肝纤维化患者肝组织中胰岛素样生长因子结合蛋白的表达及意义

胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）可参与细胞的生长、分化和存活，并在许多生理和病理情况下发挥作用。目前一些研究显示IGFBP可能与纤维化的发生发展有关。Shaarawy等研究表明血清IGFBP3的水平可作为临床上定量评价肝硬化患者肝细胞合成能力的生物学标志。目前认为肝星状细胞（HSC）活化是肝纤维化发生的关键，转化生长因子β1（TGFβ1）是最重要的促纤维化细胞因子。     

结缔组织生长因子研究进展

结缔组织生长因子（Connective tissue growth factor，CTGF）是一种近年来新发现的细胞因子，被视为转化生长因子（transforming growth factorβ1，TGF—β1）的下游反应元件。研究表明，CTGF具有促有丝分裂、趋化细胞、诱导黏附、调节细胞增殖分化和促进细胞外基质（Extracellular matfic，ECM）合成等作用，并参与机体组织的创伤修复过程。本文就其最新研究进展作一综述。     

RON与转化生长因子-β1在大肠癌中的表达及意义

大肠癌是人类最常见恶性肿瘤之一，其发生发展是多因素参与作用的过程。研究表明，MET原癌基因家族成员RON具有调节细胞扩散、转移、微管形成，保护细胞免于凋亡的功能。而转化生长因子（TGF）-β1是一个多功能的多肽链，能促进血管生成和肿瘤转化发展。本研究采用免疫组化法检测大肠癌组织中RON及TGF-β。的表达，旨在研究RON和TGF-β1与大肠癌临床和病理特征的关系。     

胃癌组织中转化生长因子β受体Ⅱ、Smad4的表达及意义

转化生长因子β(TGF—β)是一种具有多种生物学活性的细胞因子，在调节细胞生长、分化及肿瘤形成等方面起着十分重要的作用。2000年6月至2001年12月，我们应用免疫组化技术检测了转化生长因子β受体Ⅱ（TGFβRⅡ)、Smad4蛋白在56例胃癌组织中的表达，以探讨其在胃癌发生、发展中的作用。     

细胞生长因子体外对大鼠肝干细胞的影响

目的 研究大鼠肝干细胞系WB-F344细胞在体外地生长分化与多种细胞因子的关系。方法 用^3H掺入法检测细胞因子对WB-F344细胞生长增殖作用。用western blot检测WB-F344细胞因子受体的表达。流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 发现肝细胞生长因子（HGF）80ng/mlcpm值为982.95，表皮生长因子（EGF）80ng/ml cpm值为906.32，胰岛素80ng/ml cpm值为968.67，成纤维细胞生长因子（FGFα）80ng/ml cpm值为863.98。促进WB-F344细胞的增殖；白细胞介素-6（IL-6）80ng/ml cpm值为368.67，肿瘤坏死因子α80ng/ml cpm值为372.90对WB-F344细胞的生长无明显影响；而转化生长因子（TGFβ）能够诱导WB-F344细胞凋亡（80ng/ml凋亡率为26.89%)并抑制其生长；western blot检测发现WB-F344细胞表面存在HGF，EGF，FGFα，TGFβ等细胞因子受体，提示细胞因子可能通过与其受体结合方式调控WB-F344细胞的生长分化，进一步用HGF，EGF，胰岛素等细胞因子组成并添加地塞米松的分化培养体系，在体外对WB-F344细胞进行定向诱导分化。发现WB-F344细胞在体外能够向肝实质细胞分化，此外HGF还具有刺激肝干细胞离散作用。结论 肝干细胞的生长分化受多种细胞因子的调控。细胞生长因子可能在严重肝损伤后肝干细胞的动员，增殖及分化调控中起重要作用。     

