凋亡相关基因在食管上皮癌变中的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子Fas、Fas配体（Fasl）、Fas相关的死亡结构蛋白（Fadd）和半胱氨酸蛋白酶（Caspase8）基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测60例食管癌组织，30例不典型增生组织及30例正常食管黏膜中Fas、Fasl、Fadd Caspase8的蛋白表达。应用原位杂交法检测60例食管癌组织，30例不典型增生组织及30例正常食管黏膜中Caspase8 mRNA的表达。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织，Fas蛋白表达率呈逐渐下降的趋势，Fasl蛋白表达率呈逐渐上升的趋势，两者在食管癌组织和正常组织之间有显著性差异（P〈0．05）。高中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌（P〈0．05）。从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织，Fedd和caspase8蛋白与Caspapac8 mRNA阳性表达率呈逐渐下降的趋势，在食管癌与正常黏膜组织之间有显著性差异（P〈0．01或P〈0.05）。Caspac8蛋白与mRNA高中分化鳞癌表达率高于低分化鳞癌（P〈0．05）。结论Fas与Fasl的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系，并与食管癌的分化和免疫逃避有关。Fadd与Caspase8基因表达异常在食管癌的发生发展中可能起着重要作用。     

食管癌组织MCM2的表达及意义

目的探讨MCM2作为细胞新增殖指标的可靠性及其对判断食管鳞癌预后的意义。方法采用免疫组化法检测134例食管鳞癌组织中MCM2及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达．分析它们的相关性及与食管鳞癌分化、分期和预后的关系。结果MCM2的表达强弱与食管癌的分化程度密切相关。分化越低,表达越明显（P〈0．01）;表达强弱与食管癌的临床分期无关。MCM2与PCNA呈显著正相关（r=0．701,P〈0．01）。COX回归模型显示肿瘤分期、MCM2为独立的预后指标。结论MCM2可作为判断食管鳞癌增殖速率和预后的独立指标,其高表达提示预后不良。     

脾酪氨酸激酶蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的观察脾酪氨酸激酶（Syk）蛋白在食管鳞癌组织中的表达,探讨其与食管鳞癌发生、发展的关系。方法用免疫组化法检测48例食管鳞癌患者的癌组织及其癌旁组织中的Syk蛋白表达;分析不同TNM分期及淋巴结转移情况下食管鳞癌组织中的Syk蛋白表达。结果食管鳞癌组织Syk蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织（χ^2=51.24,P〈0.05）;Syk蛋白表达与肿瘤TNM分期及淋巴结转移相关（P〈0.05）。结论食管鳞癌组织中Syk蛋白表达缺失与其发生及淋巴结转移倾向有关。     

食管鳞癌组织中MICA基因mRNA、蛋白表达及意义

目的探讨MHCⅠ类链相关蛋白A（MICA）与食管鳞癌分化程度及淋巴结转移的相关性。方法采用RT-PCR法检测43例食管鳞癌组织（鳞癌组）和相应癌旁正常组织（癌旁组）中MICA mRNA表达,免疫组化SP法检测两组MICA蛋白表达,Spearman相关关系检验分析其相关性：结果鳞癌组MICA mRNA的表达水平显著高于癌旁组（t=8．35,P〈0．05）。鳞癌组MICA蛋白表达与癌组织分化程度及淋巴结转移有相关性,与肿瘤大小、性别、年龄无相关性（P〉0．05）;MICA蛋白表达水平与MICA mRNA表达水平呈显著正相关（rs=0．905,P〈0．01）。结论MICA高表达与食管鳞癌组织分化程度密切相关,可能在食管鳞癌的发生发展、浸润转移过程中起重要作用。     

食管癌组织HPV16E6蛋白表达变化及其对CyclinD蛋白表达的影响

目的观察食管癌组织中HPVl6E6蛋白表达变化,探讨其对食管癌组织细胞周期蛋白（CyclinDl）表达的影响。方法用免疫组化sP法检测40例食管鳞癌患者肿瘤组织（鳞癌组）、癌旁正常食管组织（对照组）及10例食管不典型增生患者病变组织（增生组）中的HPVl6E6蛋白表达;采用WesternNot法检测HPVl6E6阳性及阴性食管鳞癌患者肿瘤组织中的CyclinDl蛋白表达。结果鳞癌组、增生组、对照组HPVl6E6蛋白阳性表达率分别为55％（22／40）、20％（2／10）、12．5％（5／40）,鳞癌组HPVl6E6蛋白阳性表达率高于增生组和对照组（P均〈0．05）。HPVl6E6蛋白阳性、阴性者癌组织中CyclinDl蛋白表达量分别为0．892±0．057、0．327±0．02;HPVl6E6蛋白表达阳性者肿瘤组织CyclinDl蛋白表达量高于HPVl6E6蛋白阴性者（P〈0．05）。结论食管癌组织中HPVl6E6蛋白表达升高,并与CyclinDl蛋白表达有关。     

