补肾益气活血中药对大鼠缺血再灌注脑组织血管内皮生长因子表达和血脑屏障通透性的影响

目的探讨脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子（VEGF）的动态变化与血脑屏障（BBB）通透性改变的关系。方法选择健康雄性Wistar大鼠80只随机分成3组,假手术组、生理盐水组和中药组,用线栓法建立短暂性局灶性脑缺血模型。采用伊文思蓝（Evans blue,EB）荧光测定法动态检测缺血再灌注1,3,7 d脑组织中EB含量的动态变化,采用VEGF免疫组织化学染色方法,在各再灌注时间点动态观察脑组织中VEGF表达。结果模型组脑组织中EB含量与假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,呈现在缺血90 min再灌注24 h后迅速升高,72 h达到高峰,以后开始减少,至少持续到缺血再灌注7 d以上,中药组在各时间点均明显低于生理盐水组（P〈0.05）,缺血90 min再灌注24 h半暗带,VEGF阳性细胞反应最明显,达峰值后迅速减少,中药在再灌注1～7 d对VEGF蛋白的表达没有影响（P〉0.05）。结论脑缺血再灌注后血脑屏障破坏和VEGF表达均呈现动态变化过程,但变化时程不一致,故VEGF不能介导血脑屏障破坏,未加重卒中后血管源性脑水肿的发生;补肾益气活血中药是通过改善血脑屏障的功能从而减轻血管源性脑水肿的。     

益气活血中药对大鼠缺血-再灌注脑组织中氨基酸含量的影响

目的:探讨益气活血中药(芎芪合剂)对局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用及机制.方法:30只SD大鼠随机分为3组:假手术组、缺血-再灌注损伤模型组、芎芪合剂治疗组.建立大鼠大脑中动脉脑缺血-再灌注损伤模型,然后对各组大鼠缺血-再灌注后脑组织中的氨基酸含量进行测定.结果:对于大鼠缺血-再灌注后脑组织中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)的含量,芎芪合剂治疗组与模型组比较,差异有统计学意义;芎芪合剂治疗组与假手术组比较,差异无统计学意义,提示芎芪合剂能够抑制大鼠缺血-再灌注后脑组织中兴奋性氨基酸Glu、Asp含量的增高,并使之趋向于正常;对于大鼠缺血-再灌注后脑组织中抑制性氨基酸谷氨酰胺(Gln)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量,芎芪合剂治疗组与模型组、假手术组比较,差异均有统计学意义,提示芎芪合剂同时还能协同增高大鼠缺血-再灌注后脑组织中抑制性氨基酸Gln、GABA的含量.结论:芎芪合剂能够通过调整兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的含量,达到减轻大鼠脑缺血-再灌注后脑组织损伤的作用.     

EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子的影响

目的:探讨EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:雄性SD大鼠22头,随机分为3组:对照组、I/R组、EPCs组,术后1d处死各组大鼠,抽取外周血培养及鉴定内皮祖细胞,抽血检测大鼠的生化指标,采用RT-PCR技术测定三组大鼠VEGF mRNA的表达情况,行病理染色观察各组大鼠肾间质血管CD34的表达情况。结果:EPCs移植上调缺血再灌注大鼠VEGF mRNA的表达并改善了该组大鼠的肾功能,减轻了肾间质血管内皮细胞的损伤。结论:EPCs移植减轻大鼠缺血再灌注肾损伤可能与上调VEGF的表达有关。     

大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区血管内皮细胞生长因子与突触素的关系

目的探讨脑缺血再灌注后海马CA1区是否有血管新生和突触新生,以及二者是否有一致性。方法采用动脉夹箝闭双侧颈总动脉,制作大鼠脑缺血再灌注模型。用免疫组织化学方法观察大鼠脑缺血再灌注后立即处死组、24h组、48h组、3d组、7d组的血管内皮细胞生长因子（VEGF）和突触素（SYP）表达的情况。结果VEGF对照组呈极低表达,缺血再灌注后阳性细胞数增加灰度值增强,48h达峰值,再灌注3d,表达呈下降趋势但仍在较高水平,再灌注7d有少量表达,略高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）;SYP缺血再灌注后立即处死组、24h组SYP阳性产物的光密度值低于对照组（P〈0．05）,再灌注48h,光密度值达峰值（P〈0．05）,再灌注3d、7d阳性表达逐渐呈下降趋势,略高于对照组,差异无统计学意义。结论VEGF和SYP早期的高表达有助于保护缺血半暗带,可能与血管新生和突触新生有关,血管新生与突触新生具有一致性。     

