人类胆脂瘤的DNA分析

为了解中耳胆脂瘤的增殖、迁移和侵袭等生物学行为，对１９９２年２月～１９９６年６月Ｍａｎｈａｔｔａｎ眼耳鼻喉医院和纽约Ｃｏｒｎｅｌｌ大学医学中心的２１例中耳胆脂瘤病人的胆脂瘤标本和９侧耳后皮肤进行ＤＮＡ测定。应用流式细胞技术和图像分析记录标本细胞Ｇ０／Ｇ１期、Ｇ_２／Ｍ期比例，结果在能进行检测的１１例胆脂瘤标本和９例耳后皮肤标本实验中，无一例显示三倍体和非整倍体ＤＮＡ；有４例胆脂瘤标本和６例皮肤标本的直方图显示出二倍体ＤＮＡ。细胞周期分析表明，胆脂瘤标本ＤＮＡ倍体系数在４．５～１０之间，平均７．３…     

鼻耳部砂粒性骨化性纤维瘤

目的 澄清砂粒性骨化性纤维瘤的组织学特点、生物学特性、临床行为和骨化性纤维瘤、骨纤维结构不良的关系。方法 对１ 院１９５６年６月－１９９６年１２月４０年期间的３１例ＰＯＦ的组织切片，临床和病理记录资料进行回顾性分析。１０例作网织纤维染色、Ｍａｓｓｏｎ三色染色（ＭＳ）和碱性磷酸酶免疫酶染色（ＡＰ），５例作波纹蛋白，结蛋白，上皮膜抗体和平滑肌有动蛋白免疫组化染色。１例作了透射电镜。结果 １１例完整标本     

应用单克隆抗体Ki-67鉴定中耳胆脂瘤角化细胞的增生性

胆脂瘤是常见的中耳病患，据文献报道胆脂瘤上皮有异常增生活性。Ki67是一种通过细胞表达在细胞增殖周期的民，S，SZ和M阶段能识别人细胞核抗原的单克隆抗体，并能确定标本组织中的细胞增生活性。该作者运用Ki67表达来研究胆脂瘤和正常人皮肤标本，试图证实胆胀瘤上皮的高度增生活性。取鼓室成形术后的胆脂瘤和正常外耳道上皮标本各15份作低温保存，采用活性Ki－67抗体浓度为l：100，运用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶的免疫组化方法。结果显示：局限在正常外耳道上皮基底细胞层的角化细胞，有很少一部分细胞核被Ki67着色，而胆脂瘤上皮基底层…     

胆脂瘤型中耳炎骨质破坏的临床和生物化学研究

胆脂瘤引起骨质破坏的确切原因尚不清楚。近年来对细胞因子可能在骨质破坏中所起的作用引起重视。胆脂瘤中细胞因子的研究有赖于生物化学方法，该文采用生物化学方法，对50例胆脂瘤标本包括上皮及上皮下组织测定其肿瘤坏死因子α（TNF－α）、溶酶体酶、酸性磷酸酶（包括总酸性磷酸酶和酒石酸酯抗酸性磷酸酶）、组织蛋白酶B、充氨酸氨基肽酶溶菌酶以及非溶酶体酶、钙蛋白酶Ⅰ和Ⅱ，并与15例正常外耳道皮肤样本进行比较。所取胆脂瘤上皮及上皮下组织保持其不分离，用无菌盐水洗涤后，贮存于-70℃以待分析。皮肤标本采用同样方法处理。标…     

声带癌前病变的免疫组织化学研究-PC-NA和MIB-1抗体测定

最近报道认为，采用单克隆抗体法，测定肿瘤细胞的增殖能力，有助于肿瘤恶性度和预后的判定。活检声带病变和癌标本６１例，男５８例，女３例。其中声带粘膜增生９例；异形性轻度改变１２例，中度改变１０例，重度改变８例；声带息肉８例；鳞癌（ＳＣＣ）１４例。标本用１０％福尔马林固定后，石蜡包埋，制成４Ｐｍ切片，进一步处理后，分别行ＰＣＮＡ和ＭＩＢ－１抗体免疫染色。于显微镜下，随意观察扁平上皮基底层至表层１０００细胞，胞核呈现褐色染色者为阳性。结果发现，ＰＣＮＡ指数和ＭＩＢ－１平均阳性率（％）：声带息肉分别为１．…     

