辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎大鼠血清NO和鼻粘膜iNOS表达的影响

目的：探讨辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）大鼠血清一氧化氮（NO）及鼻粘膜诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的影响。方法：40只大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、实验组，用卵清蛋白建立变应性鼻炎大鼠模型，通过对造模的大鼠灌服辛芷鼻敏胶囊及与同类药物对照，用酶法检测血清一氧化氮水平及逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）半定量测定鼻粘膜诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达。结果：实验药物组的血清NO的水平和iNOsmRNA的表达明显低于模型组及阳性对照组（p〈0．05）。结论：辛芷鼻敏胶囊可能通过降低鼻粘膜iNOSmRNA的表达及血清NO含量，抑制大鼠AR发病过程NO的合成，进而减少嗜酸粒细胞（Eosinophil，EOS）的浸润而改善症状。     

克鼻敏汤剂对实验性变应性鼻炎大鼠细胞因子水平的调节作用

研究中药复方克鼻敏汤剂对实验性变应性鼻炎大鼠的治疗作用,并初步探讨其机制。用卵清蛋白致敏大鼠制作变应性鼻炎动物模型,并经灌胃克鼻敏进行预防性治疗。观察变应性鼻炎大鼠行为学改变;组织病理学方法观察鼻黏膜改变;采用ELISA法检测血清总IgE、卵清蛋白特异性IgE和细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-5水平。结果发现与模型对照组比较,克鼻敏治疗组行为学积分、血清总IgE和特异性IgE含量,IL-4和IL-5水平均明显下降(P<0.01);血清IL-2和IFN-γ明显升高(P<0.01)。克鼻敏治疗组与药物对照组和正常对照组比较,IFN-γ、IL-4和IL-5水平均无显著性差异,但克鼻敏治疗组行为学积分、血清总IgE和特异性IgE含量及IL-2水平均高于药物对照组和正常对照组。克鼻敏治疗组与强的松治疗组比较各项观测指标均无显著性差异。研究结果提示中药复方克鼻敏汤剂可通过调节细胞因子表达,下调IgE的产生达到对实验性变应性鼻炎的治疗目的。     

克鼻敏汤对变应性鼻炎患者血清Th1、Th2细胞因子的影响

目的 :观察克鼻敏汤对变应性鼻炎 (AR)患者血清Th1、Th2细胞因子的影响 ,以探讨其治疗机制。方法 :6 0例AR患者随机分为克鼻敏汤治疗组 (TG)和辛芳鼻炎胶囊对照组 (CG)进行治疗 ;收集治疗前后空腹血清标本 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)对血清中Th1细胞因子IFN γ、IL 2、IL 12、和Th2细胞因子IL 4、IL 5、IL 10进行检测 ;并与健康对照组进行比较。结果 :AR患者血清IL 4、IL 5、IL 10等Th2细胞因子水平明显高于正常 ;而IFN γ、IL 2、IL 12等Th1细胞因子水平明显低于正常(P <0 0 1)。经克鼻敏汤治疗后血清IL 4、IL 5、IL 10等Th2细胞因子水平较治疗前明显下降 (P <0 0 1) ;IFN γ、IL 2、IL 12等Th1细胞因子水平较治疗前有明显增高 (P <0 0 5 )。而对照组无明显变化 (P >0 0 5 )。结论 :克鼻敏汤通过调节Th1和Th2细胞因子的表达 ,纠正失衡的Th1 Th2的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用     

益骨胶囊含药血清对大鼠成骨细胞IL-6 mRNA及其蛋白表达的影响

目的：从mRNA及蛋白水平探讨益骨胶囊含药血清对成骨细胞表达IL-6的影响。方法：分离、培养新生SD大鼠成骨细胞，传代后分为3组即含药血清组；空白血清组；DMEM组。采用RT-PCR法检测IL-6 mRNA相对表达量，用放射免疫法检测成骨细胞培养上清中的IL-6含量。结果：益骨胶囊含药血清组IL-6 mRNA相对表达量显著低于对照组（P<0.05）；益骨胶囊含药血清组IL-6蛋白表达量也低于对照组（P<0.05）。结论：益骨胶囊含药血清能下调成骨细胞IL-6 mRNA 表达；亦能在蛋白水平降低成骨细胞分泌骨吸收因子IL-6，这可能是益骨胶囊防治骨质疏松症的机制之一。     

