婴儿白细胞体外诱生干扰素水平的研究

本文观察脐血、婴儿(8～10月龄)及成人静脉血白细胞经不同诱生剂作用后,产生干扰素的水平。发现人出生时诱生α干扰素的水平随诱生剂不同而有所差异,NDV诱导脐血产生的α干扰素效价与成人血相当;但SPA菌体诱导的脐血α干扰素(4.36±2.45log_2u/50μl)明显低于成人者(9.73±1.93log_2u/50μl)。PHA或ConA诱导脐血产生的γ干扰素量都明显低于成人水平。于8～10月龄时SPA菌体诱生α干扰素水平已无异于成人,而PHA或ConA作用下γ干扰素的效价仍逊于成人。这种干扰素,特别是γ干扰素,产生不足可能是新生儿易患严重胞内病原体感染的一个重要的免疫因素。     

牛磺酸对新生儿单个核细胞免疫功能的影响

本文以胎盘剥离前的脐血单个核细胞做体外试验,观察了牛磺酸对新生儿淋巴细胞增殖、γ-干扰素和抗体产生水平的影响,并与成人作对照。结果表明①牛磺酸可以促进淋巴细胞增殖,上升幅度以低出生体重儿最为显著。②牛磺酸可以提高ConA诱生干扰素和PWM刺激抗体生成的水平。③牛磺酸本身没有丝裂原和干扰素诱生剂的作用。提示牛磺酸有免疫促进作用。     

慢性乙型肝炎病人单个核细胞γ干扰素的诱生和T淋巴细胞亚群的研究

本文对28例慢乙肝病人的外周血单个核细胞进行ConA诱生γ干扰素的测定,同时用T细胞单克隆抗体系统检测其T细胞亚群。结果发现,慢乙肝病人ConA诱生的γ干扰素效价为7.858±1.483log2U/ml,而正常对照组为7.839±0.621log2U/ml,两组间无显著性差异,但在慢乙肝病人组内个体间IFN-γ的效价差别显著大于对照组(P<0.05).慢乙肝病人组T细胞亚群的T_4/T_3比例与对照组无显著差异。但IFN-γ反应低下组的5人均有T_4/T_3比例异常。在28例病人中有14例T_4/T_3比例异常(高于或低于正常),且20例HBeAg阳性病人中有12例T_4/T_3比例异常;8例HBeAg阴性病人中仅2例T_4/T_3比例异常。     

正常人外伤脾多向混合淋巴细胞培养产生较高效价γ干扰素

三例正常人外伤猝死者,取其全脾细胞加无血清培养基作多向混合淋巴细胞培养,不加任何干扰素诱生剂,37℃5％CO_2中培育72h后,产生出γ干扰素(1FN-γ)的效价达10240IU/ml,比用一般诱生剂的产量高。这种多向混合淋巴细胞反应的转化率>48％。文中讨论了MLC产生IFN-Y的机理,多向MLC产生较高效价IFN-γ的原因以及与所谓混合淋巴细胸肿瘤细胞培养(MLTC)产生IFN的类型和过程的不同特点。     

雌二醇在体外对脾细胞和胸腺细胞增殖反应的影响

本文研究在体外细胞培养系统中直接加入雌二醇(E_2)对脾细胞和胸腺细胞的作用,发现高剂量(≥5μg/ml)的E_2可直接抑制脾细胞对ConA诱导的增殖反应;但在胸腺细胞的实验中,无论低或高剂量(10~(-2)ng/ml～20μg/ml)的E_2均未发现它对ConA诱导的增殖反应产生明显影响。表明E_2在体外对脾细胞和胸腺细胞的作用存在差异。     

干扰素的免疫调节作用

干扰素是由有关生物细胞在干扰素诱生剂作用下产生的一类诱生蛋白。国际干扰素命名委员会将其分为三种:α干扰素(IFN-α)、β干扰素(1FN-β)和γ-干扰素(1FN-γ)。根据氨基酸顺序的不同,又分为若干亚型:人α-干扰素至少有20个亚型,β干扰素有4个亚型,γ-干扰素可能也有4个亚型。     

