抗脂肪肝冲剂对大鼠乙醇性肝损伤防治的实验研究

目的：探讨抗脂肪肝冲剂对乙醇性肝损伤大鼠脂质代谢的影响,寻找针对乙醇所致脂肪肝的有效药物,方法：采用乙醇慢性肝损伤模型,观察大鼠肝组织总胆固醇（TC）,及甘油三酯（TG）的含量,结果：抗脂肪肝冲剂降低乙醇性肝损伤大鼠肝组织TC,TG的含量,与模型组比较P＜0．05（小剂量组）,P＜0．01（中,大剂量组）,病理检查,抗脂肪冲剂各剂量组与模型组比较P＜0．01,结论：抗脂肪肝冲剂能够降低乙醇性肝损伤大鼠肝组织TG,TC的含量,具有防治乙醇性脂肪肝的作用。     

甜菜碱对酒精性肝损伤大鼠高同型半胱氨酸血症和肝脂质过氧化的影响

目的：观察甜菜碱对大鼠高同型半胱氨酸血症（hyperhomoeysteinemia，HHcy）和肝脏脂质过氧化的作用和影响。方法：将60只SD大鼠随机分为5组（每组12只）：正常对照组，模型组，甜菜碱低、高剂量组，腺苷蛋氨酸（S-adenosylmethionine，SAM）组。除对照组外，其余4组给予酒精、鱼油灌胃配合高脂饮食构建酒精性肝损伤大鼠模型，药物治疗于造模4周后开始，第8周处死全部大鼠，测定血浆总同型半胱氨酸（total plasma homoeysteine，tHcy）浓度、血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白（Alb）、白／球蛋白比值（A／G）、肝匀浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量，并进行肝脏病理组织学检查。结果：与对照组比较，模型组大鼠tHcy、ALT、AST、MDA含量均明显升高（P〈0．01），SOD、GSH水平明显降低（P〈0．01）。与模型组对比，甜菜碱低、高剂量组大鼠tHcy、ALT、AST、MDA均显著降低（P〈0．01），肝组织SOD含量明显上升（P〈0．01），GSH含量无显著变化（P〉0．05），甜菜碱低、高剂量组之间无明显差异（P〉0．05）；SAM组能显著增加肝组织GSH贮量（P〈0．01），但对血浆tHcy水平无显著影响（P〉0．05），余治疗作用均与甜菜碱治疗无显著差别（P〉0．05）。结论：甜菜碱可防治酒精性肝损伤，其机制可能为降低高同型半胱氨酸血症，改善肝组织脂质过氧化。本文结果显示，甜菜碱的作用优于腺苷蛋氨酸。     

Toll样受体4在CCI4诱导的大鼠慢性肝损伤过程中的表达

背景：Toll样受体4（TLR4）在内毒素的信号转导过程中具有重要作用。目的：动态观察在CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤过程中。肝组织和Kupffer细胞TLR4基因表达的变化，探讨TLR4在肝损伤中的作用。方法：以CCl4诱导慢性肝损伤纤维化大鼠模型，分离肝Kupffer细胞。以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA的表达；将Kupffer细胞分别与不同浓度的脂多糖（LPS）孵育，以酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞培养上清的肿瘤坏死因子（TNF）-α水平。以基质显色法测定大鼠血浆内毒素水平。结果：正常大鼠肝组织TLR4 mRNA表达水平较低，Kupffer细胞未检测到TLR4 mRNA表达；CCl4处理2～6周大鼠的肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA表达水平显著增高（P〈0．05）。CCl4处理4周和6周大鼠Kupffer细胞的TNF-α基础分泌水平显著高于正常大鼠（P〈0．05）；在LPS的刺激下，TNF-α的分泌水平较基础值进一步增高（P〈0．05），呈浓度依赖性。大鼠血浆内毒素水平在肝损伤过程中逐渐增高，相关分析显示在慢性肝损伤的早、中期。肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA的表达与血浆内毒素水平呈正相关。结论：在CCl4诱导的慢性肝损伤过程中，大鼠肝脏TLR4基因表达上调，与Kupffer细胞活化和肝脏的炎症损伤有关。     

