热变性和有机溶剂沉淀联合法提纯超氧化物歧化酶

以抗凝马血为原料，分三组分别采用热变性法、有机溶剂沉淀法及热变性与有机溶剂沉淀联合法对超氧化物歧化酶进行分离提纯，对三组方法所得的粗酶和经ＤＥＡＥ－３２层析后的纯酶分别进行蛋白浓度、酶活力等检测，综合结果与分析表明，热变性与有机溶剂沉淀联合法是提纯ＳＯＤ的优选方法。     

马血超氧化物歧化酶的提纯及检测

目的:探讨提纯马血超氧化物歧化酶的有效方法。方法:分别采用热变性、有机溶剂沉淀和热变性与有机溶剂沉淀联合法对马血超氧化物歧化酶进行分离提纯,对三组方法所得的粗酶和经DE-AE-32纤维素层析的纯酶进行蛋白浓度及酶活性等检测。结果:有机溶剂沉淀法和联合提纯法酶活力相近,它们明显高于热变性组。结论:联合法比有机溶剂沉淀法节省大量的有机溶剂,而且也能得到较高活力的酶,提示联合法是提纯马血超氧化物歧化酶的优选方法。     

热变性法处理HCVRNA模板直接扩增

采用低浓度２－巯基乙醇作为裂解剂，配合高热变性处理血清等标本中丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）模板，将裂解上清直接逆转录，使ＨＣＶＲＮＡ转变为ｃＤＮＡ，再行套式多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增．５８份抗－ＨＣＶ阳性血清标本中，可检出３２份（５５．２％）ＨＣＶＲＮＡ，虽与常规的酸胍酚抽提方法所检出相当（即３０份被检出ＨＣＶＲＮＡ阳性，５１．７％），由于这种直接法省去了用酚及氯仿抽提和醇类沉淀等步骤，具有明显的实用价值。     

年龄相关性黄斑变性血清过氧化脂质水平与超氧化物歧化酶活性的相关性研究

对３５例年龄相关性黄斑变性（ＡＭＤ）和３４例健康对照者进行过氧化脂质（ＬＰＯ）水平和血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的测定。ＬＰＤ检测采用测定其最终产物之一丙二醛（ＭＤＡ）含量。结果显示ＡＭＤ组ＭＤＡ高于对照组，差异显著（Ｐ＜０．０５）。ＳＯＤ在ＡＭＤ组偏低，但无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。正常对照组ＭＤＡ与ＳＯＤ呈负相关（ｒ＝－０．４１３９，Ｐ＜０．０５），而ＡＭＤ组则否。说明ＡＭＤ患者抗氧化能力减弱，导致脂质过氧化损害。低锌可能是ＳＯＤ降低原因，应用抗氧化剂治疗是有益的。     

胶原模拟多肽三螺旋结构的热变性过程

氨基酸重复序列是很多纤维状蛋白质特征,这些序列促进每种蛋白形成自己的拓扑结构[1].胶原蛋白Gly-X-Y肽段的重复出现使得胶原二级结构呈现特征性的聚脯氨酸Ⅱ型(P2)结构,P2结构进一步形成稳定的三螺旋结构,这是胶原蛋白区别于其他蛋白质的特征性结构[2].     

接触性热痛诱发电位在亚急性联合变性诊断中的作用

为了探讨应用接触性热痛诱发电位（CHEPS）技术研究亚急性脊髓联合变性（SCD）患者痛觉传导通路变化特点，探讨CHEPS在SCD中的应用价值，为其电生理诊断提供依据，天津医科大学总医院神经科靳梅等选取确诊型SCD患者20例和健康人34名，应用CHEPS刺激器，刺激水平为51℃，     

99mTc-热变性红细胞脾显像诊断副脾1例

陈某,女,24岁,1996年因"肝硬化、脾大"行脾摘除,1999年4月再次入院时B超发现左上腹有一5.0 cm×3.7 cm的实质回声.由于患者有不明原因的高血压,因而考虑为:①嗜铬细胞瘤;②副脾.MRI示左肾上极有一5.2 cm×4.2 cm×3.8 cm的软组织块影,疑为副脾,软组织肿瘤待排.体检:一般情况较差,血压20/13 kPa,肝肋下1 cm扪及,质中,无其他阳性体征.     

