清TNF－α含量明显高于非SIRS组与正常对照组（P＜0．01），且血清TNF－α含量随符合SIRS诊断标准数目的增多而增高。结论 TNF－α是SIRS中的主要炎性介质，它对脏器的损害起关键作用。     

Hsv—tk、重组人TNF—α融合基因表达载体的构建及瞬时表达

目的：构建pEGFP-TK-TNF-α表达载体，观察其在喉癌细胞Hep-2中的瞬时表达，方法：应用PCR方法对各自的进行扩增并经测序载体pGEM-T-Easy测序，利用逆转录病毒载体PLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因TK－rhTNF-α并将其亚克隆至pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间成功构建表达载体pEGFP-TK-rhTNF-α，并在该载体转染人喉细胞Hep-2后观察融合蛋白表达情况，结果：酶切鉴定证实TK－rhTNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间，并在转染人喉癌细胞Hep-2中观察到TK－rhTNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRI和BamH1位点间，并在转染人喉癌细胞Hep-2中观察到TK－rhTNF-α融合基因及绿色荧光蛋白的表达。结论：pEGFP-TK-rhTNF-α表达载体便于观察转染细胞中TK－rhTNF-α融合蛋白的表达情况及蛋白定位，为自杀基因联合细胞因子基因疗法提供有利条件。     

不同发展阶段肺结核患者血清中sIL—2R、TNF—α含量观察

目的：探讨不同发展阶段肺结核患者血清中sIL-2R、TNF－α含量对疾病的影响。方法：采用ELISA法检测63例不同发展阶段的肺结核患者及40例健康对照组血清sIL-2R、TNF－α的含量。结果：对照组与结核病活动期组、结核病活动期与恢复期组血清中sIL-2R、TNF－α含量比较均有显著性差异（P＜0．01），对照组与恢复组比较差异无显著性（P＞0．05）。活动期结核病患者血中sIL-2R、TNF－α水平随病情加重而增加。结论：肺结核患者血清中sIL-2R、TNF－α浓度与病情的严重程度呈正相关，检测肺结核患者血清中sIL-2R、TNF－α浓度可判断结核病进展程度，为诊断、治疗提供依据。     

早产乳中肿瘤坏因子—α的测量及其意义

目的：探讨早产母初乳中免疫活性物质肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的含量。方法：用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定初乳中ＴＮＦ－α的含量，与正常足月初乳组做对比分析。结果：早产母初乳中ＴＮＦ－α的含量高于足月组，二者间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：早产母初乳中含有丰富的免疫活性物质，对早产儿更应提倡母乳喂养、早哺母乳。     

胃癌患者血清中NO、T—SOD及TNF—α的水平变化及临床意义

目的：探讨胃癌患者血清中一氧化氮（NO）、总超氧化物歧化酶（T－SOD）及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的含量变化。方法：用生物化学方法测定胃癌患者血清NO、T－SOD含量;用ELISA法测定胃癌患者血清TNF－α含量,并进行统计学分析。结果：胃癌患者血清NO及T－SOD含量均显著低于正常对照组（P值均＜0．05）,而血清TNF－α含量显著高于正常对照组（P＜0．05）。本实验还对胃癌患者中的10例进行了肿瘤根治术前及肿瘤根治术后10天左右标本的对比检测。结果表明,肿瘤根治术后该病患者血清NO及T－SOD含量较术前明显升高（P值均＜0．05）,但仍低于正常对照组（P值均＜0．05）,而血清TNF－α含量较术前明显降低（P＜0．05）,但仍高于正常对照组（P＜0．05）。结论：胃癌患者血清NO及T－SOD含量降低：TNF－α含量增高,多项指标的联合检测对其发病机理探讨,疗效观察和预后判断均有一定临床意义。     