二草清肝汤抗大鼠免疫性肝损伤作用机制的研究

目的：观察中药二草清肝汤对大鼠免疫性肝损伤的防护作用并探讨其药理学机削。方法：采用卡介苗（BCG）＋脂多糖（LPS）建立大鼠免疫性肝损伤模型。做肝组织病理切片观察肝组织损伤情况；采用免疫组化法检测肝组织Bax、Bcl-2的表达；ELISA法检测血清IL-12水平。结果：大鼠免疫性肝损伤时。血清IL-12水平显著升高；肝脏Bax表达明显升高，Bcl-2表达显著降低；中药组及西药（环磷酰胺）对照组大鼠Bax的表达及IL-12水平明显低于模型组（P〈0．01），而Bcl-2表达明显高于模型组（P〈0．01）；中药组和西药组大鼠肝组织病理改变较模型组明显减轻。中药组一般情况明显好于西药组。结论：二草清肝汤能降低免疫性肝损伤大鼠的血清IL-12水平，下调肝Bax的表达。上调Bcl-2的表达，对实验性免疫性肝损伤有明显防护作用。     

腺苷蛋氨酸对酒精性肝损伤大鼠甲硫氨酸代谢和脂质过氧化的影响

观察腺苷蛋氨酸（S-adenosylmethionine,SAM）对酒精性肝损伤大鼠的防治作用及机制。48只SD大鼠随机分为4组（每组12只）：正常对照组、模型组、腺苷蛋氨酸低及高剂量组。除对照组外,其余三组给予酒精、鱼油灌胃配合高脂饮食构建酒精性肝损伤大鼠模型,造模4周后腹腔注射SAM,第8周处死全部大鼠。测定血浆总同型半胱氨酸（total plasma homocysteine,tHcy）、血清丙氨酸转移酶（ALT）、甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β）水平、肝匀浆丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量,及肝组织病理学检测。与对照组比较,模型组大鼠tHcy、ALT、TC、TG、TNF-α、TGF—β、MDA含量均明显升高（P〈0．01）;GSH水平降低（P〈0．01）。与模型组比较,SAM治疗组ALT、TC、TG、MDA（P〈0．01）和TNF-α、TGF—β明显降低（P〈0．05）,GSH含量升高（P〈0．01）,但血浆tHcy水平无显著变化（P〉0．05）。SAM低、高剂量组各项指标间比较无明显差别（P〉0．05）。SAM可明显改善大鼠酒精性肝损伤,其机制可能与其降低肝组织脂质过氧化、并与抗免疫炎性因子和抗增殖有关。     

枳黄方对急性酒精性肝病大鼠TNF-α和内毒素的影响

目的：通过观察枳黄方对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织TNF—α的变化及其血浆内毒素水平的改变，验证此方对大鼠急性酒精性肝病的防治作用。方法：将75只Wistar大鼠随机分为枳黄方组、模型组及正常组，采用免疫组化法测量肝组织内TNF—α值，用生化法检测血浆内毒素水平。结果：枳黄方组大鼠血浆内毒素水平高于正常组（P〈0．05），但显著低于模型组（P〈0．01），肝组织TNF-α和血清ALT水平高于正常组（P〈0．01），但显著低于模型组（P〈0.01）。并且血浆内毒素水平与肝组织TNF—α活性变化呈正相关（r=0．993，P〈0．01）。结论：枳黄方合剂可显著降低急性酒精性肝病大鼠血液中内毒素水平及肝脏中TNF-α水平，对大鼠急性酒精性肝病有较好治疗作用。     

丙酮酸乙酯对D-氨基半乳糖诱导的急性肝损伤大鼠的保护作用

目的观察丙酮酸乙酯（EP）对D-氨基半乳糖盐酸盐诱导的急性肝损伤模型大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法制备D-氨基半乳糖盐酸盐诱导的急性肝损伤大鼠模型48只,并随机分成正常组、模型组、小剂量EP提前干预组、大剂量EP提前干预组、小剂量EP治疗组和大剂量EP治疗组。在造模后24h时取血,采用ELISA法检测TNF-α、IFN-γ、IL-10和IL—18水平;采用RT—PCR法检测肝组织HMGB1mRNA水平变化。结果与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IFN-γ,IL-10和IL-18水平均无明显变化（P〉0．05）,而肝组织HMGB1mRNA水平明显升高（P〈0．01）;与模型组比较,EP提前干预组和EP治疗组动物血清TNF-α、IFN-γ,IL-10和IL-18水平均无明显变化,而EP提前干预则显著降低了肝组织HMGB1 mRNA水平（P〈0．01）,其中大剂量组最为显著（P〈0．01）;病理学检查显示,EP提前干预组大鼠肝组织学得到明显改善,尤其是在大剂量组,而且比EP治疗组更加显著。结论EP能有效保护D-氨基半乳糖盐酸盐诱导的大鼠急性肝损伤,保护效果与药物的干预剂量成正相关,并且提前干预的效果更明显。     