补肾益气活血中药对大鼠脑缺血再灌注损伤后VEGF的动态变化与BBB通透性改变的影响

目的探讨补肾益气活血中药对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子（VEGF）的动态变化与血脑屏障（BBB）通透性改变的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、中药组,采用线拴法建立脑缺血模型。采用伊文思蓝（EB）荧光测定法分别对大鼠脑组织进行缺血再灌注1、3、7d后的EB含量变化情况进行检测;采用免疫组织化学方法测定大鼠脑缺血再灌注不同时间点VEGF的表达情况。结果生理盐水组和中药组大鼠再灌注1、3、7d后湿脑组织中EB含量分别为（4．69±0．97）μg／g、（5．89±1．13）μg／g、（3．97±0．67）μg／g和（3．32±1．43）μg／g、（4．27±1．48）μg／g、（3．19±0．64）μg／g,均高于假手术组的（2．12±0．45）μg／g（P〈0．05）。中药组大鼠湿脑组织中EB含量在同一时间点均明显低于生理盐水组（P〈O．05）。结论补肾益气活血中药可通过对血脑屏障功能的改善减轻血管源性脑水肿。     

脑血管内皮细胞损伤对大鼠脑缺血再灌注神经元凋亡的影响

目的:探讨脑缺血再灌注脑血管内皮细胞损伤、内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)与神经元凋亡的关系。方法:采用4血管夹闭法制作大鼠脑缺血再灌注模型,观察缺血再灌注不同时间内皮素、一氧化氮及脑血管内皮细胞超微结构变化对神经元凋亡的影响。结果:脑缺血再灌注组缺血10m in血浆ET-1含量显著升高,再灌注24h有所下降,于72h又开始升高,血浆NO于再灌注24h有所下降,48h时间点又恢复到缺血时水平。全脑缺血10m in内皮细胞部分缺损,凋亡神经元数量较少,缺血再灌注24h内皮损伤加重,凋亡神经元数量明显增加,至48h达到高峰,再灌注72h,凋亡神经元数量明显减少。结论:脑缺血再灌注ET-1含量升高,NO水平下降,内皮损伤加重可导致神经元进一步损害。     

血栓心脉宁对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察血栓心脉宁对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组。线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,实验组于造模前每日灌胃给药1次（800 mg/kg ）,连续6 d。于缺血1 h再灌注24 h后断头取脑,免疫组织化学法和半定量PCR法检测缺血区脑组织中VEGF的表达。结果与模型组比较,实验组大鼠脑组织中VEGF的表达水平明显增高,差别有统计学意义（P＜0．05）。结论血栓心脉宁的脑保护作用机制可能与促进VEGF的表达有关。     

外源性血管内皮生长因子对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的:研究外源性血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响?方法:雄性SD大鼠30只,体重(300±20)g,随机分为A组(VEGF组)?B组(缺血再灌注组)?C组(手术对照组),其中A?B组建立70%肝缺血再灌注损伤模型?A组于缺血前30 min经腹腔注射VEGF(50 μg/300 g体重);B组于缺血前30 min 经腹腔注射等量生理盐水;C组仅麻醉?开腹,不阻断血流?术后6 h,分别采用全自动生化分析仪?HE染色?ELISA法?比色法分别测定血肝功能酶?肝组织病理改变?肝脏诱导型一氧化氮合成酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)活性?肝组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的含量?结果:A组应用重组VEGF后血肝功能酶以及肝组织MPO显著低于B组(P < 0.01),肝脏局部iNOS的活性降低,肝组织形态学无明显改变?结论:外源性VEGF能抑制肝脏iNOS的活性,缓解肝功能下降,保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤?     

尤瑞克林对脑缺血再灌注大鼠血管抑素表达的影响

目的:观察尤瑞克林对脑缺血再灌注大鼠脑组织中血管抑素表达的影响。方法:选取成年雄性SD大鼠24只,将其随机分为假手术组、模型组和试验组。模型组和试验组大鼠制作大脑中动脉阻塞脑缺血再灌注模型。试验组于再灌注后5 min静脉注射尤瑞克林。再灌注3 d后采用Western blot检测脑组织中血管抑素的表达。结果:假手术组脑组织中可见血管抑素表达;模型组和试验组脑组织中血管抑素表达均明显高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,试验组脑组织中血管抑素表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:尤瑞克林可降低血管抑素表达来促进血管新生而发挥脑保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注后血管内皮细胞Bcl—2和P53蛋白的表达

（1）目的 探讨了大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血管内皮细胞Bcl-2和p53蛋白表达的变化规律。（2）方法 将40只Wistar大鼠随机分为10组,采用免疫组织化学法检测假手术组和脑缺血再灌注后2h,6h,12h,1d,2d,3d,7d,14d和21d组血管内皮细胞Bcl-2和P53蛋白的表达,（3）结果 脑缺血再灌注后2缺血周围区内皮细胞Bcl-2蛋白开始表达,12h-1d达高峰,之后逐渐下降,至14d接近假手术组水平。脑缺血再灌注后6h缺血周围区P53蛋白开始表达,1-2d达高峰,之后逐渐下降,至7d与假手术组已无显著性差异。（4）结论 Bcl-2和P53蛋白参与缺血再灌注后血管内皮细胞凋亡的调节。     

