重组人骨形态发生蛋白2-肝素-人工骨复合材料的骨诱导活性

背景：已有将重组人骨形态发生蛋白2应用于骨再生及修复的报道,但由于其在生物体内半衰期短而导致诱导骨形成的能力受到限制。 目的：制备具有较好缓释效果的重组人骨形态发生蛋白2-肝素-人工骨复合材料,并检测其缓释性能及骨诱导活性。 方法：通过高效液相色谱法检测重组人骨形态发生蛋白2-肝素复合物对于酶解的保护作用。将重组人骨形态发生蛋白2与肝素溶液混匀后复合于人工骨材料表面,ELISA方法检测其体外释药性质,茜素红染色法检测其诱导成骨细胞的能力,应用小鼠体内实验评价其异位骨诱导能力。 结果与结论：成功制备了具有良好缓释效果的重组人骨形态发生蛋白2-肝素-人工骨复合材料,具有较强的诱导骨钙蛋白及异位骨形成能力。     

自制人骨形态发生蛋白2复合骨修复材料诱导骨再生***

摘要 背景：骨形态发生蛋白是目前发现的一类惟一可独立诱导骨再生的细胞因子,临床应用前景广阔。但它们价格昂贵,限制了在中国的应用。 目的：探讨自主生产的重组人骨形态发生蛋白2的骨诱导活性及对骨缺损的修复作用。 方法：通过电泳及质谱的方法检测其复性后重组人骨形态发生蛋白2的纯度,通过C2C12细胞在重组人骨形态发生蛋白2诱导下向成骨细胞分化检测其骨诱导活性。将重组人骨形态发生蛋白2与以动物骨为原料加工制成的新型骨修复材料复合,植入新西兰兔桡骨缺损实验模型观察其对骨缺损的修复作用。 结果与结论：自主生产的重组人骨形态发生蛋白2纯度≥95%,能明显诱导C2C12细胞向成骨细胞分化,分化早期大量表达碱性磷酸酶,分化末期形成大量的矿化小节,诱骨活性良好。在兔桡骨修复试验中,X射线影像学及苏木精-伊红染色组织学检查结果表明,重组人骨形态发生蛋白2复合材料组在2个月时形成大量骨痂,4~6个月时载体与自体骨融合,材料大量降解,修复效果良好;单纯骨填充材料组4~6个月时只有少量新生骨桥与自体骨连接,降解量极少;空白对照组损伤部位为纤维化组织所填充。结果提示自主生产的重组人骨形态发生蛋白2促进骨修复作用明显,适合应用于临床。 关键词：自主生产;人骨形态发生蛋白;生物型骨填充材料;桡骨缺损;骨修复 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.21.002     