小鼠病毒性心肌炎TNF—α变化及意义

目的：研究病毒性心肌炎（VMC）小鼠肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的动态变化及其在VMC小鼠发病中的意义。方法：本实验用ELISA方法检测VMC小鼠在接种病毒后3、5、7、9、15、35天血清TNF－α的变化，并分析了TNF－α与VMC发病的可能关系。结果：实验发现VMC小鼠在接种病毒后3－35天各时点的血清TNF－α水平均明显高于对照组（P＜0．05或0．01）。其表达高峰在接种病毒后7天（与对照组比较P＜0．01）。结论：结果提示小鼠VMC血清TNF－α水平升高可能参与VMC的发病。     

肿瘤坏死因子—α（TNF—α）对卵巢功能的影响

目的：通过实验观察TNF－α对妇女卵巢颗粒细胞和黄体细胞的直接作用以及与某些妇科疾病的关系。方法：用放射免疫方法观察了不孕症和功能性子宫出血患者血清中TNF－α浓度，用细胞培养方法观察了TNF－α对人黄体细胞和颗粒细胞CAMP和孕酮生成的影响。结果：与正常人相比不孕症和功能性子宫出血患者血清中TNF－α浓度显著增高，结论：TNF－α对女性生殖能力有显著影响。     

大剂量黄芪对慢性肾炎患者血、尿TNF—α的影响

目的：观察大剂量黄芪对慢性肾小球肾炎（CGN）患者血清、尿液肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的影响。方法：采用放射免疫法测定30例CGN患者（治疗组）应用大剂量黄芪注射液治疗前后血清、尿液TNF－α水平;并与30例应用常规治疗的患者（对照组）及30名健康人（健康对照组）进行比较,同时观察尿β2－微球蛋白（β2－MG）、24小时尿蛋白定量及内生肌酐清除率（Ccr)的变化。结果：治疗前两组患者较健康对照组血、尿、TNF－α、尿β2－MG及24小时尿蛋白定量均显著升高（P＜0．01）,治疗后治疗组上述指标均明显改善（P＜0．01）,其改善优于对照组（P＜0．05,P＜0．01）。治疗后两组Ccr比较无明显差异（P＞0．05）。结论：大剂量黄芪有较好的降低CGN患者血、尿TNF－α作用,为该药治疗CGN提供了理论依据。     

TNF—α在子宫腺肌病中的表达及其临床意义

目的：检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）在子宫腺肌病中的免疫组化定位和表达。探讨TNF－α在子宫腺肌病发生中的临床意义。方法：采用SABC免疫组化技术观察子宫腺肌病（33例）标本中TNF－α的组织定位和表达,并按照其染色强度进行统计学分析。结果：子宫腺肌病中存在TNF－α的表达;TNF－α在原位子宫内膜中的表达强度,分泌期高于增生期,并且呈周期性变化;TNF－α在异位子宫内膜中的表达强度分别高于原位子宫内膜和正常子宫内膜,但是异位子宫内膜和子宫肌层中表达无周期性变化。结论：TNF－α在异位子宫内膜中的高表达提示子宫腺肌病的发生发展受卵巢激素和多种细胞因子的调节。     

肿瘤坏死因子—α抗肿瘤研究进展

近年来,基因工程技术迅速发展。1984年首次人肿瘤坏死因子α(TNF-α)cDNA克隆成功并在大肠杆菌中表达。为进一步探讨TNF基因及蛋白质结构提供了可能。在TNF广泛的生物学作用中最引人注目的是其抗肿瘤活性。1985年以来,美日等国已用TNF-α进行了Ⅰ、Ⅱ期临床抗肿瘤试验性治疗并取得了初步结果。多年来的研究表明,TNF作为一种抗肿瘤的侯选药物是有希望的。     

核因子—kB在TNF—α诱导HL—60细胞凋亡中的作用

目的 了解白血病细胞系HL-60中，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的核因子-kB(NF-kB）活化与细胞凋亡之间的关系。方法 采用脂质体基在转染技术，将突变的核因子抑制蛋白（IkBα）质粒（PCMV4-1kBαS32//36∧）转染HL-60细胞，于48后测其瞬时表达效应。用间接免疫荧光和Western blot技术检测转染组和诱导及生长抑制效应。结果 TNF-α可诱导非转染组HL-60细胞的NF-kB活化，不能诱导转染组细胞的NF-kB活化，即突变型IkBα可特异性抑制HL-60细胞的NF-kB活化。结论 用突变型IkBα特异性抑制HL-60细胞的NF-kB活化，能明显增加其对TNF-α的敏感性。     