补肾延年丹对老年大鼠肝染色质基因活性的影响

以DNasel为杂色质活性基因的探针，观察补肾延年丹对老年大鼠肝染色质基因活性的影响．结果18月龄老年大鼠肝染色质DNasel消化百分率显著低于5月龄青年大鼠（P＜0．01）；灌胃给药30d的补肾延年丹中剂量（10倍临床剂量）组老年大鼠肝染色质DNaseI消化百分率显著高于老年大鼠空白对照组（P＜0．05）；大剂量（20倍临床剂量）组和小剂量（5倍临床剂量）组以及附性对假药补肾强身胶囊（10倍临床剂量）组老年大鼠也显示高于老年空白对照组的趋势．提示老年大鼠肝染色质基因活性降低,补肾延年丹使老年大鼠肝染色质基因活性得到一定程度恢复，这可能是补肾抗衰老的生化机制之一．     

蓝莓预防大鼠肝损伤实验研究

目的探讨蓝莓对四氯化碳（CCl4）所致大鼠急性肝损伤的预防保护作用。方法SD大鼠随机分为蓝莓汁低、高两个剂量预防组、齐墩果酸阳性药对照组、正常对照组及模型组,采用CCl4致大鼠急性肝损伤模型。测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）以及肝组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、过氧化氢酶（CAT）及丙二醛（MDA）,光镜下观察肝脏病理变化。结果蓝莓各剂量组及阳性对照组血清ALT及AST均明显低于模型组（P〈0．01）。与模型组比较,齐墩果酸组、蓝莓汁高剂量组肝匀浆GSH、SOD、CAT明显升高,MDA明显降低（P〈0．01或P〈0．05）;蓝莓汁低剂量组肝匀浆GSH升高不明显,肝匀浆SOD、CAT升高,MDA降低（P〈0．05）。结论蓝莓对CCl4所致大鼠急性肝损伤具有良好的预防保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关。     

利福平致大鼠胆汁淤积性肝损伤适应性现象的研究

背景：利福平广泛用于抗结核治疗,是引起药物性肝损伤的主要原因之一。目的：探讨利福平致大鼠胆汁淤积性肝损伤的特征及其动态变化。方法：32只Wistar大鼠随机分成正常对照组和利福平模型组,采用利福平灌胃制备胆汁淤积性肝损伤大鼠模型。动态监测造模第0、7、14、21、28、35、42、49d大鼠血清ALT、AST、ALP活性以及TBIL、DBIL含量变化。造模第14、49d分批处死大鼠,观察大鼠肝组织超微结构改变,检测肝匀浆TBA、MDA含量和SOD、GSH-Px活性。结果：利福平模型组血清AIJT、AST、ALP活性和TBIL、DBIL含量于给药后升高,第7～21d达高峰,显著高于正常对照组（P〈0．05）,之后呈现缓慢下降趋势,第49dAIJT、AST活性和DBIL含量与正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。利福平模型组肝组织电镜下可见线粒体肿胀、内质网断裂、毛细胆管扩张以及胆汁淤积。造模第14、49d利福平模型组TBA、MDA含量较正常对照组显著升高（P〈0．01,P〈0．05）,第49dTBA含量较第14d显著降低（P〈0．05）,MDA含量较第14d有所降低,但差异无统计学意义（P〉0．05）。第14d利福平模型组SOD、GSH-Px活性较正常对照组相比显著降低（P〈0．01,P〈0．05）,第49d利福平模型组SOD、GSH．Px活性较第14d相比有所降低,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：利福平可导致以胆汁淤积为主的肝损伤,并存在肝损伤适应性现象。     

肝损伤大鼠治疗前后血清透明质酸水平变化及意义

目的 探讨血清透明质酸(HA)水平对慢性肝病的诊断价值。方法 采用四氯化碳复合因素制造慢性肝损伤大鼠模型,分正常对照、模型对照、秋水仙碱及鳖甲煎丸组,肝损伤模型制造成功后治疗四周,观察治疗前后血清HA水平变化及肝细B6变性和肝纤维化程度。结果 治疗前血清HA水平较正常对照组显著升高(P<0.001),肝细胞变性及纤维化程度严重(P<0.01);治疗后,秋水仙碱组及鳖甲煎丸组的血清HA水平较模型对照组明显下降(P<0.05,P<0.01),同时肝细胞变性及纤维化程度也明显减轻(P<0.01)。结论 血清HA水平与肝脏病理变化基本平行,在肝纤维化的诊断及疗效评估中有一定价值。     

