交链孢酚和交链孢酚单甲醚诱发人淋巴细胞DNA损伤的研究

用从食管癌高发区林县严重污染粮食的链格孢(Alternaria alternata)培养物中分离纯化的交链孢酚(AOH)和交链孢酚单甲醚(AME)诱发正常人外周血淋巴细胞程序外DNA合成(UDS)。结果表明:AOH及AME均可不同程度地诱发UDS,并发现AOH比AME作用更强。结果提示,AOH及AME可引起人外周血淋巴细胞DNA损伤,其提示与食管癌发生可能有关。     

交链孢酚单甲醚对细胞免疫的影响

交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethylether,AME)是食管癌高发区林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉(亦称链格孢菌)的毒素之一。多年的研究证实,该毒素具有致突变性和致癌性。为了进一步探讨其对免疫     

交链孢酚单甲醚对人胚食管上皮的作用

用人胚食管上皮体外培养,经交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethyl ether,AME)处理后,食管上皮底层细胞比对照组的层次明显增多,细胞排列紧密紊乱,细胞核浆比增加,核不规则,大小不等.浓染,可见核分裂相,且有乳头状向内增生。该变化与甲基硝基亚硝基胍(MNNG)和甲基苯基亚硝胺(MPNA)所诱发的人胚食管上皮癌前病变相类似。结果提示,AME与人的食管癌发生很可能有关。     

交链孢酚单甲醚在大鼠小鼠体内的分布

对食管癌高发区粮食中分离的互隔交链孢霉的毒素交链孢酚单甲醚(AME)在大鼠、小鼠体内的分布进行研究。给动物腹腔内注射氚标记的交链孢酚单甲醚(~3H-AME),然后在不同时间测各脏器的放射性。结果表明:在所测9个脏器中,2h肝脏含量最高,食管下段在大小鼠分别居第四和第三。但大小鼠分别在72、24h则以食管下段最高,说明AME及其代谢物在此清除较慢,即对其有较高的亲和力。     

交链孢酚单甲醚对人胚肺2BS细胞DNA含量和细胞周期的影响

用显微分光光度计方法研究了食管癌高发区林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉提取物交链孢酚单甲醚(AME)对人胚肺成纤维细胞(2BS株)的DNA含量和细胞周期的影响。结果发现:AME作用人胚肺2BS细胞两个倍增时间后,随着AME浓度的加大,G_1期细胞峰(2C细胞)降低,出现了较高的G_2+M期细胞峰(4C细胞),S期细胞增加,分裂指数降低.并出现了一些非整倍体的细胞,这些改变与对照组相比较有显著性差异。说明AME可以抑制人胚肺2BS细胞的周期,使S期细胞受阻,堆积和损伤,导致非整倍体细胞出现,这些将有可能成为细胞突变的遗传基础。从而为互隔交链孢霉与林县人食管癌的发生可能有一定关系的说法提供了实验佐证。     

互隔交链孢霉毒素引起大鼠肝细胞DNA单链断裂的作用

应用碱性洗脱荧光分析法对互隔交链孢霉产生的两种主要毒素——交链孢酚单甲醚(Alternariol Monomethyl Ether.AME)和交链孢酚(Alternariol.AOH)引起大鼠肝细胞DNA单链断裂效应进行了研究。实验结果表明:二者都能引起大鼠肝细胞DNA单链断裂,并有明显的剂量效应关系.DNA在滤膜上的存留分数明显低于溶剂对照组.具有统计学意义(P<0.01)。结果提示AME和AOH有致突变作用,二者可能是林县食管癌的病因之一。     

交链孢酚单甲醚诱导大鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成的研究

对交链孢酚单甲醚(alternariol monamethyl ether,AME)诱导大鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成进行了实验研究。结果表明,AME在体内作用48h仍可以诱发大鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成率增高。     

四种香烟烟雾冷凝物对大鼠肺细胞程序外DNA合成的影响

用程序外DNA合成试验(Unscheduled DNA Synthesis,UDS)研究了四种市售香烟的烟雾冷凝物(Cigarette Smoke Condeinsate,CSC)对新鲜分离的大鼠肺细胞的DNA损伤作用。结果表明:四种CSC在一定浓度范围内均可诱发大鼠肺细胞的DNA损伤,与溶剂对照相比差异有极显著意义,并存在一定的剂量效应关系;而且进口555牌带普通醋酸纤维滤嘴香烟的CSC的损伤作用显著大于国产带普通醋酸纤维滤嘴和不带滤嘴香烟的CSC的作用。提示:CSC可诱发肺细胞的突变,吸烟与肺癌的发生可能有直接关系。     