构建壳聚糖-磷酸钙/重组人骨形态发生蛋白2复合材料及在体内的异位成骨

背景：研究表明，重组人骨形态发生蛋白2/壳聚糖-磷酸钙支架复合体具有良好的细胞相容性，且材料内部的多孔结构和孔径也能满足于细胞长入和骨的再生，但要应用于临床还需证明能否体内成骨。 目的：构建壳聚糖-磷酸钙与重组人骨形态发生蛋白2的复合材料，并观察其植入兔肌袋模型后的异位成骨能力。 设计、时间及地点：观察性实验，于2007-06/08在暨南大学附属第一医院中心实验室、外科实验室及暨南大学理工学院材料科学与工程系实验室完成。 材料：将固相的磷酸三钙粉末及液相的壳聚糖溶液在室温下混合，制备壳聚糖-磷酸钙支架。再将壳聚糖-磷酸钙支架放入重组人骨形态发生蛋白2溶液中浸泡，真空抽吸后冷冻干燥，制备壳聚糖-磷酸钙材料/重组人骨形态发生蛋白2复合材料。 方法：测量改良后支架的孔隙率及抗压强度, 扫描电镜观察其超微结构；20只新西兰大白兔局部麻醉后在左后肢大腿外侧切口，暴露大腿肌肉，分离形成肌袋。随机分为3组，空白对照组5只不植入材料，单纯壳聚糖-磷酸钙材料组5只、壳聚糖-磷酸钙/重组人骨形态发生蛋白2复合材料组10只分别植入壳聚糖-磷酸钙材料、壳聚糖-磷酸钙/重组人骨形态发生蛋白2复合材料。 主要观察指标：在植入后4周，通过大体观察、X射线摄片、组织学检测其体内异位成骨能力及生物反应性。 结果：制备的复合重组人骨形态发生蛋白2后的壳聚糖-磷酸钙支架的孔隙率为87%，压缩弹性模量为20 MPa。扫描电镜结果显示支架材料内部为多孔结构，孔径超过100 μm。空白对照组苏木精-伊红染色可见肌肉纤维间少量淋巴细胞浸润。单纯壳聚糖-磷酸钙材料组大体观察可见材料周围有薄层的结缔样组织包裹，材料与周围肌肉连接松散，苏木精-伊红染色可见材料植入区为圆形空腔。壳聚糖-磷酸钙/重组人骨形态发生蛋白2复合材料组大体观察可见材料周围有薄层的结缔样组织包裹，材料中间可见空洞，有降解现象及少量淡红色纤维样结构长入，X射线示左大腿内材料高密度影无明显改变，苏木精-伊红染色可见少量血管样组织长入，Masson三色染色可见编制骨岛中有胶原纤维形成。 结论：壳聚糖-磷酸钙/重组人骨形态发生蛋白2复合材料具有良好的孔隙率、抗压强度及超微三维结构，复合材料在兔体内具有异位成骨能力。     

重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶植入联合髓芯减压治疗

背景：大量实验证明骨形态发生蛋白2不但对骨组织来源的细胞有刺激分化作用，还可诱导非骨组织来源的细胞株分化为成骨细胞。但是，许多学者在研究中发现，将骨形态发生蛋白直接用于骨的修复效果不理想。 目的：将重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶复合物植入髓芯减压后的兔激素性股骨头坏死区，观察股骨头坏死区域的新骨形成情况. 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005-01/2007-12在武警医学院完成。 材料：在纤维蛋白胶的抑肽酶溶液内加入重组人骨形态发生蛋白2形成胶冻状的生物材料，最终聚合材料中重组人骨形态发生蛋白2的质量浓度1 mg/L。 方法：制造激素型股骨头缺血性坏死的动物模型，将实验动物分为3组全部进行股骨头钻孔减压，在重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白组和单纯重组人骨形态发生蛋白2组孔道内植入相应材料，髄芯减压组钻孔后不植入材料。 主要观察指标：MRI检查股骨头软骨及软骨下骨质信号改变，光镜下观察新骨生长情况，原子吸收分光光度仪测定钙含量。 结果：MRI观察显示，植入重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶8周后原骨缺损孔道消失，被新生骨所取代。单纯植入重组人骨形态发生蛋白2可见少量新生骨，髄芯减压组仍为纤维组织。组织形态学观察可见重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶组术后8周原骨缺损区基本消失，有大量相对较成熟的骨小梁及板状骨并存。单纯重组人骨形态发生蛋白2组骨缺损区明显缩小，周边亦有少量骨小梁存在，新生毛细血管少见，缺损区有大量纤维组织填充。髄芯减压组术后8周缺损区缩小，周边有少量新骨形成，中心部仍为纤维组织。重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶组钙含量显著高于另外2组(P < 0.01)。 结论：骨形态发生蛋白在缺血坏死的股骨头内可诱导新骨形成，与纤维蛋白胶复合后，骨形态发生蛋白诱导新骨形成的质量和数量均明显增强。     

重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球的制备及体外细胞毒性*☆

背景：通过各种微球负载骨生长因子使骨形态发生蛋白达到缓释效果逐渐成为研究热点,但关于载药壳聚糖纳米微球的生物相容性特别是细胞毒性的报道较少。 目的：对重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球进行细胞毒性检测,评估应用壳聚糖纳米微球作为重组人骨形态发生蛋白2缓释载体的生物安全性。 方法：通过离子交联法制备空白壳聚糖纳米微球,应用透视电镜观察微球的形态,激光粒径分析其粒径分布;通过重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球体外细胞毒性试验评估微球的生物安全性。 结果与结论：离子交联法制备的壳聚糖微球,球形规整,分散均匀,微球平均粒径为230 nm,分布较集中。载药及空白微球的反应分级为0或1级,均为合格。提示,离子交联法制备可成功制备出负载重组人骨形态发生蛋2的纳米微球,且微球细胞毒性检测合格,为进一步的骨组织工程研究提供理论实验基础。     

