粉防己碱对人增殖性瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用

目的：探讨粉防己碱对人增殖性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法：取手术切除的人增生性瘢痕组织标本,分离培养成纤维细胞,加入不同浓度粉防己碱进行干预,MTT比色法检测各组瘢痕成纤维细胞增殖效应。结果：粉防己碱药物浓度由5μg／ml升至80μg／ml时,瘢痕成纤维细胞增殖活性逐渐降低,呈明显剂量依赖性。结论：粉防己碱对人增殖性瘢痕成纤维细胞增殖具有明显抑制作用。     

粉防己碱抑制瘢痕成纤维细胞诱导胶原基质的收缩

采用成纤维细胞三维培养方法观察了粉防己碱对人瘢痕成纤维细胞诱导胶原基质收缩的影响，结果表明粉防己碱１μｇ／ｍｌ、４μｇ／ｍｌ能有效地抑制体外瘢痕成纤维细胞与胶原基质网的收缩，呈剂量效应关系     

粉防己碱对转化生长因子β促瘢痕胶原基质收缩效应的阻断作用

目的 :研究粉防己碱对转化生长因子 β促瘢痕胶原基质收缩效应的作用。 方法 :将瘢痕成纤维细胞、胶原基质和转化生长因子 β共同构成体外瘢痕实验模型 ,观察粉防己碱对其收缩指数的影响。结果 :粉防己碱对转化生长因子β促瘢痕胶原基质收缩具有阻断作用 ,并呈剂量依赖关系。结论 :这一效应可能是粉防己碱抗瘢痕纤维化的机制之一。     

粉防己碱对人皮肤成纤维细胞生长的抑制作用观察

观察粉防己碱对体外培养人皮肤成纤维细胞生长的影响。结果表明：粉防己碱能抑制成纤维细胞生长，抑制作用与浓度、时间呈正相关。据此结果，作者认为粉防己碱在增生性瘢痕的防治中有应用价值。     

粉防己碱对转化生长因子β促瘢痕胶原基质收缩效应的阻断作用

目的 :研究粉防己碱对转化生长因子 β促瘢痕胶原基质收缩效应的作用。 方法 :将瘢痕成纤维细胞、胶原基质和转化生长因子 β共同构成体外瘢痕实验模型 ,观察粉防己碱对其收缩指数的影响。结果 :粉防己碱对转化生长因子β促瘢痕胶原基质收缩具有阻断作用 ,并呈剂量依赖关系。结论 :这一效应可能是粉防己碱抗瘢痕纤维化的机制之一。     

粉防己碱抑制瘢痕形成机理的研究

目的：探讨粉防己碱对瘢痕形成的抑制作用及其机理。方法：采用瘢痕成纤维细胞体外培养和兔实验性瘢痕模型,观察粉防己碱对瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。结果：体外实验粉防己碱组^3H－TdR掺入率和^3H－脯氨酸掺入率均较对照组明显降低,呈剂量依赖关系;动物实验粉防己碱能明显减少瘢痕组织中成纤维细胞的数量,降低胶原面密度,减轻瘢痕纤维化程度。结论：粉防己碱对瘢痕成纤维细胞过度增殖和胶原沉积具有抑制作用,可能是其抗瘢痕纤维化的主要机制之一。     

甲基莲心碱在体外对瘢痕成纤维细胞生长的影响

目的：研究甲基莲心碱（neferine,Nef）对瘢痕成纤维细胞增殖的影响，探讨Nef应用于临床治疗增生性瘢痕的可能性，方法：对人增生殖性瘢痕进行体外培养，观察其形态学和生长特征；采用MTT比色法测定Nef对细胞的增殖抑制率。结果：Nef浓度10－100μg/mL时，成纤维细胞的形态发生改变，增殖受到抑制，并呈现明显的剂量依赖性，结论：Nef是瘢痕成纤维细胞生长的负性调节因子，有望在增生性瘢痕的防治中发挥作用。     

