MMP-2、MMP-9在自体移植静脉表达及活性变化

目的 探讨自体移植静脉基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达及活性的变化.方法 建立兔自体静脉旁路移植模型后3、7、28 d切取移植静脉,取对侧未移植静脉为自身对照.行HE和Verhoeff弹性纤维染色观察组织病理变化,计算机病理图像分析系统测量新生内膜厚度及面积,半定量逆转录-PCR检测静脉壁MMP-2和MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9活性,应用免疫组化法检测MMP-2蛋白表达.结果 术后7、28 d移植静脉内膜明显增生.与未移植静脉相比,术后3 d,移植静脉MMP-2、MMP-9 mRNA表达已明显增高,7 d达峰值(P＜0.01),术后28 d渐下降至正常水平,但MMP-9 mRNA表达仍维持较高水平.术后三个时间点移植静脉壁MMP-2、MMP-9活性显著增加.结论 自体移植静脉MMP-2、MMP-9表达及活性显著增强,促进移植静脉内膜增生.     

MMP-2、MMP-9在自体移植静脉的表达及活性变化

目的探讨自体移植静脉基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9表达及活性的变化。方法建立兔自体静脉旁路移植模型后3、7、28d切取移植静脉,取对侧未移植静脉为自身对照。行HE和Verhoeff弹性纤维染色观察组织病理变化,计算机病理图像分析系统测量新生内膜厚度及面积,半定量逆转录-PCR检测静脉壁MMP-2和MMP-9mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9活性,应用免疫组化法检测MMP-2蛋白表达。结果术后7、28d移植静脉内膜明显增生。与未移植静脉相比,术后3d,移植静脉MMP-2、MMP-9mRNA表达已明显增高,7d达峰值（P〈0.01）,术后28d渐下降至正常水平,但MMP-9mRNA表达仍维持较高水平。术后三个时间点移植静脉壁MMP-2、MMP-9活性显著增加。结论自体移植静脉MMP-2、MMP-9表达及活性显著增强,促进移植静脉内膜增生。     

bFGF反义寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法 Wistar大鼠48只,分为反义寡核苷酸(AODN)组、正义寡核苷酸(SODN)组、随机寡核苷酸(RODN)组、空白对照组。将含300μg寡核苷酸的F127多聚凝胶溶液涂于移植静脉及吻合口外周,对比术后1周、2周移植静脉平均内膜及中膜厚度。并检测血管壁细胞内bFGF蛋白表达。结果术后1周、2周,AODN组内膜厚度、内膜/中膜及bFGF阳性细胞率均小于其它各组,差异均有显著性(P<0.05)。而SODN组、RODN组,空白对照组之间比较,均无显著性差异(P>0.05)。术后2周,SODN组、RODN组、空白对照组内膜增生较术后1周时明显,差异有显著性(P<0.05)。结论 bFGF反义寡核苷酸通过对bFGF基因表达的抑制作用,达到了抑制移植静脉内膜增生的目的 。     

低分子肝素纳米粒子抑制兔血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨低分子肝素(LMWH)纳米粒子抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用及可能的作用机制.方法 建立32只兔颈内静脉-颈动脉移植模型,并随机分为生理盐水灌注组(A)、LMWH灌注组(B)、生理盐水灌注+术后皮下注射LMWH组(C)、LMWH纳米粒子灌注组(D),每组8只.术后4周末截取移植静脉,行免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;并行RT-PCR检测移植血管单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板源性牛长因子(PDGF)基因mRNA的表达.结果 与A、B、C三组相比,D组的PCNA阳性细胞指数明显降低(P<0.05),其MCP-1、bFGF、PDGF基因mRNA的表达水平也低于另外三组(P<0.05).结论 LMWH纳米粒子通过抑制平滑肌细胞的增殖与迁移而抑制了血管移植后内膜增生.其作用机制可能是通过降低MCP-1、bFGF、PDGF基因mRNA的表达而实现的.     

雷帕霉素抑制兔自体移植静脉内膜过度增殖

目的 观察血管周围局部应用雷帕霉素对兔自体移植静脉段内膜过度增殖的抑制作用.方法 大耳白兔15只,采用自身对照设计建模.任取一侧静脉桥为干预组,外涂含0.3 mg雷帕霉素的Pluronic凝胶;另一侧为对照组,外涂空凝胶.4周后测桥静脉内膜厚度、细胞的增殖指数及p27kip1免疫组化阳性细胞数.结果 干预组桥静脉内膜厚度为(63.7±14.0) μm,明显少于对照组的(77.8±14.9) μm(P＜0.05).增殖指数,干预组为29.3±7.2,明显高于对照组的20.1±9.5(P＜0.05).p27kip1免疫组化染色在干预组见有阳性表达细胞,而对照组表达呈阴性.结论 血管周围局部应用雷帕霉素具有抑制兔移植静脉内膜过度增殖的作用;这种作用与p27kip1的上调表达有关.     