活性胶原基纳米骨修复下颌骨缺损的组织学检测

背景：单纯胶原基纳米骨在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力。 目的：通过动物实验进行组织学光镜及扫描电镜检测,观察复合重组人骨形态发生蛋白2的活性胶原基纳米骨材料促进下颌骨骨缺损的愈合能力。 设计、时间及地点：同体对照动物实验,于2008-08/12在南方医科大学动物实验中心、病理实验室以及电镜中心完成。 材料：采用浸泡抽吸法将重组人骨形态发生蛋白2与胶原基纳米骨相复合,形成复合重组人骨形态发生蛋白2的活性胶原基纳米骨材料。 方法：建立兔下颌骨双侧缺损模型,随机选取一侧缺损应用复合重组人骨形态发生蛋白2的活性胶原基纳米骨修复,作为活性材料组;另一侧缺损应用单纯胶原基纳米骨修复,作为单纯材料组。 主要观察指标：术后5,10,20周,获取整块下颌骨标本作组织学光镜苏木精-伊红染色和Masson染色及扫描电镜超微结构检测,观察骨缺损愈合效果和新骨形成情况。 结果：两组骨缺损区均愈合良好,未见移植骨周围炎症发生。①单纯材料组：术后5周时与宿主骨结合不紧密,有大量纤维结缔组织;10周时出现疏松的骨样组织,材料残留较多,降解缓慢;20周时骨样组织增多明显,但缺损中心区骨组织仍较少且不成熟,材料部分降解。②活性材料组：成骨过程较早,术后5周时与宿主骨结合良好,有明显骨样组织长入;10周时骨样组织显著增多且更加成熟,材料部分降解;20周时新骨组织与宿主骨完全融合,缺损中心区为致密骨样组织充满,材料降解充分,只有少量残留。 结论：胶原基纳米骨具有良好的骨传导作用和生物相容性,可作为理想的修复下颌骨缺损的人工材料。复合重组人骨形态发生蛋白2后具有一定的骨诱导作用,愈合加快,成骨可靠。     

纤维蛋白胶复合重组人骨形态发生蛋白2微球对犬骨髓基质细胞增殖与分化的影响

背景：前面的实验己经证实PLGA微球/纤维蛋白胶能作为rhBMP-2的良好可注射性缓释载体，但其对犬骨髓基质细胞增殖及分化的影响尚不明确。 目的:制备携载重组人骨形态发生蛋白2的聚乳酸与聚乙醇酸缓释微球并将其与纤维蛋白胶复合，构建具有自固化能力的可注射性骨形态发生蛋白缓释体系, 并观察其对犬骨髓基质细胞( marrow stromal cell, MSC) 增殖及分化的影响。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2005-01/2010-9在解放军总医院骨科研究所、北京世纪坛医院完成。 材料：聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(聚乳酸/聚乙醇酸75/25，MW=3 000，黏度0.025 L/g)由山东省医疗器械研究所提供，重组人骨形态发生蛋白2由解放军军事医学科学院提供，纤维蛋白胶由杭州普济公司提供。 方法：复乳-溶剂挥发法制备重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸-聚乙醇酸共聚物载药微球，然后将微球与纤维蛋白胶复合制备出重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸-聚乙醇酸共聚物/纤维蛋白胶复合材料，采用细胞培养及组织化学等方法观察微球对犬MSC 的增殖、分化及I型胶原表达的影响。 主要观察指标： MSCs形态学观察、材料对MSCs增殖、ALP活性、I型胶原表达的影响 结果：纤维蛋白胶复合重组人骨形态发生蛋白2微球对骨髓基质细胞的增殖无明显影响,但对细胞的分化功能有明显的促进作用。 结论：纤维蛋白胶复合重组人骨形态发生蛋白2微球能够提高骨髓基质细胞的体外成骨能力，可作为骨形态发生蛋白的良好载体。     