高三尖杉酯对成纤维细胞增殖、凋亡及TGF-β1/Smad信号通路的影响北大核心

目的:探讨高三尖杉酯碱通过TGF-β1/Smad信号通路对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)增殖及凋亡的影响.方法:取第4代对数生长期的HKF细胞,随机分为空白对照组、高三尖杉酯碱组、TGF-β1组、高三尖杉酯碱+TGF-β1组,各组细胞给予相应药物孵育后,CCK-8检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR检测Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA表达,蛋白印迹法检测TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:与对照组比较,高三尖杉酯碱组细胞存活率、侵袭细胞数、划痕愈合百分比显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,ColⅠ、Col Ⅲ、TGF-β1 mRNA及p-Smad2、p-Smad3、Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.05).TGF-β1组上述指标变化趋势与高三尖杉酯碱组相反,除存活率外与对照组比较差异均有统计意义(P＜0.05).高三尖杉酯碱+TGF-β1组上述指标介于高三尖杉酯碱组和TGF-β1组之间,与高三尖杉酯碱组及TGF-β1组比较差异均有统计意义(P＜0.05).结论:高三尖杉酯碱可抑制HKF细胞增殖,诱导凋亡,降低细胞迁移和侵袭能力,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关.     

小檗碱对高糖诱导心肌成纤维细胞增殖、胶原合成及Akt激活的影响

目的:探讨小檗碱对高糖诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及Akt激活影响。方法:分离新生乳鼠心肌成纤维细胞,MTT法检测不同浓度小檗碱(10⁴0μM)对高糖(25 mM)诱导心肌成纤维细胞增殖的影响。采用qPCR法检测大鼠心肌成纤维细胞纤连蛋白(FN)的表达。采用Western blot法检测大鼠心肌成纤维细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Akt的表达。结果:25 mM高糖刺激48 h后心肌成纤维细胞的细胞增殖显著增加,FN、PCNA、p-Akt表达升高,小檗碱以剂量依赖性方式抑制高糖诱导上述指标的改变。结论:小檗碱可以通过抑制高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,其机制可能与抑制Akt有关。     

瑞香狼毒提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞抑制作用的研究

 目的观察瑞香狼毒提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用,为烧伤后增生性瘢痕的治疗提供实验依据。方法体外培养烧伤后的人增生性瘢痕成纤维细胞,加入不同浓度的瑞香狼毒提取物,24h后观察细胞形态学,以乳酸脱氢酶(LDH)为指标观察细胞毒性,用MTT法检测其增殖活性。结果不同浓度的瑞香狼毒提取物均能改变成纤维细胞形态,抑制细胞增殖,浓度在500μg·mL^-1以下无明显的细胞毒作用。结论瑞香狼毒提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞具有抑制作用,并呈剂量依赖关系,具有防治增生性瘢痕的应用前景。     

塔斯品碱对大鼠皮肤创伤和对成纤维细胞增殖及分泌的影响

目的:观察塔斯品碱(TA)对大鼠皮肤创伤愈合的作用及对成纤维细胞增殖和分泌生长因子的影响,探讨其促愈合作用机制.方法:建立大鼠皮肤损伤模型,采用组织学的方法评价愈合质量;体外培养L929成纤维细胞,MTT法观察TA对成纤维细胞增殖的影响,ELISA法测定TA对成纤维细胞分泌转化生长因子-β1(TGF-β1)及表皮生长因子(EGF)的影响.结果:TA 3.0和1.5 mg/ml溶液外涂对实验性大鼠皮肤损伤有加速修复作用;体外实验表明,0.05～0.4μg/ml TA可明显增加成纤维细胞对TGF-β1和EGF的分泌,其作用呈剂量依赖性,而对成纤维细胞的增殖无明显影响.结论:TA具有促伤口愈合作用,其作用可能与促进成纤维细胞分泌TGF-β1和EGF有关.     