四种多肽生长因子对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3M生长的影响

目的 观察多肽生长因子中的转化生长因子β1（TGF－β1）、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维生长因子（bFGF）、角化生长因子（KGF）对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC－3M生长的影响。方法 体外培养前列腺癌细胞系PC－3M,分别加入TGF－β1、EGF、bFGF、KGF,每种生长因子采用1、5、10、50ng/ml4种浓度,采用Brdu掺入法测定细胞生长水平。结果 培养72h后,对照组PC－3M细胞的吸光度[A,旧称光密度（OD）]值为0．759,4种生长因子在不同浓度时对PC－3M细胞的生长皆有抑制作用,而且随浓度的增加抑制作用逐渐增强。4种因子在50ng/ml时,A值分别为0．400（TGF－β1）、0455（EGF）、0．532（bFGF)、0．491（KGF）,与对照组比较,差异均具有显著性。另外,当1ng/ml EGF分别与0．5ng/ml或5ng/ml TGF-β1同时加入培养基时,A值分别为0．522和0．299。结论 在体外培养条件下,TGF－β1、EGF、bFGF及KGF均依浓度效应关系抑制PC－3M细胞的生长,TGF－β1与EGF对PC－3M细胞生长的抑制作用不存在交互作用。     

转化生长因子β与血管钙化

血管壁上钙过量沉积称为血管钙化。动脉粥样硬化、慢性肾功能衰竭、糖尿病、高血压等疾病过程中均有血管钙化，其程度与疾病的严重性呈正相关，并随年龄的增长而逐渐恶化。目前研究表明，血管钙化是一个主动的细胞调控过程。许多因素都参与了这一过程的调节，但血管钙化的调控机理尚不清楚。转化生长因子β（Transforming growth factor β，TGF-β）是一组多功能的多肽类生长因子，可由多种细胞分泌，广泛存在身体各组织，通过细胞表面的受体信号转导途径发挥其广泛的生物学作用，参与许多重要的生理和病理过程。目前关于TGF—β与血管钙化关系的研究不多，TGF-β对血管钙化作用也存在争议。     

体外转化生长因子—β1与表皮生长因子对人前列腺上皮细胞增作用调节

目的：体外观转化生长因子－β1(TGF-β1）、表皮生长因子（EGF）对前列腺上皮细胞增殖的调节作用。方法：胶原酶消化组织，建立原代前列腺上皮细胞系，细胞培养于无血清培养基中。前列腺特异抗原（PSA）、Pan-Keratin等免疫组织化学染色鉴定培养细胞。给制细胞生长曲线和运用细胞增殖ELISA染色（BrdU)方法观察传代后细胞的生长状况及不同剂量的生长因子TGF-β1、EGF对细胞增殖的作用。结果：培养细胞具有典型的上皮细胞形态特征，PSA、Pan-Keratin染色阳性，细胞传代5－7次开始衰退。不同培养基条件可明显地影响细胞生长活性。EGF促进细胞增殖活性，TGF-β1则抑制增殖，其作用与剂量成正比。此外，EGF与TGF-β1相经减弱对方的作用。结论：体外培养的人前列腺上皮细胞增殖受生长因子TGF-β1和EGF调节，结果提示TGF-β1、EGF可能在前列腺增生（BPH）发病中起重要作用。     

血管内皮生长因子与转化生长因子β在人动脉粥样硬化病灶中的表达

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）与转化生长因子（TGF—β）在人动脉粥样硬化病灶中的表达。方法采用免疫组织化学SP法，检测VEGF与TGF—β在人正常冠状动脉及冠状动脉粥样硬化组织中的表达情况。结果VEGF与TGF—β在动脉粥样硬化组织的平滑肌细胞、巨噬细胞中有表达，并明显高于正常对照组。二者的表达呈正相关。结论VEGF与TGF—β在人动脉粥样硬化病灶中有表达，并与病变程度具有相关性。     

结缔组织生长因子——抗肝纤维化的新靶点

结缔组织生长因子(CTGF)与转化生长因子β(TGFβ)高表达于多种纤维化的组织器官中,被认为是促纤维化发生的主要细胞因子.CTGF作为TGFβ生物学作用的下游效应介质,它介导TGFβ促组织纤维化的效应,而对TGFβ抗炎、调节免疫等其它生物学效应无明显相关,因此可能成为抗肝纤维化的更好的靶点,在探索抗纤维化的道路上愈来愈引起大家的关注.     

