国产柴油机废气颗粒提取物致NIH3T3细胞转化作用的实验研究

目的 评价3种国产柴油机(6120型、4115型、S-195型)废气颗粒提取物致细胞转化活性，预测它们的致癌性。方法 以国产3种柴油机废气颗粒提取物为受试物，采用细胞转化技术，观察其致NIH3T3细胞形态学转化作用。结果 国产3种类型柴油机废气颗粒提取物均可致NIH3T3细胞形态转化，且转化率存在剂量-反应关系，随着剂量的加大，细胞转化率增高，除6120型和4115型的0．25μg／ml剂量组外，其他受试物不同剂量组的细胞转化率与对照组比较，差异均有显著性(P＜0．05)。相同剂量下S-195型柴油机废气颗粒提取物的细胞转化活性较4115型和6120型高。结论 柴油机废气颗粒提取物具有不同程度的致细胞转化作用，柴油机废气颗粒物的职业性危害不容忽视。     

哈尔滨市水源地江水对NIH3T3细胞的恶性转化作用

用哈尔滨市水源地江水的３种有机提取物（乙醚，丙酮和二氯甲烷）分别做ＮＩＨ３Ｔ３细胞转化试验结果表明：３种有机提取物各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶，其细胞转化率呈现剂量反应关系。转化细胞的恶性表现是生长失去接触性抑制并能在软琼脂内生长。提示该江水可能具有潜在的致癌作用。     

染料木黄酮对NIH/3T3细胞体外短期转化实验的影响

目的 通过观察染料木黄酮对NIH/3T₃细胞体外恶性转化的影响,研究染料木黄酮在癌症起始阶段的预防作用.方法 体外短期转化实验.结果 染料木黄酮在对细胞无明显毒性的浓度下,对MNNG所诱发NIH/3T₃细胞恶性转化有明显的抑制作用,其最低抑制浓度为37μmol/L.结论 染料木黄酮可能是化学致癌过程的抑制剂.     

煤焦油对NIH/3T3细胞的毒性作用

以某炼焦厂煤焦油为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测NIH/3T3细胞活性。结果不同浓度下的煤焦油作用一定时间后,NIH/3T3细胞存活率下降,随着浓度的增加和作用时间的延长,这种抑制作用也愈加明显,同时细胞在形态学上也出现一系列的改变。接触受试物24 h,细胞生长半数抑制浓度IC50为58.2μg/L,同时镜下观察细胞形态也发生了改变。提示煤焦油可以抑制NIH/3T3细胞生长,降低其线粒体代谢活性。     

用NIH3T3细胞转化试验对松花江江水潜在致癌性的研究

为探讨松花江江水潜在致癌性，检测了哈尔滨市上游１５ｋｍ处江水对ＮＩＨ３ＴＨ３细胞的恶性转化作用。试验结果表明：乙醚提取各剂量均对细胞有一定毒性，能诱发典型的细胞转化灶，其转化率呈现剂量－效应关系。提示，该江水具有潜在致癌作用。     

煤焦油致哺乳动物细胞转化作用的实验研究

采用转化细胞灶法,观察煤焦油致小鼠肺成纤维细胞的形态学转化,并以刀豆球蛋白A凝集实验进一步验证其转化活性.结果 煤焦油剂量为0.1μg/ml、1.5μg/ml、22.5μg/ml的转化率分别为7.80%、9.88%、12.06%,煤焦油处理的NIH/3T3细胞均可与刀豆球蛋白A发生凝集反应.提示煤焦油具有细胞转化活性.     