食管癌患者淋巴细胞程序外DNA合成的研究

应用盐酸氮芥及N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),诱发食管癌患者、患者亲属及无癌家族正常健康人淋巴细胞程序外DNA合成(UDS),结果表明,食管癌患者,患者血缘亲属(子女)的UDS值比无癌家族史的正常健康人及食管癌家族共同生活无血缘关系的健康人(夫妻)低。这一结果提示,食管癌患者、患者子女DNA损伤修复功能有缺陷,这种缺陷可能与遗传易感性有关。     

交链孢酚单甲醚对人胚食管DNA结合作用的研究及其结合键型的鉴别

应用吸收光谱分析法研究了交链孢酚单甲醚(Alterariol Monomethyl Ether,AME)对人胚食管DNA之间的结合作用并对结合的键型作了鉴别。研究表明,AME和DNA在37℃条件下,二者的最大吸收峰向长波方向明显位移。而且在AME和DNA结合之间存在剂量效应关系。AME和人胚食管DNA结合的最大分子比例(以AME:脱氧—磷酸核苷计)为5:1000,结合反应的平衡常数K=2.8×10~6,结合作用发生迅速而稳定。结合部位可能在碱基,无明显的碱基特异性。热变性DNA能结合更多的AME分子,说明二者的结合不需要DNA具有完整的二级结构。盐离子可严重干扰二者的结合,而脲对此则不产生明显影响,提示AME与DNA结合的主要键型为离子键而不是氢键型。AME与人胚食管DNA这种以离子键结合的方式可能在AME的诱变性/致癌性中起重要作用。     

交链孢酚对人胎儿食管和胃上皮脂质过氧化的影响

采用硫队巴比妥酸试验测定丙二醛含量反映脂质过氧化程度。用林县粮食中分离的互隔交链孢霉的代谢物交链孢酚(AOH,体外攻击人胎儿食管及胃上皮后观察对相应组织脂质过氧化的影响,AOH可使4人胎儿食管及胃上皮丙二醛含量明显升高(P?0.01),其程度与AOH剂量有关,并随时间延长,其程度增高,4～5h达高峰、食管对AOH反应较胃强烈,提示AOH可引发食管及胃上皮组织的脂质过氧化,并有一定的器官选择性。据结果可推测AOH可能是林县地区人食管癌病因之一。     

甲基苄基亚硝胺诱发大鼠肿瘤的实验观察

作者用Wistar大鼠,雌雄不限,口服甲基苄基亚硝胺进行诱癌实验。各器官的肿瘤发生率分别为:食管乳头状瘤为64.5%(40/62),食管鳞癌为53.7%(29/54);舌乳头状瘤为12.3%(10/81),舌鳞癌为8.47%(5/59),其中1例为粘液腺导管上皮癌;咽癌为6.78%(4/59);前胃乳头状瘤为12.3%(7/57),前胃鳞癌为9.1%(4/44);口唇癌为0.377%(1/265)。大部分肿瘤呈多发性,一个器官发生多个肿瘤,或多个器官同时发生肿瘤。食管上皮癌变过程的形态发生学并进行了描述。对照组未发现肿瘤。     

酶联免疫吸附试验检测食管癌高、低发区粮食中交链孢酚单甲醚的研究

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，分别对食管癌高发区林县和低发区商丘各６４份粮食（玉米３２份、小麦３２份）中交链孢酚单甲醚（ＡＭＥ）进行检测。结果：林县６４份粮食中检出ＡＭＥ２５份，阳性率为４０．３％；商丘６４份粮食中有１５份阳性，阳性率为２３．４％。两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。不论是小麦还是玉米，ＡＭＥ含量林县均高于商丘，这与粮食中互隔交链孢霉污染情况相符。结果提示：ＡＭＥ可能是人食管癌的病因之一。     

交链孢酚单甲醚对鼠肝脂质过氧化及谷胱甘肽过氧化物酶的影响

用食管癌高发区林县的粮食中分离出的互隔交链孢霉的代谢物之一——交链孢酚单甲醚(AME)注入小鼠体内,观察对鼠肝中脂质过氧化及谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响。试验结果显示:AME可以导致丙二醇含量增加(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶活性降低(P<0.01)。丙二醛含量的增高与AME剂量呈显著正相关(r=0.957,P<0.05),酶活性与丙二醛水平呈明显负相关(r=-0.973,P<0.05)。结果表明:AME可以引发脂质过氧化反应,谷胱甘肽过氧化物酶活性下降,本实验结果为该霉菌极可能是引起食管癌病因之一学说提供的积极佐证。