脱细胞真皮基质修补腹股沟疝

背景：当前应用聚丙烯补片行腹股沟疝无张力修补已成为腹股沟疝修补的标准手段,但这些材料可能对患者生殖功能产生影响。 目的：总结应用脱细胞真皮基质修补腹股沟疝的经验。 方法：回顾性分析19例应用异体脱细胞真皮基质修补腹股沟疝患者的临床资料,男15例,女4例,年龄5~38岁。术后观察切口愈合情况,并定期随访。 结果与结论：19例患者伤口均Ⅰ期愈合,无切口感染、皮下积液等并发症。18例患者获得随访,随访3~30个月,无局部疼痛、牵拉等不适感,无复发病例。提示脱细胞真皮基质材料为未成年人、尚未婚育及有生育要求的男性腹股沟疝患者的治疗提供一种新的选择。     

脱细胞真皮基质补片治疗小儿肛瘘

背景：采用异体脱细胞真皮基质材料填塞治疗成人低位肛瘘具有较好的临床效果。 目的：探讨脱细胞异体真皮基质补片修补小儿肛瘘的可行性以及方法。 方法：将138例肛瘘患儿随机分为2组,用可吸收线将脱细胞异体真皮基质生物补片固定在直肠黏膜下,A组双层缝合封闭内口,B组不游离、缝合内口。 结果与结论：随访观察6个月,所有病例肛周无红肿,外观无异常,外口硬结消失,内口愈合良好,无肛门狭窄及肛门外形改变。两组在修复后均有部分患儿出现瘘口出流便,但未经特殊处理,症状均自行消失,痊愈。A组术后瘘口漏便患儿人数较B组多(P < 0.01),出现时间较B组早(P < 0.05),但总体愈合时间无差异。说明手术中仅固定补片于内口,而不游离、缝合内口即可达到满意疗效。     

异种脱细胞真皮基质制备方法的改进

背景：应用液氮进行大张羊脱细胞真皮基质制作时,复温过程中真皮基质易破碎,不易制出大张完整的脱细胞羊真皮基质。 目的：探索更好的羊脱细胞真皮基质的制作方法。 方法：改变低温条件,变液氮降温为应用-80 ℃低温冰箱进行异种皮肤的冷冻处理,破坏细胞成分,利用洗脱液振荡洗涤,去除细胞碎片,制备出完整的大张羊脱细胞真皮基质,并对其脱细胞程度和胶原三维支架结构的完整性进行测定。 结果与结论：通过-80 ℃低温冰箱进行反复冻融制备的大张羊脱细胞真皮基质,较为完整,常规病理检查无明显细胞碎片残留;免疫组化检测无明显细胞碎片;电子显微镜检查胶原结构完整。应用改良-80 ℃低温冰箱和液氮进行反复冻融制作的大张羊脱细胞真皮基质对比,脱细胞程度和其他生物学性能无明显差异,但完整性前者明显优于后者,适合临床应用。 关键词：脱细胞真皮;制备;改进;反复冻融;胶原结构;组织构建;组织工程     

脱细胞真皮基质黏膜补片填充治疗单侧声带麻痹

背景：脱细胞真皮基质黏膜补片作为一种新型的组织填充修复材料,具有良好的生物和结构相容性。 目的：观察脱细胞真皮基质黏膜组织补片作为填充材料应用于声带内移的近远期疗效。 方法：选择2009-01/2010-01解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所耳鼻咽喉-头颈外科收治的单侧声带麻痹患者20例,局麻下患侧甲状软骨板开窗,观察脱细胞真皮基质黏膜补片患侧声带下填充对改善声嘶等症状的疗效,术后1 d、3,6,12个月各随访1次,通过纤维喉镜观察发音时声门闭合情况,嗓音分析评估音质,包括标准化噪声能量和最长声时。 结果与结论：经患者主观评价及治疗前后各阶段嗓音声学参数分析(标准化噪声能量,最长声时),证实手术近远期疗效满意,无特殊手术风险及不良反应。提示脱细胞真皮基质黏膜补片具有良好的组织相容性和易操作性,可作为声带麻痹手术治疗中声带内移的新型填充材料,临床应用疗效满意。     