热盐水对大鼠萎缩性胃炎血清和胃黏膜组织超氧化物歧化酶和总抗氧化力的影响

慢性萎缩性胃炎是临床常见的胃部疾病，由于其与胃癌尤其是肠型胃癌的发生呈显著正相关，1978年世界卫生组织将其定为癌前病变。我们以人类饮食中不可缺少的二大因素-食物的热度与成度，创建了快速建立慢性萎缩性胃炎动物模型的方法，并观察从正常胃黏膜发展到萎缩性胃炎的演变过程中超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化力（TAC）的动态变化，以探讨活性氧损伤与萎缩性胃炎发生的关系。     

肝豆状核变性患者血清超氧化物歧化酶活性的检测及与血清肝功能、铜生化指标的相关性分析

目的 研究肝豆状核变性(WD)患者血清超氧化物歧化酶(SOD)活性变化与肝功能、铜生化指标的相关性.方法 选择2017年7月—2019年2月本院收治的267例肝豆状核变性(WD)患者(病例组)和117名同期门诊健康体检正常者(对照组)作为研究对象.病例(WD)组又分为肝型129例,脑型138例.检测并比较两组SOD活性...     

热变性对外周血细胞亚群标记效果的影响

目的探讨热变性对外周血细胞亚群标记效果的影响,从而建立稳定的流式-荧光原位杂交技术流程（flow cytometryfluorescence in situ hybridization,Flow-FISH）。方法采集10例健康人肝素抗凝新鲜外周血标本,分别以Alexa Fluor647标记的CD3、CD19、CD14抗体标记T淋巴细胞、B淋巴细胞和单核细胞,高温变性后,采用流式细胞术分析热变性前后细胞系列特异性抗原表达的变化;以Fluor647-CD3标记外周血T淋巴细胞,以4种浓度的Bis[sulfosuccinimidyl]suberate（BS3）交联剂进行抗原抗体交联,比较不同浓度BS3的交联效果。结果高温变性后,Alexa Fluor647标记的CD3和CD19的荧光强度减弱,但仍能有效区分出T淋巴细胞和B淋巴细胞;Alexa Fluor647-CD14的荧光强度无变化,单核细胞清晰可辨;4种浓度交联剂BS3作用后,CD3的标记效果基本一致。结论经过热变性后,Alexa Fluor647标记的CD3、CD19、CD14抗体仍能够有效标记出血细胞中的不同细胞亚群,耐热性好,可以用于Flow-FISH技术中;交联剂BS3的适宜作用浓度为2.5 mmol/L。     

超氧化物歧化酶对大鼠肾热缺血再灌注损伤的作用—组织学观察

本文观察了经超氧化物歧化酶(SOD)处理的大鼠热缺血再灌注肾脏的组织学改变。结果表明未经 SOD 处理的动物肾脏热缺血1小时,再灌注24小时肾皮质近端小管损伤严重,并以细胞坏死为主。血管球中各细胞水肿,膜结构模糊、破裂、线粒体肿胀,嵴紊乱消失等改变。而经 SOD 处理的肾脏小管损伤轻、以变性表现为主,血管球近于正常。本文还详细地描述两组动物肾脏的组织学改变。     

热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注后血清丙二醛、超氧化物歧化酶的影响

目的探讨热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响。方法制备大鼠缺血再灌注模型及热应激预处理模型。采用硫代巴比妥酸法测定大鼠丙二醛(MDA)浓度,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力并与对照组比较。结果大鼠肢体缺血再灌注后血清中的MDA含量明显增高(P<0.01),并有随再灌时间延长不断升高的趋势,而SOD活性明显降低(P<0.01);热应激预处理后,血清中MDA含量明显降低(P<0.01),SOD活性明显增高(P<0.01)。结论热应激预处理可增强SOD清除细胞内氧自由基的水平。     

肺癌中血清乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶联合检测的意义

目的:探讨血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)联合检测在肺癌诊疗中的临床应用价值.方法:收集局部晚期或转移性肺癌病人45例,以健康体检人群45名作为对照组,使用Beckman Coulter AU5800型全自动生化分析仪,测定血清中LDH和SOD含量,同时观察肺癌病人化疗前后两指标的变化.结果:与对照组相比,肺癌病人的LDH水平升高,SOD水平降低(P<0.01).LDH与病人血清白蛋白水平呈负相关(P<0.05);SOD与病人肿瘤分期呈负相关(P<0.01),与血清白蛋白水平呈正相关.两指标在肺癌病人治疗前血清中的表达水平呈负相关关系(P<0.05).2周期化疗后,化疗的疗效与LDH的下降及SOD的上升均呈正相关(P<0.05).结论:联合监测血清LDH和SOD含量对肺癌病人疾病诊断、病情评估及疗效评价可能有一定的临床意义.     