介绍一种测定IL-1活性的方法

浓度为20μg/ml的LPS刺激单核细胞(粘附于塑料平皿底)48小时,其上清液有IL-1活性。在6.25％上清液与5μg/ml PHA条件下,~3H-TdR掺入NIH小鼠胸腺细胞从单纯6.25％上清液的255±165cpm和单纯PHA的828±126cpm增高到3,818±620cpm。在12.5％上清液与5μg/ml PHA条件下,~H-TdR掺入从单纯12.5％上清液的260±118cpm和单纯PHA的828±126cpm增高到3,718±894cpm。但上清液浓度增高到25％和50％,~3H-TdR掺入增高程度降低。IL-1活性测定中PHA浓度5μg/ml优于2.5μg/ml,NIH小鼠胸腺细胞优于BALB/c小鼠胸腺细胞。     

IL-2和PWM对人淋巴细胞产生免疫球蛋白的影响

本文初步观察了IL-2和PWM 对人淋巴细胞产生免疫球蛋白的影响。将PWM、MLA-144细血培养上清(富含IL-2)分别加入人扁桃体和外周血淋巴细胞体外培养。用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法,分别检测第七天培养上清液中IgG、IgM和IgA的含量。加入PWM(10μg/ml)或 MLA-144 细胞培养上清(1:5稀释)的刺激组,IgG、IgM、IgA 的含量均较对照组明显升高,三种免疫球蛋白比较,IgG、IgM 产量高于IgA。相同条件下,扁桃体淋巴细胞产生的IgA,高于外周血淋巴细胞所产生者。同时加入PWM和MLA-144细胞上清联合刺激组较加PWM 或MLA-144 细胞上清单独刺激组IgG、IgM、IgA的产量增高。结果说明:适当刺激浓度的 IL-2和PWM 对人淋巴细胞免疫球蛋白的产生有明显促进作用。一定条件下,PWM和 IL-2联合刺激诱生免疫球蛋白有相加作用。     

PHA诱导人外周血淋巴细胞产生IL2的方法学及影响因素探讨

本文借用IL-2依赖细胞CTLL测定IL-2生物活性实验,检测了人外周血单个核细胞(PBM)在PHA促分裂剂的刺激下,上清内IL-2含量,并建立了一个微量的体外诱导人PBM产生IL-2的方法。实验结果示,体外诱导人PBM产生IL-2的最佳PHA浓度为1:250稀释,培养时间以44～48小时为宜。由于采用96孔板培养,诱生时需血量小。实验结果还示,诱导IL-2产生的PHA终浓度范围窄(1:250～1:500),而淋转相对宽(1:250～1:5000),单核细胞对IL-2的诱生似具有负调节作用,表现为去单核时诱生的IL-2活性增高。粗制的IL-2上清除能维持CTLL生长外,也能维持人PBM体外培养。     

5种中药有效成分的干扰素促诱生效应

用100μg/ml的人参皂甙、云芝糖肽、人参多糖、羧甲基茯苓多糖及10μg/ml的刺五加多糖对人脐血白细胞进行了IFN-α和IFN-γ的促诱生试验,其促诱生组的IFN效价比常规诱生组(IFN     

PHA、ConA及CD3ε单克隆抗体对小鼠淋巴细胞迁移及分泌趋化因子的影响

目的探讨不同浓度的PHA、ConA及CD3ε单克隆抗体对Balb/c小鼠淋巴细胞迁移及分泌趋化因子的影响,初步了解这3种刺激剂与小鼠淋巴细胞迁移功能之间的关系。方法通过研磨法分离Balb/c小鼠脾脏淋巴细胞,用不同浓度的PHA、ConA及CD3ε单克隆抗体分别刺激培养淋巴细胞,收集细胞上清,用Traswell法测定细胞上清对淋巴细胞迁移率的影响;ELISA法检测细胞上清中趋化因子XCL1、CCL4、CCL5、CCL3、IL-16、IL-8及CCL20的水平。结果 PHA组各个浓度刺激下淋巴细胞的迁移率和对照组无明显差异;ConA组的刺激浓度为20μg/ml时,其对应的淋巴细胞迁移率明显高于对照组;CD3ε单抗组,其浓度分别为2.5、10μg/ml时,对应的淋巴细胞迁移率明显高于对照组。在各个刺激组中,ELISA测得的多种趋化因子水平在总体上存在明显差异。结论 ConA及CD3ε单克隆抗体分别刺激小鼠淋巴细胞后,其分泌趋化因子的功能发生了明显的改变,这些趋化因子影响着小鼠淋巴细胞的迁移功能。趋化因子XCL1、CCL4、CCL5、CCL3的水平明显高于对照,说明这几个因子在淋巴细胞迁移中起到重要的作用。根据实验结果初步推荐CD3ε单抗可以作为小鼠淋巴细胞迁移试验中的首选阳性对照,次选为ConA。     