食管鳞癌组织中FEZ1和PCNA蛋白的表达及意义

目的 检测FEZ1和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白在食管鳞癌组织中的表达,探讨其临床意义及相关性。方法采用免疫组化SP法检测100例食管鳞癌及100例正常食管组织中FEZ1和PCNA的表达情况。结果FEZ1蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率明显低于正常食管组织,其表达与浸润深度及淋巴结转移密切相关;PCNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率明显高于正常食管组织,其表达与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关。FEZ1和PCNA在食管鳞癌组织中的表达存在负相关。结论FEZ1的表达可能与食管鳞癌的发生有关,并且参于了其浸润、转移等过程。     

食管鳞癌组织β-catenin表达与淋巴管生成的关系

目的研究食管鳞癌组织中β-catenin表达与淋巴管生成的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测68例食管鳞癌标本及20例癌旁正常黏膜组织中β-catenin蛋白的表达状态,特异性淋巴管内皮标记物Podoplanin检测癌及正常黏膜组织的淋巴管密度(LVD),分析β-catenin异位表达和LVD与各临床病理指标的关系,并探讨二者之间的相关性。结果 1正常食管黏膜β-catenin均表达于细胞膜,而食管癌鳞组织中β-catenin主要呈细胞质/细胞核的异位表达,表达率为82.4%(56/68),且β-catenin的异位表达与淋巴结转移(χ2=7.275,P=0.007)和外膜浸润(χ2=6.236,P=0.013)明显相关。2食管鳞癌组织中的LVD显著高于正常组织(t=2.946,P=0.002),淋巴结转移组的LVD也明显高于无淋巴结转移组(t=7.521,P=0.001)。3β-catenin异位表达的食管鳞癌组织与β-catenin仅表达于细胞膜的LVD比较差异显著(t=2.926,P=0.008)。结论β-catenin异位表达可能是诱导食管癌淋巴管生成的重要原因。     

EphA2、hMSH2 mRNA在新疆维吾尔族和汉族食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨新疆维吾尔族和汉族食管鳞状细胞癌（鳞癌）基因EphA2和hMSH2 mRNA的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。方法采用RT-PCR技术检测EphA2和hMSH2 mRNA在30例新疆维吾尔族和30例汉族食管鳞癌组织及其对应的远隔无癌食管组织中的表达。结果 EphA2在食管癌组织和远隔无癌组织中的相对表达量分别为0.269±0.040和0.153±0.023,P=0.013;hMSH2分别为0.674±0.039和0.797±0.035,P=0.022。在汉族和维吾尔族食管鳞癌组织中EphA2的阳性表达率分别为50%和63.3%,P=0.297;hMSH2的阳性表达率分别为40%和50%,P=0.436。EphA2与hMSH2的表达之间呈负相关。结论 EphA2和hMSH2在两民族食管鳞癌中的表达无差异;EphA2高表达和hMSH2低表达可能共同促进食管鳞癌的发生发展。     