长期吸入糖皮质激素对支气管哮喘患者血清leptin、IL-13和IL-2水平的影响

目的:观察支气管哮喘患者血清leptin、IL-13和IL-2水平的变化并探讨长期吸入糖皮质激素后对支气管哮喘患者血清leptin、IL-13和IL-2的影响.方法:4采用酶联免疫吸附法(ELISA),分别检测70例支气管哮喘患者采用吸入糖皮质激素治疗前、治疗3、6、12个月后及60例对照者血清IL-13和IL-2水平...     

IL-13对成纤维细胞IL-13受体和IL-4受体表达的影响

目的研究IL-13对人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2 IL-13受体和IL-4受体表达的调节作用。方法 RT-PCR法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2 mRNA的表达;凝胶电泳定量软件Image Tool2.0对RT-PCR电泳条带进行光密度分析;ELISA法检测HFL-1细胞株和LX-2细胞株分泌可溶型IL-13Rα2以及检测细胞裂解液总IL-13Rα1、IL-4R和IL-13Rα2含量。结果 IL-13(5～100 ng/ml)对HFL-1细胞株和LX-2细胞株表达IL-13Rα1和IL-4R无影响;IL-13为5、10、20 ng/ml时能诱导HFL-1细胞株表达IL-13Rα2并呈现剂量依赖,当IL-13为50 ng/ml时,对HFL-1细胞株IL-13Rα2表达的诱导作用明显减弱,IL-13 100 ng/ml组没有检测到HFL-1细胞株IL-13Rα2的表达;LX-2细胞株IL-13Rα2表达缺失且IL-13不能诱导LX-2细胞株表达IL-13Rα2。结论 IL-13不能上调人肺成纤维细胞株HFL-1和人肝星状细胞株LX-2表达功能型受体IL-13Rα1和IL-4R,表明IL-13不能通过上调IL-13Rα1和IL-4R表达量来放大自身作用;一定浓度的IL-13能诱导人肺成纤维细胞株HFL-1表达抑制型受体IL-13Rα2,表明IL-13的自身负调控。     

川芎嗪对CIA大鼠足爪组织MMP-13蛋白表达及血清VEGF、IL-17和IL-23水平的影响

 目的： 探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP)治疗胶原性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠的可能机制。方法：采用Ⅱ型胶原诱导CIA大鼠模型。随机分为正常对照组、模型组与药物处理组,用免疫组化染色法和Western blotting分析检测足爪组织中基质金属蛋白酶（MMP）-13蛋白的表达;HE染色观察不同剂量的TMP对CIA大鼠足爪组织病理学变化的影响;ELISA法检测CIA大鼠血清中VEGF、IL-17和IL-23的含量。结果：与CIA组相比,CIA+TMP (100 mg·kg-1)组大鼠体重明显回升（P<0.01）,足爪组织胞浆中MMP-13蛋白表达降低了31.82%（P<0.01）,大鼠足爪皮下组织病理改变明显减轻,血清中VEGF、IL-17和IL-23的含量分别降低了33.33%、27.40%和33.33%（P<0.01）。结论：TMP(100 mg·kg-1)对CIA大鼠炎症有明显的抑制作用,其机制可能与其下调MMP-13蛋白表达,抑制炎症细胞浸润及血管增生,降低VEGF、IL-17和IL-23的产生有关。     