异种脱细胞真皮基质组织补片修复口腔黏膜组织缺损71例

摘要 背景：近年来,同种异体脱细胞真皮基质组织补片已在口腔组织缺损修复中广泛应用,但有关异种脱细胞真皮基质组织补片修复口腔黏膜缺损的研究较少。 目的：评价异种脱细胞真皮基质在口腔黏膜组织缺损修复中的效果及生物安全性。 方法：选择口腔良、恶性肿瘤手术切除后遗留的黏膜及部分软组织缺损患者71例,男37例,女34例,年龄45(20~70)岁;其中良性肿瘤42例,恶性肿瘤29例。采用异种脱细胞真皮基质组织补片修复口腔软组织浅层缺损。观察生物膜成活情况,颜色、质地,比较组织补片修复无硬组织支撑部位(颊、舌、口底)和有硬组织支撑部位(牙龈、硬腭)的收缩率。 结果与结论：71例补片完全成活,未发生坏死、感染等并发症。植入后2周补片成活面积为(98.20±5.20)%,植入后3个月,补片颜色已与周围黏膜相近,大部分患者诉有不同程度的紧张感;植入后6个月补片植入区成功完成了细胞的爬行代替和血管化,生长稳定,无进一步收缩,弹性良好,患者感觉趋于正常。生物膜收缩发生在植入后2周~1个月,植入后3个月后基本稳定,术区组织形态与正常组织相比无明显差异。无硬组织支撑部位(颊、舌、口底)的收缩率较硬组织支撑部位(牙龈、硬腭)收缩率大。说明应用异种脱细胞真皮基质组织补片修复口腔黏膜具有组织相容性好、来源广泛、操作简单等优点,能够起到早期覆盖创面,促进创面愈合,减轻瘢痕生成的作用,可作为口腔黏膜缺损修复的理想材料。 关键词：口腔黏膜组织缺损;异种脱细胞真皮基质;组织移植;补片;牙周与口腔组织再生修复材料     

脱细胞血管基质制备及体内外生物相容性

背景：利用脱细胞血管基质作为血管支架具有以下优点：脱细胞血管基质保留了自然血管的复杂三维结构;脱细胞基质表面的生长因子和结构域有利于细胞的黏附和浸润。 目的：制备脱细胞血管基质并对其体内外生物相容性进行评价。 方法：采用胰蛋白酶、Triton X-100逐步处理猪颈动脉制备脱细胞血管基质。采用皮下植入实验、急性毒性实验和体外细胞毒性实验等评价其生物相容性。 结果与结论：脱细胞基质材料具有良好的化学稳定性,未释放对红细胞产生破坏溶解作用的有害元素,未引起急性溶血反应,对细胞的生长无毒性影响。脱细胞基质材料在动物体内植入后早期有较多炎性细胞浸润,到实验观察的后期无明显炎性细胞浸润,脱细胞基质内可见成纤维细胞。另外,脱细胞基质材料对周边组织未产生毒性作用,伤口Ⅰ期愈合。同时组织学切片显示：支架材料与周边组织相容性好,未产生排斥反应。说明脱细胞基质材料在动物体内具有很好的生物相容性。 关键词：血管支架;生物相容性;生物材料;脱细胞血管基质;相容性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.16.010     

猪脂肪干细胞与脱细胞真皮基质的生物相容性

背景：脱细胞真皮基质已广泛应用于器官或组织缺损的修补。 目的：观察猪脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质的相容性。 方法：酶消化法原代培养猪脂肪源性干细胞,利用流式细胞仪和多向诱导分化方法鉴定脂肪干细胞,将其与脱细胞真皮基质共培养。 结果与结论：实验成功培养出猪脂肪源性干细胞,流式细胞仪检测结果显示阳性表达CD44和CD105,不表达CD34和CD45;在诱导培养基条件下,可向脂肪细胞、成骨细胞分化。苏木精-伊红染色及扫描电镜发现干细胞能在脱细胞真皮基质表面黏附生长。脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质具有良好的相容性,将两者体外复合培养后,有望将复合物植入体内进行缺损组织、器官的修复。     

纳米银猪脱细胞真皮敷料的细胞毒性评估

背景：传统的猪皮敷料具有保护创面的作用,但不具有主动抗感染功能。 目的：评估自制纳米银猪脱细胞真皮敷料的体外细胞毒性,评价其作为新型敷料的可行性。 方法：用四甲基偶氮唑盐比色法检测自制纳米银猪脱细胞真皮敷料100%和50%的浸提液对小鼠成纤维细胞(L-929细胞)相对增殖率的影响,并评价其细胞毒性。倒置显微镜观察各组细胞形态变化,培养2,4,7d后用酶联免疫检测仪测定溶液吸光度值来评估细胞毒性。 结果与结论：L-929细胞在自制纳米银猪脱细胞真皮敷料的浸提液中增殖良好,其细胞毒性实验显示细胞毒级为1级,实验组与阴性对照组之间的吸光度值差异均无显著性意义( P >0.05)。说明自制纳米银猪脱细胞敷料无细胞毒性,作为新敷料具有可行性。 关键词：猪脱细胞真皮基质;敷料;纳米银;细胞毒性;MTT doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.012     