热变性法测定红色毛癣菌核中DNA鸟嘌呤加胞嘧啶含量的研究

DNA中鸟嘌呤加胞嘧啶克分子百分比含量(G Cmol％)值是一种间接反映两个物种核中DNA序列相似性的遗传指标之一.自从Lee和Belozersky把G Cmol％值用作细菌分类鉴定遗传指标以后,G Cmol％值在微生物分类鉴定方面已得到广泛应用。在真菌方面,国外于60年代已有报道,而国内     

热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注后血清丙二醛、超氧化物歧化酶的影响

目的：探讨热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响。方法：制备大鼠缺血再灌注模型及热应激预处理模型。采用硫代巴比妥酸法测定大鼠丙二醛（MDA）浓度，采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力并与对照组比较。结果：大鼠肢体缺血再灌注后血清中的MDA含量明显增加（P＜0．01），并有随再灌注时间延长不断升高的趋势，而SOD活性明显降低（P＜0．01）；热应激预处理后，血清中MDA含量明显降低（P＜0．01），SOD活性明显增高（P＜0．01）。结论：热应激 预处理可增强SOD清除细胞内氧自由基的水平。     

食管癌细胞株热休克蛋白70肽复合物的提纯及抗肿瘤活性观察

目的:利用抗体亲和层析法从食管癌细胞内提纯热休克蛋白70肽复合物(heat shock protein70 peptidecomplexes,HSP70-PCs),观察其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对食管癌细胞的杀伤作用.方法:常规方法造成EC-109细胞热休克,偶联HSP70抗体的CNBr-Sepharose 4B亲和层析柱分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot检测获得的蛋白;混合淋巴细胞反应检测纯化过程中收集的蛋白粗提液、PBS洗脱蛋白及解吸附剂洗脱蛋白对食管癌细胞的杀伤活性.结果:细胞经热休克作用,裂解后获蛋白粗提液,经亲和层析柱过柱、洗脱后得到的蛋白经电泳鉴定为相对分子质量在70 000左右的单一条带,且经Western blot鉴定可与HSP70单克隆抗体结合,证实为HSP70;MTT法检测解吸附剂洗脱蛋白诱导的CTL对食管癌细胞的杀伤率为(38.10±2.78)%,明显高于蛋白粗提液(22.22±2.54)%和PBS洗脱蛋白(17.46±3.89)%,P均＜0.05.结论:利用抗体亲和层析法,能够简便地从热休克处理过的食管癌细胞株中分离纯化HSP70-PCs,且所获得的HSP70-PCs具有较强的激活CTL杀伤食管癌细胞的生物学活性.     

脊髓亚急性联合变性的临床和MRI影像学分析

目的：探讨脊髓亚急性联合变性（SCD）的临床和MRI影像学特点。方法回顾性分析12例SCD患者的MRI影像图像及临床诊治资料。结果12例患者均因神经系统损害体征起病,血清维生素B12降低6例,升高2例,正常4例。1例MRI检查未见明显异常。11例患者MRI检查能直观地显示病灶,其中1例表现为脊髓萎缩,其余10例表现为颈胸段脊髓后、侧索的对称性T1WI等或稍低信号和T2WI高信号,其中1例合并颅内异常信号。患者经维生素B12治疗后,11例症状有明显改善,1例无明显改善。结论 MRI检查能准确显示病变部位,且病灶形态具有一定影像学特异性,对SCD的诊断有辅助作用。     

热盐水致大鼠萎缩性胃炎血清和胃黏膜组织SOD和MDA的动态变化

目的观察过热、过成饮食引起胃粘膜损伤以致造成胃粘膜萎缩的过程中超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的动态变化。方法采用55℃、15％NaCl连续灌胃12周,制成大鼠萎缩性胃炎模型,对照组采用等量的25。C水灌胃,在灌胃期间每隔4NJ处死一批大鼠。将大鼠麻醉后腹主动脉取血分离血清,同时摘取胃组织,制成组织匀浆,分别测定血清及胃黏膜组织SOD和MDA含量。SOD测定采用改良的盐酸羟胺法,总蛋白测定采用Lowry’s法测总蛋白,MDA按照试剂盒中的步骤严格操作。结果经热盐水灌饲大鼠的血清和胃黏膜组织中SOD活性和MDA均表现出了较好的时间效应关系,随处理时间延长,SOD活性显著降低和MDA含量明显升高。结论活性氧损伤在萎缩性胃炎发生发展过程中起着重要的先导作用。