大鼠脑神经生长因子受体分布的实验研究

本文报道了一种测定脑内神经生长因子（ＮＧＦ）受体的竞争性结合分析法。应用１２５Ｉ－ＮＧＦ作为放射配基，在含有过量未标记ＮＧＦ条件下，１２５Ｉ－ＮＧＦ与不同脑组织细胞膜于３７℃下孵育３０ｍｉｎ达到可逆的平衡状态的。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析，根据其与配体亲和力的不同分为高亲和力（Ⅰ型）与低亲和力（Ⅱ型）结合位点两种受体亚型，平衡解离常数（Ｋｄ）分别约为４ｐｍｏｌＬ－１及１．６ｎｍｏｌＬ－１，最大结合能力（Ｂｍａｘ）约为０．５ｆｍｏｌ／Ｌｍｇ－１（蛋白）及２４ｆｍｏｌ／Ｌｍｇ－１（蛋白）。脑内各分区ＮＧＦ受体的结合容量依次为中隔、小脑、脑干、大脑皮质、下丘脑、嗅脑。     

大鼠脊髓中神经生长因子受体TrkA的表达与分布

目的：检测神经生长因子受体TrkA在大鼠脊髓中的表达与分布。方法：通过Western blot检测TrkA在脊髓中的表达;通过免疫荧光组织化学,利用激光共聚焦显微镜检测TrkA在神经元中的定位。结果与结论：TrkA广泛分于脊髓各层神经元及灰质内,并且在神经元的胞体和树突中均有表达。     

神经生长因子与其受体的信号转导

1952年2月Levi—Montalcini在研究鸡胚的神经发育过程中发现了神经生长因子（Nerve Growth Factor，NGF），开辟了一个全新的研究领域。神经生长因子的受体分别为高亲和力的原癌基因（Oncogene）编码的一种酪氨酸蛋白激酶受体TrkA和低亲和力的分子量为75kD的p75。神经生长因子是最早发现的细胞生长调节因子，其在神经元的发育、轴突的生长、递质的合成及细胞的凋亡等阶段均起着重要作用。     

老年大鼠海马组织中神经生长因子及其受体基因表达的变化

目的：观察老年大鼠海马组织中NGF及其受体基因表达的变化。方法：采用RT－PCR法，半定量分析2年龄大鼠海马组织中NGF及其受体p75mRNA含量的变化。结果：与正常成年（3月龄）大鼠相比，2年龄大鼠海马组织NGF mRNA含量显著下降，而NGF受体p75mRNA的表达无明显改变。结论：老年鼠海马NGF基因表达明显下降，而其受体p75的表达变化不明显。提示衰老可能与NGF基因表达量减少有关。     

胶质瘤表皮生长因子受体显像的实验研究

目的:探索131I标记表皮生长因子(EGF)对胶质瘤显像的可行性.方法:用神经胶质瘤C6细胞进行放射性摄取和滞留的体外实验;荷胶质瘤裸鼠尾静脉注射131I-EGF,于注射后30min、2h、6h、12h进行131I-EGF在鼠体内的放射性分布研究;在荷瘤鼠与正常对照鼠尾静脉注射131I-EGF后12h进行SPECT显像研究.结果:体外培养C6细胞对131I-EGF有较好的放射性摄取和滞留;在各个时间点,131I-EGF主要分布在荷瘤鼠肝、脾、肾等组织,瘤区放射性分布较高,脑组织最低,随时间延长肿瘤组织放射性分布逐渐增加,在12h时达最高;12h时SPECT显像图像清晰,瘤组织放射性分布明显,肝脾组织放射性分布较高,轮廓完整.结论:131I标记EGF有望为临床神经胶质瘤提供一种新的核医学诊断方法.     

不同组织移植治疗成体大鼠脊髓损伤的实验研究

不同组织移植治疗成体大鼠脊髓损伤的实验研究Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｆｏｒｉｎｊｕｒｉｅｓｏｆｔｈｅｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎａｄｕｌｔｒａｔｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｓｓｕｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｓ胡建，王...     