Brg1调控重组人骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化*

背景：Brg1是依赖ATP的染色质改变复合物的核心催化亚基,该亚基在基因的转录调控、复制、重组,骨骼肌的分化、抑制肿瘤的发生等活动中起着重要的作用。 目的：探索Brg1基因在骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化过程中的调控机制。 方法：采用胶原酶消化法进行小鼠颅骨成骨细胞的原代培养;分别用0,50,200 μg/L的重组人骨形态发生蛋白2诱导原代培养的成骨细胞的分化,摸索骨形态发生蛋白2的最佳作用剂量;实时荧光定量PCR和Western blot进行骨形态发生蛋白2对Brg1的作用时间的动力学分析;实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测敲除Brg1对骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化的影响;构建Dlx5腺病毒重组表达载体,实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测Brg1在骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化过程中对Dlx5的调控作用。 结果与结论：用自行合成的重组人骨形态发生蛋白2可诱导原代培养小鼠成骨细胞分化,200 μg/L剂量有着较好的诱导分化效果;重组人骨形态发生蛋白2可诱导Brg1基因转录水平和翻译水平表达水平上调;敲除Brg1可抑制重组人骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化;Brg1能够调控Dlx5的表达水平。说明Brg1通过调控Dlx5的表达水平调控重组人骨形态发生蛋白2诱导的小鼠成骨细胞的分化。 2     

骨形态发生蛋白2和音猬因子体外诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化

背景：研究表明，骨形态发生蛋白2和音猬因子联合诱导干细胞的定向分化存在理论上的可能性，但目前联合诱导间充质干细胞的方向纷繁复杂，且众说纷纭。 目的：观察骨形态发生蛋白2和音猬因子在体外联合和单独应用促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的能力。 设计、时间及地点：随机分组设计，对比观察，于2008-12在江苏大学临床医学院实验室完成。 材料：6周龄SPF级SD大鼠10只，体质量140~160 g，雌雄不拘，用于间充质干细胞的获得、培养和传代。重组人骨形态发生蛋白2、音猬因子为PeproTech公司产品。 方法：将SD大鼠的间充质干细胞分离培养后分为4组：重组人骨形态发生蛋白2组：加入100 mg/L重组人骨形态发生蛋白2；音猬因子组：加入20 μg/L音猬因子；联合组：100 mg/L重组人骨形态发生蛋白2联合20 μg/L音猬因子作用于SD大鼠间充质干细胞；对照组：不加任何干预措施。 主要观察指标：倒置相差显微镜观察细胞形态学的变化；MTT法检测细胞培养第3，6，9，12天细胞增殖数和细胞碱性磷酸酶活性；以及成骨细胞表型的检测和Ⅰ型胶原蛋白免疫印迹分析，以比较各组诱导成骨能力的差异。 结果：①间充质干细胞培养24 h后部分贴壁，贴壁细胞呈圆形或椭圆形，第7天左右细胞铺满瓶底，多为梭形。条件培养基培养3 d后，联合组细胞由长梭形转变为多角形。随后重组人骨形态发生蛋白2组细胞发生成骨样改变，音猬因子组细胞未见明显形态学改变。②相同时间点联合组、重组人骨形态发生蛋白2组、音猬因子组细胞吸光度均高于对照组(P < 0.05)。联合组和重组人骨形态发生蛋白2组在各时间点碱性磷酸酶表达量均高于音猬因子组和对照组(P < 0.05)。③间充质干细胞经诱导培养7 d后，碱性磷酸酶细胞化学染色联合组和重组人骨形态发生蛋白2组呈阳性，联合组可见胞质中棕黄色颗粒，音猬因子组和对照组阴性。诱导培养14 d后，Ⅰ型胶原免疫荧光染色音猬因子组和对照组均为阴性，联合组和重组人骨形态发生蛋白2组为阳性，但联合组细胞数量明显增多，细胞间融合较好，重组人骨形态发生蛋白2组细胞融合欠佳。矿化沉积茜素红染色音猬因子组和对照组仍为阴性，联合组和重组人骨形态发生蛋白2组为阳性，联合组细胞间可见红色的钙结节。④蛋白免疫印迹分析显示，与对照组相比，联合组和重组人骨形态发生蛋白2组Ⅰ型胶原蛋白表达增加，联合组尤其明显，音猬因子组与之接近。 结论：骨形态发生蛋白2和音猬因子在体外能明显促进间充质干细胞向成骨细胞分化并且具有明显的协同相关性。     