肺癌TNF—α的表达及其意义

目的 探讨ＴＮＦ－α基因在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化ＳＰ法检测４０例肺癌组织中肿瘤坏死因子（Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ－α）的表达,并与癌旁正常肺组织对照。结果 ＴＮＦ－α阳性表达主要分布于癌细胞胞浆中,阳性率为４７．５％（１９／４０）,细胞核内无阳性表达;癌旁正常肺组织内无阳性表达（Ｐ〈０．０５）。结论 ＴＮＦ－α与肺癌的发生、发展有着密切关系。     

TNF—α和IFN—α对淋巴细胞迁移至小鼠皮肢区的影响

目的 体内观察ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α两种细胞因子对淋巴细胞迁移至小鼠皮肤区的影响。方法 以近交系ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为实验动物,皮内注射细胞因子,尾静脉输注标记的淋巴细胞,然后切除注射区皮块,制样后行乳化计数测量。测量值计算后转化成细胞浓度因子（ＣＣＦ）,用ＣＣＦ值反应淋巴细胞迁移的水平。结果 ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α注射区ＣＣＦ值均高于对照（Ｐ〈０．０１）;且ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－α联合应用的ＣＣＦ值是     

原发性肾病综合征患者血和尿TNF—α变化及其意义

目的：探讨TNFα在原发性肾病综合征（PNS）发病中所起的作用，方法：检测40例PNS患者和20名正常人血，尿TNF－α含量。40例PNS患者接受糖皮质激素常规治疗，分别于治疗后1，2，3，4周复查血，尿TNF－α水平，并与正常人血，尿TNF－α进行比较，结果：40例PNS患者血，尿TNF－α均较正常对照组明显增高（P＜0．01），激素治疗后显效31例，无效9例，显效率为77．5％，显效者血，尿TNF－α早期即开始下降，而激素治疗无效者，血，尿TNF－α无明显变化。血，尿TNF－α与血尿素氮（BUN），血肌酐（Scr),24h尿蛋白定量（Pro)明显正相关，与内生肌酐消除率（Ccr)明显负相关，结论：TNF－α参与PNS发病及疾病进展，激素治疗PNS有效，其作用机制可能与其抑制TNF－α产生有关；，血尿TNF－α可作为评价PNS发病及疾病活动性的一个临床指标。     

肿瘤坏死因子—α（TNF—α）对卵巢的影响

目的 通过实验观察ＴＮＦ－α对妇女卵巢颗粒细胞和黄体细胞的直接作用以及与某些妇科疾病的关系。方法用放射免疫方法观察了不孕症和功能性子宫出血患者血清中ＴＮＦ－α浓度,用细胞培养方法观察了ＴＮＦ－α对人黄体细胞和颗粒细胞ｃＡＭＰ和孕酮生成的影响。结果 与正常人相比不孕症和功能性子宫出血患者血清中ＴＮＦ－α浓度显著增高;ＴＮＦ－α剂量依赖性刺激人颗粒细胞ｃＡＭＰ生成;ＴＮＦ－α抑制人离体黄体细胞基础酮生     

乙型肝炎患者血清中TNF-α水平与肝组织炎症的关系

目的研究临床各期乙型肝炎患者血清TNF-α水平变化及其与肝组织炎症坏死的关系。方法用放射免疫法测定77例乙型肝炎患者血清TNF-α水平与65例健康人对比，同时对所有患者行肝组织活检，并对肝组织进行炎症分期：另对临床各期的患者TNF-α水平做了比较。结果患者血清TNF-α水平与乙型肝炎的进度一致，在慢性肝炎活动期与重型肝炎阶段处于最高水平，与肝组织的炎症坏死程度一致，在S3期处于最高水平。结论血清TNF-α水平与肝组织炎症坏死和纤维化程度呈正相关，但与炎症坏死相关性更显著。