098 TNFα在胰岛素抵抗发生机制中的作用

肿瘤坏死因子α(TNF α)是一种具有多种生物学功能的细胞因子，可由免疫细胞及非免疫细胞分泌，近来研究证实在大多数肥胖啮龄动物模型中脂肪组织中的TNF α表达增加。随着研究的不断进展，发现TNF α与葡萄糖代谢及脂代谢关系密切，并且在胰岛素信号转导、葡萄糖转运和外周组织胰岛素抵抗等方面发挥作用。本文拟就有关内容作一综述。     

TNFα在胰岛素抵抗发生机制中的作用

肿瘤坏死因子α(TNFα)是一种具有多种生物学功能的细胞因子 ,可由免疫细胞及非免疫细胞分泌 ,近来研究证实在大多数肥胖啮龄动物模型中脂肪组织中的TNFα表达增加。随着研究的不断进展 ,发现TNFα与葡萄糖代谢及脂代谢关系密切 ,并且在胰岛素信号转导、葡萄糖转运和外周组织胰岛素抵抗等方面发挥作用。本文拟就有关内容作一综述。     

肿瘤坏死因子α诱发胰岛素抵抗的机理

本文通过论述肿瘤坏死因子（TNF-α）对葡萄糖运载体，酪氨酸磷酸化，脂代谢及其他激素的影响，阐述TNF－α诱发胰岛素抵抗的机理。     

胰岛素、地塞米松、肿瘤坏死因子α能调节脂联素的表达和分泌

目的通过体外培养的3T3-L1脂肪细胞模型,研究胰岛素、地塞米松和肿瘤坏死因子α(TNFα)对脂肪细胞因子脂联素(Acrp30)的mRNA表达和蛋白分泌的影响。方法用150nmol/L胰岛素、100nmol/L地塞米松和10ng/ml TNFα刺激分化完全的3T3-L1细胞16h,提取细胞RNA,运用半定量RT-PCR技术检测Acrp30mRNA表达量的变化;另外,用同样浓度的胰岛素、地塞米松和TNFα刺激分化完全的3T3-L1细胞1、2、4、16h,用Western印迹技术检测Acrp30分泌的变化。结果胰岛素、地塞米松和TNFα均能下调Acrp30mRNA的表达;地塞米松和TNFα减少Acrp30的蛋白分泌;而胰岛素仅能瞬时刺激Acrp30的蛋白分泌,作用时间超过4h对Acrp30的分泌并无影响。结论血浆脂联素蛋白浓度在翻译后水平被调节,包括翻译和(或)分泌水平。     

胰岛素样生长因子1和胰岛素对人α1(Ⅰ)前胶原启动子活性的影响

目的 :探讨胰岛素样生长因子 1(IGF 1)和胰岛素对人α1(Ⅰ )前胶原 (COL1A1)基因启动子的调控作用及肿瘤坏死因子α(TNFα)、干扰素γ(IFNγ)、干扰素α(IFNα)对这一作用的影响。方法 :构建含COL1A1基因启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的重组体pCOLH0 2 7与pCOLH2 5 ,它们分别含该启动子序列 2 68～ 4 2bp( 0 2 7kb)与 2 4 83～ 4 2bp( 2 5kb)片段。将这 2个重组体瞬时转染人皮肤成纤维细胞 ,加入IGF 1或胰岛素 ,部分细胞还加入TNFα或IFNγ或IFNα,测定CAT活性。结果 :13nmol/LIGF 1使转染后的这 2个重组体活性分别增高 3 68倍与 4 0 4倍。 2 5 μmol/L的胰岛素亦使之分别增高 3 69倍与 3 93倍。TNFα、IFNγ、IFNα能降低IGF 1与胰岛素诱导的pCOLH2 5活性。结论 :IGF 1和胰岛素能在转录水平促进COL1A1基因的表达 ,TNF α、IFNγ、IFNα能抑制IGF 1和胰岛素的这一作用。     