转录因子Sp1在肝细胞癌中的表达

目的通过研究转录因子Sp1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及转化生长因子（TGF）B1对肝癌细胞中Sp1mRNA转录表达的影响,探讨Sp1在HCC中表达的意义及其在细胞凋亡中的作用。方法免疫组织化学方法对51例HCC组织与10例良性病变而切除的正常肝组织中转录因子Sp1进行蛋白检测;体外培养肝癌细胞株HepG2,施加外源性TGFβ1,逆转录一聚合酶链反应方法检测HepG2细胞中Sp1mRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞受到干预后的凋亡情况。结果Sp1蛋白在HCC组织中的表达率明显高于正常肝组织（P〈0．01）;施加外源性TGFβ1与对照组相比HepG2细胞Sp1mRNA的表达显著降低（P〈0．01）,且HepG2细胞凋亡率随着TGF[31浓度的增高而上升。结论Sp1蛋白在HCC中的过表达在肿瘤发生发展中起一定作用;TGFβ1诱导肝癌细胞凋亡,而Sp1基因的抑制在TGFβ1诱导肝癌细胞凋亡中可能起一定作用。     

肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术前后血清TGFβ1、VEGF、bFGF浓度变化

目的：观察肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术（TACE）前后血清转化生长因子（TGFβ1）、血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的浓度变化。方法：随机选择64例经病理确诊的肝细胞癌（HCC）患者,按照单纯随机抽样法均分为实验组和对照组,两组患者治疗药物相同,实验组患者行TACE术,对照组患者静脉注射化疗药物。用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法检测两组患者TACE术前3天和术后两周血清TGFβ1、VEGF、bFGF浓度。结果：治疗后两周患者血清TGFβ1、VEGF、bFGF浓度均升高;与治疗前比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：TACE的远期疗效欠佳,可能是其引起HCC患者血清TGFβ1、VEGF、bFGF过表达,导致肿瘤血管增生、侧枝循环形成以及机体的免疫反应被抑制。     

转化生长因子-1和基质金属蛋白酶抑制因子-1在肝硬化组织中的表达及其临床意义

目的了解转化生长因子-1（TGFβ1）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP1）在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法采用免疫组化法（S—P）。检测10例对照肝组织,57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1的表达。结果57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1蛋白表达的阳性率分别为90．38％、100％,而正常肝组织未见阳性表达,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGFβ1、TIMP1表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达。结论（1）肝硬化患者肝细胞中存在TGFβ1、TIMP1的表达,其表达强度与肝组织病理改变相关。提示TGFβ1与TIMP1的表达与肝纤维化活动状态密切相关,在肝纤维化的形成和发展中具有重要意义。（2）检测TGFβ1、TIMP1的表达可对肝硬化病变从分子水平进行评估,也可作为早期诊断及临床治疗和判断预后的分子病理学指标。     

TGF-β信号传导通路及其生物学功能

TGF—β信号传导通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子大家族,根据配体分子激活的不同的下游特异性通路可以分为TGF-β／Activin／Nodal和BMP／GDF／MIS两个亚家族通路。该信号通路的激活首先是TGF-βs配体分子与受体结合,从而使受体TpRs磷酸化,磷酸化的TpRI直接作用于底物Smads蛋白,活化的Smads就将配体与受体作用的信号从细胞膜、胞浆传递到细胞核内,再与其他核内因子协同激活或者抑制靶基因的转录。TGF-β信号通路就是通过调节细胞的生长、增殖、分化、迁移和凋亡等过程,在组织与器官的发生和形成（胚胎发育、骨骼等器官形成）、机体的免疫反应等生物过程发挥重要的功能。     

