miR-215在进展期结肠直肠癌中的表达及其临床意义

目的:研究miR-215在结肠直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及其临床意义。方法:研究对象是我院2007年1月至6月的进展期CRC病人,从入选病人的石蜡包埋组织中提取microRNA,进行实时定量PCR检测。结果:共有42例CRC病人入选,男25例,女17例;直肠癌18例,结肠癌24例。miR-215在CRC组织中的表达水平低于配对的癌旁正常组织(P<0.001)。结论:miR-215可能成为CRC的预后标志物。     

胃癌中微小RNA表达谱及miR-429表达水平的研究

目的 检测胃癌组织及胃癌细胞中微小RNA (miRNA)表达谱,并测定胃癌组织及胃癌细胞中miR-429的表达水平.方法 采用基因芯片技术检测胃癌组织、癌旁正常胃组织标本及胃癌细胞株( SGC-7901)、正常人胃上皮细胞(GES-1)中miRNAs的表达.挑选基因芯片结果中胃癌组织表达显著下调的miR-429,并采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测7例正常胃组织、52例胃癌组织、胃癌细胞SGC-7901、GES-1中miR-429的表达.结果 基因芯片结果表明,胃癌组织中有23个miRNA上调,如miR-21、miR-30b等,31个下调如miR-429、miR-200等.qRT-PCR检测显示,miR-429在胃癌组织中下降约63.4％ (P＜0.01),在胃癌细胞株SGC7901中下降约76.2％(P＜0.01).结论 miR-429在胃癌组织中表达显著下调,可能作为胃癌特异性miRNA,在胃癌的发生发展过程中有重要作用.     

miR-214对胃癌细胞SGC7901侵袭和转移能力的影响

目的:探讨miR-214对胃癌细胞侵袭和转移能力的影响及其可能作用机制。方法:应用miRanda,TarBase v.5c靶基因预测网站分析miR-214与PTEN mRNA的可能结合位点,分别将miR-214模拟物(mimics),拮抗物(inhibitors)和无关序列转染到SGC7901细胞株,以空白转染组为阴性对照,用Western blot的方法比较各组细胞PTEN蛋白的表达,用Transwell侵袭小室检测各组细胞侵袭能力的变化。结果:Western blot结果显示,miR-214 mimics转染组的SGC7901细胞中PTEN蛋白表达较其余各组显著降低(均P<0.05),Transwell侵袭小室检测结果表明,miR-214 mimics转染组的细胞侵袭细胞数明显多于其余各组(均P<0.05)。结论:miR-214能促进胃癌细胞侵袭和转移,其机制可能与抑制PTEN的表达有关。摘要     

miR-1246在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察微小RNA-1246（miR-1246）在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其在肝癌发生发展中的作用和意义。方法应用实时定量PCR（qRT-PCR）方法检测miR-1246在肝癌以及癌旁组织的表达;对人肝癌细胞株（BEL7402、SMMC7721）转染miR-1246 抑制剂后,采用MTT法观察肝癌细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果 miR-1246 在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织[（65.39±8.77）vs（10.23±2.58）,P=0.002]。MTT和凋亡实验结果显示,与阴性对照组相比,转染miR-1246抑制剂后,BEL7402细胞增殖能力下降,凋亡增加（P均＜0.05）;SMMC7721细胞也出现增殖能力下降,凋亡增加（P均＜0.05）。结论 miR-1246 在肝癌组织中高表达,并且与肝癌细胞的增殖及凋亡有关,其表达的上调可能与肝癌的发生发展有关。     

乳腺癌组织中 miR-21的表达及意义

目的 对乳腺癌组织及其相应癌旁组织中miR-21进行定量检测,分析其表达与临床病理特征的及意义.方法 采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测60例乳腺癌及其对应癌旁组织中miR-21的表达量,分析其表达与肿瘤大小、TNM分期、组织学类型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)等临床病理特征的关系.结果 实时RT-PCR方法 检测miR-21表达的敏感性和特异性良好.miR-21在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P＜0.001);miR-21的高表达还与较高的TNM分期,淋巴结转移及PR的表达程度有关(各分组间P＜0.01及＜0.05);miR-21的表达在"三阴性乳腺癌"(ER,PR,CerbB-2均为阴性)和"非三阴性乳腺癌"之间的表达存在统计学差异(P=0.029).结论 miR-21在乳腺癌组织中高表达,其水平可能与乳腺癌的恶性程度有关.     

