ELISA联合RT-nPCR检测慢性丙型肝炎病毒感染者结果分析

目的对比酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)检测慢性丙型肝炎病毒感染者血清抗-HCV和HCVRNA结果。方法2005年5月对河北赵县某农村单采血浆还输血细胞HCV感染者133人及健康对照52人共185人采集空腹静脉血。该感染人群于1990年前单采血浆还输血细胞时感染、1993年被现场调查、血清生化指标及病原学标志检查确诊为HCV感染者、2002年追踪调查仍明确诊断者。用ELISA法检测抗-HCV,用RT-nPCR检测HCVRNA。结果①185份血清标本中,抗-HCV和HCVRNA均阳性者92份,占49.73%;抗-HCV阴性、HCV-RNA阳性者18份,占9.73%;抗-HCV阳性、HCV-RNA阴性者22份,占11.89%,两者均阴性53份,占28.65%。两种方法检测结果一致符合率为78.38%[(92+53)/185],检测不一致率差异无显著性(配对χ2=0.40,P>0.05);②ELISA法检测慢性HCV感染者的灵敏度为82.71%,特异度为92.31%,漏诊率为17.29%;RT-nPCR检测的灵敏度为81.20%,特异度为96.15%,漏诊率为18.80%,两种方法检测灵敏度差异无显著性(χ2=0.102,P>0.05);③并联试验检测其灵敏度为96.75%,特异度为88.76%,其灵敏度明显高于单一ELISA法82.71%(χ2=9.62,P<0.01)。结论单独用ELISA法检测抗-HCV约有17%的漏检率,同时用RT-nPCR检测HCVRNA,可明显提高HCV感染者的阳性检出率。     

HIV感染者合并GBV-C/HGV感染的预后

已知HIV感染者合并HBV或HCV感染较常见,且影响预后。为了明确HIV合并GBV-C/HGV感染的预后,作者对HIV感染者中GBV-C/HGV RNA和抗-E2的流行率及有关的临床随访结果进行了研究。 研究组为197例HIV感染者,对照组为120例随机抽样的供血员。用ELISA法检测抗-HIV、HBsAg、抗-HBc、抗-HCV;对抗-HCV阳性者再用套式PCR法检测HCV     

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用价值

目的将HCV核心抗原检测与HCV RNA PCR法和抗-HCV检测进行比较,评估HCV核心抗原检测的临床应用价值。方法采用ELISA法检测121份怀疑为HCV感染患者血清中的HCV核心抗原,并以HCV RNA PCR法和抗-HCV检测结果作为比较。结果121份样本中,PCR法测HCV RNA,阳性56例,阴性65例,ELISA法测HCV核心抗原,阳性52例,阴性69例,ELISA法测抗-HCV,阳性44例,阴性77例;HCV RNA PCR、HCV核心抗原、抗-HCV阳性率分别为46.28%、42.97%、36.36%。同HCV RNA PCR检测结果比较:HCV核心抗原检测符合率90.08%、假阳性率3.31%、假阴性率6.61%;抗-HCV检测符合率81.81%、假阳性率4.13%、假阴性率14.05%。结论HCV核心抗原检测与PCR检测的符合率较高。说明PCR法与HCV核心抗原检测都可以对抗-HCV出现前的感染进行早期诊断,从而缩短窗口期。     

受血者受血前HIV、HBV、HCV及梅毒重叠感染的研究

目的探讨受血者受血前HIV、HBV、HCV及梅毒重叠感染. 方法用ELISA、双抗体夹心法检测血清HBV标志物、血清抗-HCV、血清抗-HIV,用RPR及TPPA检测受血者受血前梅毒感染. 结果 19 800例受血者受血前检查中发现血清乙型肝炎HBsAg阳性者2 136例(10.79%),血清抗-HCV阳性者576例(2.91%),血清梅毒(RPR法及TPPA)阳性者16例(0.08%),血清抗-HIV阳性者14例(0.07%),其中HBV、HCV重叠感染74例(0.375%);14例抗-HIV阳性病例中,HIV重叠感染HCV4例(28.5%),HIV重叠感染HBV2例(14.28%),HIV和HCV、HBV三重感染2例(14.28%). 结论在受血者受血前检查中HIV感染者与HCV、HBV重叠感染率较高,进行全面检查不仅可以避免医疗纠纷的发生,还可以为患者治疗提供帮助.     