食管鳞癌中TGF-β1与临床病理因素关系意义的研究

目的　研究食管鳞癌中TGF β1的表达 ,及它在食管鳞癌细胞的增殖、侵袭、转移中的作用。方法　运用免疫组织化学方法研究TGF β1蛋白表达情况 ,显微镜下计数阳性细胞指数 (LI) ,并进行统计分析。结果　①正常食管黏膜阳性率为 2 0 % (2 / 10 ) ,食管鳞癌组织为 62 % (3 1/ 50 ) ,两者差异有显著性 (χ2 =5.93 94,P =0 .0 15) ;LI后者高于前者 (t=2 .717,P =0 .0 0 9) ,正常食管黏膜阳性 2例 ,均为弱阳性 (LI <2 5% )。②TGF β1在食管鳞癌组织中的表达与年龄、性别无明显关系 (P >0 .0 5) ,不同分化级别中两者表达亦无差异 (P >0 .0 5)。有淋巴结转移组TGF β1水平高于无淋巴结转移组 ,差异有显著性 ,P =0 .0 0 3。食管外膜浸润组TGF β1显著高于未受浸润组 ,P =0 .0 0 1,临床分期Ⅰ Ⅱ与Ⅲ Ⅳ期TGF β1表达水平差异有显著性 ,P =0 .0 0 0。结论　①食管鳞癌中存在TGF β1的高表达 ,表达水平与淋巴结转移、浸润侵袭、临床分期等有关 ,其检测有辅助诊断作用 ,且有利于判断肿瘤转移、浸润和后继治疗 ;②表达水平与组织分级无关 ,提示TGF β1在促进肿瘤局部侵袭转移中的重大作用 ,有助于理解临床上一些肿瘤生物学行为与组织分级不符的现象     

食管鳞癌组织中B7-H4、CD3表达变化及意义

目的探讨B7-H4、CD3在食管鳞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测30例食管鳞癌组织（食管癌组）和20例癌旁正常食管黏膜组织（对照组）中B7-H4、CD3蛋白表达,采用等级相关方法分析B7-H4和CD3表达的相关性。结果食管癌组B7-H4阳性表达率高于对照组,CD3阳性表达率低于对照组（P均〈0.05）。不同临床分期及淋巴结转移情况者食管癌组织中B7-H4表达差异有统计学意义（P均〈0.05）。食管癌组织中B7-H4与CD3蛋白的表达呈负相关关系（r=-0.467,P〈0.05）。结论食管鳞癌组织中B7-H4呈高表达,CD3呈低表达,二者与食管鳞癌的发生发展及侵袭转移有关。     

食管鳞癌组织中JWA、FAK表达变化及其与淋巴结转移的关系

目的观察食管鳞癌组织中JWA蛋白和黏着斑激酶（FAK）的表达变化,并探讨其与食管鳞癌淋巴结转移的关系。方法采用蛋白免疫印迹法检测37例食管鳞癌患者肿瘤组织及其癌旁组织中的JWA、FAK蛋白。结果食管鳞癌组织与癌旁组织中JWA蛋白的相对表达量分别为0.302±0.119、0.638±0.128,FAK分别为0.717±0.153、0.432±0.097,二者JWA、FAK蛋白表达量相比,P均〈0.05。有、无淋巴结转移者JWA蛋白相对表达量分别为0.163±0.37、0.383±0.06,FAK蛋白分别为0.832±0.134、0.658±0.109,P均〈0.05。JWA、FAK蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关（r=-0.736,P〈0.01）。结论食管鳞癌组织中JWA蛋白表达下调,FAK蛋白表达上调,且其表达变化与食管鳞癌淋巴结转移有关。JWA可能通过抑制FAK的表达,发挥抑制食管鳞癌淋巴结转移的作用。     

新疆哈萨克族食管鳞癌中微小RNA let-7的表达及病理生物学意义

目的探讨微小RNA（miRNA）let-7在食管鳞癌细胞及组织中的表达,及let-7与食管鳞癌临床病理的关系。方法在细胞水平,运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative PCR,qRT-PCR）检测let-7在正常食管鳞状上皮细胞Heepic及食管鳞癌细胞CaES-17、Eca109和KYSE-150中的表达差异;在组织水平,采用qRT-PCR技术检测let-7在15对哈萨克族食管鳞癌组织和癌旁正常组织中的表达,并分析其与食管鳞癌浸润、转移等临床病理的关系。结果 qRT-PCR结果显示,let-7在3个食管鳞癌细胞系中的表达明显低于在正常食管鳞状上皮细胞Heepic中的表达,let-7在食管鳞癌组织中的表达明显低于其在癌旁正常组织中的表达,其相对表达量比值为0.79±0.56,差异有统计学意义（P〈0.05）;let-7在不同性别、分化程度、大体分型、浸润深度及淋巴结转移之间的相对表达量比值均无统计学差异（P〉0.05）。结论 Let-7在正常食管鳞状上皮细胞和食管鳞癌细胞中均有表达,但在食管鳞癌细胞中呈低表达;let-7在食管鳞癌组织和正常食管鳞状上皮组织中均有表达,但在癌组织中呈显著低表达;哈萨克族食管鳞癌患者let-7低表达与其临床病理参数之间无显著相关性;let-7对哈萨克族食管鳞癌的发生起抑制作用,是食管鳞癌的潜在分子标记物。     