柴茵丹参汤预防利福平肝损伤的实验研究

目的:观察柴茵丹参汤对利福平肝损伤的预防作用,并探讨其机制.方法:利福平灌胃制备大鼠肝损伤模型,同时给予柴茵丹参汤煎剂.21天后分别检测大鼠血清ALT活性、血清和肝组织MDA含量、肝组织病理变化及超微结构改变.结果:柴茵丹参汤可抑制利福平引起的血清ALT活性升高(P＜0.01);减轻肝细胞水肿、脂肪变性、点状坏死及炎细胞浸润;减轻肝细胞线粒体肿胀、内质网扩张,使肝细胞内小脂滴减少;但对血清及肝组织MDA含量升高无明显改善.结论:柴茵丹参汤对利福平肝损伤有一定的预防作用.     

抗脂肪肝中剂对大鼠高脂血症防治的实验研究

目的：探讨抗脂肪肝冲剂对高脂血症大鼠脂质代谢的影响,寻求防治高脂血症的有效药物。方法：采用高脂饮食喂养大鼠,形成高脂血症模型,饲以抗脂肪肝冲剂,观察大鼠血清总胆固醇（TC）及甘油三酯（TG）的含量,结果：抗脂肪肝冲剂能显著降低高脂血症大鼠血清中TC含量（与模型对照组比较P＜0．01）及TG含量（大、中、小剂量组与模型对照组比较P＜0．01,P＜0．05,P＜0．05）。结论：抗脂肪肝冲剂能够降低高脂血症大鼠TC、TG的含量,具有防治高脂血症的作用。     

Influence of BOL on hyaluronic acid, laminin and hyperplasia in hepatofibrotic rats

AIM:To study the anti-hapatofibrosis mechanism of Bie JiaJian oral liquid(BOL).METHODS:The model was induced by subcutaneousinjection of CCl_4.BOL was administered and the change ofserum hyaluronic acid(HA)and laminin(LN)was observedand the degeneration of liver cells and the degree of fibrehyperplasia analyzed.Changes of ultra micro-structure inliver cells were observed in some samples.RESULTS:HA was reduced in both the groupa with low andhigh dosage of BOL.which showed a remarkable differenceas compared with that of the model group(low dosagegroup:376.15μg/L±35.48μg/L vs 806.07μg/L±98.49μg/L,P<0.05;high dosage group:340.14μg/L±30.18μg/L vs806.07μg/L±98.49μg/L,P<0,05).The LN content of lowand high dosage group of BOL was lower than that of modelgroup(low dosage group:71.99μg/L±8.15μg/L vs 133.94μg/L±14.45μg/L,P<0.01;high dosage group:71.68μg/L±11.62μg/L vs 133.94μg/L±14.45μg/L,P<0.01)andcolchicine group(low dosage group:71.99μg/L±8.15μg/Lvs 118.28μg/L±16.13μg/L,P<0.05;high dosage group:71.68μg/L±11.62μg/L vs 118.28μg/L±16.13μg/L,P<0.05).Examined by Rldit,BOL could reduce thedegeneration and necrosis of liver cells(X~2=11.99P<0.05),the degree of fibre hyperplasia(X~2=13.24P<0.05)and the pathological change of ultra micro-structure as well.CONCLUSION:The BOL has certain therapeutic effect on theexperiment hepatoflbrosis.Its mechanisms might include:protecting the function of liver cells,inhibiting excessivesynthesis and ascretion of extracelluar matrix from hepaticatellete cells,relieving the capillarization of hepaticsinusold,Improving liver micro-clrculation,and regulatingimmune function.     

Serum matrix metalloproteinase-1 in patients with chronic viral hepatitis

BACKGROUND AND AIMS: Previously we found that serum matrix metalloproteinase (MMP)-1 activity decreased with progression of chronic liver disease. Our objectives in the present study were to observe the change in the serum MMP-1 protein concentration using recently developed specific enzyme immunoassays for MMP-1 and MMP-1 complexed with tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP)-1 and to elucidate the clinical usefulness of the serum MMP-1 test in chronic viral hepatitis. We measured the serum concentrations of MMP-1 and MMP-1/TIMP-1 complex using these immunoassays in 64 patients with histologically characterized chronic viral hepatitis. RESULTS: Serum MMP-1 concentration was inversely related to the histological severity of chronic hepatitis (P< 0.0001). It was closely associated with the histological degree of periportal necrosis (P< 0.0001), intralobular necrosis (P< 0.005), portal inflammation (P<0.0001) and liver fibrosis (P< 0.05). The serum concentration of MMP-1/TIMP-1 complex was also related to the histological severity of chronic hepatitis (P< 0.0001). It was associated with the degree of portal inflammation (P< 0.05), but not with the degree of periportal necrosis, intralobular necrosis or liver fibrosis. As serum MMP-1 level was closely associated with the histological degree of necroinflammation, we examined the ability of the serum MMP-1 test to differentiate active and inactive forms of hepatitis with a receiver operating curve. The results were compared with those of serum procollagen type III N-peptide (PIIINP) test. We found that the serum MMP-1 test was superior to the serum PIIINP test in assessing liver necroinflammation. CONCLUSIONS: In addition to the previously reported changes in enzyme activity, MMP-1 proteins in serum decreased during histological progression of chronic hepatitis. The serum MMP-1 test may be useful clinically to differentiate active and inactive types of hepatitis in patients with chronic viral hepatitis.     