Wortmannin对糖尿病肾病大鼠肾组织IL-1与IL-6表达的影响

目的研究糖尿病肾病(DN)大鼠模型经静脉注射PI3K抑制剂Wortmannin后肾组织白介素-1(IL-1)与白介素-6(IL-6)表达的变化。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为假手术组(10)、模型组组(10)和Wortmannin处理组(10)。参照Anderson's方法制作糖尿病肾病大鼠模型。采用Western blot方法检测三组大鼠肾组织IL-1与IL-6蛋白的表达;RT-PCR方法检测三组大鼠肾组织IL-1m RNA与IL-6m RNA的表达。结果模型组与Wortmannin处理组肾组织IL-1与IL-6蛋白和m RNA的表达量均显著高于假手术组(0.05),而与模型组相比,Wortmannin处理组肾组织IL-1与IL-6蛋白和m RNA的表达量明显降低(0.05)。结论 PI3K抑制剂Wortmannin能够下调DN大鼠肾组织IL-1与IL-6的表达。     

雷帕霉素对糖尿病大鼠肝组织IL-1与IL-6表达的影响

目的研究糖尿病(DN)大鼠模型经静脉注射PI3K抑制剂雷帕霉素后肝组织白介素-1(IL-1)与白介素-6(IL-6)表达的变化。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠60只,随机分为对照组(20)、糖尿病组(20)和雷帕霉素组(20)。采用高脂饲料喂养和小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔内注射方法,建立2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝动物模型。评价各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平,采用免疫组织化学方法和Western blot方法检测三组大鼠肝组织IL-1与IL-6蛋白的表达。结果糖尿病组大鼠血清ALT、AST、TG、CHO、LDL-C水平比对照组显著升高,而雷帕霉素组比糖尿病组显著降低(P0.01)。糖尿病组大鼠肝组织IL-1与IL-6蛋白的阳性表达量比对照组显著升高,而雷帕霉素组比糖尿病组显著降低(P0.01)。结论雷帕霉素改善2型糖尿病大鼠肝功能可能与下调IL-1与IL-6的表达相关。     

地塞米松对水通道蛋白1、4、5在大鼠变应性鼻炎鼻黏膜中表达的影响及意义

目的:确定水通道蛋白(AQPs)在大鼠变应性鼻炎时鼻黏膜上的表达及分布,并观察地塞米松对AQPs表达的影响,探讨AQPs与变应性鼻炎时水液分泌的关系.方法:健康SD大鼠随机分成空白组、假处理组、模型组、干预组,组织化学方法观察各组组织形态学特征,免疫组织化学方法(SP法)检测各组AQPs的表达并进行比较.结果:AQP1在血管内皮细胞、成纤维细胞中表达较强;AQP4表达于上皮细胞和上皮内腺上皮细胞及部分上皮下的腺上皮细胞;AQP5在上皮下部分腺上皮细胞成簇表达.经地塞米松处理后,AQP1、4、5的表达均有明显变化,仅AQP4在干预组间的表达并无明显改变.结论:AQP1、4、5在大鼠鼻黏膜上有不重叠表达;地塞米松能调节AQPs在鼻黏膜上的表达.     

Modulation of neurotrophin and neurotrophin receptor expression in nasal mucosa after nasal allergen provocation in allergic rhinitis

Background: Patients with allergic rhinitis (AR) feature both allergic airway inflammation and a hyperresponsiveness to nonspecific stimuli which is partly neuronally controlled. Still, it is unclear whether or not neurotrophins are involved in airway pathophysiology of AR and in nasobronchial interaction. Methods: Nine AR patients with mono‐allergy to grass pollen and nine healthy controls underwent nasal allergen provocation (NP). Serum samples, nasal and bronchial biopsies were taken before (T₀) and 24 h after (T₂₄) NP. Pan‐neurotrophin receptor p75^NTR, tyrosine kinase A (trkA), trkB, nerve growth factor (NGF), and brain‐derived neurotrophic factor (BDNF) were assessed with immunohistochemistry, and NGF and BDNF levels with ELISA. Results: At T₂₄, BDNF and NGF were upregulated in nasal mucosa (P < 0.05) and increased in the peripheral blood of AR compared with T₀. The increase in nasal BDNF expression correlated positively with the maximum increase in total nasal symptom score in AR (P = 0.02). p75^NTR was expressed on peripheral nerves and epithelial layer, trkA on endothelial cells, and trkB on mast cells. trkB + mast cells significantly decreased after NP in AR (P < 0.01). NP did not modulate p75^NTR and trkA expression in nasal mucosa and had no effect on the expression of neurotrophins and receptors in bronchial mucosa. Conclusion: This study shows that neurotrophins and their receptors are expressed in human airways. Allergic rhinitis was characterized by a modulation of BDNF, NGF, and trkB in nasal mucosa after NP and a correlation of nasal BDNF with the maximal increase of total nasal symptom score. Therefore, our data suggest that neurotrophins participate in upper‐airway pathophysiology in AR, whereas their role in nasobronchial interaction remains unclear.     