黑布药膏对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨黑布药膏对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖与凋亡的影响。方法:成年大耳白兔24只,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,21 d后,将瘢痕动物模型随机分为黑布药膏治疗组和瘢痕模型组,在黑布药膏治疗组瘢痕局部涂抹黑布药膏,每3 d 1次,连续用药56 d。在用药第2,4,6,8周分别切取两组瘢痕组织,对比研究在瘢痕形成过程中黑布药膏对兔耳瘢痕成纤维细胞的影响,采用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达和细胞凋亡的原位检测。结果:按不同时间段取材进行免疫组化染色,高倍镜下观察,结果显示:黑布药膏治疗组和模型对照组比较,PCNA蛋白表达明显减弱(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05)。结论:黑布药膏可抑制兔耳增生性瘢痕成纤维细胞的增殖过程,诱导细胞凋亡。黑布药膏可抑制兔耳增生性瘢痕组织增生。     

姜黄素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用研究

目的:观察姜黄素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用。方法:取新西兰大白兔12只,随机分为4组,空白组(A组)、模型组(B组)、姜黄素组(C组)和地塞米松组(D组),除空白组外,其余各组建立兔耳增生性瘢痕模型,瘢痕上皮化后C、D两组分别涂抹姜黄素软膏、地塞米松软膏,B组不予特殊处置。连续用药28 d后对各组瘢痕进行大体观察及组织学观察;考察各组瘢痕的瘢痕增生指数(HI)、成纤维细胞密度(NA);增殖细胞核抗原蛋白(Ki-67)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果 C、D两组与B组比较,瘢痕体积明显缩小,质地变软,颜色变浅,有向A组转化的倾向;HE结果显示,C、D组中胶原纤维排列较B组规则,成纤维细胞(Fb)数目明显减少;HI及NA方面,C、D组明显低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05),但C、D两组比较无明显差异(P>0.05);免疫组化结果表明,Ki67及α-SMA在B组中大量表达,而在C、D两组中表达量减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素能有效改善瘢痕组织内纤维过度沉积的现象,其可通过抑制Fb的增殖及向肌成纤维细胞(MFb)的转化来抑制...     

苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的体外抑制作用

组织损伤修复是人体自我保护的一个正常病理过程,而过度修复则会出现组织纤维化,影响组织、器官的正常功能,人增生性瘢痕是创伤过度修复的异常结果。苦参碱(matrine,Mat)广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中,近年研究发现其具有较强的抗组织纤维化作用[1],目前关于Mat对人增生性瘢痕成纤维细胞(下文简称为成纤维细胞)作用的报道较少。本实验以成纤维细胞为靶细胞观察不同质量浓度的Mat在体外对该细胞增殖的影响,并对其抗纤维化作用机制进行初步研究。1材料与仪器苦参碱标准品(中国药品生物制品检定所提供);DMEM培养基(Gibco公司产…     

水杉总黄酮对IGF1诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:探讨水杉总黄酮(TFM)对胰岛素样生长因子1(IGF1)诱导的体外培养的乳鼠心肌成纤维细胞DNA和RNA合成以及胶原合成的影响。方法:IGF1诱发培养乳鼠心肌成纤维细胞肥大,采用DNA、RNA定量检测及3H-脯氨酸掺入量的检测,对成纤维细胞在分子水平进行实验观察。结果:IGF1可诱导心肌成纤维细胞DNA和RNA含量及胶原合成率明显增多,与正常组比较均有显著性差异(P<0.05),而TFM可使IGF1诱导的上述指标的变化均明显下降(P<0.05)。结论:水杉总黄酮可抑制IGF1诱导的乳鼠心肌成纤维细胞的增生和胶质合成。     

氧化苦参碱对人瘢痕成纤维细胞前胶原及纤维粘连蛋白表达的影响

目的 研究氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人病理性瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原(procollagen Ⅰ, Ⅲ, PCⅠ, PCⅢ)、纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)及基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase,MMP-1)表达的作用,并与瘢痕治疗常规药物氢化可的松(hydrocortisone,HC)进行比较。方法 采用组织块培养法培养原代瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast,KFb)、增生性瘢痕成纤维细胞(hyperplastic scar fibroblast,HFb)和正常皮肤成纤维细胞(normal fibroblast,NFb),分别使用OM (500 μg/mL)、HC(2 μg/mL)作用于KFb、HFb和NFb,RT-PCR法检测3种成纤维细胞PCⅠ、PCⅢ、FN及MMP-1 mRNA表达及其药物干预后的变化。结果 正常条件下,与NFb比较,KFb、HFb的PCⅠ mRNA表达分别增加31.7%和34.2% (均P<0.05),且KFb的PCⅢ mRNA表达增加44.9%(P<0.01)。药物干预后,OM使HFb的FN及PCⅠ mRNA表达量分别减少18.8%和23.6%(均P<0.05);HC使HFb的FN及PCⅠ mRNA表达量分别减少26.8%和43.6%(P<0.05,P<0.01);OM还使KFb的MMP-1 mRNA表达量增加21.8%(P<0.05)。结论 OM可能通过抑制病理性瘢痕成纤维细胞PCⅠ和FN mRNA表达而减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的合成;与HC比较,OM还可通过诱导KFb的MMP-1 mRNA表达增加以促进ECM的降解,因而具有潜在的治疗病理性瘢痕的作用。     