氢化可的松对新生儿细胞产生IFNγ的影响

本文观察了氢化可的松对新生儿脐血单个核细胞(CBMC)产生γ-干扰素(IFN_γ)的影响。试检结果表明,药理浓度(10~(-6)M)氢化可的松对ConA 诱导新生儿CBMC产生IFN_γ有明显的抑制作用,其抑制幅度大于该浓度氢化可的松对成人单个核细胞产生IFN_γ的抑制作用。生理浓度(10~(-7)M)氢化可的松对成人单个核细胞生成IFN_γ不产生明显影响,却使新生儿CBMC产生IFN_γ的水平呈下降趋势。将甘草甜素(100μg/ml)与新生儿CBMC预孵育12小时,可部分地逆转药理浓度氢化可的松对新生儿CBMC产生IFN_γ的抑制作用。本文的结果表明新生儿CBMC对氢化可的松抑制IFN_γ产生的效应比成人敏感,提示在儿科临床使用糖皮质激素时,更应警惕其造成的机体免疫功能下降及引起易感的问题。而在使用糖皮质激素前先使用一定量的甘草甜素,有可能会缓解由使用糖皮质激素而引起的免疫抑制效应。     

微量全血诱生γ-干扰素的酶免疫测定法

建立了一种微量全血诱生γ-干扰素(IFN-γ)的酶免疫测定法.将抗凝全血、脂多糖(LPS)、植物血凝素(PHA)、RPMI 1640培养基和HRP标记的抗IFN-γ单克隆抗体,同置于用抗IFN-γ多克隆抗体包被的反应板微孔中.此法IFN-γ最小检出量为0.5ng/ml,特异性、重复性均较好,适于临床应用.     

人扁桃腺和外周血IL—2的产生及消炎痛、PGE_2对IL—2产生的影响

本文在建立检测 IL—2活性方法的基础上,对人扁桃腺和外周血 IL—2的产生,及消炎痛和前列腺素 E_2(PGE_2)对 IL—2产生的影响作了初步研究,现将结果报导如下。取手术切除的人扁桃腺淋巴细胞(HTLC)及外周血单个核细胞(PBMC),用含5～10%小牛血清或5%自身血浆的1640液配成2×10~6/ml 细胞悬液,同时加 PHA200μg/ml,37℃5%CO_2培养48小时,     

肿瘤及肿瘤化疗病人外周血单个核细胞诱生γ—干扰素的比较

本文用高亲和力、高特异性的人重组γ-干扰素(rhIFN-γ)单克隆抗体A_3,建立的人γ-干扰素的免疫放射量度分析。检测范围为0.10～250U/ml.批内和批间变异系数分别为7.40%和17.3%,回收率为1±0.17,稀释试验符合线性关系(r=0.98),不与IFN-α,IFN-β交叉。用本法检测了29例正常人、34例肿瘤病人和19例肿瘤化疗病人外周血单个核细胞诱生IFN-γ的量。结果表明肿瘤病人和正常人外周血单个核细胞产生IFN-γ的能力无明显差别,化疗病人外周血单个核细胞产生IFN-γ能力显著低于正常人及未化疗的肿瘤病人(P<0.005),这可能是由于化疗杀伤了CD_4~+、CD_(?)~+细胞。     

黄芪苷对人外周血自然杀伤活性影响因素的研究

应用~(51)Cr释放法研究黄芪苷ASI和SK对人外周血NK活性的影响。结果表明,高浓度(250 μg/ml)有抑制作用,在适当浓度范围内(5μg/～0.05μg/ml)有较显著的促进作用(P<0.05),当与PHA、rIFN α或rIL-2联合作用时对NK活性有明显的增强作用。本文还证明了黄芪苷对地塞米松抑制NK活性有一定的恢复作用。本研究证实黄芪苷是增强机体免疫功能的一种有效成分。它是一种免疫调变剂,其作用强弱与机体的免疫水平有关。本研究也为临床使用黄芪制剂提供一些依据。     