高迁移率族蛋白B1在变应性鼻炎中的表达及意义

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在变应性鼻炎患者鼻甲粘膜中的表达及意义。方法:收集12例变应性鼻炎患者下鼻甲鼻粘膜及11例单纯性鼻中隔偏曲患者下鼻甲粘膜(对照组),采用免疫组化方法和RT-PCR方法检测下鼻甲粘膜中HMGB1的表达。结果:HMGB1表达水平在变应性鼻炎患者鼻甲粘膜中的表达水平较对照组明显增高(P0.01)。免疫组化显示阳性表达主要位于粘膜固有层间质,变应性鼻炎患者鼻甲粘膜中荧光强度明显高于对照组(P0.001),HMGB1 mRNA水平(5.0±1.2)与蛋白水平都和鼻甲粘膜中成熟的树突状细胞数目成正相关(r=0.695和r=0.578,P0.01),HMGB1蛋白水平与鼻甲粘膜中嗜酸性粒细胞数目(40.0±3.1)成明显负相关(r=-0.547,P0.01)。结论:HMGB1可能通过作用于嗜酸性粒细胞和树突状细胞抑制变应性鼻炎的发展。     

Nerve growth factor localization in the nasal mucosa of patients with persistent allergic rhinitis

Background and objectives:  Nerve growth factor (NGF) and NGF receptors have been shown to be expressed by structural and infiltrating inflammatory cells in the human allergic bronchial mucosa and conjunctiva. In the nose, a positive immunostaining for NGF was recently reported in biopsies of subjects undergoing surgery for refractory nasal obstruction. This study was aimed at studying by immunohistochemistry NGF expression and localization in the nasal mucosa from subjects with moderate/severe persistent allergic rhinitis and natural allergen exposure.
Methods:  Immunostaining for NGF, tryptase and eosinophil cationic protein was performed in human nasal turbinate sections of 25 patients affected by persistent allergic rhinitis and sensitization to Dermatophagoides pteronyssinus .
Results:  NGF was consistently expressed in the epithelium and in the submucosa of allergic rhinitic subjects, preferentially localized in eosinophils and mast cells. A strong NGF immunostaining was found in mucous cells of the epithelial lining and in the submucosal glands.
Conclusions:  As previously shown for allergic asthma and allergic conjunctivitis, NGF is also detectable in the nasal mucosa of patients with persistent allergic rhinitis. The preferential NGF localization in mucous cells of the epithelial lining and in the submucosal glands suggests a possible role for NGF in modulating secretion in allergic rhinitis and possibly other allergic diseases.     

变应性鼻炎患者血清IL-17和IL-23的表达及临床意义

目的:检测变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者血清IL-17和IL-23的表达水平并探讨其临床意义。方法:检测25例AR患者(观察组)血清IL-17、IL-23、s Ig E(过敏原特异性Ig E)的表达水平,并以23名健康体检合格者(对照组)为对照,比较两组人群血清中IL-17、IL-23、s Ig E表达水平的差异,并探讨AR患者血清中IL-17、IL-23、s Ig E三者间的相互关系。结果:观察组患者血清中IL-17、IL-23及s Ig E水平均高于对照组(P均0.01);观察组患者血清中IL-17、IL-23、s Ig E三者两两之间均呈线性正相关关系(P均0.05)。结论:IL-17、IL-23参与了AR的发生发展过程,与s Ig E的形成可能有关。