两种基质金属蛋白酶在胆脂瘤和中耳癌中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMP)的MMP－2和MMP－9的胆脂瘤和中耳癌中的表达差异及其在骨浸润作用。方法 采用免疫组织化学方法检测36例胆脂瘤上皮，10例胆脂瘤外耳道皮肤、16例中耳癌组织及正常组织中MMP－2和MMP－9的表达。结果 ①MMP－2和MMP－9在胆脂瘤上皮染色最强。而且在上皮组织的各层细胞均有表达，基底膜染色最强。②胆脂瘤上皮中的MMP－2和MMP－9的表达明显高于其对应的外耳道皮肤和正常外耳道上皮。MMP－2阳性表达在胆脂瘤上皮中为83％，胆脂瘤外耳道上皮为50％，正常外耳道皮肤2例有微弱表达。③16例中耳鳞癌组织中，MMP－9的阳性达率为50％（8／16），MMP－2的阳性表达率为56.25%(9/16)，表达水平与肿瘤的病理分级和临床分期有关。④中耳癌组织中MMP－2的表达与MMP－9表达不致，而胆脂瘤组织中MMP－2和MMP－9的表达密切相关。结论 胆脂瘤向周围骨质侵袭的特性与中耳癌相似，MMPs家族及其抑制剂之间的平衡紊乱所致的蛋白水解酶活性增高是引起中耳胆脂瘤骨吸收的原因之一。     

胆脂瘤和外耳道上皮的黑色素细胞

本文用组织化学和免疫组化等方法，研究２６例后天性胆脂瘤标本中的黑色素细胞，查见８例（３０．８％）胆脂瘤有黑色素细胞。用同法研究２例胎儿及１例死婴的外耳及中耳，见外耳道和鼓膜的表皮有黑色素细胞，而中耳粘膜则无。因此认为，那些无黑色素细胞的胆脂瘤上皮可来源于中耳粘膜的鳞状化生。     

胆脂瘤中与增殖期细胞核抗原(PCNA)指数相关的7号染色体3倍体的意义

继发性胆脂瘤具有侵袭性，有时有肿瘤表现，术后残留易复发，对它的生物学特性研究很少。在体外培养研究中，发现增殖活动活跃的胆脂瘤存在染色体的不稳定性，特别是７号染色体三倍体的出现。为了确定在手术切除时，胆脂瘤是否出现该三倍体及能否将其作为具有较强侵袭性胆脂瘤的生物学标志，该作者进行了回顾性细胞遗传学及动力学研究。实验材料为４４例胆脂瘤病人（男２４例，女２０例，年龄１８～６８岁），４例正常外耳道皮肤作为对照，标本用１０％福尔马林固定，常规石蜡包埋，每个标本作３个连续组织切片，分别进行ＨＥ染色、ＰＣ１０…     

胆脂瘤与正常上皮白介素-1α,白介素-1β和白介素8的不同合量

胆脂瘤性骨破坏是由于胶原酶活性增加和破骨细胞激活引起。细胞因子,例如白介素（ＩＬ）,在骨破坏机制中的细胞间交流起重要作用。为了观察白介素在耳胆脂瘤的病理生理作用,该作者将手术取得的１４例相匹配的中耳胆脂瘤和外耳道皮肤进行培养,应用酶联免疫测定（ＥＬＩＳＡ）方法,在培养的２、５、７天测定培养物上清液中白介素－１ａ、白介素－１β和白介素８的含量。结果：在培养的第二天,白介素－１α在胆脂瘤组织的含量为０．６０±０．１３（ｇｇ／μｇ）,在外耳道皮肤的含量为０．２５±０．０２;白介素－１β的含量在胆脂瘤组…     

凋亡抑制蛋白Survivin及Bcl-2在中耳胆脂瘤上皮中的表达及意义

目的研究凋亡抑制蛋白Survivin及Bcl-2在中耳胆脂瘤上皮中的表达及相互关系,探讨其表达对胆脂瘤增殖能力的影响。方法运用免疫组织化学SP法检测21例胆脂瘤标本及11例外耳道骨部正常皮肤组织中Survivin、Bcl-2的表达。结果Survivin、Bcl-2在胆脂瘤上皮的表达与正常外耳道皮肤上皮比较,不仅范围广,基底上层也有表达,而且表达水平显著增高,两者比较有统计学意义(P<0.01)。胆脂瘤上皮中Survivin表达指数与Bcl-2表达指数呈正相关(r=0.553,P<0.01)。结论凋亡抑制蛋白Survivin,Bcl-2在中耳胆脂瘤的异常表达可能在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用,它们可能参与胆脂瘤上皮的凋亡调控过程,因此适当控制Survivin,Bcl-2的表达可能会更有效地控制中耳胆脂瘤的发展。     

表皮生长因子受体在胆脂瘤型中耳炎上皮的表达

胆脂瘤型中耳炎的发病原因至今尚不明确；其病理组织学特点是中耳腔内存在着表皮角化的复层鳞状上皮。一般认为，胆脂瘤上皮是以因过度增生的角化细胞失调而导致中耳正常粘膜的损伤为特点的。本文对20例本病患者的胆脂瘤上皮应用免疫组织化学方法，观察表皮生长因子受体（EGF－R）的表达状况，旨在探讨在胆脂瘤上皮中是否存在EGF－R的表达及其意义。1材料与方法1．1材料来源20例患者中，男12例，女8例；年龄14～65岁，病史3～60岁。胆脂瘤上皮标本取自胆脂瘤型中耳炎乳突手术，平坦、树状胆脂瘤14例，珍珠状胆脂瘤6例。同时取患者正常耳…     

