沙利度胺对人鼻咽癌细胞株血管内皮生长因子表达影响的观察

目的:探讨沙利度胺对人鼻咽癌细胞株体外生长及对血管内皮生长因子表达的影响。方法:采用MTT法检测沙利度胺对人鼻咽癌细胞增殖的抑制率;RT-PCR和免疫细胞化学方法分别检测沙利度胺作用前后血管内皮生长因子基因和蛋白表达水平的变化。结果:沙利度胺能抑制CNE-2细胞增殖,呈浓度依赖性,当60mg/L沙利度胺作用72h,其抑制率为45.6%;不同浓度沙利度胺作用后VEGFmRNA和VEGF-CmRNA表达均降低,VEGFmRNA下降最明显,P<0.05;蛋白表达与其相应mRNA呈正相关,r值分别为0.959和0.974,P值分别为0.035和0.021。结论:沙利度胺能够抑制CNE-2细胞增殖,其作用机制可能与其下调血管内皮生长因子的表达有关。     

黄芩素诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡作用的研究

目的:研究12-脂氧合酶(12-lipoxygenase,12-LOX)在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达,以及选择性12-LOX抑制剂黄芩素对人肝癌细胞SMMC-7721生长、凋亡的影响.方法:采用免疫细胞化学染色及RT-PCR检测12-LOX的蛋白质和mRNA在SMMC-7721中的表达.应用MTT、流式细胞术及TUNEL检测细胞生长及凋亡.蛋白印迹法检测分析Caspase-3,Bcl-2,Bax,phospho-ERK1/2,ERK1/2和β-actin蛋白质的表达.结果:免疫细胞化学技术显示12-LOX蛋白表达于SMMC-7721细胞质.RT-PCR检测到黄芩素呈浓度-时间依赖性地抑制12-LOX mRNA表达.采用黄芩素小同浓度或不同时间段干预细胞SMMC-7721,MTT法检测细胞增殖呈剂量、时问依赖性的下降.原位末端转移酶标记技术及流式细胞仪分析证实12-LOX抑制剂诱导细胞凋亡.蛋白印迹法检测显示,黄芩素干预后,Bcl-2蛋白表达明显下降和Bax蛋白轻微上升,细胞凋亡蛋白酶-3活性水平与黄芩素浓度正相关,黄芩素对细胞凋亡相关蛋白的影响被12 (S)-HETE逆转,12(5)-HETE可能激活ERK1/2磷酸化.结论:人肝癌细胞株SMMC-7721存在12-LOX的表达,12-LOX抑制剂黄芩素可抑制细胞生长和诱导细胞凋亡.     

沙利度胺联合TACE术治疗中晚期肝癌的疗效分析

目的观察沙利度胺联合经导管肝动脉化疗栓塞术（TACE）治疗中晚期肝癌的疗效以及血清血管内皮生长因子（VEGF）的变化与疗效的关系。方法将无法手术切除的中晚期肝癌64例随机分为两组,每组32例。治疗组：沙利度胺＋TACE术;对照组：单纯TACE术。沙利度胺每晚200 mg口服,服用至少3个月,每位患者至少行TACE术2次,并检测TACE术前1周及术后2周VEGF水平。结果治疗组有效率为59.4%,对照组46.9%,比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组疾病控制率81.2%,对照组56.2%,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组1、2年生存率分别为65.6%、28.1%,对照组为62.5%、25.0%,比较差异无统计学意义（P〉0.05）;血清VEGF治疗组下降较对照组显著（P〈0.05）,对照组治疗前后血清VEGF水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组甲胎蛋白（AFP）下降率81.3%明显高于对照组53.1%（P〈0.05）;两组毒副反应均为Ⅰ~Ⅱ级,治疗组嗜睡、疲劳、头昏、皮疹等症状较对照组高（P〈0.05）。结论沙利度胺联合TACE术治疗中晚期肝癌疗效较好,能提高疾病控制率,降低血清VEGF水平,且毒副反应可以耐受。     

菱角提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

[目的]探讨菱角提取物对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。[方法]采用MTT法检测菱角提取物对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;丫啶橙染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]菱角提取物能抑制SMMC-7721细胞的增殖,且呈明显的剂量依赖性。荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变。[结论]菱角提取物可抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡。     