丙型肝炎病毒核心抗原在丙肝检测中的应用分析

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原在丙肝感染诊断中的临床应用价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对162例疑似HCV感染者血清进行HCV RNA检测,同时用ELISA法对其进行HCV核心抗原和抗-HCV检测。结果 162例样本中,抗-HCV阳性率64.20%(104/162),HCV RNA阳性率51.85%(84/162),HCV核心抗原阳性率35.19%(57/162);HCV RNA和HCV核心抗原均阳性样本57例,二者符合率为67.86%;HCV核心抗原和HCV RNA阳性而抗-HCV阴性者1例。结论 HCV核心抗原是HCV早期感染的标志之一,检测HCV核心抗原有利于HCV感染的早期诊断。     

两种不同基因型NS3抗原在HCV感染者血清学诊断中的应用

目的 研究两种不同基因型NS3抗原在HCV感染者血清学诊断中的应用价值. 方法 分别用两种不同基因型NS3单片段抗原、两种单片段抗原的混合物(MIX)作为包被抗原,对血清标本进行ELISA测定;应用反转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)检测血清中HCV RNA,数据以X2检验. 结果 85份抗-HCV阳性血清以不同基因型HCV NS3单片段抗原检测,阳性检出分别为52份(Ⅰ型)和50份(Ⅵ型),X2=0.06,P>0.05;100份健康成人体检血清以此两种抗原检测均为阴性;90份抗-HCV阳性血清经MIX抗原检测,阳性检出为65份;51份抗-HCV阳性血清经RT-nPCR检测,29份阳性. 结论 HCV不同基因型NS3编码区抗原片段有不同的抗原反应性,在HCV感染者的血清学诊断中将不同基因型NS3抗原混合使用可能是更好的选择.     

544例新确证HIV阳性病例丙肝感染状况调查

目的了解新确诊的人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性者中感染丙肝病毒(HCV)的现状。方法从"艾滋病综合防治信息系统"中查询"确认(替代策略)检测阳性日期"在2016年1月1日至12月31日,"郑州市第六人民医院"确证HIV阳性已终审的病例544例,对其进行HCV抗体检测,HCV抗体阳性者检测HCV核酸。结果544例新确证HIV阳性病例中,男性455例(占83.6%),女性89例(占16.4%),性别比是5∶1;性传播,占98.3%(535/544),其中同性传播占40.3%(219/544);抗-HCV阳性率是8.82%(48/544);HCV RNA阳性率是5.15%(28/544)。经性传播感染535例病例中,抗-HCV阳性率是8.22%(44/535),HCV RNA阳性率是4.49%(24/535)。经同性传播的219例病例中,抗-HCV阳性率是4.11%(9/219),HCV RNA阳性率是2.28%(5/219);经异性传播途径的316例病例中,抗-HCV阳性率是11.08%(35/316),HCV RNA阳性率是6.01%(19/316)。结论新确诊的艾滋病病例中,丙肝阳性率较高,高于普通就诊人群。在艾滋病高危人群中宣传艾滋病防治知识,同步宣传丙肝的防治知识。     

40例吸毒者HCV、HIV、ALT、BUN的检验结果分析

目的了解邵阳县吸毒人员HCV(丙型肝炎)、HIV感染情况及其主要危险因素,为政府提供制定防治对策的依据。方法静脉采血,用ELISA法检测抗HIV和抗HCV,用连续监测法检测ALT(谷丙转氨酶),脲酶靛蓝法检测BUN(尿素氮)。结果本次检测40份标本,抗HCV阳性者32份,占80%,HIV检测全为阴性,ALT增高21份,占52.5%,BUN偏高11份,占27.5%。结论吸毒人群是HCV感染的高危人群,长期吸毒可引起肝功能损害,肾功能损害。     