肿瘤坏死因子α抑制肝细胞的线粒体呼吸

现已确认肿瘤坏死因子α(TNFα)的直接细胞毒作用是引起组织损害,但导致细胞死亡的细胞内变化仍不了解.文章研究了TNFα对正常实质细胞的细胞毒效应.选用Sprague-Dawley大鼠,用胶元酶灌注术取得肝细胞,离心后获得的肝细胞纯度大于90%,活细胞数大于85%.肝细胞用含胰岛素、L-谷氨酰胺、地塞米松等williams培养液培养,实验组在培养液中分别加入重组鼠TNFα、LPS、胰高血糖素或其     

胰岛素样生长因子1和胰岛素对人α1(Ⅰ)前胶原启动子活性的影响1

目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素对人α1(Ⅰ)前胶原(COL1A1)基因启动子的调控作用及肿瘤坏死因子α(TNFα)、干扰素γ(IFNγ)、干扰素α(IFNα)对这一作用的影响.方法构建含COL1A1基因启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH0.27与pCOLH2.5,它们分别含该启动子序列-268～+42bp(0.27kb)与-2483～+42bp(2.5kb)片段.将这2个重组体瞬时转染人皮肤成纤维细胞,加入IGF-1或胰岛素,部分细胞还加入TNFα或IFNγ或IFNα,测定CAT活性.结果13nmol/LIGF-1使转染后的这2个重组体活性分别增高3.68倍与4.04倍.2.5μmol/L的胰岛素亦使之分别增高3.69倍与3.93倍.TNFα、IFNγ、IFNα能降低IGF-1与胰岛素诱导的pCOLH2.5活性.结论IGF-1和胰岛素能在转录水平促进COL1A1基因的表达,TNF-α、IFNγ、IFNα能抑制IGF-1和胰岛素的这一作用.     

抗肝癌单链抗体融合TNFα导向作用的初步实验研究

目的 获得有效果的抗肝癌基因工程单链免疫细胞因子（TNFα）。方法 将抗肝癌单克隆抗体（mAb)HAb25的单链抗体（scFv25)与人TNFα基因偶联,构建抗肝癌免疫细胞因子（scFv25-TNFα,亚克隆人原核GST融合表达载体pGEX4T-1中,在大杆菌中进行表达。对肝癌细胞SMMC-7721涂片进行间接免疫荧光染色,测定纯化后目的蛋白的活性,通过对荷肝癌（SMMC-7721）裸鼠进行的初步抑瘤实验,检测scFv25-TNFα的导向治疗效果。结果scFv25-TNFα具有与亲本抗体HAb25类似的抗原结合特异性。scFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径2mm左右的肿瘤具有明确的导向杀伤作用,达到3/3完全缓解,明显强于TNFα对照组。该组有交待得只有2/3,且无完全缓解。结论 scFv250-TNFα为具有一定效果的抗肝癌双功能抗体。     

肿瘤坏死因子与急性心肌梗塞关系的探讨

肿瘤坏死因子α(TNFα)是由激活的巨噬细胞分泌的一种具有多种生物学效应的细胞因子,它参与介导人体多种疾病的发生和发展,最近研究发明,TNFα与急性心肌梗塞(AMI)的发生、发展及转归有关。本文通过动态观察AMI患者血清TNFα水平,以探讨TNFα与AMI的关系。     