沙利度胺对人鼻咽癌细胞株体外放射敏感性的影响

[目的]探讨沙利度胺对人鼻咽癌细胞株细胞周期分布及体外放射敏感性的影响。[方法]应用MTT法检测不同时间点、不同浓度沙利度胺对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞增殖的抑制率。采用沙利度胺及放射线单独或联合作用于CNE-2细胞,用克隆形成法经单击多靶模型拟合细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比;流式细胞技术分析沙利度胺对CNE-2细胞周期分布的影响。[结果]沙利度胺可抑制CNE-2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;20mg／L和40mg/L沙利度胺作用CNE-2细胞24h后均见到放射增敏作用,SER分别为1．29（0．941／0．728）和1．57（0．941／0．598）;流式细胞仪分析表明沙利度胺作用24h,随着沙利度胺浓度的增加．CNE-2细胞中处于G0／G1期的细胞增多,S期和G2/M期细胞减少．但变化差异无显著性。[结论]沙利度胺能够抑制CNE-2细胞的增殖,并具有一定的放射增敏作用,为临床放疗和沙利度胺的联合应用提供了实验依据。     

沙利度胺对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子-C及其受体表达的影响

 目的 探讨沙利度胺对人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231VEGF-C及KDR表达的影畸。方法 MTT法检测沙利度胺对细胞增殖的抑制作用，从而选择适当的药物浓度及作用时间；RTPCR法检测沙利度胺处理前后细胞中vEGF-CmRNA的表达水平；流式细胞术检测沙利度胺处理前后细胞中VEGF_C及KDR蛋白的表达水平。结果 沙利度胺在（6～120）μg／ml范围内对MCF-7和MDA-M13-231细胞有明显的抑制增殖作用，60μg／ml明显抑制两株细胞的VEGF-CmRNA及VEGF-C、KDR蛋白的表达。结论 沙利度胺在一定浓度范围内能抑制人乳腺癌细胞的增殖，其抗血管生成作用可能与下调vEGF-C及KDR表达有关。     

沙利度胺对难治、复发多发性骨髓瘤患者骨髓微环境的影响

背景与目的:越来越多的研究表明,骨髓瘤细胞的生长、生存以及耐药的产生与骨髓微环境密切相关。沙利度胺(thalidomide,Thal)是作用于骨髓微环境的药物之一,我们通过观察沙利度胺对难治、复发多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者骨髓微环境的影响,进一步了解Thal的作用机制。方法:用流式细胞仪检测沙利度胺治疗前后难治、复发的MM患者骨髓基质细胞膜表面的细胞间粘附分子(ICAM-1)和血管细胞粘附分子(VCAM-1)的表达强度,半定量RT-PCR法检测骨髓基质细胞IL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血清VEGF、bFGF水平。结果:难治、复发MM患者骨髓基质细胞(BMSC)膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度分别为13.28±4.26、10.35±2.47,用Thal治疗有效的难治、复发MM患者BMSC膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度分别为4.29±0.98、3.54±0.62,明显受抑制(P<0.05)。难治、复发MM患者BMSCIL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA与β-actin的比值分别为1.83±0.64、24.52±11.46、3.42±1.83,用Thal后有效的难治、复发MM患者BMSCIL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA与β-actin的比值分别为0.58±0.11、13.47±14.31、1.25±0.76,明显受抑制(P<0.05)。而治疗无效的难治、复发MM患者BMSC膜表面IC     

叶绿酸联合赛特铂对人SMMC-7721肝癌细胞株影响的初步研究

目的:探讨叶绿酸(CHL)联合赛特铂(JM216)对人SMMC-7721肝癌细胞凋亡及增殖的作用。方法:选用CHL(1×10-5 mol/L)及不同浓度JM216(10、20和40mg/L),1×10-5 mol/L的CHL分别联合不同浓度JM216作用于SMMC-7721肝癌细胞24、48和72h后,用MTT比色法观察其对肝癌细胞的生长抑制作用,并观察细胞形态变化;用流式细胞术分析药物作用48h时肝癌细胞的周期分布和凋亡情况。结果:CHL组、不同浓度JM216组和联合组细胞生长抑制率均高于对照组,联合组1和联合组2以及联合组3的细胞生长抑制率均高于相应浓度的JM216组。CHL组SMMC-7721细胞周期中G0/G1期比例为(55.94±3.49)%,高于对照组的(50.52±2.56)%,差异有统计学意义,P<0.05;而JM216组SMMC-7721细胞周期中S期比例为(45.12±1.42)%,高于对照组的(27.60±1.27)%,差异有统计学意义,P<0.05。CHL组和JM216组细胞凋亡率分别为(13.48±1.63)%和(15.51±2.09)%,均高于对照组的(1.61±0.47)%,差异有统计学意义,P<0.05;联合组细胞凋亡率为(30.22±3.20)%,高于JM216组和对照组,差异均有统计学意义,P<0.05。结论:CHL和JM216均可抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长并诱导其凋亡,且联用后作用增强。     