出入境人员丙型肝炎传染性及危险因子研究

目的了解出入境人员丙型肝炎(HCV)感染水平,研究HCV感染者的传染性及影响感染的危险因子。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查出入境人员抗-HCV,并对150份抗-HCV阳性血清采用实时荧光定量PCR法测定HCV RNA病毒载量,以性别、年龄、抗-HCV阴性、HCV RNA阴性、1∶4比例为匹配条件,选择600例为阴性对照组。采用单因素和多因素非条件Logistic回归分析。结果23781名出入境人员传染病监测体检中,检出抗-HCV阳性150例,检出率为0.63%。男女间感染HCV的几率均等;抗-HCV阳性率随年龄增长而升高,各年龄组间差异有统计学意义(χ2=86.065,P<0.001);外籍人员抗-HCV阳性率显著低于中国籍,两者差异有统计学意义(χ2=12.376,P<0.005);78.67%抗-HCV阳性者HCV RNA病毒处于复制状态,抗-HCV滴度≥1∶64感染者HCV RNA病毒载量均≥1.02×104copy/ml,各抗体滴度间病毒载量有显著性差异(χ2=136.593,P<0.001);经单因素回归分析发现,年龄、国籍、谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、直接胆红素(DBIL)、尿素(BUN)、总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)等8个因子均有统计学意义,对这8个因子进行多因素Logistic逐步回归分析,年龄、ALT、LDL等3个因子进入模型。结论78.67%出入境人员HCV感染者具有传染性,抗-HCV滴度≥1∶64指标可作为HCV具有传染性的判断指标;影响HCV感染的危险因子有年龄、国籍、ALT、AST、DBIL、BUN、CHOL、LDL等8个。     

微流芯片在出入境人群中对HBV HCV HIV联合检测的研究

目的 探讨在出入境人群中应用微流芯片技术联合检测HBV、HCV、HIV的模式及可行性.方法 收集经两种ELISA试验验证的江西口岸出入境体检人员HBV、HCV、HIV230份血液标本,提取核酸后进行扩增,采用微流芯片进行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA检测,用芯片所带的内对照体系监控试验的有效性.结果 206份HBV、226份HCV抗体和228份HIV抗体阴性标本经微流芯片检测DNA/RNA,阴性符合率分别为99％、100％、100％;24份HBV、4份HCV抗体、2份HIV抗体阳性标本经微流芯片检测DNA/RNA,阳性符合率均为100％;206份江西口岸出入境体检人员HBV阴性标本中检出2份HBV DNA(+),2份标本两对半结果为抗- HBe(+)、抗- HBc(+),HBV DNA检出率为0.97％.结论 本次建立的微流芯片法检测结果准确可靠,可用于出入境人员乙肝、丙肝、艾滋病三种传染病的联合检测.     

血清HCV RNA载量、HCV抗体及ALT相关性研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者血液中HCV RNA载量、HCV抗体及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果的相互关系。方法经ELISA法检测的HCV抗体阳性血样,采用胶体金法检测HCV抗体,同时用荧光RT-PCR检测血清HCV RNA载量,用全自动生化仪定量检测ALT。结果 255份ELISA检测为HCV抗体阳性样本中,154份胶体金法阳性,139份HCV RNA阳性,59份ALT结果异常。HCV抗体高值组(S/CO值≥10)中HCV RNA阳性率为85.49%,胶体金阳性率为96.95%,ALT异常率35.88%,均显著高于S/CO低值组(1S/CO5)和S/CO中值组(5≤S/CO10)。胶体金阳性样本,HCV RNA阳性率(74.03%)显著高于胶体金阴性样本的HCV RNA阳性率(24.75%),二者差异有统计学意义(P0.05)。胶体金阳性样本的ALT异常率(32.47%)显著高于胶体金阴性样本的ALT异常率(8.91%),二者差异有统计学意义(P0.05)。HCV RNA阳性者的ALT异常率(35.50%)显著高于HCV RNA阴性者的ALT异常率(8.57%),二者差异有统计学意义(P0.05)。ALT异常率随着HCV RNA载量的增高而升高,有一定相关性(r=0.975,P=0.001),而ALT变化与HCV RNA载量无相关性(r=-0.26,P=0.63)。结论对人群HCV感染的筛查,可在ELISA法检测HCV抗体基础上,对S/CO高值人群进行HCV RNA的检测,提高检出率的同时最大程度地降低成本。     

补充验证试验在抗-HCV检测中的应用

目的探讨补充验证试验在一般人群抗-HCV检测中的应用.方法应用重组免疫印迹实验(RIBA)对血清抗-HCV酶联检测结果阳性者进行抗-HCV确认,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCV RNA.结果2002～2003年福州市部分人群血清抗-HCV酶联检测的阳性率为0.593%,低于贵州出入境人群和部分地区无偿献血员的抗-HCV检出率,而与长沙和南京地区无偿献血员的检出率相近.抗-HCV酶联检测阳性者经RIBA确认后,仅1例阳性,6例为阴性,另有5例结果为不确定.5例不确定者的血清经RT-PCR检测HCV RNA,结果均为阴性.结论RIBA和RT-PCR作为抗-HCV酶联检测的补充试验有助于抗-HCV检测结果的确认和解释,可在抗-HCV检测中推广应用.     