互隔交链孢酚对NIH/3T3细胞的急性毒性作用

目的研究互隔交链孢酚(AOH)对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3的急性毒性作用。方法将对数生长期的NIH/3T3细胞分为10、50μmol/L AOH处理组和溶剂对照组,观察染毒细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法研究细胞存活率,采用彗星实验观察细胞的DNA损伤程度,利用流式细胞术(FCM)检测对细胞周期的影响。结果细胞处理后,出现明显的细胞形态学变化。MTT结果表明,10、50μmol/L AOH处理组细胞抑制率(分别为19.88%,32.47%)显著高于溶剂对照组(P<0.05)。10、50μmol/L AOH组在彗星实验中细胞拖尾率为35.87%和71.83%,尾部DNA含量为(36.18±18.6)和(51.3±21.6),显著高于溶剂对照组的拖尾率(14.78%)和尾部DNA含量(21.29±15.60)(P<0.05);10μmol/L AOH处理组对NIH/3T3细胞周期影响不明显,而50μmol/L AOH处理组引起S期增高和明显的G2/M期阻滞(P<0.05)。结论AOH可诱导NIH/3T3细胞的DNA损伤、抑制细胞增殖,并诱导G2/M期细胞阻滞。     

姜黄素对紫外线致NIH3T3细胞损伤的保护作用

[目的]研究姜黄素对紫外线致NIH3T3细胞损伤的保护作用。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT试验）和激光扫描共聚焦显微镜技术研究不同浓度（1、5、10μmol／L）的姜黄素对紫外线致细胞损伤的保护作用。[结果]与紫外线照射组（UVR组）相比较，姜黄素预处理（姜黄素＋UVR）组可以提高紫外线辐照细胞的存活率（P〈0．05），减少细胞内活性氧的堆积（P〈0．05），减少细胞线粒体膜电位的下降（P〈0．05）。[结论]姜黄素对紫外线致NIH3T3细胞损伤有保护作用，其作用机制可能与清除细胞内的活性氧，维持细胞的线粒体膜电位有关。     

镍冶炼烟尘致NIH/3T3细胞DNA损伤的实验研究

目的 研究镍冶炼烟尘致DNA损伤作用.方法 采用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术,检测2份镍冶炼烟尘对小鼠NIH/3T3细胞的DNA损伤.结果 相同染毒时间内,随着染毒剂量（除样品2中50.0μg/ml剂量染毒24 h组）加大,细胞拖尾率增高,DNA断裂程度在4 h达到高峰,分别为35.5%、69.7%、85.2%、41.3%、75.7%、89.2%.各受试物在相同剂量下,染毒4 h时均较染毒2 h和染毒24 h细胞拖尾率高.NIH/3T3细胞受到镍冶炼烟尘的受试物作用后,在染毒2 h,样品1、样品2各剂量组的细胞彗星尾DNA含量、尾长（除12.5 μg/ml剂量组外）、尾动差（除样品1的12.5μg/ml剂量组外）均明显高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.在染毒4 h,两样品对细胞DNA的损伤达到高峰,各剂量组的3个指标与对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）.染毒时间延长至24 h,上述3个指标改变程度均较染毒4 h减弱,样品1的彗尾长与对照组的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 镍冶炼烟尘可不同程度致NIH/3T3细胞DNA损伤.     

苯和甲醛致细胞氧化损伤的联合作用初步探讨

目的 探讨苯与甲醛致细胞氧化损伤的联合作用.方法 苯、甲醛染毒细胞24 h后,测其谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力.各组甲醛的浓度分别为0、0、0、0.319 75、0.319 75、0.319 75、0.639 5、0.639 5、0.639 5 μg/ml,相应组别苯的浓度分别为0、0.392、0.784、0、0.392、0.784、0、0.392、0.784 mg/ml.中国仓鼠肺成纤维细胞株(CHL)中加入不同浓度的苯、甲醛作用24h后.随浓度的增高,细胞GSH水平降低,MDA含量升高,SOD活力降低,且均呈剂量-反应关系(P<0.000 1);根据正交实验设计方差分析,两因素存在交互作用(P<0.05).结论 苯与甲醛共同作用于CHL细胞.其所引起的CHL细胞氧化损伤作用的交互作用为协同作用.     