异种（牛）脱细胞真皮基质修复咽喉肿瘤切除术后黏膜缺损的效果评估

目的：咽喉肿瘤切除后黏膜缺损的修复直接影响呼吸、发音、吞咽功能的恢复。文章评估了应用异种（牛）脱细胞基质修复膜修复咽、喉术后黏膜缺损的效果。 方法：选择2006-08/2007-11青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科收治的咽喉肿瘤患者27例，口咽部扁桃体癌5例，下咽癌6例，喉癌16例，其中声门区癌15例，声门上区癌1例，肿瘤病理均为鳞状细胞癌。实验经医院伦理委员会批准，所有患者对实验及治疗方案均知情同意。实验采用烟台正海生物技术有限公司提供的异种（牛）脱细胞真皮基质修复膜，批号SS070603，规格（2×2.5）cm或（4×3）cm的白色、半透明、蜂窝状片块组织，基底膜面较粗糙，另一面较光滑。扁桃体癌患者将修复膜缝于创面后，采用碘仿纱条打包固定7 d。喉癌患者如缺损组织小可以将修复膜直接铺于创面缝合，如缺损较大则先应用带状肌或带状肌筋膜修补喉部缺损，然后将修复膜铺于喉内创面与黏膜切缘对位缝合，采用喉扩张模局部压迫10～12 d。下咽癌及颈段食管癌患者亦应用带状肌修补下咽部后壁或侧壁缺损，然后将修复膜与局部黏膜切缘直接对位缝合。术后对患者进行随访观察，以3，6个月，1年为观察时间；主要观察脱细胞真皮基质修复膜修复的愈合，呼吸功能、发音功能、吞咽功能的恢复情况。 结果：27例患者中出院时经电子喉镜检查26例黏膜缺损修复一期愈合，1例下咽癌患者术后出现咽漏，经局部换药对症处理后愈合。4例扁桃体癌、4例下咽癌、6例喉癌患者在术后3～6个月应用电子喉镜复查，修复的局部已经恢复为肉眼可见的黏膜组织，吞咽、呼吸均恢复正常（1例声门上喉癌的患者在术后15 d进食时有呛咳，经过锻炼进食恢复正常）。喉癌患者发音功能恢复，但是发音的清晰度欠佳；5例扁桃体癌中随访6个月以上4例无复发，1例术后放疗于2个月时局部复发及颈部转移，拒绝再次手术，现带瘤生存；随访1年以上者2例。6例下咽癌随访6个月以上者4例，其中1例患者术后出现咽瘘，经局部换药及对症处理后咽瘘愈合，放疗后3个月因口内大出血死亡。16例喉癌患者随访6个月者6例，随访1年以上者1例。27例患者均未发现排斥、过敏等反应。 结论：异种脱细胞真皮基质修复膜为修复头颈肿瘤术后黏膜缺损提供了一种新的方法，手术操作简便，效果良好，为功能恢复提供了保证。     

聚丙烯补片与脱细胞真皮基质补片及传统方法修复战伤性腹壁软组织

背景：近年来随着各种新型的人工合成修补材料问世,应用这类材料修补疾病所致的腹壁缺损也取得了很好的效果,但应用于战伤腹壁缺损的研究较少。 目的：比较脱细胞真皮基质、聚丙烯补片以及传统方法修补战伤腹壁缺损的有效性和安全性。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-01/08在解放军第四军医大学西京医院及唐都医院动物实验外科实验室完成。 材料：脱细胞真皮基质由烟台正海生物技术有限公司提供;聚丙烯补片购于北京。 方法：27只成年杂种犬制作腹部开放伤动物模型后,随机分为3组,分别以脱细胞真皮基质、聚丙烯补片、传统修复方法进行修补。 主要观察指标：3组分别于术后1,3,6个月时取材行光镜检查及抗拉力强度测定。 结果：全部动物无伤口裂开、无腹壁疝形成,脱细胞真皮基质修补组脏面未与内脏粘连,聚丙烯补片修补组均与内脏粘连。组织切片苏木精-伊红染色检查表明脱细胞真皮基质较聚丙烯补片、传统修补更有利于成纤维细胞及血管形成,6个月内脱细胞真皮基质可逐渐降解替代;6个月时聚丙烯补片仍有炎症反应,表现了长期的异物影响;传统修补只是肌肉之间简单的瘢痕愈合,增殖较少,生长较慢。抗拉力试验结果提示在3个阶段除6个月时脱细胞真皮基质修补处与聚丙烯补片修补处抗拉力强度相等外,余均提示在抗拉力强度上脱细胞真皮基质修补处>聚丙烯补片修补处>传统方法修补处。 结论：脱细胞真皮基质修复战伤腹壁缺损的效果等同于聚丙烯补片,均优于传统修复方法,安全性优于聚丙烯补片。     

