对照亲和超滤液质联用和分子对接技术筛选博落回种子中的G-四链体配体

G-四链体已成为肿瘤治疗和抗肿瘤开发的重要靶点。现代药理学证明,博落回Macleaya cordata有抗炎、抗菌、抗肿瘤等药理作用。亲和超滤法可快速筛选药物活性成分,但G-四链体DNA配体难以解离,因此该研究建立了对照亲和超滤方法,通过HPLC-MS检测超滤后的滤液成分,与空白对照,筛选博落回种子中和人体端粒DNA(HT4)有结合作用的配体。由结果可知,相对丰度大于30%且峰面积差异大于20%的有2个,经质谱鉴定分别为血根碱(SAN)和白屈菜红碱(CHE),其圆二色谱构象进一步证明SAN和CHE是HT4的活性配体。另鉴定了丰度较大但峰面积差异较小的原阿片碱(PRO)、别隐品碱(ALL),计算了SAN,CHE,PRO,ALL的结合率,并用分子对接方法比较分析,结合力评分与结合率一致,说明该方法可以用于混合物中活性成分筛选。     

吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞端粒酶活性的影响

目的:探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞凋亡及端粒酶催化亚基(hTERT)表达的影响,为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法:体外培养人结肠癌HT29细胞,加入不同浓度的吴茱萸碱及盐酸小檗碱进行培养,采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,TRAP法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERT的表达。结果:吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后,增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性;能够降低HT29端粒酶活性,但二者无协同作用;并且端粒酶hTERT表达降低,具有剂量依赖关系。结论:吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用,该抑制作用可能通过下调端粒酶hTERT基因表达,降低端粒酶的活性,为临床治疗大肠癌提供实验依据。     

天然苄基异喹啉类抗肿瘤生物碱的筛选

目的:寻找具有抗肿瘤活性的天然苄基异喹啉类生物碱.方法:本实验建立以DNA为靶标,运用离心超滤和HPLC联用技术,从中药中筛选可能具有抗肿瘤活性的苄基异喹啉类生物碱活性成分的方法;并利用体外肿瘤细胞实验,对筛选出的化合物进行抗肿瘤活性验证和评价.结果:从博落回等3种中药中发现并鉴定了9种化合物与DNA有相互作用,有良好的细胞增殖抑制活性.结论:建立起来的方法能用于中药中具有抗肿瘤活性的天然苄基异喹啉类生物碱的筛选.     

试论中药对肿瘤细胞的多靶点效应

中药对肿瘤细胞的多靶点效应,是中药抗肿瘤的重要特点和优势。其主要机制是:1直接抑制或杀灭肿瘤细胞;2影响肿瘤细胞DNA、蛋白质合成及细胞生长周期;3对抗致癌启动子;4影响肿瘤细胞端粒酶活性;5诱导肿瘤细胞凋亡;6诱导肿瘤细胞分化;7调节肿瘤细胞信号通路;8影响肿瘤细胞化学成分及代谢;9增强荷瘤机体的抗肿瘤免疫功能     

小檗碱抗肿瘤作用机制的研究进展

对近年来小檗碱抗肿瘤机制研究的最新进展进行总结,表明小檗碱可通过影响肿瘤细胞生长周期,抑制DNA和蛋白质的合成和影响拓扑异构酶活性来抑制肿瘤细胞增殖；通过调节凋亡相关基因的表达、诱导线粒体跨膜电位(△Φm)下降促进肿瘤细胞凋亡；通过抑制肿瘤血管形成、阻断肿瘤转移相关的信号传导通路、抗恶液质病等途径抑制肿瘤转移,另外小檗碱可通过诱导肿瘤细胞分化发挥抗肿瘤作用。     

吴茱萸碱和盐酸小檗碱对HT29细胞生长抑制及凋亡的影响

目的探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞的生长抑制及其诱导细胞凋亡的作用。为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法采用活细胞计数试剂盒（CCK-8），AnnexinV—FITC／PI双染色流式细胞术，检测不同浓度的盐酸小檗碱和吴茱萸碱作用后HT29细胞增殖活性和细胞凋亡的变化。结果吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后，增殖明显受到抑制，呈剂量和时间依赖性；流式细胞仪检测表明吴茱萸碱和盐酸小檗碱能够诱导细胞凋亡，呈剂量依赖性。倒置显微镜观察细胞呈现缩小、变圆、皱缩、脱壁等增殖变慢的形态学特征。结论吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用。该抑制作用与诱导细胞凋亡相关。     