氧化苦参碱对转化生长因子 β1 诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖与分化的抑制作用

目的:观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OM)干预对转化生长因子β1 (Transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的SD大鼠心肌成纤维细胞(Cardialfibroblasts,CFs)增殖、分化的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:体外培养新生大鼠CFs,分离纯化后分为对照组(使用无血清DMEM培养)、TGF-β1组(单纯TGF-β1诱导)和观察组(使用TGF-β1加OM干预) 3组。MTT法检测CFs增殖情况,ELISA法检测Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ,CoL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅲ,CoL-Ⅲ)含量,RT-PCR法检测Smad2 mRNA表达,Westorn blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad2及Smad3蛋白表达情况。结果:与对照组比较,TGF-β1组CFs增殖水平、CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ、PCNA、α-SMA、Smad2 mRNA及Smad2/3蛋白表达均明显升高(P 0.05);与TGF-β1组比较,观察组上述指标均降低(P 0.05),除CoL-Ⅰ外,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:OM能够明显抑制TGF-β1诱导CFs增殖、分化水平,降低胶原蛋白的合成水平,作用机制与其能够干预Smad2及Smad3蛋白表达有关,具有临床应用价值。     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BB mRNA基因表达的影响

目的观察清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞转化生长因子-β1（TGF—β1）、血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）mRNA基因表达的影响。方法以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,制备清肺口服液含药血清,作用于该细胞,另设正常细胞组、病毒对照组、利巴韦林组,采用原位杂交法检测TGF—β1、PDGF—BB mRNA基因的表达,进行各组间比较。结果病毒对照组较正常细胞组的TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达均明显升高（P〈0．01）,含药血清组对3I、7b型攻击后的TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达均有显著降低作用（P〈0．01）。结论清肺口服液可下调TGF—β1、PDGF—BB mRNA表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

五倍子瘢痕膏水溶液对瘢痕疙瘩成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原基因表达的影响

目的探讨五倍子瘢痕膏治疗瘢痕疙瘩的作用机理。方法采取瘢痕疙瘩成纤维细胞原代培养,通过核酸斑点杂交实验观察不同浓度药物对原代培养的第7～8代瘢痕疙瘩成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原基因表达的影响。结果对Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA的表达,大、中剂量药物组与对照组比较有非常显著性差异(P0.01),而小剂量组与对照组比较无显著性差异(P0.05),对Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA的表达大剂量组和小剂量组均有显著性差异(P0.05)。药物对瘢痕疙瘩成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达的抑制作用与药物剂量有一定的依赖关系。结论五倍子瘢痕膏水溶液能在Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的转录水平上影响瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原的合成,从而减少瘢痕疙瘩组织中胶原的大量沉积。     

血府逐瘀汤对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:探讨血府逐瘀汤对心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响,为血府逐瘀汤防治多种由于心肌成纤维细胞增殖而导致的心脏疾病提供理论依据。方法:采用直接加药和血清药理学方法观察血府逐瘀汤对心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响。结果:1:80稀释的1 g/ml血府逐瘀汤与含10％血府逐瘀汤鼠血清已经对心肌成纤维细胞增殖有抑制作用,同对照组比较具有显著性差异(P<0.05);1:80稀释的1 g/ml血府逐瘀汤能显著抑制心肌成纤维细胞分泌胶原,达17.9％。结论:血府逐瘀汤不仅能够抑制心肌成纤维细胞增殖,而且具有抑制心肌成纤维细胞分泌胶原的作用,血府逐瘀汤具有抗心肌纤维化的作用。