辛伐他汀联合吡喃阿霉素对肝癌SMMC-7721细胞的协同抑制作用

目的:研究辛伐他汀联合吡喃阿霉素对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用。方法:辛伐他汀、吡喃阿霉素分别及联合处理细胞48小时,MTT法测量细胞的增殖抑制,按公式计算相互作用指数。结果:按照文献报道计算相互作用指数,相互作用指数小于1。结论:辛伐他汀和吡喃阿霉素对于SMMC-7721有协同抗瘤作用。     

沙利度胺联合PC方案对非小细胞肺癌患者疗效/血清VEGF的影响

背景与目的:沙利度胺具有抗肿瘤血管增生的潜能.本研究旨在研究和评价沙利度胺联合化疗对非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效/血清中血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:采用前瞻性随机对照研究,将2007年2月-2008年8月就诊的136例晚期NSCLC患者分为联合治疗组(联合组)和对照治疗组(对照组),每组68例.联合组采用PC方案+沙利度胺治疗.PC方案:给予周剂量紫杉醇(PTX)+顺铂(DDP),即PTX 80 mg/m2,静滴,每周1次,连续2周;DDP 80 mg/m2,静滴,分为3 d;沙利度胺200 mg/d口服,第1天起连续给药.对照组采取单化疗,行PC方案,剂量同上.采用酶联免疫法检测100例(两组各前50例)患者治疗前后血清VEGF含量.结果:联合组有效率CR+PR为52.9%,对照组有效率为38.2%,两组有效率差异无显著性(P=0.16);联合组和对照组患者在治疗后血清VEGF水平均有不同程度升高;联合组治疗后血清VEGF水平(568±181 pg/m1)与治疗前(309±128 pg/m1)比较差异无显著性(P>0.05);但对照组化疗后血清VEGF水平(679±175 pg/m1)显著高于化疗前(261±135 pg/m1),差异有显著性(P<0.05). 结论:沙利度胺联合化疗有提高近期疗效的趋势,能抑制晚期NSCLC患者的肿瘤细胞VEGF的产生,从而降低血清VEGF水平.     

Hsa-miR-4282对肝癌细胞系SMMC-7721生长的影响

目的  探讨Hsa-miR-4282在肝癌细胞系SMMC-7721中的表达及其对细胞生长的影响。方法 采用实时荧光定量PCR法检测Hsa-miR-4282在人正常肝上皮细胞系HL-7702和人肝癌细胞系MHCC97-H、SMMC-7721，以及 20例肝癌组织及其相应癌旁组织中的表达。采用瞬时转染法将Hsa-miR-4282 mimics（上调组）和Hsa-miR-4282 inhibitor（下调组）分别转染肝癌SMMC-7721细胞，上调组和下调组分别设置相应阴性对照组。转染后采用MTT法检测细胞增殖能力，平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，流式细胞仪检测细胞凋亡能力。结果 Hsa-miR-4282在肝癌组织、肝癌细胞MHCC97-H及肝癌细胞SMMC-7721中的表达均低于癌旁组织及正常肝细胞HL-7702（P＜0.05）。MTT实验结果显示，Hsa-miR-4282上调后肝癌SMMC-7721细胞的OD值低于其阴性对照组，而下调后OD值高于其阴性对照组 （P＜0.05）。平板克隆形成实验显示，下调组的细胞克隆数高于其阴性对照组［（240±7） 个 vs （191±10） 个，P=0.005）］，而上调组细胞克隆数低于基阴性对照组［（146±10） 个 vs （193±12） 个，P=0.013）］。流式细胞仪检测结果显示，Hsa-miR-4282上调组细胞凋亡率较其阴性对照组升高［（23.89±1.89）% vs（16.6±1.14）%，P=0.009）］，下调组细胞凋亡率较期阴性对照组降低［（14.98±0.46）% vs （17.79±0.73）%，P=0.010］。结论 Hsa-miR-4282上调可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，促进细胞凋亡，可能与肝癌的发病机制有关。     