吴茱萸生物碱抗肿瘤活性的研究

目的:研究吴茱萸生物碱的抗肿瘤活性.方法:取从吴茱萸中分离得到的吴茱萸碱粗品,以吴茱萸碱粗品500mg/kg灌胃给予大鼠,考察吸收入血成分;通过离体抗肿瘤活性实验,考察对MCF-7、HL-60、K562、SPC-A-1和NCI-H446等5种肿瘤细胞的影响;通过在体抗肿瘤活性实验,考察吴茱萸碱对小鼠S180、HepA和MFC的影响.结果:大鼠口服吴茱萸碱粗品后吸收入血的主要成分为吴茱萸碱.离体实验发现吴茱萸碱粗品对MCF-7、SPC-A-1、NCI-H446等肿瘤细胞有明显抑制作用;在体实验发现吴茱萸碱粗品对S180、MFC、HepA等小鼠肿瘤细胞有明显抑制作用.结论:吴茱萸生物碱具有很强的抗肿瘤活性.     

苦参碱与氧化苦参碱抗肿瘤作用及其机制的研究进展

苦参碱和氧化苦参碱为传统中药苦参(Sophora flavescens Ait)的主要生物活性成分,具有广泛的药理学活性.近年其抗肿瘤作用受到较大关注.苦参碱和氧化苦参碱能抑制肿瘤细胞增殖、诱导周期阻滞、促进细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抗肿瘤新生血管形成以及抑制肿瘤侵袭和转移等.同时,苦参碱和氧化苦参碱也能逆转肿瘤的多药耐药性,并能增强临床上常用抗肿瘤化疗药物的抗肿瘤活性.作者对苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用及其机制进行系统的总结和评述.     

桑树提取物桑根酮C影响神经胶质母细胞瘤细胞生长增殖的初步研究

胶质母细胞瘤是最常见的原发性颅脑恶性肿瘤，化学药物治疗仍然是其治疗的重要手段。桑根酮C (sanggenon C, San C)是一类从桑属植物中提取的天然黄酮类化合物，是一种潜在的抗肿瘤中药单体。该研究采用methyl thiazolyl tetrazolium(MTT)实验、5-bromodeoxyuridinc(BrdU)标记实验检测San C对胶质母细胞瘤细胞生长增殖能力的影响；采用流式细胞术检测San C对肿瘤细胞周期的影响；采用软琼脂实验检测San C对肿瘤细胞形成克隆和自我更新能力的影响；采用Western blot和生物信息学分析初步探究San C的抗肿瘤活性的作用机制。在San C的作用下，MTT实验表明San C以剂量和时间依赖性的方式显著地抑制肿瘤细胞的生长增殖；BrdU标记实验显示San C可显著减弱肿瘤细胞核内DNA复制的活性；流式细胞术则证实桑根酮C将肿瘤细胞的细胞周期阻滞于G₀/G₁期；软琼脂克隆形成实验揭示San C显著减弱肿瘤细胞的克隆形成和自我更新的能力；基因集富集分析(gene set enrichmen...     

苦参碱抗肿瘤作用机制研究进展

苦参碱是中药苦参、山豆根、苦豆子的主要活性成分之一。近年来,苦参碱的抗肿瘤活性受到广泛关注。研究表明苦参碱通过诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞、诱导细胞自噬、抑制肿瘤细胞转移和侵袭、抑制血管生成、抑制NF-κB表达等多途径发挥抗肿瘤作用,并能与化疗药物协同作用。随着苦参碱抗肿瘤作用机制的进一步阐明,其在肿瘤临床治疗中将具有广阔的开发应用前景。     

博落回中两个新苯并菲啶类异喹啉生物碱(英文)