福州市美沙酮替代治疗人群丙肝、乙肝、艾滋病和梅毒感染调查

目的了解美沙酮替代治疗者丙肝、乙肝、艾滋病及梅毒感染情况及高危因素,为制定防控措施提供依据。方法对接受美沙酮替代治疗的1 149例进行问卷调查;采集静脉血标本,用ELISA法检测抗-HCV、HBV标志物、抗-HIV和梅毒抗体。结果 1 149例中男性检出抗-HCV 569例(49.5%),HBsAg阳性25例(2.2%),抗HIV阳性31例(2.7%),梅毒抗体阳性5例(0.4%)。抗-HCV阳性者中,女性感染率(63.4%)高于男性(46.8%),感染率最高为30~49岁组。注射吸毒为HCV感染的高危因素。93例HCV感染者中,HCV RNA大于2.7log10拷贝/mL有61例(65.6%)。61例HCV RNA阳性标本中,基因型以1b型为主(65.7%)。结论美沙酮替代治疗的吸毒人群中,抗-HCV阳性率远超自然人群,尤以注射吸毒者感染率为高;其HCV基因型与福建自然人群感染丙肝基因型一致;65.6%HCV感染者存在HCV RNA高复制,需要进行抗病毒治疗。     

补充验证试验在抗-HCV检测中的应用

[目的]探讨补充验证试验在一般人群抗-HCV检测中的应用。(方法]应用重组免疫印迹实验(RIBA)对血清抗-HIV酶联检测结果阳性者进行抗～HCV确认，并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCVRNA。[结果]2002～2003年福州市部分人群血清抗-HCV酶联检测的阳性率为0．59％，低于贵州出入境人群和部分地区无偿献血员的抗-HCV检出率，而与长沙和南京地区无偿献血员的检出率相近。抗-HCV酶联检测阳性者经RIBA确认，仅1例阳性，6例为阴性，另有5例结果为不确定。5例不确定者的血清经RT-PCR检测HCV RNA，结果均为阴性。[结论]RIBA和RT-PCF作为抗-HCV酶联检测的补充试验有助于抗-HCV检测结果的确认和解释，可在抗-HCV中推广应用。     

免疫印迹试验在丙肝确认检测中的应用

目的探讨免疫印迹试验在丙肝确认检测中的应用。方法将135份HCV初筛为阳性的血清标本再进行抗-HCV的ELISA检测,仍为阳性的再用荧光PCR法检测HCV-RNA以及特异性更高的补充确认试验,即免疫印迹试验(WB)。结果初检为阳性的135份血清ELISA检测后仍然为阳性,HCV-RNA的检测结果为1.0×10~3IU/ml有28份,1.0×10~3IU/ml的有107份。WB结果为阳性115份,阴性19份,不确定1份。结论多种原因可能会导致ELISA法检测丙肝抗体时出现假阳性,而核酸检测灵敏度、病毒血症消退或病毒基因变异等多种因素的影响可能也会出现抗-HCV结果阳性而RNA检测结果为阴性的情况。因此建议对于抗-HCV初检阳性的标本进一步用免疫印迹试验进行复检,以排除假阳性结果。     

母亲丙型肝炎病毒血清学标志与子代受染的关系

目的：探讨母亲丙型肝炎病毒血清学标志与子代受染之间的关系。方法：选择母亲与胎儿抗-HCV均阳性者为研究对象，检测母亲与胎儿的抗-HCV、HCV RNA、抗-HCV的型别。结果：16对母亲与胎儿抗-HCV均阳性，血清分型一致，其中12例母亲HCV RNA阳性，其胎儿6例阳性，4例阴性母亲的胎儿HCVRNA均阴性，结论：母亲HCVRNA阳性其子代受染率为50%。     