人-人杂交瘤细胞产生的一种改进方法

本文描述一种高效的人体细胞与细胞融合方法,作者的记录改进了几种早期的PEG为介质的融合方法,为了提高细胞-细胞杂交产量和降低PEG对细胞的毒性,作者采取了几个步骤。该法使用了含有高分子量的低浓度的PFG混合物供融合细胞形成单细胞层。至适的因子包括提高杂交作用的植物血凝素(PWM或PHA)。在含有5～15％DMSO和5μg/ml     

葫芦素B对小鼠淋巴细胞活化、增殖和凋亡的影响

目的分析葫芦素B(CuB)对多克隆丝裂原激活的小鼠淋巴细胞活化、增殖、凋亡和γ-干扰素(IFN-γ)表达的影响,探讨其免疫调节作用的机制。方法经CuB处理的小鼠淋巴细胞,在刀豆蛋白(ConA,5μg/ml)或者佛波醇酯(PDB,10-7 mol/L)和离子霉素(Ion,0.5μg/ml)刺激后,细胞计数观察CuB对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析CD69和IFN-γ的表达及亚二倍体峰和线粒体膜电位的变化;免疫印迹分析Caspase 3的活化水平。结果细胞计数分析显示,CuB对小鼠淋巴细胞增殖的抑制呈剂量依赖关系。对细胞DNA含量分析表明,随着CuB浓度的增加,处于亚二倍体峰(即凋亡峰)的细胞数量增加。同样,经CuB处理后,早期活化标志CD69和IFN-γ在CD3+T细胞中的表达均受剂量依赖性抑制。JC-1染色结果表明,10μmol/L CuB能显著使小鼠淋巴细胞的线粒体膜电位发生下降(P<0.01)。免疫印迹分析表明,10μmol/L CuB处理24 h后,Caspase 3明显活化。结论 CuB对小鼠淋巴细胞的增殖和活化具有明显抑制作,可以诱导体外培养的小鼠淋巴细胞发生凋亡,具有潜在的抗炎免疫调节活性。     

肝再生增强因子对大鼠脾单个核细胞增殖及IL-2产生能力的影响

目的：通过体外实验探讨rALR对脾脏单个核细胞是否具有直接的免疫调控作用和作用特点。方法：以3H-TdR掺入法检测脾脏单个核细胞在不同处理情况下的增殖状况：①不同剂量的rALR与5μg/ml ConA同时加入；②5μg/ml ConA预刺激脾脏单个核细胞10和32小时后，再加入30μg/ml rALR；③30μg/ml rALR预处理脾脏单个核细胞至30小时，再加5μg/ml ConA刺激。以环孢霉素A作为阳性对照，以转空质粒的酵母表达上清提取物作为阴性对照。以放免法检测培养上清中IL-2分泌情况。结果：不同剂量的rALR与ConA同时加入时，能以剂量依赖方式明显抑制ConA对脾脏单个核细胞的促增殖作用。ConA预刺激脾脏单个核细胞10、32小时后，再给予30μg/ml rALR仍可明显抑制脾脏单个核细胞的增殖，但用30μg/ml rALR预处理脾脏单个核细胞至30小时，并不影响脾脏单个核细胞对ConA刺激的反应能力。ConA＋rALR（30μg/ml）组的IL-2分泌在24小时明显低于ConA组。结论：rALR对ConA活化的脾脏单个核细胞增殖有明显的抑制作用，而对未活化的脾脏单个核细胞则无明显影响，提示未经抗原激活的免疫细胞可能不表达ALR受体。     

白芍总甙对免疫系统的影响

白芍总甙(TGP)对羊红细胞免疫的小鼠脾淋巴细胞体外诱生溶血素(IgM)抗体和刀豆素A诱导小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应均呈现低浓度(<0.4μg/ml)促进和高浓度(>0.4μg/ml)抑制的双向调节作用。TGP(5mg/kg,ip)可明显促进辐照加输注受训胸腺细胞体内诱导抗原特异性Th细胞。以上结果提示,TGP对免疫系统的影响有明显的浓度与机能依赖性特征。