P16、Rb和PCNA在非小细胞肺癌的表达及临床意义

目的检测P16、Rb和PCNA在非小细胞肺癌中表达的改变,并探讨其临床意义。方法收集88例NSCLC手术切除标本存档蜡块,其中鳞癌63例,腺癌25例;Ⅰ～Ⅱ期48例,Ⅲ～Ⅳ期40例。取正常肺组织20例作对照。应用免疫组织化学SABC法检测全部标本中P16、Rb、PCNA的表达情况,并计数PCNA增殖指数（PI）。结果P16蛋白表达缺失率为51．1％（45／88）,Rh表达缺失率为21．6％（19／88）,P16与Rb表达呈负相关;Rb表达缺失表现为较高的细胞增殖活性,Rb（＋）与Rb（-）组PCNA增殖指数分别为30．8±17．1,58．1±19．2,组间差异有显著性（P〈0．01）,P16（＋）与P16（-）组间PCNA增殖指数分别为39．5±18．7,34．0±22．5,差异无显著性（P〉0．05）。结论p16基因改变在NSCLC发生中起重要作用,是NSCLC早期诊断的有用指标。Rh基因改变不是NSCLC发生发展的重要机制,P16与Rb表达呈负相关,P16和Rh作用于细胞周期和肿瘤抑制的单一途径,存在负反馈回路。Rb表达缺失表现为较高的细胞增殖活性,可能在预后估计上有一定意义。     

食管鳞癌组织中p34^cdc2的表达变化及意义

目的观察人食管鳞癌组织中细胞分裂周期蛋白p34^cdc2的表达,并探讨其临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化及蛋白免疫印迹法检测138例食管癌患者肿瘤组织和配对正常食管黏膜组织中的p34^cdc2蛋白。结果p34^cdc2在食管鳞癌组织的表达明显高于配对正常黏膜组织,P〈0.01。p34^cdc2表达与食管鳞癌临床分期、淋巴结转移有关（P均〈0.05）,与分化程度和肿瘤浸润深度等无关（P均〉0.05）。结论食管癌组织中p34^cdc2表达升高。p34^cdc2可促进食管癌的发生与发展。     

免疫球蛋白G在牙龈鳞状细胞癌中的表达

目的 研究免疫球蛋白G（IgG）在牙龈鳞状细胞癌中的表达,探讨IgG的表达水平与牙龈癌分化程度的相关性.方法 应用免疫组化和原位杂交法检测30例牙龈鳞状细胞癌和牙龈正常上皮组织中IgG的表达水平.结果 IgG在牙龈鳞状细胞癌组织中的表达水平高于牙龈正常鳞状上皮（P＜0.05）;IgG的表达强度与牙龈癌的分化程度呈负相关（r=-0.509,P＜0.01）.结论 IgG在牙龈鳞状细胞癌组织中表达升高;IgG表达与肿瘤的发生、发展密切相关.     

Expressions of PCNA, p53, p21WAF-1 and cell proliferation in fetal esophageal epithelia: Comparative study with adult esophagea lesions from subjects at high-incidence area for esophageal cancer in Henan, North China

AIM: To characterize the expression of p53, p21WAF-1 and proliferation-cell-nuclear-antigen (PCNA) in fetal esophageal epithelia and to determine the role of these genes in proliferation of fetal and adult esophageal epithelial cells.METHODS: Immunohistochemical avdin-biotin peroxidase complex (ABC) method was applied to 31 cases of fetal esophageal specimens and 194 cases of adult esophageal specimens to detect the expression of p53, p21WAF-1 and PCNA in fetal and adult esophageal epithelia.RESULTS: Both the PCNA positive immunostaining cell number and PCNA positive immunostaining rate in fetal esophageal epithelia (506±239) were significantly higher than those in adults,including normal epithelia (200±113) and epithelia with basal cell hyperplasia (BCH) (286±150) (P＜0.05, ttest). However,the number of PCNA positive immunostaining cells in adult esophageal dysplasia (719±389) and squamous cell carcinoma (SCC) (1261±545) was apparently higher than that in fetal esophageal epithelia (506±239) (P＜0.05, ttest). The positive immunostaining rate of P53 was 10 % (3/3L) in fetal esophageal epithelia, which was significantly lower than that in adult normal esophageal epithelia (50 %), adult epithelia with basal cell hyperplasia (62 %), dysplasia (73 %) and squamous cell carcinoma (86 %) (P＜0.05, Fisher′s exact test). No p21WAF-1positive immunostaining cells were observed in fetal esophageal epithelia. However, p21WAF-1 positive immunostaining cells were observed in adult esophagus with 39 % (11/28) in normal, 38% (14/37) in BCH, 27 % (3/11) in DYS and 14 % (1/7) in SCC.CONCLUSION: PCNA could act as an indicator accurately reflecting the high proliferation status of fetal esophageal epithelium. p53 may play an important role in growth and differentiation of fetal esophageal epithelium. p21WAF-1 may have no physiological function in development of fetal esophageal epithelium.     