瑞舒伐他汀对颈动脉粥样硬化大鼠血管损伤及MMP-2、MMP-9和PKC表达的影响

目的 探究瑞舒伐他汀对颈动脉粥样硬化大鼠血管损伤的保护作用,以及对基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和蛋白激酶C(PKC)表达的影响.方法 将90只大鼠随机分为对照组、模型组和瑞舒伐他汀组,每组30只,模型组和瑞舒伐他汀组给予高脂鼠粮并复制颈动脉球囊损伤模型.检测颈总动脉内膜、中膜厚度,RT-PCR法检测颈总动脉内MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA和PKC mRNA表达水平,Western blotting法检测颈总动脉内MMP-2蛋白、MMP-9蛋白和PKC蛋白表达水平.结果 瑞舒伐他汀组与模型组比较,精神恢复较快,毛发色泽光滑,活动量较大,体质量增加速度较快;瑞舒伐他汀组内膜厚度/中膜厚度比值、MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、PKC mRNA、MMP-2蛋白、MMP-9蛋白和PKC蛋白表达水平与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.001).结论 瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化大鼠颈总动脉损伤有保护作用,保护作用机制可能为下调MMP-2,MMP-9和PKC表达水平.     

辛伐他汀通过Rho/Rho激酶信号通路抑制高血压模型大鼠的心血管重构研究

目的:研究辛伐他汀抑制高血压模型大鼠心血管重构的作用及其机制。方法:将60只大鼠均分为模型组和阴性对照组,模型组大鼠连续给药3周建立高血压模型,检测2组大鼠血压、主动脉结构变化和Rho激酶mRNA及其A蛋白的表达。然后将模型组大鼠分为低、中、高剂量(0.1、1、10mg/kg)辛伐他汀组(n=9),阴性对照组中选取9只大鼠作为对照组,每日灌胃相应药物1次,8周后处死大鼠,检测4组大鼠主动脉结构变化和Rho激酶mRNA及其A蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,模型组大鼠收缩压、舒张压、Rho激酶mRNA及其A蛋白表达均明显增加(P<0.01),主动脉内膜明显增生,内膜厚度增宽,表明高血压模型建模成功。与对照组比较,低、中、高剂量辛伐他汀组大鼠主动脉内膜增生程度、Rho激酶mRNA及其A蛋白表达均明显降低(P<0.05),且均呈剂量依赖性。结论:辛伐他汀可能通过Rho/Rho激酶信号通路抑制高血压模型大鼠的心血管重构。     

Survivin与MMP-9在子宫内膜异位症在位内膜中的表达

目的:检测子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜中survivin与MMP-9的表达情况并分析两者表达的相关性.方法:收集80例子宫内膜异位症患者子宫内膜标本为EMs在位内膜组(EMs组),其中临床分期Ⅰ期4例、Ⅱ期25例、Ⅲ期44例与Ⅳ期7例;增殖期47例,分泌期33例.以20例同期手术的单纯子宫肌瘤患者子宫内膜作为对照组,其中增殖期内膜7例,分泌期13例.采用免疫组化二步法检测2组标本中survivin与MMP-9的表达;并应用IPP专业图像分析系统进行定量分析.结果:survivin与MMP-9均在子宫内膜胞浆中表达.在EMs组中增殖期survivin和MMP-9及分泌期survivin表达均高于对照组(P＜0.01);其中,survivin表达与细胞周期无关,呈持续性高表达.EMs组不同临床分期间survivin表达,Ⅱ期明显高于Ⅲ期,其余各分期间表达差别无统计学意义(均P＞0.05);而MMP-9在各AFS分期中表达差别均无统计学意义(均P＞0.05).Pearson相关性分析表明survivin与MMP-9在子宫内膜异位症在位内膜中表达呈正相关(r=0.262,t=2.860,P＜0.05).结论:survivin与MMP-9在子宫内膜异位症形成及进展过程中均起关键的作用.     

MMP－9及TIMP－1在功能失调性子宫出血中的作用

目的:探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)与功能失调性子宫出血(功血)的关系。方法:应用RT-PCR技术检测MMP-9及TIMP-1mRNA的表达量。结果:功血复杂性、单纯性增生组子宫内膜组织中MMP-9mRNA的表达均显著高于正常对照组,而二者TIMP-1mRNA的表达量则明显低于正常组(P<0.01)。结论:MMP-9和TIMP-1的变化证实了子宫内膜局部微环境的改变与功血的发生密切相关。     

IL-18及IL-18抗体抗免疫性肝纤维化药血清对离体小鼠HSC增殖和凋亡的影响

目的 探讨白细胞介素18(IL-18)及IL-18抗体抗免疫性肝纤维化药血清对离体小鼠肝星状细胞(mHSC)增殖、凋亡的影响.方法 取12周末正常对照(A)组,兔IgG(B)组,刀豆蛋白A(C)组,IL-18(D)组,IL-18抗体(E)组小鼠注射药物24 h后血清.用MTT法观察药血清对小鼠mHSC增殖作用,荧光显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪分析凋亡作用,半定量RT-PCR检测药物血清处理的mHSC 72 h基质金属酶2(MMP-2)mRNA,基质金属酶抑制剂1(TIMP-1)mRNA表达.结果 与A、B组相比,C、D、E组药血清可以促进mHSC的增殖(P＜0.05),E组较C组抑制mHSC作用明显(P＜0.05).以0.5 pg/ml～50 μg/ml浓度的IL-18和IL-18抗体观察对mHSC的增殖作用不明显.荧光显微镜观察到mHSC核的浓染致密、固缩、片段化以及新月型改变.A、B、C、D、E组mHSC的平均凋亡率为(12.55±2.31)%、(13.01±2.32)%、(6.59±1.06)%、(4.26±0.63)%、(9.04±1.62)%,组间具有统计学差异(P＜0.05).C、D、E组MMP-2 mRNA,TIMP-1 mRNA表达较A、B组明显(P＜0.05).结论 IL-18药血清可以促进mHSC的增殖,并增加MMP-2 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达.