重组人骨形态发生蛋白2在下颌骨牵引成骨过程中的作用

背景：重组人骨形态发生蛋白2能诱导未分化的间充质细胞不可逆地分化形成软骨和骨,从而导致新骨的形成。 目的：观察在下颌骨牵引成骨过程中应用基因重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)对成骨的影响。 方法：选用日本成年大耳白兔45只,随机分为3组,建立下颌骨牵引模型,分别将空白胶原、1.5 mg和3.0 mg重组人骨形态发生蛋白2胶原复合物植入下颌骨切开处,固定、牵引0.4 mm/次,2次/d,共计5 d,总延长下颌骨4 mm。在稳定期第1,3,7,14,28天分别处死各组动物,取牵引区新生骨痂行放射学及组织学检测。 结果与结论：重组人骨形态发生蛋白2组中的新生骨组织较空白胶原对照组中多且成熟,3.0 mg重组人骨形态发生蛋白2组较1.5 mg重组人骨形态发生蛋白2组新骨形成多且成熟。结果表明,重组人骨形态发生蛋白2能促进兔下颌骨牵引成骨,并且具有浓度依赖性。     

纳米人工骨混合自体骨治疗骨肿瘤及骨病43例

背景：纳米人工骨是一种新型的骨移植材料,具有良好生物相容性等优势,但其治疗骨肿瘤及骨病的临床效果尚有待进一步研究。 目的：回顾性分析纳米人工骨混合自体骨治疗骨肿瘤及骨病的临床效果。 方法：对43例骨肿瘤及骨病患者病灶进行彻底刮除,选用大小不一的纳米人工骨条或颗粒混合人工骨充填,并用尽量将腔隙填满压实。病理性骨折的4例患者行内固定,其余患者未行内固定,依病情选择适当的支具。观察植骨后患者全身状态及植骨局部情况,术后不同时间X射线片观察植骨局部情况。 结果与结论：43例患者均获随访,最短为6个月,最长为24个月。1例患者切口延迟愈合。余患者全身状态及切口愈合均良好。术后1~3个月纳米人工骨混合人工骨植入区与缺损周围的骨组织之间界限模糊,但局部仍可见密度高影。约12个月植入骨区与周围骨组织密度相似。结果证实应用纳米人工骨混合人工骨治疗骨肿瘤及骨病效果满意,且并发症较少,其为一种比较理想的移植骨替代物,且具有良好应用前景。 关键词：纳米人工骨;自体骨;骨肿瘤;骨病;骨组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.027     

辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖分化的影响**

背景：辛伐他汀对正常大鼠骨代谢及骨髓基质干细胞增殖分化影响的报道目前不多。 目的：观察辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖、分化的影响,及其在此过程中Smad1,2,7 mRNA表达水平的变化。 方法：16只6周龄雌性SD大鼠按体质量随机均分成2组,对照组每天灌胃蒸馏水,实验组灌胃辛伐他汀20 mg/(kg•d),持续9周。于最后一次灌胃的第2天取左侧股骨行骨密度和骨组织形态计量学测定;取右侧股骨和胫骨骨髓基质细胞向成骨方向诱导培养,并采用CCK-8法检测定向成骨分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第16,28天检测碱性磷酸酶比活性、碱性磷酸酶染色阳性细胞比;细胞培养第21天,提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测Smad1,2,7的mRNA表达。 结果与结论：辛伐他汀体内给药干预9周后,大鼠骨量和骨密度无显著变化,体外培养骨髓基质干细胞所有检测基因mRNA水平、细胞增殖能力、细胞外基质矿化能力、碱性磷酸酶比活性、碱性磷酸酶染色阳性细胞比两组间差异均无显著性意义 (P > 0.05)。结果显示20 mg/(kg•d)辛伐他汀体内给药9周对大鼠骨量及骨髓基质干细胞的增殖和分化及Smad1,2,7的表达无显著作用。     