推拿对坐骨神经损伤大鼠神经生长因子及其受体TrkA的影响

目的观察推拿对坐骨神经损伤大鼠行为学、神经生长因子(NGF)及其酪氨酸激酶受体(Tr-kA)的影响,探讨推拿治疗坐骨神经损伤的生物学机制。方法采用神经夹持损伤的方式建立大鼠坐骨神经损伤模型,通过斜板实验、热痛阈实验观察正常组、假手术组、模型组、对照组、推拿组大鼠的行为学变化;通过免疫组织化学染色观察各组大鼠脊髓内NGF及TrkA表达情况,进而统计分析各组间的差异。结果模型组和对照组大鼠行为学检测表明坐骨神经损伤后大鼠的运动及感觉功能明显降低(P<0.05),推拿治疗后斜板实验及热痛阈实验评分明显升高(P<0.05),并在治疗20 d后与正常组比无显著性差异(P>0.05);模型组、对照组及推拿组NGF及TrkA免疫组化表达与正常组相比均有显著性提高(P<0.05),推拿组NGF与TrkA表达与模型组相比也具有显著性差异(P<0.05)。结论推拿治疗可以通过提高机体神经生长因子NGF表达,提高NGF的高亲和力受体TrkA释放,从而抑制细胞抵抗凋亡,促进神经元存活,最终改善坐骨神经损伤大鼠的运动及感觉功能。     

大鼠脑加压素受体测定方法的建立

采用~(125)碘标记精氨酸加压素(~(125)I-AVP),建立了大鼠脑粗制膜上AVP受体的测定方法。结果表明,第一次冻融可使~(125)I-AVP与脑粗制膜上受体的结合率降低约35％,第二次冻融则降低约70％。用此方法测得大鼠脑粗制膜上AVP受体的最大结合容量Bmax为157.1±16.3fmol/mg蛋白,平衡解离常数Kd为0.25±0.04nmol/L。     

人脑胶质瘤表皮生长因子受体表达及预后的相关性研究

目的　检测表皮生长因子受体 (EGFR)蛋白在人脑瘤中的表达 ,探讨EGFR表达与胶质瘤病理分级、患者年龄、肿瘤大小和预后的关系。方法　应用免疫组化方法检测 46例人脑胶质瘤标本中EGFR表达 ,分析其与胶质瘤恶性程度、年龄、肿瘤大小和预后的关系。结果　低分化胶质瘤 (WHOⅢ +Ⅳ级 )EGFR表达 69.57% (1 6/ 2 3) ,高分化胶质瘤 (WHOⅠ +Ⅱ级 )EGFR表达 30 .43 % (7/ 2 3) ,两者之间差异显著 (P <0 .0 1 ) ;EGFR表达与胶质瘤病理分级呈正相关 (r =0 .6882 ,P <0 .0 0 1 )EGFR表达阳性与阴性患者生存时间差异显著 (P <0 .0 5)。结论　EGFR在胶质瘤的发生、发展中起重要作用 ,与肿瘤分化程度、患者预后密切相关 ,与患者年龄及肿瘤大小无关     

雌性老年大鼠红核NGF及其相关受体的增龄性变化

目的研究雌性SD大鼠运动功能及红核NGF及其相关受体表达的增龄性变化。方法选用22月龄（老年组）和3月龄（青年组）SD大鼠,应用网屏握持试验、抓握牵引试验和平衡木试验检测大鼠运动功能;应用West-ern Blot检测红核mNGF、TrkA、Pro-NGF、p75NTR、sortilin的表达。结果老年组大鼠运动功能明显差于青年组大鼠,其前肢力量及平衡感觉明显衰退。与青年组大鼠相比,老年组大鼠红核Pro-NGF、p75NTR、sortilin表达上升,mNGF、TrkA表达下降。结论雌性老年大鼠的衰老伴随着其运动功能及红核mNGF、TrkA表达下降,红核中NGF信号途径的变化和老年大鼠运动功能的衰退相关。     