目的:对中药博落回的化学成分进行研究。方法:依次采用阳离子交换树脂、硅胶、Sephadex LH-20 柱色谱法和重结晶等分离技术, 对博落回的生物碱进行分离。并运用多种光谱技术对所得生物碱的结构进行鉴定。结果:从博落回中分离并鉴定了 6 个苯并菲啶类异喹啉生物碱:6α-iso-butanonyldihydrosanguinarine (1), 6α-iso-butanonyldihydrochelerythrine (2), 6-丙酮基二氢血根碱(6-acetonyldihydrosanguinarine, 3), 6-丙酮基二氢白屈菜红碱(6-acetonyl-dihydrochelerythrine, 4), 二氢血根碱(dihydrosanguinarine, 5)、二氢白屈菜红碱(dihydrochelerythrine, 6)。结论:苯并菲啶类异喹啉生物碱是中药博落回的典型化学成分。化合物 1 和 2 为新化合物。     

复方博落回生物碱溶液对玄参黑点球象成虫的毒力

目的:测定复方博落回生物碱溶液对玄参黑点球象成虫的毒力。方法:应用文献法提取博落回果实、烟叶中的生物碱;将博落回生物碱、烟碱和表面活性剂组成复方博落回生物碱溶液;采用喷雾法将不同浓度的复方博落回生物碱溶液施药于玄参黑点球象成虫;通过正交试验,分析复方博落回生物碱溶液中各组分的作用;用计算机软件SPSS 11.5进行统计学分析。结果:复方博落回生物碱溶液对玄参黑点球象成虫的LD50为27.003mg/L、95%可信区间为15.677～80.073mg/L。正交试验考察了各因素对玄参黑点球象毒力作用的影响程度,各因素的最佳组合是A2B1C2D2。结论:复方博落回生物碱溶液对玄参黑点球象成虫有毒杀作用。各组分的最佳组合和施药方案是博落回生物碱原液∶水为1∶4、10%烟碱溶液、10%吐温-80,对每只玄参黑点球象的受药量分4次进行连续喷雾。     

博落回资源为示范的中药材全产业链研究与综合利用

博落回为新发掘的农用产品之重要中药资源,是异喹啉类生物碱尤其是血根碱重要的来源植物,在欧洲已作为饲用抗生素重要的替代产品来使用(如Sangrovit),本文介绍湖南农业大学"兽用中药资源与中兽药创制"国家农业科研杰出人才研究团队从资源生物学、野生变家种、资源化学、品质评价与代谢分析、综合利用开发等方面进行的博落回全产业链研究。     

博落回总碱半数致死量测定

目的：测定博落回总碱小鼠半数致死量（LD50）。方法：60只小鼠随机分为6组,每组10只,雌雄各半,给小鼠灌入不同浓度的博落回总碱溶液,观察7天内小鼠的毒性反应及死亡情况,记录各组小鼠症状,以小鼠死亡率为指标,计算其LD50。结果：博落回总碱的LD50为1657mg／kg,其95％可信区间为1171．13～2344．99mg／kg．结论：博落回总碱按毒性分级标准属于大毒性。     

尖山橙和龙州山橙中的抗肿瘤吲哚生物碱(英文)

目的:研究尖山橙和龙州山橙中的抗肿瘤生物碱成分方法:采用层析柱和制备高效液相进行化合物分离,运用1D、2D-NMR及MS等波谱分析技术鉴定化合物结构。采用MTT法进行人体肿瘤细胞毒体外活性实验。结果:分离得到两个新的双吲哚生物碱melofusine I (1)和melomorsine I (2),以及22个已知吲哚生物碱,测试了24个化合物对5种(SW480,SMMC-7721,HL-60,MCF-7,A-549)人体肿瘤细胞的细胞毒活性。结论:化合物1-2是新的双吲哚生物碱,化合物tabersonine(3) and 19S-vindolinine(14)具有抑制5种人体肿瘤细胞株的活性。     