MiR-134通过靶向调节KRAS抑制786-0肾透明细胞癌细胞上皮间质转化过程

目的探索miR-134在肾癌组织中的表达并研究其对肾透明细胞癌细胞786-0上皮间质转化的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-134在20对肾癌组织和786-0细胞中的表达情况;miR-134模拟物转染786-0后,划痕实验和Transwell实验分别检测肾癌细胞迁移和侵袭能力的改变情况,Western blot检测细胞中靶蛋白KRAS及其相关信号通路蛋白表达情况;双荧光素酶报告基因检测miR-134与KRAS 3′-UTR结合情况。结果 MiR-134在20对肾癌组织和786-0细胞中明显低表达(P0.01);miR-134模拟物转染后能够抑制肿瘤细胞侵袭(P0.01)和迁移的能力(P0.05),显著降低肿瘤细胞中KRAS蛋白的水平(P0.05)并抑制RAS/MAPK/ERK通路中关键蛋白p-ERK的表达(P0.05);双荧光素酶报告基因显示miR-134能与KRAS 3′-UTR结合,显著降低荧光值(P0.05)。结论 MiR-134在肾透明细胞癌中显著低表达,能通过靶向抑制KRAS表达调控下游RAS/MAPK/ERK通路活性,阻滞786-0细胞上皮间质转化过程,抑制肿瘤细胞的侵袭和转移。     

A gene chip study suggests that miR-17-3p is associated with diabetic foot ulcers

Background of the Study Diabetic foot ulcers (DFUs) are severe effect of diabetes. This research aimed to discover the role of micro-ribonucleic acid (miRNA) in treating DFUs involved in maggot debridement therapy (MDT) via a miRNA chip study. A miRNA chip approach was adopted. Patients with diabetes (type 1 or 2) who had at least one-foot ulcer (current or previous) were enrolled in the study. The alterations of miRNA expressions in the granulation tissue during treatment with MDT were measured. Following MDT, the increased expression of miR17-92 was verified in vivo. The miR-17-3p expression increased, and Flk-1 (vascular endothelial growth factor) expression was significantly reduced in patients with DFUs who received MDT (P < 0.01). Results from human umbilical vein endothelial cells that excrete or secrete showed consistency with in vitro findings (P < 0.001, P < 0.05). The overexpression of miR-17-3p demonstrated inhibitory activity on tube formation (P < 0.05). When DFUs were treated with MDT, it revealed that miR-17-3p had a negative regulatory effect on Flk-1.     

miR-542-3p对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及机制探讨

目的 探讨microRNA-542-3p(miR-542-3p)在人肝癌细胞系及组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响.方法 采用RT-PCR检测miR-542-3p在肝癌细胞系(HCCLM3、Hep3B、Huh7、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L)以及人正常肝细胞LO2中的表达;...     

miR-193b对胃癌细胞浸润和转移的影响

目的:探讨miR-193b转染对胃癌细胞浸润、转移的影响及其作用机制。 方法:应用microRNA芯片检测TGF-β1处理胃癌细胞BGC823前后miRNA的差异表达谱;应用划痕实验,transwell 迁移浸润及裸鼠成瘤等实验分别检测瞬时转染miR-193b抑制剂前后胃癌细胞株生物学行为的变化。 结果:TGF-β1处理胃癌细胞BGC823前后miRNA的表达谱存在6个差异表达,包括3个（miR-27a, miR-29b-1和 miR-194）表达上调,3个（miR-193b, miR-574-3p和miR-130b）表达下调。转染miR-193b 抑制剂后,胃癌细胞株BGC823迁移、浸润和转移的能力明显增强。 结论:TGF-β1可能通过下调miR-193b的表达负向调控胃癌细胞的迁移、浸润和转移。     

MicroRNA与常见消化系统肿瘤

microRNA(miRNA)是一种大小为18～25个碱基的单链小分子的非编码RNA.miRNA在消化系统肿瘤的发生发展中都发挥着重要的作用.目前已经有部分miRNA被证实与一些常见的消化系统肿瘤有关,它们有一部分起着癌基因的作用,而另一部分起着抑癌基因的作用,至今为止,很多miRNA的靶点都已经被发现.因此miRNA的研究为消化道肿瘤的诊断和治疗提供了新的途径和手段.     

microRNA与乳腺癌转移、复发的关系

miRNAs是一类广泛存在于真核细胞中的长约22 nt的单链、非编码的小分子RNAs,具有转录后基因调控的功能,能够调节细胞增生、凋亡以及分化等多种生物学过程.近年来研究发现,miRNA与肿瘤的侵袭、转移与复发关系密切.本文就miRNA的主要特点及其与乳腺癌转移、复发的关系的研究进展予以综述.     