骨髓基质干细胞与骨缺损的修复

背景：骨髓基质干细胞来源广泛,分离方便,扩增迅速,具有多向分化潜能,适合自体移植的特点,同时是骨组织工程中合适的种子细胞。 目的：总结分析采用骨髓基质干细胞作为种子细胞,并利用转基因或其复合支架修复骨缺损所具有的优势。 方法：检索1990/2009 西文生物医学期刊文献数据及CNKI数据库有关骨髓基质干细胞分离、培养,在骨缺损方面的应用,骨组织工程方面的文献,英文检索词为“Bone marrow stem cells,Repairing,Bone defect”,中文检索词为“骨髓基质干细胞,修复,骨缺损”。排除重复性研究,保留28篇进一步归纳总结。 结果与结论：文章从骨髓基质干细胞作为种子细胞的优势,骨髓基质干细胞的分离和培养,骨髓基质干细胞的成骨诱导及骨髓基质干细胞修复骨缺损等方面进行了总结。利用骨髓基质干细胞作为种子细胞,与适当的支架材料结合,或用骨髓基质干细胞作为靶细胞,导入外源目的基因诱导成骨的基因治疗来修复骨缺损的方法,给骨缺损的治疗带来光明的前景。但同时也存在骨髓基质干细胞存化,骨髓基质干细胞的增殖、分化合适的条件,哪些因子能有效促进新骨形成,载体材料及体内植入方式,以及如何将骨组织工程与基因治疗的方法结合起来等问题需要进一步的研究。     

骨形态发生蛋白4和骨形态发生蛋白4/7基因转染对骨髓基质干细胞成骨活性差异的比较**☆

背景：有文献报道骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)异源二聚体比同源二聚体的活性高，目前国内外尚无BMP-4/7异源二聚体与BMP-4同源二聚体间诱导成骨活性比较的报道。 目的：观察不同基因BMP-4、BMP-4/7对骨髓基质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)成骨活性的差异，探讨融合基因BMP-4/7的生物学活性。 方法：经脂质体转染分离培养的兔BMSCs，G418筛选出稳定表达株，利用RT-PCR法证明目的基因在BMSCs中的表达情况；以BMP-4和BMP4/7融合基因修饰的AAV载体，转染兔BMSCs，MTT法检测不同基因转染细胞的增殖能力；以BMP-4单基因和BMP-4/7融合基因修饰的AAV载体转染兔BMSCs 7 d后，测定两组细胞内碱性磷酸酶及骨钙素水平，观察成骨活性的变化。 结果与结论：实验成功构建高滴度的分别携带BMP-4单基因、BMP-4/7融合基因的重组腺相关病毒载体AAV-BMP-4、AAV-BMP-4/7；RT-PCR结果证明目的基因能够在BMSCs中得到稳定表达。AAV-BMP-4及AAV-BMP-4/7载体转染效率分别为68.20%、72.18%；转染BMSCs后，细胞增殖能力均明显提高，BMP-4/7融合基因的细胞增殖能力活性高于BMP-4单基因。以BMP-4和BMP-4/7融合基因修饰的AAV转染细胞7 d后，细胞内碱性磷酸酶活性明显上调，骨钙素水平升高，成骨活性均增强；两种基因比较，BMP-4/7融合基因成骨活性强于BMP-4单基因(P < 0.01)。提示BMP-4、BMP-4/7修饰的AAV载体转染效率高，对BMSCs均有成骨活性，其中BMP-4/7融合基因成骨活性强于BMP-4单基因。     