益气活血中药对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞血管新生功能的影响

目的：观察益气活血中药对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞（ CMECs）增殖、迁移、成管功能的干预作用,及其对细胞增殖相关蛋白激酶（ERK）和细胞死亡相关分子（p53）mRNA 表达的影响。方法制备芪参益气滴丸高剂量（QG 组）、中剂量（QZ 组）、低剂量（QD 组）大鼠含药血清,分别与大鼠缺血 CMECs 共孵育,同时制备空白血清,分别与心肌缺血模型大鼠（ MX 组）、正常大鼠（ ZC组）来源的原代 CMECs 共孵育;噻唑蓝比色法检测细胞增殖情况,细胞划痕法检测细胞迁移能力,倒置相差显微镜观察管腔结构的形成情况;实时定量聚合酶链反应（ Real - time PCR）检测 ERK 和 p53 mRNA 的表达情况。结果增殖窗口期 QZ 组、QD 组均为第2天,而 QG 组、ZC 组均为第3天,MX 组为第6天;QG 组、QZ 组、QD 组增殖率、迁移率及成管率均显著高于 MX 组,而 QD 组增高最明显（P ﹤0.01）;与 MX 组比较,QG 组、QZ 组、QD 组 ERK mRNA 表达增加,p53 mRNA 表达降低（P ﹤0.05）。结论益气活血中药可促进大鼠缺血 CMECs 的血管新生功能,但其作用与药物剂量并非成正相关,可能与不同药物浓度干预导致 ERK 及 p53的差异表达有关。     

益气活血法在脑缺血再灌注后神经血管单元损伤中的保护作用

中风的机制为气虚血瘀,本源为阻滞脉络。益气活血法是治疗此证的根本大法。益气活血类中药治疗该病具有多环节、多途径、多组分、多靶点的特点和优势,治疗机制包括:①抗氧化应激作用;②抗炎症作用;③抗细胞凋亡作用。益气活血类方药治疗脑缺血再灌注损伤后神经血管单元损伤还存在以下问题:①调节脑缺血再灌注损伤的通路非常复杂,且脑缺血再灌注损伤的发生发展及脑缺血再灌注损伤后引发神经血管单元损伤的具体机制尚待商榷;②益气活血方药虽然能在脑缺血再灌注损伤后神经血管单元损伤的不同方面、针对不同的发病机制发挥作用,但仍需进一步明确益气活血方药对调节脑缺血再灌注损伤的信号通路的影响。     

益气活血法在脑缺血再灌注后神经血管单元损伤中的保护作用

中风的机制为气虚血瘀,本源为阻滞脉络。益气活血法是治疗此证的根本大法。益气活血类中药治疗该病具有多环节、多途径、多组分、多靶点的特点和优势,治疗机制包括:①抗氧化应激作用;②抗炎症作用;③抗细胞凋亡作用。益气活血类方药治疗脑缺血再灌注损伤后神经血管单元损伤还存在以下问题:①调节脑缺血再灌注损伤的通路非常复杂,且脑缺血再灌注损伤的发生发展及脑缺血再灌注损伤后引发神经血管单元损伤的具体机制尚待商榷;②益气活血方药虽然能在脑缺血再灌注损伤后神经血管单元损伤的不同方面、针对不同的发病机制发挥作用,但仍需进一步明确益气活血方药对调节脑缺血再灌注损伤的信号通路的影响。     

电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及血管内皮生长因子表达的影响

目的 研究电针对脑缺血/再灌注大鼠梗死侧海马区血管内皮生长因子(VEGF)、内源性神经干细胞(NSCs)及学习记忆功能的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组及电针组,每组10只动物,模型组及电针组大鼠采用Zea Longa线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注(MCAO/R)模型,电针组于制备模型后24 h给予电针治疗,连续治疗14 d后,采用RT-PCR法检测梗死侧海马区VEGF mRNA的表达,免疫组化法检测梗死侧海马区内源性神经干细胞的增殖,水迷宫检测其学习记忆能力.结果 与模型组比较,电针治疗组大鼠脑梗死侧海马区VEGF mRNA表达明显增强,内源性神经干细胞增殖显著增加,而逃避潜伏期明显缩短,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 电针可能通过增加脑梗死侧海马区VEGF的表达而促进血管新生,进而诱导内源性神经干细胞的增殖,从而改善其学习记忆能力.     