BFGF及TGF-β1与260例乙肝患者肝脏纤维化及炎症关系研究

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）及转化生长因子β1（TGF-β1）在慢性乙型肝炎肝纤维化不同进展阶段的表达和定位情况,探讨其与肝纤维化及炎症的关系。方法对260例乙肝患者肝组织BFGF、TGF-β1行免疫组化定量分析,并与肝脏纤维化分期及炎症分级进行统计学分析。结果肝组织BFGF、TGF-β1随肝脏纤维化加重而表达增加,各组与对照组比较及组间两两比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）;且二者与炎症比较,各组与对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）,但组间两两比较无差异（P〉0．05）;肝脏BFGF、TGF-β1之间呈正相关,r=0．895（P〈0．05）。结论肝组织BFGF、TGF-β1与肝纤维化程度呈正相关,与炎症无确切相关性,BFGF及TGF-β1可作为评价肝纤维化严重程度的重要指标。     

复方牛胎肝提取物抑制小鼠转化生长因子β1/Smad2信号通路发挥抗纤维化的作用机制

目的研究复方牛胎肝提取物通过抑制肝纤维化小鼠肝脏组织转化生长因子β1/Smad 2通路发挥抗纤维化作用的机制。方法健康雄性ICR小鼠90只,随机分为正常对照组(10只),模型组(20只),治疗组(60只)。治疗组按不同剂量分为大剂量治疗组(20只),中剂量治疗组(20只),小剂量治疗组(20只)。模型组及治疗组皮下注射30%四氯化碳溶液制备肝纤维化小鼠模型。治疗组造模8周后用复方牛胎肝提取物以大、中、小剂量灌胃治疗,1次/d,持续4周;正常组及模型组同期予等量生理盐水灌胃。肝脏组织经HE染色后光学显微镜观察病理变化;采用Real-Time PCR、免疫组织化学及Western蛋白印迹法分别检测正常组、模型组及治疗组TGFβ1、蠕虫果蝇母抗同源蛋白(Smad)2的mRNA及蛋白表达水平。各组间均数比较采用单因素方差分析。方差齐性采用Levene法检验,样本均数比较采用单因素方差分析;方差不齐时采用秩和检验。相关性检验采用Pearson直线相关分析。结果正常对照组TGFβ1、Smad 2 mRNA及蛋白表达量很低,模型组较高,治疗组较模型组表达下降,大剂量治疗组下降最为显著,其他2组随治疗剂量的减少表达逐渐增加;各组TGFβ1、Smad 2 mRNA表达水平差异具有统计学意义(χ2=27.877、26.688,P0.05)。直线相关性分析显示:各治疗组TGFβ1、Smad 2的mRNA表达水平与治疗剂量均呈负相关(r=-0.967、-0.956,P0.05)。结论复方牛胎肝提取物能改善小鼠肝脏纤维化程度,并呈剂量依赖性抑制TGFβ1、Smad 2蛋白在肝纤维化组织中的表达,这可能与其抗肝纤维化机制相关。     

罗格列酮阻止非酒精性脂肪性肝纤维化进展作用机制的研究

目的观察PPARγ靶向性激动剂罗格列酮对高脂、蛋氨酸-胆碱缺乏（MCD）饮食诱导的非酒精性脂肪性肝纤维化模型肝组织中转化生长因子（TGFβ1）及其下游效应因子结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，以明确其阻止脂肪性肝纤维化进展的作用及作用机制。方法采用MCD饮食8周建立C57BL6／J小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化模型，以蛋氨酸-胆碱充足饮食设立对照组，干预组小鼠采用MCD饮食加罗格列酮（每日50mg／kg）喂养。血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）采用全自动生化仪测定。HE染色、Masson染色观察肝脂肪变、炎症及纤维化程度。TGFβ1、CTGFmRNA及蛋白表达分别应用RT—PCR、免疫组织化学染色方法检测。结果模型组肝组织出现重度肝细胞脂肪变，伴有点、灶状肝细胞坏死及炎细胞浸润、汇管区纤维组织增生及窦周纤维化，ALT水平和TGFβ1、CTGFmRNA及蛋白表达均较对照组明显升高（P〈0．05和P值均〈0．01），罗格列酮干预组肝组织学改变较模型组明显减轻，ALT水平及TGFβ1、CTGF表达明显下降（P值均〈0．05）。结论在MCD饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化模型中，罗格列酮可通过靶向激活PPARγ下调TGFβ1及其下游效应因子CTGF表达，从而缓解或阻止疾病的进展。     