血管内皮生长因子受体在大鼠脊髓组织中的表达与分布

目的观察血管内皮生长因子受体VEGFR-1与VEGFR-2在大鼠脊髓组织的表达与分布. 方法取成年雄性Wistar大鼠腰段脊髓组织,采用免疫组织化学方法和逆转录-聚合酶链式反应技术,对VEGF受体蛋白及mRNA在大鼠脊髓组织中的表达与分布进行研究.结果 VEGF的两种受体蛋白在大鼠正常脊髓组织的微血管均有表达,并且VEGFR-2更主要的表达于脊髓运动神经元、胶质细胞及周边白质中的神经纤维,其mRNA的表达水平明显高于VEGFR-1(P<0.05). 结论VEGF通过VEGFR-1、VEGFR-2两种受体共同作用促进脊髓微血管的形成,维持神经内环境的稳定;通过VEGFR-2发挥神经营养和神经保护作用,为今后进一步应用VEGF治疗脊髓损伤奠定了实验及理论基础.     

神经生长因子受体活性中草药及其成分的筛选

一些神经元退行性病变Alzheimer’s病，是导致早衰的重要原因之一，其发生和发展与缺乏神经生长因子的营养作用有关。而神经生长因子对神经元的营养支持作用主要是由受体介导的，本文采用神经生长因子受体竞争结合实验模型对14种传统抗衰老中草药的神经生长因子受体活性进行了筛选，并从牛膝中筛选出一种特异性抑制神经生长因子与其受体结合的活性物质，其IC50为6．18±3．43μg／ml。     

神经生长因子及其受体与周围神经系统关系的研究进展

神经生长因子（NerveGrowthFactor,NGF）是本世纪50年代被发现并确定分子结构的一种典型的细胞生长因子,其生物学作用广泛,其靶细胞多达ZO余种。研究发现,NGF与周围神经系统关系密切。它是周围神经系统维持正常发育和功能的必要因素,并在周围神经再生和创伤修复中起着重要作用。笔者就NGF及其受体在周围神经系统发育、再生和创伤修复中的作用及机理的研究进展作一综述。INGF的生物合成NGF主要来源于神经的靶器官及胶质细胞（雪旺细胞和纤维细胞）。成年小鼠颌下腺、牛精液和人胎盘均含有丰富的NGF。从成年雄性小鼠颌下腺组织…     

表皮生长因子受体在银屑病患者皮损中的分布

用一种新的免疫组织化学技术－标记的抗生蛋白链菌素－生物素连接系统，对２４例银屑病患者皮损中的表皮生长因子受体进行研究。结果；在银屑病进展期，ＥＧＦＲ阳性细胞分布于表皮全层包括角质层，在汗腺及毛囊外根鞘上皮细胞也有ＥＧＦＲ的表达；而静止期患者ＥＧＦＲ明显减少，主要分布于颗粒层和棘层，角层阴性。     

中药复方962胶囊对老年大鼠海马神经生长因子及其受体表达的影响

目的 我们以往的实验证明：中药复方962胶囊（含何首乌、石菖蒲等六味中药）能显改善老年大鼠学习记忆功能。本研究观察962胶囊对自然衰老大鼠模型海马区神经生长因子（NGF）及其受体TrkA表达的影响,探讨962胶囊改善学习记忆功能的作用机理。方法 雌性Wistar大鼠,老年为TrkA表达的影响,探讨962胶囊改善学习记忆功能的作用机理。方法 雌性Wistar大鼠,老年为22月龄,青年为5月龄。962胶囊高剂量1.8g/kg,962胶囊低剂量0.9g/kg,每日灌胃给药一次,连续灌胃2个月,ABC法行NGF和TrkA免疫组化染色。VISILOG5.0图像分析系统对组织切片进行分析。海马CAI区锥体细胞层连续摄取3个视野,这3个视野包括了整个CAI区,记数3个视野内总阳性细胞数量、阳性细胞总面积（象素单位）及阳性细胞灰度积分值（灰度单位）。海马CA2区连续摄取2个视野,海马CA3区连续摄取2个视野,海马CA4区摄取齿状回包含的1个视野,包括了完整的CA2、CA3、CA4区;结果（1）老年大鼠海马CA1、CA2、CA3、CA4区NGF和TrkA阳性细胞数,阳性细胞总面积和阳性细胞灰度积分值较青年对照组明显减少,以CA2、CA3区的减少最严重。（2）962胶囊能提高老年大鼠海马CA1、CA2、CA3、CA4区NGF和TrkA阳性细胞数量,阳性细胞总面积和阳性细胞灰度积分值,962胶囊高剂量组基本恢复青年对照组水平。结论 老年大鼠神经生长因子（NGF）及其受体TrkA在海马区表达明显减少,可能与其学习记忆能力下降有关;962胶囊能够明显促进老年大鼠海马区NGF及受体TrkA表达,可能是改善其学习记忆功能的药理学基础。增强内源性神经营养物质的表达对老年性痴呆的治疗有重要意义。     

