蛋白质芯片检测可溶性转铁蛋白受体条件的优化研究

目的优化蛋白芯片检测可溶性转铁蛋白受体(sTfR)的技术条件。方法用芯片点样仪将血清铁蛋白的一种抗体点样于PSG芯片上,用其另一种抗体做为检测抗体,以Cy3标记的羊抗做为二抗进行检测。以双抗夹心法对sTfR抗原进行检测。结果以sTfR单克隆鼠抗为固定探针,选择接触式点样进行芯片点样,预点样在40以后可出现较好的点样一致性;sTfR的固定探针的浓度选择0.25mg/ml,其检测抗体的浓度为0.18μg/ml;3%脱脂乳粉和GE公司的羊抗兔IgG被优选为封闭剂与第二抗体。sTfR检测下限与生物检测限分别为0.253ng/ml和0.78ng/ml;建立了对sTfR具有最佳相关系数的回归方程(r=0.99699)与标准曲线。结论该研究优化了用于sTfR检测的蛋白芯片检测条件,从而建立了定量检测sTfR的蛋白芯片平台。     

检测血清铁蛋白和甘胆酸对献血者体检普查意义的探讨

为加强输血安全工作 ,提升血源质量 ,防止输血反应疾病的发生 ,在按照国家法规对无偿献血者必检的血液红细胞(RBC)、血红蛋白 (Hb)、血清谷丙转氨酶 (AL T)、乙肝表面抗原 (HBs Ag)、丙肝病毒抗体 (抗 - HCV)、艾滋病病毒抗体(抗 - HIV)、梅毒抗体等多项体检。本文试测血清铁蛋白 (SF)和甘胆酸 (CG) ,旨在进一步提高体检筛选项目的敏感性和特异性。现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　对象　无偿献血者 75 8人次。其中男性 5 16人次 ,年龄2 3～ 4 5岁。女性 2 4 2人次 ,年龄 2 0～ 4 2岁。清晨空腹抽静脉血约 5 ml (RBC和 Hb单…     

血液恶性肿瘤血清铁蛋白测定的临床意义

血清铁蛋白（ＳｅｒｕｍＦｅｒｉｔｉｎ，ＳＦｔ）是存在于真核细胞中的一种含铁蛋白复合物，在铁代谢中起重要作用。随着放免技术的应用ＳＦｔ检测越来越受到人们的重视，在血液肿瘤中，虽然体内储存不增加，但ＳＦｔ可以增高。文献多见急性白血病、恶性淋巴瘤的报告。为...     

阿特拉津抗体芯片制作条件的优化

目的探讨制备阿特拉津抗体蛋白芯片的影响因素,优化制备的实验条件,为采用蛋白芯片技术检测阿特拉津打下基础。方法固定在醛基化玻片的兔抗阿特拉津单克隆抗体质量浓度分别为1.27、0.635、0.254、0.0127mg·mL-1,封闭液选择多种不同浓度的卵清蛋白和胎牛血清,缓冲液选择不同pH值的PBS,温度始终选择37℃,抗原抗体反应时间为15、30、60、120min,采用竞争法进行阿特拉津样品检测,GenePixTm4000B扫描仪进行扫描,分析荧光信号强度。结果荧光信号强度随阿特拉津抗体浓度的增加、反应时间的延长而增强。选择2%OVA封闭、pH7.2稀释样品溶液时背景值最低。结论当阿特拉津抗体质量浓度为1.27mg·mL-1、2%OVA封闭、pH值7.2～9.0,抗原抗体反应时间60～120min时,可以得到较理想的检测结果。     

血清铁蛋白和骨髓细胞内外铁检测结果的对比分析

为探讨血清铁蛋白和骨髓细胞内外铁的相互关系及意义,本文对98例血液病患者血清及骨髓细胞内外铁进行了检测,结果如下.     

小儿急性白血病血清铁蛋白测定的临床意义

为探讨小儿急性白血病(AL)血清铁蛋白(SF)的变化及临床意义,我们对30例小儿AL患者SF进行了测定,并在治疗过程中作动态观察,结果报告如下。1 对象和方法1.1 对象 AL组30例,均为初治的住院患儿,经临床、血象、骨髓象确诊。男17例,女13例,年龄1～13岁,平均5.4岁。其中急淋(ALL)18例(L_110例,     

营养性缺铁性贫血血清铁蛋白与红细胞铁蛋白的测定及其意义

目的：测定缺铁性贫血（IDA）患儿血清铁蛋白（SF）与红细胞铁蛋白（EF）水平和在IDA治疗过程中的变化及意义。方法：102例IDA患儿随机分为三组,应用元素铁10mg/d进行干预,A组为12周疗程组、B组为6周疗程组、C组为病例对照组,并设立正常对照组;A、B、C各组分别于投药前、服药后第12周采末梢血测定Hb,ZPP,SF,EF,第8周时仅测定Hb。Hb、ZPP采用常规方法,SF与EF测定采用末梢血放射免疫法。结果：治疗12周后SF与EF水平均显著高于治疗前（P均＜0．01）,与正常对照组相比,SF仍低于正常对照组水平（P＜0．05）,而EF水平则已达到正常对照组水平（P＞0．05）,治疗前后各组EF与SF均呈正相关关系,EF与Hb存在正相关关系,但与ZPP存在负相关关系。结论：EF对IDA的治疗反应较SF敏感,且影响EF的因素较少,可作为治疗IDA早期疗效评价指标。     