Role of insulin-like growth factor binding proteins in controlling IGF actions

The insulin-like growth factors (IGF) stimulate growth in multiple connective tissue cell types. The capacity of IGF-I and -II to access cell surface receptors is controlled by insulin-like growth factor binding proteins (IGFBPs). Connective tissue cells synthesize four of the IGFBPs (IGFBP-2 through -5). Synthesis is controlled by growth hormone and several other growth factors. In addition to regulating synthesis, other variables regulate the abundance of the IGFBPs including specific serine proteases that are produced for each form of IGFBP. Following cleavage, the IGFBPs have reduced affinity for IGF-I and -II, thus allowing release to receptors. Variables that regulate the amount of proteolysis have been shown to regulate IGF action. In addition to being proteolytically cleaved, three forms of IGFBPs (IGFBP-2, -3 and -5) can associate with extracellular matrix (ECM). In the case of IGFBP-5 binding to ECM, its affinity is lowered substantially allowing IGF to better equilibrate with the receptors. This event results in a potentiation of IGF-I action on fibroblasts and smooth muscle cells (SMC). In summary, IGFBPs are important molecules for regulating the bioavailability of IGF-I and -II to receptors. Understanding the variables that regulate their abundance may lead to a better understanding of the factors that regulate IGF action in skeletal tissues.     

溃疡性结肠炎患者结肠黏膜转化生长因子-β1及其受体表达与临床病理因素的相关性

背景：转化生长因子（TGF）-β1是溃疡性结肠炎（UC）的一种重要抗炎因子,目前TGF-β1及其Ⅰ型受体（TGFβRⅠ）在UC中表达状况的研究仍较少。目的：探讨TGF-β1、TGFβRⅠ在UC结肠黏膜中的表达及其与临床病理因素的关系。方法：以免疫组化SABC法检测60例UC患者结肠黏膜中TGF-β1、TGFβRⅠ的表达,设16例正常结肠组织作为对照。分析TGF-β1、TGFβRⅠ的表达与病变范围和组织病理学分级的关系。结果：TGF-β1、TGFβRⅠ在UC中的表达显著强于正常对照组（P〈0.05）,且活动期显著强于缓解期（P〈0.05）。TGF-β1、TGFβRⅠ与组织病理学分级均呈正相关（rs分别为0.421和0.553,P〈0.05）,与病变范围均不相关（rs分别为-0.031和-0.037,P〉0.05）。结论：UC结肠黏膜中TGF-β1和TGFβRⅠ表达增强,与UC的发病机制密切相关,有可能成为反映UC疾病活动度的生物学指标。     

膜联蛋白I在大鼠肝纤维化组织中的表达及意义

目的检测膜联蛋白Ⅰ（AnnexinⅠ）、转化生长因子（TGF）β1、α–平滑肌肌动蛋白（α–SMA）在大鼠肝纤维化组织中的表达,阐明AnnexinⅠ在肝纤维化中的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为健康对照组6只,肝纤维化模型组24只,采用二甲基亚硝胺（DMN）腹腔注射制备肝纤维化模型。肝纤维化模型组2、4、6、8周各6只大鼠门静脉采血检测血清ALT、AST,采用HE及Masson染色观察肝组织学变化,应用反转录聚合酶链反应（RT–PCR）检测肝组织AnnexinⅠ、TGFβ1、α–SMA mRNA表达,Western Blot法检测肝组织AnnexinⅠ表达。结果与对照组比较,肝纤维化模型组血清ALT、AST水平随损伤时间延长逐渐升高,4周达高峰,6周下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;正常肝组织有AnnexinⅠ、TGFβ1、αSMA低表达,2周即升高,4、6周较明显,8周下降,肝纤维化模型组与对照组在2、4、6、8周各时间点差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 AnnexinⅠ对肝脏可能有保护作用,为临床肝纤维化的防治提供新策略