哈萨克族食管鳞癌组织中CyclinD1、survivin的表达

目的研究Cyc linD1和survivin基因在哈萨克族食管鳞状上皮细胞癌组织中的表达。方法采用RT-PCR技术检测Cyc linD1和survivin基因在30例哈萨克族食管癌组织及30例非癌组织中的表达。结果食管癌组织、非典型增生组织、正常组织中Cyc linD1阳性表达率分别为63.33%、70.00%、15.00%,正常组织低于非典型增生组织及食管癌组织（P〈0.05）;survivin阳性表达率分别为93.33%、60.00%、15.00%,三者比较均有统计学差异（P〈0.05）。Cyc linD1、survivin mRNA表达与食管鳞状上皮细胞癌病理分化程度无相关关系,两者在食管鳞状细胞癌组织中表达无相关关系。结论在哈萨克族食管鳞状细胞癌形成过程中,Cyc linD1、survivin过表达是两个相对独立的分子事件;检测survivin可能更有助于新疆食管癌高发地区进行早期食管癌筛查。     

HGF在大肠癌中的表达及其与淋巴管生成及转移的关系

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）在大肠癌淋巴管生成及转移中的作用。方法应用免疫组织化学（SABC）法检测52例大肠癌、20例大肠息肉组织和20例正常对照组织中HGF的表达,并应用podoplanin标记淋巴管,检测各组织中的淋巴管密度,结合大肠癌患者的临床病理资料,分析其相关性。结果大肠癌组织中HGF被染成棕黄褐色,其阳性表达率和相对表达量均明显高于大肠息肉组织和正常大肠组织[75％、30％、15％;（0．36±0．07）、（0．24±0．06）、（O．23±0．06）,P〈0．01]。其微淋巴管密度（LMVD）也明显增多[（4．13±1．99）、（2．59±1．46）、（2．40±1．44）,P〈0．01]。大肠癌组织中HGF的相对表达量和LMVD两者间呈正相关。39例HGF表达阳性的大肠癌,其LMVD明显大于HGF蛋白表达阴性者[（4．25±2．13）w（2．73±1．54）,t=3．051,P=0．003]。HGF和LMVD的表达与大肠癌患者年龄、性别及肿瘤分化程度无关（P〉0．05）,但与Dukes分期（P=0．034,P=0．006）、淋巴管有无转移明显相关（P=0．015,P=0．001）。结论HGF与大肠癌的淋巴管生成及转移有一定的相关性,并可能通过直接或间接促进淋巴管增生,从而促进肿瘤细胞的淋巴转移。     

肾细胞癌组织中内皮抑素、MVD表达变化及意义

目的检测肾细胞癌（RCC）组织中内皮抑素的表达与肿瘤微血管密度（MVD）,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SABC法检测50例RCC组织及30例正常肾组织中的内皮抑素及CD34。结果正常肾脏组织中内皮抑素阳性表达率为36.7%,RCC组织中为76%,二者相比,P〈0.01。内皮抑素在Ⅲ~Ⅳ期RCC中的表达情况与Ⅰ~Ⅱ期RCC相比,P〈0.05。RCC组织中的MVD均值为（35.62±11.38）条/HP,明显高于正常肾脏组织的（18.71±9.53）条/HP,P〈0.01。Ⅲ~Ⅳ期RCC组织中的MVD为（41.29±10.65）条/HP,显著高于Ⅰ~Ⅱ期的（24.74±7.83）条/HP,P〈0.01。RCC组织中的Endostatin与MVD有相关性（P〈0.05）。结论 RCC组织中内皮抑素表达上调,MVD升高。二者可作为评估RCC恶性程度、转移及预后的重要指标。