Mir-145在肝癌细胞及肝癌组织中的表达及其意义

Objective To explore the role of miR-145 in human hepatocellular carcinoma ( HCC). We investigate the expression of miR-145 in human embryonic hepatocytes ( L02 cells),hepatocellular carcinoma cell lines (MHCC97 ,SMMC7721) ,HCC tissues and normal liver. Methods We detected the expressions of miR-145 in human embryonic hepatocytes, hepatocellular carcinoma cell lines ( MHCC97,SMMC7721) ,HCC tissues,cancer organizations and normal liver by real-time PCR. Result The expression of miR-145 in hepatocellular carcinoma cell lines ( MHCC97,SMMC7721) is significantly lower than the human embryonic hepatocytes ( 0. 312 ± 0. 025,0. 396 ± 0. 076,0. 954 ± 0. 037, P ＜ 0. 05), and compared with the cancer organizations and normal liver,the expression of miR-145 in HCC tissues is significantly decreased (0. 162 ±0.002,0. 972 ±0.054,0.956 ±0. 018,P＜0. 05). Conclusion These results indicate that the miR-145 probably involved in HCC pathogenesis and was the indicator of diagnosis and prognosis of the HCC.     

Mir-145在肝癌细胞及肝癌组织中的表达及其意义

Objective To explore the role of miR-145 in human hepatocellular carcinoma ( HCC). We investigate the expression of miR-145 in human embryonic hepatocytes ( L02 cells),hepatocellular carcinoma cell lines (MHCC97 ,SMMC7721) ,HCC tissues and normal liver. Methods We detected the expressions of miR-145 in human embryonic hepatocytes, hepatocellular carcinoma cell lines ( MHCC97,SMMC7721) ,HCC tissues,cancer organizations and normal liver by real-time PCR. Result The expression of miR-145 in hepatocellular carcinoma cell lines ( MHCC97,SMMC7721) is significantly lower than the human embryonic hepatocytes ( 0. 312 ± 0. 025,0. 396 ± 0. 076,0. 954 ± 0. 037, P ＜ 0. 05), and compared with the cancer organizations and normal liver,the expression of miR-145 in HCC tissues is significantly decreased (0. 162 ±0.002,0. 972 ±0.054,0.956 ±0. 018,P＜0. 05). Conclusion These results indicate that the miR-145 probably involved in HCC pathogenesis and was the indicator of diagnosis and prognosis of the HCC.     

microRNA和干细胞的研究进展

目的介绍microRNA(miRNA)起源、功能及其与干细胞的关系的研究进展。方法查阅近年有关文献,并对miRNA和干细胞进行综合分析。结果miRNA是一类非编码蛋白并且参与转录后调节的单链小分子RNA(20~25个碱基),对基因表达具有重要调控作用。近年来发现存在着一个庞大的miRNA家族,参与调控生物体生长发育等许多复杂的生命过程,并且与干细胞的自我更新和多向分化存在着紧密关联。结论miRNA作为一种新的调控基因表达的小分子RNA,可以成为干细胞研究的新途径。     

MicroRNA与胰腺癌关系研究进展

胰腺癌因其起病隐匿、早期诊断难、手术切除困难、放化疗不敏感以及预后差、死亡率高等原因,成为危害最大的恶性肿瘤之一,其相关的分子机制的研究具有重要临床意义。microRNA（miRNA）是一类单链非编码RNA分子,是与肿瘤发生发展有关的新的调节分子家族之一。     

胸水microRNA检测及与生化指标、肿瘤标志物的相关性

目的：分析良恶性胸水中与肿瘤密切相关的5种micro RNA的表达,探讨其与胸水中生化指标和肿瘤标志物的相关性。方法：应用逆转录荧光定量PCR法对12例肺癌性和9例良性患者的胸水中has-let-7b、has-miR-24、has-miR-27b、has-miR-30d和has-miR-128a的表达量进行检测,并分析其与胸水中腺苷脱氨酶（ADA）、乳酸脱氢酶（LDH）、总蛋白（TP）、葡萄糖（GLU）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原199（CA199）、甲胎蛋白（AFP）的含量之间的关系。结果：5种micro RNA中只有has-miR-24在恶性胸水中表达要明显低于良性胸水（P＜0.05）,与ADA和LDH的相关性分别是0.5707和0.5144;ADA与LDH的含量也是恶性胸水明显低于良性胸水（P＜0.05）,ADA与LDH在恶性胸水中的含量的相关性达到0.7754。结论：恶性胸水中has-miR-24的表达与ADA和LDH的含量存在明显的相关性,为进一步探究microRNA在恶性胸水形成中所起作用提供依据。     