mDRA-6与尼美舒利对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞的协同杀伤效应

背景与目的:mDRA-6为本实验室制备的具有肿瘤细胞杀伤作用的抗人死亡受体5(death receptor5,DR5)的单克隆抗体,尼美舒利作为特异性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂,近年来发现其对某些肿瘤细胞系的细胞具有促凋亡作用,本研究探讨mDRA-6与尼美舒利对肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用,及二者有无协同效应。方法:流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率;分别用一定浓度的mDRA-6、尼美舒利、mDRA-6联合200μmol/L尼美舒利处理SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察SMMC-7721细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果:SMMC-7721细胞表面DR5的表达率为95.0%,mDRA-6能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,存在浓度依赖性(r=0.984,P=0.002),25ng/mL作用12h可杀伤10.5%的细胞,1600ng/mL作用12h可杀伤35.0%的细胞。尼美舒利能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,200μmol/L作用12h可使5.0%的细胞凋亡,800μmol/L作用12h可杀伤34.0%的细胞,存在浓度依赖性(r=0.929,P=0.002)。尼美舒利与mDRA-6联合对SMMC-7721细胞具有协同杀伤作用(q=1.23),200μmol/L的尼美舒利协同25ng/mL与1600ng/mL的mDRA-6作用12h可分别杀伤31.2%与91.1%的SMMC-7721细胞,Hoechst33258染色和Annexin V/PI染色证实杀伤作用是通过诱导细胞凋亡实现的。结论:mDRA-6与尼美舒利均有杀伤SMMC-7721细胞的作用,二者具有协同作用,该作用是通过诱导凋亡实现的。     

Curcumin induces apoptosis involving bax/bcl-2 in human hepatoma SMMC-7721 cells

Curcumin is a major active component of Curcuma aromatica salisb, which has been shown to inhibit proliferation of a wide variety of tumor cells. In this study, the molecular mechanisms of curcumin inducing apoptosis in human hepatoma SMMC-7721 cells were examined. We find that curcumin inhibits the growth of SMMC-7721 cells significantly in a concentration-depenent manner, with typical apoptotic morphological changes of cellular nuclei. Annexin-V/PI double staining detected by flow cytometry and expression of the relative apoptotic proteins (Bax, Bcl-2 and caspase-3) revealed a strong apoptosis-inducing competent of curcumin in SMMC-7721 cells. Curcumin increased the expression of bax protein while decreasing that of bc1-2 protein significantly. The results suggest that curcumin induction of apoptosis involves modulation of bax/bcl-2 in SMMC-7721 cells and provide a molecular basis for the development of naturally compounds as novel anticancer agents for human hepatomas.     

刺梨提取物与氟尿嘧啶协同抗人肝癌SMMC-7721细胞的作用研究

目的:观察刺梨提取物(extract from Rosa roxburghii Tratt, CL)联合5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)抗人肝癌细胞SMMC-7721的作用.方法:采用MTT法检测和生长曲线绘制分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞生长的影响;通过检测硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)阳性细胞百分率和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP )含量,分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞分化的影响;采用丫啶橙(acridine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)荧光染色法和FCM法检测CL联合5-FU对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:联合作用组的细胞生长曲线较5-FU和对应浓度CL单独作用组下移,且联合作用组的联合作用系数q值为0.85～1.15,表明CL联合5-FU具有抗肿瘤相加作用;与对照组相比较,5-FU、CL和2药联合均能提高NBT阳性细胞比率(P<0.05),且联合用药组的NBT阳性细胞比率比CL单独作用组高(P<0.05);CL组和CL联合5-FU组均能降低细胞AFP含量,且随着CL浓度的增加而下降,但2组间差异无统计学意义(P>0.05);CL单独作用组和联合作用组间的细胞凋亡率无明显差异(P>0.05);与阴性对照组比较,5-FU组能增加异倍体细胞比率(P<0.05),CL组和CL联合5-FU组均能增加G0/G1期细胞比率(P<0.05)、减少S期细胞比率(P<0.05),联合用药组还能降低G2/M期细胞比率(P<0.05).结论:CL与5-FU具有协同抗SMMC-7721细胞的作用,其机制可能与2者协同诱导细胞分化和抑制细胞增殖有关.     

三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞中P27kip1、JAB1表达的影响及其作用机制

背景与目的:三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)作为治疗实体瘤的新药已应用于临床,但其作用机理尚不清楚.本研究拟探讨As2O3对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,及其对细胞周期素依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKIs)P27kip1和P27kip1相关蛋白c-Jun结合蛋白-1(c-Jun activation domain-binding protein 1,JAB1)表达的调控作用.方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用0～8 μmol/L As2O3处理96 h,用WST-8法检测细胞的存活率.用2 μmol/L As2O3作用72 h,在指点时间点收集细胞,用Western blot技术检测P27kip1、JAB1在SMMC-7721细胞中的表达,同时采用核浆分离方法及细胞免疫荧光技术检测P27kip1、JAB1表达和亚细胞定位的改变.结果:与对照组比较,As2O3可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,96 h时IC50为(1.81±0.41)μmol/L.2μmol/LAs2O3处理12 h后,SMMC-7721细胞中P27kip1蛋白表达增加,而JAB1蛋白表达减少.在As2O3处理后12 h、24 h,P27kip1与JAB1均发生从胞浆向胞核的易位.免疫荧光检测P27kip1和JAB1的亚细胞定位情况,结果也显示2 μmol/L As2O3可诱导两者在胞核的积聚.结论:As2O3可下调JAB1的表达,从而影响P27kip1的核内外分布及表达,并影响P27kip1的功能状态,进而参与调控肝癌细胞的增殖.     