慢性肝损伤致肝纤维化过程中微小RNA200家族的表达

目的观察肝组织中微小RNA200(miR-200)家族成员在慢性肝损伤致肝纤维化过程中表达变化并探讨其机制。方法雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,分别在2、4、6、8周处死大鼠测定肝脏指数、血清ALT、AST含量,观察肝组织病理改变,Real-time PCR检测肝组织miR-200a、b、c、141、429mRNA表达变化。结果模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT、AST含量显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显,8周模型组肝组织中miR-200a、b、c、141、429mRNA表达较正常组显著增加(P<0.05)。结论 miR-200s在慢性肝损伤致肝纤维化过程中的表达变化,提示其参与慢性肝损伤及肝纤维化的发生发展。     

温阳解毒化瘀方对肝衰竭大鼠内毒素血症的影响

目的:动态观察温阳解毒化瘀方对肝衰竭大鼠内毒素血症(ITEM)的影响。方法:将85只SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组(予乳果糖+三联活菌溶液)及温阳解毒化瘀颗粒组(实验组),采用D-半乳糖胺(D-gal)腹腔注射致肝衰竭ITEM大鼠模型。正常组在腹腔注射生理盐水12小时后处死,其余各组分别于造模后12小时、24小时各取10只大鼠处死,检测各组大鼠血清转氨酶(ALT、AST)、肝组织病理学、门静脉及结肠内毒素水平。结果:模型组12小时时ALT和AST较正常组升高(P<0.05),24小时时门静脉及结肠内毒素水平明显升高(P<0.01),肝组织大面积坏死;实验组及对照组在造模后12小时各观察指标与模型组比较,差异无显著性意义,造模后24小时两组ALT和AST、门静脉及结肠内毒素水平较模型组降低(P<0.05),肝组织病变减轻。结论:D-gal腹腔注射可建立大鼠肝衰竭ITEM模型,温阳解毒化瘀方可通过降低门静脉及结肠内毒素水平减轻ITEM而达到抗肝衰竭的效应。     

丹参对原位肝脏隔离灌注区域性化疗所致细胞免疫抑制和肝脏损害的防护作用

目的:观察丹参对原位肝脏隔离灌注区域性化疗所致细胞免疫抑制和肝脏损害的防护作用。方法:用大剂量5-氟脲嘧啶原位肝脏隔离灌注技术行犬区域性化疗,观察静脉全身给药组、原位肝脏隔离灌注对照组、原位肝脏隔离区域性化疗组及丹参组等不同组别对犬外周血细胞免疫功能的影响、肝细胞损害及丹参的防护作用。结果:肝脏隔离灌注区域性化疗对实验动物的细胞免疫抑制作用明显小于同等剂量的静脉给药组,而且恢复快;丹参组细胞免疫功能(T、B、NBT、淋转等)明显高于区域性化疗组(P<0.05);丹参组犬血清MDA水于明显低于区域性化疗组(P<0.05)。结论:丹参对原位肝脏隔离灌注区域性化疗所致的细胞免疫和肝脏损害具有防护作用。     

萎胃散治疗大鼠慢性萎缩性胃炎实验研究

目的探讨萎胃散治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)的疗效及其机制.方法用主动免疫、乙醇、去氧胆酸钠及热糊灌胃同时进行的综合方法,制成大鼠CAG模型.造模后治疗组以萎胃散大、小剂量治疗60d,观察指标以胃粘模固有腺体萎缩程度为依据.对照组仅予生理盐水灌胃.结果治疗组的CAG病变数量明显减少,病理检查可见腺体恢复正常.治疗组与模型组(不给药治疗)比较有显著性差异(P＜0.05).结论萎胃散的应用可使胃粘膜同有腺体增多,有良好的治疗CAG的作用.