大鼠脑缺血再灌注后胰岛素生长因子1的表达

［摘要］　目的　观察局灶性脑缺血再灌注后不同时间胰岛素样生长因子1（IGF-1）的表达。方法　SD大鼠40只分为对照组、2 h组、1 d组、3 d组、7 d组,每组8只。2 h组、1 d组、3 d组、7 d组采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,对照组仅做右侧颈外动脉和颈总动脉结扎,不做右侧大脑中动脉线栓栓塞。各组动物分别在0 h(对照组)、2 h、1 d、3 d、7 d处死,断头取脑,采用免疫组化染色的方法检测IGF-1的表达。结果 对照组表达最弱,随缺血时间延长,梗死中心和半影区IGF-1的表达逐渐增强,再灌注后3 d达到高峰(14.83±0.48),7 d阳性细胞数有所下降,但仍明显高于对照组。结论 缺血再灌注可促进内源性IGF-1表达,但维持时间不长。     

缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注后TNF-α和VEGF表达的影响

目的 探讨缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将180只(sprague-dawley,SD)雄性大鼠按照随机数字表法随机分为3个实验组(n=60):假手术组(SH)、缺血再灌注组(IR)、缺血预处理+缺血再灌注组(IP),相应处理后,予行为学评分,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-trip...     

麦芽醇对大鼠缺血再灌注血管内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究麦芽醇对缺血再灌注血管内皮细胞损伤的保护作用。方法：选用健康wistar大鼠32只，随机分成：（1）假手术对照组(Control组）；（2）缺血再灌注组（IR组）；（3）缺血预处理组（IPC组）；（4）麦芽醇处理组（Maltol组），测定各组血中循环内皮细胞数量，NO及ET的含量，以及心肌组织中SOD活性及MDA的含量。结果：IR组循环内皮 细胞数量增多，NO含量下降，ET含量升高，SOD活性下降，MDA含量升高；IPC组和Maltol组循环内皮细胞数量减少，NO含量升高，ET含量下降，SOD活性增强，MDA含量下降。结论：麦芽醇对缺血再灌注所致的血管内皮细胞损伤有保护作用。     

大鼠肺缺血再灌注损伤血管内皮生长因子的检测

目的检测血管内皮生长因子（VEGF）在大鼠肺缺血再灌注损伤过程中含量的变化。方法将36只大鼠制作肺缺血再灌注模型，随机分为假手术组和模型组。模型组动物手术夹闭左肺门40 min，假手术组仅开胸，不夹闭肺门，2 h后分别检测两组动物肺灌洗液及肺组织中VEGF的含量、肺毛细血管通透性、肺干/湿重比，并将结果进行统计学处理。结果与假手术比较，模型组肺灌洗液VEGF的含量增加（P〈0.05），肺毛细血管通透性明显增高（P〈0.01），肺干/湿重比明显减小（P〈0.01）；但两组肺组织中VEGF的含量比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论大鼠肺缺血再灌注后肺灌洗液VEGF的含量增加，肺毛细血管通透性、肺干/湿重比改变明显，推测VEGF在肺缺血再灌注损伤过程中具有重要作用。     

人参与丹参配伍对心肌缺血再灌注模型大鼠抗氧化和血管内皮细胞因子的影响

目的研究人参与丹参配伍对心肌缺血再灌注模型大鼠抗氧化能力和血管内皮细胞因子的影响。方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型,分为假手术组、模型组、人参与丹参2∶1配伍组、2∶0组、0∶1组,灌胃给药28 d后取血分离血清,用比色法测定总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量;ELISA法测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量。结果与假手术组比较,模型组T-AOC、GSH、SOD、VEGF和bFGF含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,2∶1组、2∶0组、0∶1组T-AOC、GSH、SOD、VEGF和bFGF含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2∶1组T-AOC、SOD、GSH、VEGF和bF-GF含量改变与2∶0组、0∶1组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论人参与丹参配伍组具有一定的抗氧化能力和促血管内皮细胞新生能力,其中以人参与丹参2∶1配伍组更显著。     

雌二醇对脑缺血大鼠海马血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨雌二醇对脑梗死/再灌注损伤大鼠海马区血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:雌性成年大鼠,双侧卵巢切除后随机分为3组.雌二醇治疗组给予苯甲酸雌二醇2 mg·kg-1·d -1腹腔注射,连续7 d;模型组、假手术组腹腔注射等量麻油.模型组和雌二醇治疗组分别建立大脑中动脉梗死(MACO)模型,缺血2 h后再灌注48 h.Western 印迹技术和RT-PCR技术分别检测VEGF蛋白及基因表达.结果:大脑梗死/再灌注损伤后VEGF蛋白、基因表达均增加,雌二醇治疗组VEGF表达高于模型组(P<0.05).结论:雌二醇增加脑梗死/再灌注损伤大鼠海马VEGF的表达.