奥沙利铂对人肝癌细胞的放射增敏作用

目的：研究奥沙利铂（Ｌ-ＯＨＰ）对人肝癌ＳＭＭＣ-７７２１细胞的放射增敏作用。方法：实验分为单纯用药组及放疗＋药物组，采用ＭＴＴ法观察Ｌ-ＯＨＰ不同药物浓度与不同外放射剂量２４、４８、７２ｈ对人肝癌细胞ＳＭＭＣ-７７２１的抑制作用。计算细胞抑制率和增敏比，应用统计软件ＳＰＳＳ１１.５处理数据，运用方差分析和多元相关方法分析各因素对人肝癌细胞ＳＭＭＣ-７７２１的抑制作用以及各因素之间的交互作用。结果：生长抑制率与放疗剂量、Ｌ-ＯＨＰ浓度呈正相关，而时间因素与生长抑制率无相关性（Ｐ＞０.０５）。结论：在采用Ｌ-ＯＨＰ对肝癌进行放射增敏时，时间因素可忽略不计。当Ｌ ＯＨＰ浓度大于０.６２５ｍｇ／Ｌ，将可获得放疗增敏的效果。     

积雪草酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和自噬的影响

目的  探讨积雪草酸（asiatic acid,AA）对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和自噬的影响。方法 不同浓度AA作用于人肝癌SMMC-7721细胞24 h后,MTT法检测细胞活性并观察自噬抑制剂3-MA对40 μmol/L AA的干预作用;MDC染色检测自噬泡的形成,Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62、mTOR、p-mTOR及p53的表达。结果 MTT检测结果显示,不同AA浓度均可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,并呈浓度依赖性（F＝46.790,P＝0.006）,IC₅₀ =37.313 μmol/L。与单独使用40 μmol/L AA相比,自噬抑制剂3-MA可部分逆转40 μmol/L AA对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用［（46.400±9.099）% vs （22.000±3.391）%,P＜0.001］。MDC染色实验表明40 μmol/L AA干预可增加自噬泡形成。Western blot检测发现,与对照组比较,40 μmol/L AA可明显降低LC3-Ⅰ的蛋白表达,而提高LC3-Ⅱ表达（1.744±0.108 vs 1.529±0.065,t=2.928,P=0.043;0.113±0.031 vs 0.380±0.036,t=-9.754,P<0.001）,降低p62蛋白表达（0.522±0.024 vs 0.123±0.019,t=22.565,P<0.001）和p-mTOR蛋白表达（1.252±0.039 vs 0.353±0.028,t=30.775,P<0.001）,但对mTOR和p53的蛋白表达无影响（1.713±0.111 vs 1.556±0.076,t=1.555,P=0.190;0.671±0.040 vs 0.726±0.055,t=-1.555,P=0.210）。结论 AA能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,可能与其通过非p53依赖方式负调控mTOR通路诱发自噬有关。     

Icariin,a natural flavonol glycoside,induces apoptosis in human hepatoma SMMC-7721 cells via a ROS/JNK-dependent mitochondrial pathway

In this study, the anticancer effect of icariin, a natural flavonol glycoside, against human hepatoma SMMC-7721 cells and the underlying mechanisms were investigated. Icariin triggered the mitochondrial/caspase apoptotic pathway indicated by enhanced Bax-to-Bcl-2 ratio, loss of mitochondrial membrane potential, cytochrome c release, and caspase cascade. Moreover, icariin induced a sustained activation of the phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) but not p38 and ERK1/2, and SP600125 (an inhibitor of JNK) almost reversed icariin-induced apoptosis in SMMC-7721 cells. In addition, icariin provoked the generation of reactive oxygen species (ROS) in SMMC-7721 cells, while the antioxidant N-acetyl cysteine almost completely blocked icariin-induced JNK activation and apoptosis. Taken together, these findings suggest that icariin induces apoptosis through a ROS/JNK-dependent mitochondrial pathway.