骨结构的重建理念

背景：在骨折治疗原则上,主要体现在从生物学和机械力学两方面进行骨结构重建,把生物固定与机械固定,髓内固定与髓外固定相结合。 目的：介绍骨折治疗、骨结构重建理念的发展历程和研究进展。 方法：应用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI：2006-01/2011-05)、Pubmed数据库和Medline database(2006-01/2011-05)数据库有关骨结构的重建理念的文章,检索词分别为“骨结构,重建,理念”和“bone structure,rebuild,principle”,语言分别设定为中文和英文。 结果与结论：共收集30篇有关骨结构的重建理念的文章,排除重复或类似的同一研究,14篇符合综述要求。骨折的治疗理念已经由机械力学固定体系逐渐转向生物学固定体系。骨折治疗必须着重于寻求骨折稳固和软组织完整之间的一种平衡,植入物和器械设计明显改善。近年来,又出现了数字化虚拟人体技术、生物力学有限元理论、创伤控制论、骨质疏松的药理学研究、用组织工程学理论和技术修复创伤缺损等。总的来说,骨结构重建的理念就是患者为中心,在宏观与微观的层次上选择骨折治疗最合理的方法,引导和促进骨的愈合、功能恢复。     

托吡酯对癫癎患者骨代谢的影响

目的探讨长期服用托吡酯对成人癫癎患者骨代谢的影响及其可能机制。方法将长期服用抗癫癎药治疗的成人癫癎患者,分为单独服用非肝酶诱导剂托吡酯组、单独服用肝酶诱导剂(卡马西平、苯巴比妥等抗癫癎药物)组,服药疗程均>6个月。并设健康成人为对照组;对各组进行骨密度测定,检测骨形成的特异性指标(骨碱性磷酸酶),骨吸收的特异性指标(尿中脱氧吡啶啉),同时检测血钙、血磷含量及24小时尿钙尿磷的排泄量及血中甲状旁腺激素含量。结果肝酶诱导剂组及托吡脂组均表现不同程度的骨代谢异常,生化指标改变早于骨密度改变。托吡酯主要通过增加尿钙尿磷的排泄量,促进机体钙的丢失,其次还通过减少骨质形成,综合影响了骨质代谢。结论托吡酯与肝酶诱导剂类抗癫癎药物相比,导致骨量减少较轻,但同样影响骨代谢。早期加强钙的摄入,可以预防骨质疏松的发生。     

双相陶瓷样生物骨修复骨缺损

背景：已有研究表明课题组制备的双相陶瓷样生物骨符合骨组织工程支架或直接作为植骨材料的要求。实验将材料植入兔桡骨节段性骨缺损，以进一步了解双相陶瓷样生物骨修复骨缺损的能力。 目的：用双相陶瓷样生物骨来修复兔桡骨骨缺损，评价双相陶瓷样生物骨的成骨作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2008-03/09在昆明医学院动物实验中心完成。 材料：将猪椎骨煮沸12 h，经系列乙醇脱水后于800 ℃条件下煅烧6 h后制得陶瓷化骨，完全去除有机成分，再将陶瓷化骨与适当浓度的焦磷酸钠溶液复合后于800 ℃煅烧1 h，经缓慢冷却后制得双相陶瓷样生物骨。 方法：成年日本大耳白兔36只随机分为3组：双相陶瓷样生物骨组、自体髂骨组、空白对照组，每组12只。在兔双侧桡骨造成1.0 cm骨缺损后分别植入双相陶瓷样生物骨材料、自体髂骨，空白对照组不做任何处理直接缝合切口。 主要观察指标：术后4，8，12，24周取出双侧尺、桡骨后摄X射线片，了解移植物的X射线变化情况。制备组织切片，光镜下观察移植物的组织形态特征及新骨形成情况。 结果：X射线片：双相陶瓷样生物骨组在术后4周可见材料密度较宿主骨高，与宿主骨分界清楚，8周后材料与宿主骨分界模糊，12周后大部分材料呈高密度影，24周后材料仍有部分高密度影。自体髂骨组在术后4周可见髂骨与宿主骨分界模糊，24周后植骨部位密度与宿主骨一致。组织学形态观察：双相陶瓷样生物骨组发现有新骨贴附材料生长，材料随着时间的推移逐渐降解吸收，新骨形成增多。24周后新骨形成明显增多，仍可见部分残余材料；自体髂骨组在12周后髓腔完全再通，24周后植骨部位与宿主骨结构没有差别；空白对照组未见骨连接或髓腔再通，随着时间的推移缺损两端逐渐封闭并硬化。 结论：实验初步表明双相陶瓷样生物骨可用于桡骨骨缺损的修复。     