脐血血清铁蛋白测定的价值探讨

目的 :探讨孕妇妊娠晚期、分娩时及新生儿脐带血血清铁蛋白 (SF)含量 ,以了解母体内铁的贮存量以及相互关系。方法 :使用全自动酶标分析仪测定 95例晚期妊娠孕妇的静脉血和脐带血的SF含量值。结果 :正常对照组SF为 83 1± 32 8μg/L ,孕妇分娩时SF为 16 1± 5 5 μg/L ,脐血SF为 96 9± 4 0 8μg/L ;前两者比较有显著差异 (P <0 0 0 1) ,后两者比较亦有显著差异 (P <0 0 0 1) ,对照组与脐带血SF含量比较有差异 (P <0 0 5 )。结论 :孕妇妊娠期SF测定可以动态观察孕妇是否缺铁 ,以便间接了解新生儿铁的贮备 ,并纠正孕妇妊娠晚期的缺铁。     

THE CORRELATION OF SERUM FERRITIN AND BODY IRON STORES

The relationship between serum ferritin levels and total body iron stores is discussed. Recent work is evaluated which correlates these parameters in iron deficiency, liver disease, inflammation, renal failure, and states with increased red cell turnover.     

放射免疫法与酶联免疫法测定血清铁蛋白的比较

血清铁蛋白是反映机体铁储备的简便和可靠的指标,本文用商业上生产的盒子比较了放射免疫法(RIA)和酶联免疫法(EIA)的准确性,并对两种方法测定血清铁蛋白值进行了比较,两种方法均可获得较好的结果,灵敏度达1μg/ml,同一份血清测定10次CV％在3.62—24.08之间。但血清浓度在10μg/ml以下时标准曲线较平,技术上容易造成误差,故应加大取样量。 一般酶联免疫法测得结果常较放射免疫法测得值高,本实验共测定35份血清,其直线回归方程式为RIA=0.82·EIA+11.8 r=0.98 两者结果密切相关,因此在无条件或不愿接触同位素的实验室,可采用EIA法测定血清铁蛋白,同样可以得到满意的结果。但酶联法影响因素较多,在操作上更要注意。     

正痘病毒检测基因芯片的研制

目的 研制正痘病毒的检测基因芯片,以应用于此类病毒引起疾病的早期诊断。方法 运用长片段PCR方法从痘苗病毒中扩增30kb的正痘病毒保守区域,PCR产物经Sau 3AI限制性内切酶消化后与T载体连接,筛选阳性克隆,扩增探针,用Cartesian Pixsys 5500打印仪制备成芯片。采用限制性显示技术对痘苗病毒和牛痘病毒样品进行标记,与芯片杂交,用Agilent扫描仪扫描,检测杂交信号。结果 大小分别为10035bp,9845bp,9293bp的正痘病毒保守区被扩增出来,构建了其酶切片段克隆的探针库,经测序验证正确。根据正痘病毒保守区域制备的芯片与痘苗病毒有明显的杂交信号,与牛痘病毒杂交信号稍弱,且有杂交信号的探针数目减少。阴性对照和空白对照均无杂交信号。结论 本研究中制备的正痘病毒检测基因芯片具有较高的敏感性,可用于正痘病毒类生物病原体的检测。     

血清铁蛋白纸片测定法与常规方法的比较

目的　建立早期、敏感、准确的铁评价方法。方法　采用常规方法与滤纸斑点法(纸片法 )对 41例健康成人血清铁蛋白含量进行对比研究。结果　两方法所得结果的几何均数分别为 32 .2 μg/L和 30 .5μg/L,差异无显著性 (P>0 .0 5) ;在铁蛋白含量为 2 .5～ 371 .6μg/L范围内呈高度相关 (r=0 .999,P=0 .0 0 0 1 ) ;纸片法的测定结果与常规法的相符程度高 ;以血清铁蛋白<1 5μg/L为诊断标准 ,纸片法对铁缺乏诊断的敏感性 (sensitivity)为 94.6% ,特异性 (specificity)达 1 0 0 %。结论　纸片法不需冷冻设备 ,血样可在室温下保存与运送 ,血清用量少 ,毛细血管采血即可满足要求 ,具有简便、可靠、实用等优点 ,便于血清铁蛋白在现场铁营养状况评价中的应用。     

THE DETECTION OF EARLY HEMOCHROMATOSIS

The detection of early latent disease in the relatives of individuals with idiopathic hemochromatosis is a matter of importance. A study of iron metabolism suggests that no one test is diagnostic and several are needed. Another study evaluated the concordance of HLA — haplotypes in affected and nonaffected relatives and gives evidence of a promising new approach.     