异种脱细胞真皮替代睑板材料重建眼睑的可行性*☆

摘要背景：眼睑后层重建是眼睑重建的重点和难点,其中睑板替代物更是研究的焦点。异种脱细胞真皮作为一种新型的组织工程材料,在国内外烧伤整形领域,正得到广泛的研究和应用。目的：观察异种(猪)脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性极其组织病理学变化。方法：剥取健康小白猪全层皮肤20 cm×20 cm,制备异种(猪)脱细胞真皮基质。同时制备兔睑板全层缺损模型并植入脱细胞真皮基质,观察大体情况,并分别于第1,2,3周取移植交界处眼睑组织光镜下观察组织学的改变。结果与结论：大体观察未见明显排斥反应及眼睑的变形;光镜下1周时可见局部炎症细胞浸润,2周时炎症细胞减少,3周时正常纤维组织长入,逐渐分割代替植入的胶原纤维,炎症反应消失。提示异种脱细胞真皮免疫原性低,并可引导新生胶原的生长,是一种良好的睑板替代物。关键词：异种脱细胞真皮;眼睑重建;组织工程;材料;相容性doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.03.004     

脱细胞异体真皮组织补片在智齿拔除中的应用

背景：使用J-1型脱细胞异体真皮组织补片覆盖拔牙创口的报告较少。 目的：探讨异体脱细胞组织补片置入拔牙窝对预防拔牙后并发症的影响。 方法：将400例阻生智齿拔除患者随机分为2组,实验组智齿拔除后拔牙窝内放置医用组织补片;对照组智齿拔除后不放置医用组织补片。分别观察拔牙后组织补片脱落率、肿胀发生率、拔牙窝内血凝块存留和食物残渣残留情况、牙龈是否红肿、对拔牙后出血的影响以及干槽症的发生率。 结果与结论：拔牙后出血的百分比,血凝块留存率,拔牙窝内食物残渣残留百分比,干槽症发生率实验组均明显低于对照组。放置组织补片对术后肿胀和牙龈红肿无明显影响。所有放置在拔牙窝内的组织补片与拔牙创周围组织附着紧密,未见脱落。     

异种(猪)无细胞真皮基质的制备及体外生物相容性*

背景：人同种无细胞真皮基质作为一种永久性真皮支架,已成功应用于烧伤创面修复及美容医学等领域,但由于来源有限,限制了其应用。 目的：研制异种(猪)无细胞真皮基质,并对其体外生物相容性进行评价。 设计、时间及地点：体外细胞学对比观察实验,于2007-08/2008-06在中国辐射防护研究院生物材料与制药技术研究所实验室完成。 材料：实验猪由中国辐射防护研究院实验动物中心提供;人成纤维细胞来自武警山西总队医院健康儿童包皮环切术切除的包皮组织。 方法：无菌条件下获取健康小白猪猪皮,用高渗盐溶液-去污剂、胰酶消化及超声清洗的方法,制备猪无细胞真皮基质。体外培养人成纤维细胞,用猪无细胞真皮基质浸提液法及人成纤维细胞和猪无细胞真皮基质直接贴附法,评价猪无细胞真皮基质体外生物相容性。 主要观察指标：①猪无细胞真皮基质的组织学形态。②猪无细胞真皮基质的体外生物相容性。 结果：制备的猪无细胞真皮基质,完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,保留了胶原基质。猪无细胞真皮基质浸提液对人成纤维细胞增殖无明显影响。人成纤维细胞可以在猪无细胞真皮基质上贴附、增殖。 结论：此种方法制备的无细胞真皮基质完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,有较好的体外生物相容性。 关键词：猪无细胞真皮基质;人成纤维细胞;生物相容性     