新型双相钙磷陶瓷复合骨形态发生蛋白及碱性成纤维细胞生长因子修复兔骨缺损

摘要 背景：细胞因子能启动、促进并维持软骨和骨生成,但需要合适的载体才能发挥其生物学活性。 目的：验证复合骨形态发生蛋白及碱性成纤维细胞生长因子的新型双相钙磷陶瓷(1∶1)促进骨缺损修复的作用。 方法：27只兔,造成兔两侧股骨中下段4 mm×4 mm×12 mm的缺损,随机分为3组：骨形态发生蛋白+ 碱性成纤维细胞生长因子+双相钙磷陶瓷组、骨形态发生蛋白+双相钙磷陶瓷组、双相钙磷陶瓷组。于4,8,12周取材,通过苏木精-伊红染色,X射线以及计算机图像分析,比较各组缺损的修复情况。 结果与结论：骨形态发生蛋白+碱性成纤维细胞生长因子+双相钙磷陶瓷组及骨形态发生蛋白+双相钙磷陶瓷组在软骨诱导、小梁骨的形成数量、骨缺损修复等方面均明显优于双相钙磷陶瓷组。骨形态发生蛋白+碱性成纤维细胞生长因子+双相钙磷陶瓷组又优于骨形态发生蛋白+双相钙磷陶瓷组,在8周时编织骨小梁逐渐改建为成熟的板层骨及髓腔结构,骨缺损基本修复。12周时完全修复。结果提示：①双相钙磷陶瓷复合骨形态发生蛋白及碱性成纤维细胞生长因子在体内有较强的成骨活性,可以促进骨缺损的修复。②碱性成纤维细胞生长因子与骨形态发生蛋白合用可以加快新骨的形成。③新型双相钙磷陶瓷是一个吸附细胞因子的良好缓释载体,它的降解吸收和新骨的形成是一个相互促进过程。 关键词：双相钙磷陶瓷;骨缺损;诱导成骨;骨形态发生蛋白;成纤维细胞因子 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.42.001     

Gender differences in bone mineral density in epilepsy

PURPOSE: Bone accrual in adolescence is a major determinant of peak bone mass and risk of osteoporotic fractures later in life. Postmenopausal women are at highest risk, although, both men and premenopausal women with epilepsy experience adverse bone effects. We examined gender differences in bone density in epilepsy. METHODS: Cross-sectional study examining age and gender-specific z-score total bone mineral density (z-BMD) in 108 ambulatory children with epilepsy between 6 and 18 years of age (61 females 12.8 +/- 3.6 years; 47 males 12.4 +/- 3.1 years) compared to 35 healthy controls who were first-degree cousins of patients (21 females 13.8 +/- 2.5 years and 14 males 11.7 +/- 2.5 years). RESULTS: Patients with epilepsy accrued lower z-BMD compared to controls (0.27 +/- 0.77 vs. 0.53 +/- 1.1, p < 0.05), and were reduced for both females (0.23 +/- 1.1 vs. 0.47 +/- 0.76; p = 0.14, NS) and males (0.3 +/- 1.1 vs. 0.8 +/- 0.5; p = 0.11, NS). Increasing duration of epilepsy was associated with lower BMD in males (correlation coefficient = 0.06; p = 0.05). Males with > or =6 years of epilepsy experienced the lowest z-BMD compared to controls (-0.89 +/- 0.80 vs. 0.62 +/- 0.80; p = 0.45). Fractures occurred in two females with epilepsy for > or =6 years and z-BMD of -1.5 and -2.7. CONCLUSIONS: BMD in both males and females with epilepsy is reduced. Young males with more chronic epilepsy (> or =6 years) had the lowest BMD. Age at onset of epilepsy, growth trends, and hormonal differences may underlie these gender differences. Lower bone accrual in adolescence may contribute to increased fracture risk for both men and women with epilepsy.