绝经妇女外周血单个核细胞骨代谢调控因子表达变化

目的:探讨绝经妇女雌激素水平下降所致免疫细胞骨代谢调控因子变化。方法:纳入绝经妇女、未绝经妇女各30例,电化学发光法检测血清雌二醇(E2)水平;RT-PCR法检测外周血单个核细胞(PBMC)中雌激素受体(ERα、ERβ)、白细胞IL-6、TNFα-。核因子κB受体活化因子配基(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)mRNA表达;ELISA检测血清IL-6、TNFα-蛋白含量;双能X线骨密度仪检测腰椎2~4(L2-4)前后位骨密度(BMD)。结果:与未绝经组比较,绝经妇女E2水平明显下降,腰椎BMD显著降低(P<0.05),外周血单个核细胞ERα、ERβmRNA表达明显降低(P<0.05),IL-6、TNFα-、RANKL、RANKmRNA表达明显升高(P<0.05),IL-6及TNFα-血清蛋白含量明显升高(P<0.05)。相关性分析显示PBMC中ERα、ERβmRNA表达与血清E2水平、腰椎BMD呈显著正相关性(P<0.05),PBMC中IL-6、TNFα-、RANKL、RANKmRNA表达与血清E2水平、腰椎BMD呈显著负相关性(P<0.05)。结论:绝经后妇女雌激素水平下降伴随着外周血免疫细胞雌激素受体转录水平下降,同时,炎性骨吸收调控因子和溶骨性细胞因子表达升高,这种变化可能在绝经后骨丢失中发挥重要作用。     

肿瘤坏死因子α诱发胰岛素抵抗的机理

本文通过论述肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对葡萄糖运载体，路氨酸磷酸化，脂代和谢及其他激素的影响，阐述ＴＮＦ－α诱发胰岛素抵抗的机理。     

TNF-α介导的11-β羟类固醇脱氢酶1表达和活性变化对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响

目的：观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）介导的11-β羟类固醇脱氢酶1（11-β HSD-1）表达和活性变化对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响。方法:以TNF-α以及TNF-α分别与阿司匹林、2’-hydroxyflavanone和RU486联合作用3T3-L1脂肪细胞，然后检测细胞11-β HSD-1 mRNA表达和活性以及胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力。 结果:TNF-α增加3T3-L1脂肪细胞11-β HSD-1 mRNA表达和活性，同时降低细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。阿司匹林减轻了TNF-α对11-β HSD-1 mRNA表达和活性的上调作用，并减轻TNF-α对胰岛素刺激的葡萄糖摄取的抑制作用；11-β HSD-1活性特异抑制剂2’-hydroxyflavanone和皮质醇受体拮抗剂RU486也可减轻TNF-α对胰岛素刺激的葡萄糖摄取的抑制作用。结论:TNF-α可通过提高3T3-L1脂肪细胞11-β HSD-1的表达和活性而降低细胞对胰岛素的敏感性。     

肿瘤坏死因子在肝损伤中的作用及机理

肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-αTNF—α）是由单核巨噬细胞产生的一种具有广泛生物学活性的多肽介质。它一方面参与机体的免疫防御机能，另一方面则介导休克、炎症反应及组织损伤等病理过程。近年研究发现［1，2］：暴发性肝衰竭病人血清中TNF－α含量明显增高，尤其是合并感染及内毒素（enaotox－in，ET）血症者更高，并且其含量高低与预后相关，故认为TNF-a与暴发性肝衰竭时肝细胞坏死有关。本文就TNF－α在肝损伤中的作用及其机理作一简要综述。一、TNF-α为ET致肝损害的重要介质：关于ET与肝损害关系的研究已持续多…     

不明原因习惯性流产与肿瘤坏死因子水平及肿瘤坏死因子α-308基因多态性的相关性初步研究

目的 研究肿瘤坏死因子（TNF）水平及肿瘤坏死因子α-308基因多态性与不明原因习惯性流产的关系。方法 用放免法测定50例不明原因习惯性流产患者及50例健康对照者血清TNF水平，用聚合酶链反应扩增TNF-α-308基因片段，NcoI内切酶进行限制性酶切反应。结果 50例妊娠高血压综合征患者及50例正常对照TNF-α-308基因型及等位基因频率均无显著性差异，而血浆中TNF水平，不明原因习惯性流产组明显高于对照组（P〈0．05）。结论 炎性反应在不明原因习惯性流产病程中有重要作用，TNFα-308基因多态性与不明原因习惯性流产无关联。     

肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞组织因子基因表达及其机制的研究

目的；研究肿瘤坏死因子α（TNFα），血管紧张素Ⅱ（AngⅡ)对内皮细胞组织因子（TF）表达的影响，并探讨TF基因5‘上游序列在TNFα，AngⅡ诱导内皮细胞该基因转录中的调控作用。方法：应用细胞原位杂交技术检测TF mRNA水平。采用基因重组技术构建含有人TF基因不同上游序列荧光毒酶报告基因质粒，经脂质体法转染内皮细胞，检测及分析报告基因活性。结果：TNFα和AngⅡ均可以诱导内皮细胞TF mRNA的表达增强。在TF基因上游序列－244／＋121bp存在时，TNFα，AngⅡ均可使转梁内皮细胞荧光素酶表达量明显增加，而在－111／＋121bp存在时TNFα，AngⅡ组与对照组荧光素酶表达量均无明显差异，而且较－244／＋121bp存在时荧光素酶表达量明显降低。结论：TF基因上游－244／－112bp序列的存在对TNFα，AngⅡ诱导内皮细胞TF基因表达起重要的调节作用。     

TNFα刺激的星形胶质细胞条件培养液对海马神经元的兴奋作用(英文)

为了探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNFα)刺激的星形胶质细胞对神经元的作用,本研究将体外纯化培养的大鼠海马星形胶质细胞,用反相高效液相法测定TNFα刺激后细胞培养液内谷氨酸的含量;将TNFα刺激后的星形胶质细胞条件培养液(astrocytic conditioned medium,ACM)作用于培养的海马神经元,运用免疫细胞化学方法和图像分析技术研究神经元NF-κBp65和谷氨酸的表达。结果表明:(1)TNFα可明显促进星形胶质细胞释放谷氨酸,(2)ACM作用1 5 min即可诱导神经元NF-κBp65的核表达,30 min达高峰,180 min恢复至对照水平,(3)ACM作用60 min可使谷氨酸免疫反应阳性神经元平均光密度明显升高,持续至240 min。提示,TNFα刺激的星形胶质细胞可通过释放谷氨酸等可溶性物质使神经元快速激活、兴奋性升高。     

TNF—α基因多态性与慢性HBV感染研究进展

肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是人体重要的免疫调节因子，在炎症反应和免疫应答中起重要作用。研究发现，TNF—α基因启动子单核苷酸多态性影响TNF-α的表达。在HBV感染中，TNF-α主要是通过直接抑制病毒复制和间接调节宿主免疫应答发挥作用。TNF-α启动子区基因多态性必然导致不同HBV感染者外周血单个核细胞和肝组织TNF—α表达水平间的差异，从而与HBV的慢性持续感染相关。     

子宫内膜异位症与肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性与子宫内膜异位症的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测100例子宫内膜异位症及100例正常人肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性。结果TNFα-308G/A和TNFβG252A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论肿瘤坏死因子TNFα-308G/A和TNFβG252A基因多态性与子宫内膜异位症无明显相关。     

用干扰素α和内毒素诱导巨噬细胞产生肿瘤坏死因子

本文研究了用IFNα联合LPS诱导小鼠骨髓及腹腔巨噬细胞产生TNF的动态,通过抗TNF血清对TNF活性免疫吸收试验,证明巨噬细胞诱导培养上清引起L929细胞毒作用的因子为TNFα。结果证明:(1)HrIFNα和LPS在诱导骨髓和腹腔巨噬细胞产生TNF上有协同作用。(2)TNFα产生量以培养4hr为最高。(3)小鼠骨髓巨噬细胞为体外诱导TNF产生的较敏感细胞,适于分析各种诱导物诱导TNF产生的效力。     

肿瘤坏死因子α基因多态性与系统性红斑狼疮的相关研究

目的 探讨肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）α的基因多态性与华东地区汉族人群系统红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE)易感性的关系及其在SLE家系中的传递规律。方法 应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性对99例SLE患者，116名正常人及12个SLE家系的48名成员进行了TNFα基因分型。结果 SLE患者的TNFα等位基因频率高于对照组（8.6%vs3.4%,OR=2.63,P=0.00232)，在SLE家系研究中未发现TNFα基因多态性与SLE存在关联以及传递－连锁不平衡的证据。结论 TNFα2等位基因可能是SLE的易感等位基因。