标准大骨瓣开颅术治疗合并脑疝形成的外伤性颅内血肿

目的：探讨标准大骨瓣开颅术治疗合并脑疝形成的外伤性颅内血肿的疗效。方法：治疗32例病人，采用大骨瓣开颅术切口．清除血肿、止血后去除骨瓣，减张缝合硬脑膜。结果：本组病人治愈19例，中残3例，重残1例，植物状态1例，死亡8例，死亡牢为25％。结论：标准大骨瓣开颅术是治疗合并脑疝形成的外伤性颅内血肿的较好方法，可减少死亡率，提高患的生存质量。     

额叶挫裂伤致脑中心疝手术时机探讨

目的探讨额叶挫裂伤致脑中心疝手术时机,提高手术效果,改善患者预后。方法回顾性分析我院收治的额叶挫裂伤导致脑中心疝33例患者的临床资料,根据患者的临床表现及影像学检查结果进行病理分期,并探讨不同手术时机的效果。结果间脑期14例患者优良率71.43%,中脑-脑桥上部、脑桥下部-延髓上部期、延髓期无优良患者,3组预后比较差异有统计学意义(P0.01)。恢复良好患者中,部分患者记忆力、注意力下降,中残、重残患者均有智能障碍和情感障碍。结论额叶挫裂伤致脑中心疝患者入院后尽快抢救,尽可能在间脑期,即疾病早期进行手术可显著提高抢救成功率,避免遗留严重的后遗症。     

Differentiation of mesenchymal stem cells into neuronal cells on fetal bovine acellular dermal matrix as a tissue engineered nerve scaffold

The purpose of this study was to assess fetal bovine acellular dermal matrix as a scaffold for supporting the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural cells following induction with neural differentiation medium.We performed long-term,continuous observation of cell morphology,growth,differentiation,and neuronal development using several microscopy techniques in conjunction with immunohistochemistry.We examined specific neuronal proteins and Nissl bodies involved in the differentiation process in order to determine the neuronal differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells.The results show that bone marrow mesenchymal stem cells that differentiate on fetal bovine acellular dermal matrix display neuronal morphology with unipolar and bi/multipolar neurite elongations that express neuronal-specific proteins,including βIII tubulin.The bone marrow mesenchymal stem cells grown on fetal bovine acellular dermal matrix and induced for long periods of time with neural differentiation medium differentiated into a multilayered neural network-like structure with long nerve fibers that was composed of several parallel microfibers and neuronal cells,forming a complete neural circuit with dendrite-dendrite to axon-dendrite to dendrite-axon synapses.In addition,growth cones with filopodia were observed using scanning electron microscopy.Paraffin sectioning showed differentiated bone marrow mesenchymal stem cells with the typical features of neuronal phenotype,such as a large,round nucleus and a cytoplasm full of Nissl bodies.The data suggest that the biological scaffold fetal bovine acellular dermal matrix is capable of supporting human bone marrow mesenchymal stem cell differentiation into functional neurons and the subsequent formation of tissue engineered nerve.     

Persistent increase in ventral hippocampal long-term potentiation by juvenile stress: A role for astrocytic glutamine synthetase

A traumatic childhood is among the most important risk factors for developing stress-related psychopathologies such as posttraumatic stress disorder or depression later in life. However, despite the proven role of astrocytes in regulating transmitter release and synaptic plasticity, the contribution of astrocytic transmitter metabolism to such stress-induced psychopathologies is currently not understood. In rodents, childhood adversity can be modeled by juvenile stress exposure, resulting in increased anxiety, and impaired coping with stress in adulthood. We describe that such juvenile stress in rats, regardless of additional stress in adulthood, leads to reduced synaptic efficacy in the ventral CA1 (vCA1) Schaffer collaterals, but increased long-term potentiation (LTP) of synaptic transmission after high-frequency stimulation. We tested whether the glutamate–glutamine-cycle guides the lasting changes on plasticity observed after juvenile stress by blocking the astrocytic glutamate-degrading enzyme, glutamine synthetase (GS). Indeed, the pharmacological inhibition of GS by methionine sulfoximine in slices from naïve rats mimics the effect of juvenile stress on vCA1-LTP, while supplying glutamine is sufficient to normalize the LTP. Assessing steady-state mRNA levels in the vCA1 stratum radiatum reveals distinct shifts in the expression of GS, astrocytic glutamate, and glutamine transporters after stress in juvenility, adulthood, or combined juvenile/adult stress. While GS mRNA expression levels are lastingly reduced after juvenile stress, GS protein levels are maintained stable. Together our results suggest a critical role for astrocytes and the glutamate–glutamine cycle in mediating long-term effects of juvenile stress on plasticity in the vCA1, a region associated with anxiety and emotional memory processing.