蛋白质和食盐摄入量与血脂水平关系初探

本实验首先通过控制饲料蛋白质的供给量，观察不同蛋白质水平对小鼠嗜盐程度的影响，以探索蛋白质摄入量与嗜盐习性的关系。之后，进一步观察给盐的同时给予高胆固醇高脂肪饲料的小鼠血清总胆固醇（ＴＣ）和甘油三酯（ＴＧ）的水平变化，以探讨血脂代谢与蛋白质摄入量及嗜盐习性的关系。结果表明：低蛋白质（５．２％）饲料使小鼠自发饮用较多的盐水，有可能蛋白质供给量不足是嗜盐原因之一。小鼠摄食高胆固醇高脂肪饲料时，血脂水平明显升高（Ｐ＜０．０５）；同时饮用１．１％食盐水时，血清ＴＣ及ＴＧ水平更显著升高（Ｐ＜０．０１））．     

糖化血清蛋白测定对急性脑血管病高血糖状态的诊断价值

目的:探讨急性脑血管病患者糖化血清蛋白(GSP)和血糖之间的相关性。方法:对48例急性脑血管病患者及50例正常对照组分别进行血糖和血清GSP检测。结果:糖尿病继发脑血管病组GSP((4.21±1.35)mmol/L)显著高于正常对照组GSP((1.65±0.27)mmol/L,P<0.01)。无糖尿病的脑血管病组GSP水平((1.96±0.25)mmol/L)与正常对照组比差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病患者组与无糖尿病患者组的GSP水平比较差异有统计学意义(P<0.01)。糖尿病组空腹血糖水平与GSP水平呈显著正相关(r=0.603,P<0.01);而无糖尿病组空腹血糖水平与GSP水平差异无统计学意义(r=0.357,P>0.05)。结论:GSP与血糖关系密切,联合检测对急性脑血管病患者血糖增高的原因有鉴别价值。     

西尼罗病毒60mer寡核苷酸探针的设计

[目的]设计西尼罗病毒诊断芯片的60mer寡核苷酸探针.[方法]使用NCBI Blast软件对病毒的基因序列进行对比,获得特异性序列,以Oligo6.0对特异性序列进行探针的设计.[结果]设计出10条60mer寡核苷酸探针;为下一步芯片的制备做准备.[结论]将Blast序列分析和Oligo6.0的探针设计功能相结合能快速有效地设计出诊断芯片的寡核苷酸探针.     

糖化血红蛋白与糖化血清蛋白对诊断妊娠期糖尿病的临床价值

目的探讨妊娠期糖尿病应用糖化血清蛋白(GSP)及糖化血红蛋白(HbAlc)诊断的临床价值。方法入选我院2010年6月²013年6月妊娠期糖尿病患者120例为观察组,同期择取120例正常妊娠孕妇为对照组,比较两组的GSP及HbAlc检测水平。结果观察组的GSP及HbAlc检测指标显著高于对照组(p<0.05);观察组的GSP及HbAlc异常率显著高于对照组(p<0.05);妊娠期糖尿病诊断中GSP的阳性预测值、灵敏度、特异性等均显著优于HbAlc(p<0.05)。结论妊娠期糖尿病患者应用糖化血清蛋白及糖化血红蛋白检测诊断效果确切,且糖化血清蛋白的阳性预测值更高,对诊断妊娠期糖尿病具有重要意义。     

应用荧光蛋白磷酸酶抑制法检测水中微囊藻毒素

目的：以DiFMUP为底物，建立微囊藻毒素的荧光蛋白磷酸酶抑制检测法（F-PPIA）并探讨其在水体微囊藻毒素检测中的应用。方法：对太湖水华期间水样分别应用F-PPIA和HPLC方法检测微囊藻毒素含量，并进行相关性分析；应用F-PPIA方法检测南京玄武湖、莫愁湖、南湖等富营养化水体中微囊藻毒素含量，同时应用丙酮提取-分光光度法检测水体中叶绿素含量。结果：F-PPIA法对水中MC的检测范围是（0．02～0．5）μg／L。FPPIA和HPLC方法检测水样中微囊藻毒素物质的结果相关性较好（r=0．9678，P〈0．001）。南京玄武湖、莫愁湖、南湖水体中微囊藻毒素类物质分别为（6．671～14．579）、（0．096～0．166）、（0．050～0．057）μg／L，叶绿素含量分别为（51．182～183．956）、（40．946～65．513）及40．946μg／L。结论：F-PPIA法能快速、准确检测环境样本中微囊藻毒素含量，具有一定的实用价值。南京7～8月玄武湖水体的富营养化程度和微囊藻毒素类物质污染程度较莫愁湖、南湖严重。