木鳖子抗肿瘤有效作用部位筛选及作用机制探讨

目的:观察中药木鳖子不同提取部位体内体外的抗肿瘤作用,并考察其中抗肿瘤效果显著的木鳖子乙酸乙酯提取部位的抗肿瘤作用机制。方法:采用索氏提取技术将中药木鳖子按照溶剂极性顺序依次提取,得到不同成分,采用细胞增殖实验结合动物抗肿瘤模型方法进行药效评价,运用现代分子生物学技术阐明其中最优部位可能的抗肿瘤作用机制。结果:中药木鳖子乙酸乙酯提取部位在体外和体内实验中均可表现出明显的抑制肿瘤生长能力(P0.05),且对实验动物无明显的毒副作用,本研究首次发现木鳖子乙酸乙酯提取部位可影响表皮生长因子(EGFR)激酶活性(P0.05),并可明显抑制EGFR蛋白磷酸化表达(P0.05),可明显抑制丝裂原活化蛋白激酶家族(mitogen activated protein kinase,MAPKs)通路上重要节点蛋白细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2),氨基末端激酶(C-Jun N-terminal kinase,JNK)和丝裂原激活蛋白激酶p38的磷酸化水平(P0.05),且具有浓度依赖关系。结论:中药木鳖子乙酸乙酯提取部位可通过抑制EGFR蛋白及相关通路蛋白活性,在体内外实验中显著抑制肿瘤的生长。     

苦参总生物碱及其单体在Caco-2细胞模型的吸收特征研究

目的 建立同时测定Caco-2细胞模型中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的HPLC方法,探讨苦参总生物碱在Caco-2细胞模型的吸收机制.方法 利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱由细胞绒毛膜面供给侧(AP)→基底外侧(BL)和BL→AP侧两个方向的转运过程;HPLC-UV法测定上述3个生物碱的量;计算转运参数和表观渗透系数(Papp).结果 苦参总碱给药后,苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱由AP→BL侧的Papp分别为(1.098±0.092)×10-5、(1.434±0.098)×10-5、(3.87±0.64)×10-6cm/s,由BL→AP侧的Papp分别为(1.104±0.098)×10-5、(1.034±0.079)×10-5、(2.75±0.33)×10-6 cm/s,与文献报道的单体化合物给药相比,氧化槐果碱和氧化苦参碱双向转运的Papp明显增大.苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的表观渗透率值分别为1.01、0.72、0.71.结论 苦参总生物碱中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱仍主要以被动吸收方式进入体内,但比各单体给药吸收更好.     

Effect of houttuynia cordata aetherolea on adiponectin and connective tissue growth factor in a rat model of diabetes mellitus

Objective

To determine the effect of Houttuynia cordata Aetherolea on connective tissue growth factor and adiponectin in a rat model of diabetes mellitus (DM).

Methods

DM was induced in rats using streptozotocin (STZ) and high glucose-lipid animal feed. Animals were then treated with Houttuynia cordata Aetherolea for 8 weeks. Changes in connective tissue growth factor and adiponectin levels in rats were observed.

Results

Connective tissue growth factor and adiponectin levels in rats with DM improved after Houttuynia cordata Aetherolea treatment.

Conclusion

Houttuynia cordata Aetherolea had a positive effect on rats with DM by reducing levels of connective tissue growth factor and increasing adiponectin levels.     

蒙药草乌芽中药效组分的电喷雾串联质谱分析

目的 分析蒙药草乌芽的药效组分.方法 利用电喷雾串联质谱技术对蒙药草乌芽的乙醇提取液进行了直接分析鉴定.结果 ESI-MS可以给出相对分子质量信息,ESI-MSn方法 则可以从复杂体系中获得结构信息,在草乌芽中发现乌头碱、中乌头碱、次乌头碱及它们的水解产物和脂类生物碱等15种二萜类生物碱.结论 草乌芽中的药效组分二萜类生物碱为首次报道,这些生物碱的结构相似,在电喷雾串联质谱中碎裂方式相同,因此根据电喷雾串联质谱结果 确定了这些生物碱的结构.     

中药抗肿瘤活性成分纳米递送系统的研究进展

与传统化疗药物相比,中药抗肿瘤活性成分具有多靶点、多层次及协同干预等独特的优势。然而,大部分中药抗肿瘤活性成分往往水溶性差、生物利用度低等,限制了其临床应用。纳米递送系统有望改善中药抗肿瘤活性成分的应用限制,与游离药物相比,纳米载药系统表现出改善的生物利用度、增强的组织靶向性、减轻的脱靶不良反应及更大的体内稳定性。综述了目前最常用的2种中药抗肿瘤活性成分纳米递送系统即包载递送系统和共价结合前药递送系统,并对其中存在的问题及未来发展进行讨论,旨在为促进中药抗肿瘤活性成分纳米递送系统在临床上的实际应用提供参考。