HIV在HCV母婴传播中的作用及母体抗-HCV免疫印迹形式与婴儿抗-HCV清除率的关系

有关HCV的垂直传播率,文献报道中各不相同(0％～100％),有人提出孕妇受HCV和HIV双重感染时垂直传播率增高。为此,作者对伴或不伴HIV感染的45名抗-HCV阳性妇女所生的婴儿进行了HCV垂直传播率的前瞻性研究。在孕妇分娩前1个月内、婴儿出生时和出生后,分别检测孕妇及婴儿血清中的抗-HIV(ELISA法)、抗-HCV(ELISA-2和RIBA-2法)、HCVRNA(RT-PCR法)和ALT值。     

抗-HCV阳性反应血清中HCV核酸检测结果分析

目的 探讨和研究抗-HCV阳性反应血清进行HCV核酸指标检测的效果.方法 收集2011年6月-2013年5月76例抗-HCV呈阳性反应的受检者血清,使用HCV核酸扩增酶免检测HCV核酸指标.结果 通过本次试验中收集的50份通过2种ELISA试剂来检测抗-HCV呈阳性反应血清.其中,共有7份抗-HCA呈阳性受检者,运用2种试剂进行检测都显示出强阳性（S/CO大于10）,其HCV核酸检测也全部显示为阳性（比例为100％）,其它43份抗-HCA阳性受检者,经检测均显示为较弱的阳性,其中经HCV核酸检测呈现阳性的占46.5％.另外,经过运用单种试剂来检测的抗-HCV阳性血清,都呈现较弱的阳性,且该HCV核酸检测的阳性率也比较低,同时运用双种试剂检测抗-HCV阳性的特异性,均比运用单种试剂而进行检测的抗HCV阳性要高,二者对比其差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论 若抗HCV呈阳性且HCV核酸检测也呈阳性的可以确定为HCV感染;若抗HCV阳性而HCV核酸检测呈阴性,则可能和HCV核酸检测的灵敏度、抗-HCV检测试剂的特异性或者病毒基因变异等很多因素相关.     

天津市东丽区530名志愿献血人员HCV感染血清学流行病学调查

采用ELISA方法对天津市东丽区530名志愿献血人员检测了抗-HCV及其它肝脏疾患标志,旨在探索志愿献血人员的HCV感染在传播中的作用,监测该人群HCV感染状况。结果抗-HCV阳性者25人,阳性率为4.72％,远高于国内外一些地区义务献血员的感染水平,其中7人(28％)抗-HCV阳性者合并ALT异常,而其余18名抗-HCV阳性者,ALT均在正常范围,可见仅以ALT检测筛选控制HCV感染者献血收效甚微。调查证实抗-HCV阳性率与性别、血型无关,但显示机关、学校工作人员感染率明显高于工人和农民。     

丙型肝炎病毒抗体阳性者血清病毒载量与丙氨酸转氨酶相关性研究

目的对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阳性者血清进行病毒载量和转氨酶的检测,研究其相关性,为临床诊断和治疗丙型肝炎提供一定依据。方法选择2009—2011年济南市中心医院医学实验诊断中心感染免疫实验室和济南市传染病医院检验科免疫室收集的抗-HCV阳性血清162例,应用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA),应用全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)。异常率与平均值采用Sperman等级相关分析,阳性率比较用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 162例抗-HCV阳性者血清共检出HCV RNA阳性(≥80拷贝/ml)110例(67.9%),HCV RNA阴性52例(32.1%);ALT异常者93例(57.4%),ALT正常者69例(42.6%)。对HCV RNA水平进行分级,发现ALT异常率随HCV RNA水平的增高而增加,两者呈正相关(r=0.943,P<0.05),而与ALT水平高低无相关性(r=0.486,P>0.05)。ALT异常组中,ALT在40～80 U/L范围内HCV RNA阳性只有12例(40%)阴性18例(60%),ALT>80 U/L中HCV RNA阳性有59例(93.7%)阴性4例(6.3%),两者统计学分析有显著性差异(χ2=32.390,P<0.05)。结论 ALT异常率随HCVRNA水平的增高而增加,两者呈正相关,而与ALT水平高低无相关性;某些未知的干扰因素使得ALT处于低水平异常状态,此时HCV RNA并不显示阳性,表明此时并非处于病毒复制状态,因此在诊断尤其在治疗丙型肝炎时,HCV RNA的定量检测依然占有无法替代的优势。