日本研究发现海马区受体参与脑神经细胞形成

据东京媒体报道，日本研究人员经动物实验发现，负责学习和记忆的大脑海马区细胞表面存在一种受体，它参与了脑神经细胞的形成。这种受体名为GPR40，主要存在于大脑和胰腺中。     

大鼠杏仁核胃动素受体分布及其作用研究

目的探讨大鼠杏仁核胃动素受体分布及杏仁核基底外侧核胃动素受体与外源性胃动素结合或者毁损后对十二指肠消化间期移行性复合肌电活动（MMC）的影响及其作用机制。方法采用免疫组织化学、中枢立体定位杏仁核微量注射、杏仁核毁损、多道生理记录仪监测十二指肠MMC的方法，探讨大鼠杏仁核胃动素受体的作用。结果杏仁核各亚核团都有胃动素受体分布．以杏仁内侧核分布最多；杏仁基底外侧核也有较多分布，后部多于前部；分布较少的核团是杏仁基底内侧核、杏仁中央核、杏仁基底外侧核：杏仁核基底外侧核胃动素受体与外源性胃动素结合后可以使十二指肠MMC时相变短，峰电振幅增加，峰电频率增快；膈下迷走神经切断术可完全阻断这种效应：阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔不能阻断这种效心；抗胃动素血清只能部分阻断这种效应：杏仁基底外侧核核团毁损对十二指肠MMC影响不明品。结论杏仁核各亚核团都有胃动素受体分布，杏仁内侧核是胃动素受体分布最多的部位。杏仁核微量注射胃动素可以使十二指肠MMC的时相、峰电振幅和峰电频率发生变化．这种作用可能是通过杏仁核-下丘脑-脑干．迷走神经通路实现的．提示杏仁核胃动素受体存对十二指肠MMC的中枢性调节中发挥着重要作用。     

表皮生长因子受体在银屑病患者皮损中的分布

用一种新的免疫组织化学技术──标记的抗生蛋白链菌素－生物素连接系统（ＬＳＡＢ），对２４例银屑病患者皮损中的表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）进行了研究。结果：在银屑病进展期，ＥＧＦＲ阳性细胞分布于表皮全层包括角质层，在汗腺及毛囊外根鞘上皮细胞也有ＥＧＦＲ的表达；而静止期患者ＥＧＦＲ明显减少，主要分布于颗粒层和棘层，角层阴性。ＥＧＦＲ阳性表达率及阳性细胞密度，进展期患者明显大于静止期，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。ＥＧＦＲ在银屑病发病中具有重要作用。     

大鼠肝脏癌变过程中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究

了解肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体基因在大鼠肝脏癌变过程中的表达变化规律，以及这种变化与肿瘤生物学行为的关系。方法以二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱发的大鼠肝癌模型为对象，采用地高辛标记的ＨＧＦ及其受体ＤＮＡ探针，检测ＨＧＦ及其受体基因在大鼠肝脏癌变过程中的表达。结果ＨＧＦ及其受体基因在大鼠肝组织中均有表达，但在诱癌的不同时期，其表达阳性率差异明显，ＨＧＦ表达阳性率在肝硬变前期达最高，肝硬变期次之，癌变期与正常对照比差异无显著意义。ＨＧＦ受体基因表达阳性率随肝组织逐渐癌变呈逐渐增加趋势，以癌变期为最高，正常肝组织中未见表达。结论ＨＧＦ及其受体基因的过量表达与大鼠肝脏癌变的演化过程关系密切，ＨＧＦ及其受体系统对调节肿瘤生长、转移起重要作用