miR-145在结直肠癌组织的表达及临床意义

目的 探讨结直肠癌组织microRNA-145(miR-145)的表达与患者临床症状,尤其是肿瘤远处转移或浸润生长的关系.方法 收集88例手术切除的结直肠癌组织,42例远离癌组织的正常结直肠组织.提取这些标本的总RNA,在使用微小RNA的引物反转录后,用miR-145特异性引物做荧光定量聚合酶链反应(PCR).结果 荧光定量PCR显示:结直肠癌组织miR-145的表达量明显降低,癌组织和正常组织的miR-145相对水平分别为31.65±27.97和189.39±159.30,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).miR-145的低表达,与年龄,性别,肿瘤原发病灶的大小,有无淋巴转移明显相关(P＞0.05),但与细胞分化程度,远处转移或浸润其他器官是否发生密切相关.高分化(n=25)、中分化(n=34)和低分化(n=29)的癌组织miR-145均值分别为41.96±38.58、29.69±20.43和26.12±23.13,组间差异有统计学意义(P＜0.01).有远处转移或浸润其他器官的19个病例miR-145均值仅为14.45±9.98,远低于癌症患者的均值(P＜0.01).结论 结直肠癌组织中miR-145的表达低于正常组织,这与癌细胞的分化程度,远处转移或浸润生长密切相关.

Abstract：

Objective To study the expression of microRNA-145 (miR-145) in colorectal cancer tissues and its relationship to tumor cell differentiation, tumor metastasis or invasion. Methods Colorectal cancer tissues were collected from 88 operated patients. Forty-two cases of normal colorectal samples served as controls. Total RNA was extracted from these tissues and reversely transcribed to cDNA by using microRNA specific primers. miR-145 levels were assayed by real-time polymerase chain reaction (PCR).Results miR-145 relative level in colorectal tumor and nomad colorectal tissues was 31.65 ± 27. 97 and 189. 39 ± 159.30 respectively, with the difference being statistically significant between them ( P ＜0. 01 ).There was no relationship between miR-145 level and patients' age and sex, size of the tumor, lymph node metastasis (P ＞ 0. 05 ). However, the low expression of miR-145 was related to the differentiation of tumor cells. In the cells with higher differentiation (n =25), moderate differentiation (n =34) and lower differentiation (n =29), miR-145 levels were 41.96 ± 38.58, 29. 69 ± 20. 4 and 26. 12 ± 23. 13 respectively (P ＜0. 01 ). miR-145 was even lower when the tumor had remote metastasis and invasion to neighborhood organs. In 19 patients with the situations, miR-145 levels were only 14. 45 ± 9. 98, significantly lower then the average level of cancer patients (P ＜ 0. 01 ). Conclusion The expression of miR-145 was reduced in colorectal cancer and related to tumor cell differentiation. In the patients with metastasis and invasion the miR-145 expression level was even lower.     

miR-128真核表达载体的构建及功能的初步研究

目的构建miR-128真核表达载体,研究其在神经胶质瘤细胞株U343表达及对U343细胞增殖的影响。方法以人神经胶质瘤细胞株U343的DNA为模板扩增miR-128-1和miR-128-2的前体序列,将人miR-128-1(hsamiR128-1)和人miR-128-2(hsa-miR128-2)基因克隆到真核表达载体pCR3.1,将pCR3.1-miR-128-1(p-128-1)和pCR3.1-miR-128-2(p-128-2)表达载体瞬时转染U343细胞,采用Northern印迹检测成熟的miR-128表达。将U343细胞接种96孔板,MTT法检测过表达miR-128对细胞增殖的影响。结果p-128-1和p-128-2表达载体经酶切及测序鉴定正确;二者转染细胞后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增结果显示,其能有效表达miR-128的前体;Northern印迹结果均能产生成熟态的miR-128。MTT检测结果在无血清培养和维甲酸处理的情况下,细胞的增殖能力明显下降。结论成功构建了p-128-1和p-128-2的真核表达载体,转染神经胶质瘤细胞后能有效表达,miR-128基因过表达能抑制U343细胞的增殖。