八氯二丙醚对BALB/c3T3细胞恶性转化的研究

目的 检测八氯二丙醚(S2)的细胞恶性转化作用。方法 采用传代细胞系BALB／c3T3细胞进行细胞毒性实验确定转化实验的剂量范围，再进行细胞转化实验并对转化细胞进行恶性行为鉴定。结果 S2各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶，并呈剂量-反应关系；软琼脂培养证明转化细胞为恶性转化细胞。结论 是其有致BALB／c3T3细胞恶性转化作用，有必要进行深入研究。     

番茄红素或与维生素E合用对苯并(a)芘诱导BALB/c-3T3细胞转化的影响

[目的 ]观察不同浓度的番茄红素 (lycopene ,Ly)或与维生素E(VitaminE)合用对苯并 (a)芘 (benzo(a)pyrene ,BaP)诱导BALB/c 3T3细胞转化的影响。 [方法 ]每组 14瓶 ,每瓶接种 10 4个细胞 ,2 4h后加受试物及苯并 (a)芘 ,3d后 2瓶用结晶紫方法测定细胞毒性 ,其余 12瓶换含DMEM/F12转化表达培养液。每周换液 2次 ,2 5d后 10瓶固定 ,计数直径>2mm转化灶 ;其余 2瓶用定量的双抗体夹心ELISA方法测定细胞中p5 3蛋白的含量。 [结果 ]各种受试物及其混合物的细胞相对存活率均 >90 %。 0 .5、1、5 μmol/L的番茄红素可以阻止苯并 (a)芘诱导的细胞转化作用 ,细胞中p5 3蛋白的含量处在较低水平。然而当番茄红素浓度升高至 10 μmol/L时 ,番茄红素反而降低了抗转化的效果 ,细胞中p5 3蛋白的含量增加。维生素E存在能增强番茄红素抗苯并 (a)芘导致转化作用。 [结论 ]番茄红素阻止苯并 (a)芘诱导的细胞转化作用与其抗氧化作用方式相似 ,未发现番茄红素有类似 β 胡萝卜素的辅致癌作用 ;维生素E能增强番茄红素抗转化效果。     

Rap2b基因表达对NIH3T3细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的影响

目的了解Rap2b基因对NIH3T3细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据。方法以人肺CDNA为模板克隆出Rap2b基因片段,构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,稳定转染NIH3T3细胞,利用集落形成试验和细胞伤口愈合试验,观察细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的改变。结果与转染空质粒的细胞对比,转染pcDNA3.1-Rap2b质粒的细胞集落形成数目明显增加(P0.01),损伤修复愈合增快。结论 Rap2b基因表达可显著增加NIH3T3细胞集落形成,并增快该细胞的损伤愈合速度。提示Rap2b基因表达可能具有促进NIH3T3细胞增殖和恶性转化功能。     

β-胡萝卜素辅致癌机制体外实验研究

[目的 ]建立改进的BALB/c 3T3细胞转化试验方法 ,简便、快速检测 β 胡萝卜素通过诱导细胞色素P45 0酶提高苯并 (a)芘、吸烟焦油致癌作用。 [方法 ]每组 12瓶细胞 ,每瓶接种 10 4细胞 ,2 4h后加受试物 ,1周后 2瓶细胞用结晶紫方法测定细胞毒性 ,其余 10瓶换含 2 %胎牛血清和 1%ITES( 2 0 0 μg/ml胰岛素 ,2 0 0 μg/ml人转铁蛋白 ,12 2 μg/ml氨基乙醇 ,0 0 3 4μg/ml亚硒酸钠 )DMEM /F12转化表达培养液。每周换液 2次 ,第 2 5天甲醇固定 10min ,2 5 %Giemsa染色 5～ 10min ,肉眼计数直径 >2mm转化灶。 [结果 ] 0 5、1μmol/Lβ 胡萝卜素、10 μmol/Lα 萘黄酮、10 μmol/L苯并 (a)芘和 2μg/ml吸烟焦油对细胞相对存活率均大于 90 %。 1μmol/Lβ 胡萝卜素能提高苯并 (a)芘、吸烟焦油的细胞转化率平均每瓶细胞转化灶分别增高 3 2 %和 5 0 0 %。α 萘黄酮可以抑制 β 胡萝卜素增强吸烟焦油和苯并 (a)芘细胞转化作用。[结论 ]β 胡萝卜素增强苯并 (a)芘和吸烟焦油对BALB/c 3T3细胞转化能力 ,可被混合功能氧化酶抑制剂α 萘黄酮阻止 ,提示 β 胡萝卜素辅致癌作用是通过诱导细胞色素P45 0酶所致