开放性乳突根治术腔颞骨的组织病理

开放性乳突根治术已有百年的历史，至今仍是治疗中耳聪脂瘤的主要外科手段。但术后有较大一部分病人长期不能干耳，据统计开放性乳突根治术后的不干耳率约为20畅～60畅。少数学者曾对不干耳的乳突腔行尸检颧骨或对再次手术时的标本进行研究，认为溢液是由于溃疡性肉芽组织及残留呼吸道上皮所引起。对4例曾行开放性乳突根治术的4例颈骨标本进行连续切片检查、发现：①乳突腔内主要由复层鳞状上皮覆盖，上皮下有纤维与中耳胆脂瘤相似，没有发现呼吸道上皮残留区域；②残留的乳突气房由纤维结缔组织所封闭或闭塞，没有见到残留的呼吸道粘膜上皮…     

嗜酸粒细胞主体碱性蛋白对鼻粘膜上皮肥大细胞组胺释放的影响

为探讨变应性鼻炎患者鼻粘膜上皮肥大细胞和嗜酸粒细胞主体碱性蛋白的相互作用，将取自５９例变应性鼻炎患者的含有肥大细胞的鼻粘膜上皮在体外与嗜酸粒细胞主体碱性蛋白（ＭＢＰ）进行反应，测定反应前后肥大细胞组胺的释放量。结果显示１０－５ｍｏｌ／Ｌ浓度ＭＢＰ可促使肥大细胞释放组胺，１．５７×１０－５ｍｏｌ／ＬＭＢＰ处理肥大细胞可使变应原诱发的组胺释放受到抑制。提示嗜酸粒细胞在鼻粘膜上皮层内的聚集、活化、脱颗粒等可通过与肥大细胞的相互作用而对变应性鼻炎症状的发生、发展产生影响。     

白三烯C_4和D_4能增加离体人类上呼吸道粘膜纤毛摆动频率

抗原刺激能够影响人类上呼吸道粘膜纤毛摆动频率（ＣＢＦ）,在变态反应过程中上呼吸道白三烯Ｃ４（ＬＴＣ４）和Ｄ４（ＬＴＤ４）水平均有升高。由于腺样体上皮和其它上呼吸道粘膜在组织学上的相同性,作者研究了ＬＴＣ４和ＬＴＤ４在５小时内对离休人类腺样体ＣＢＦ的作用。腺样体上皮标本培养于ＭＥＭ培养基中。ＬＴＣ４和ＬＴＤ４的使用浓度分别为１０－６和１０－８Ｍ,白三烯受体特异阻断剂ＬＹ－１７７８８３的浓度为１０－６Ｍ。ＣＢＦ用相差显微技术和显微成像系统测定。结果发现,加白三烯之前ＣＢＦ均值为５．５１±０．５８Ｈｚ…     

飘散蒿属花粉对鼻粘膜上皮细胞间粘附分子表达的影响

为探讨吸入性变应原对变应性鼻炎患者鼻粘膜上皮细胞表达细胞间粘附分子（Ｉｎｔｅｒ－ｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）的影响，对１１例蒿属花粉过敏的花粉症患者，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法，测定鼻粘膜上皮细胞ＩＣＡＭ－１的ｍＲＮＡ表达。结果显示：在蒿属花粉飘散期，８例标本全部呈阳性；在蒿属花粉非飘散期，３例标本中２例阴性，１例阳性（该例对屋内尘土皮肤试验也呈阳性反应）。由此提示：当外界环境中的特异性变应原含量增高时，花粉症患者的鼻粘膜上皮细胞表达Ｉ－ＣＡＭ－１，而无致敏原时，ＩＣＡＭ－１的表达为阴性。     

从组织化学及超微结构的研究探讨胆脂瘤的发病机制

近年来文献上在关于胆脂瘤发病机制的报导中,都指出胆脂瘤上皮下层形态学改变的重要作用。认为颞骨破坏的程度直接与上皮下层炎症反应和肉芽组织的扩展有关;骨间质为酶所破坏,除胶原蛋白酶之外,溶酶体的酶作用也参予这一过程。本文研究的目的就是从这一方面来探讨胆脂瘤的发病机制。作者们从乳突根治术病人身上采取胆脂瘤基质及鼓窦入口附近的骨质标本共10     

中耳胆脂瘤中增殖细胞核抗原及Ki67和p53蛋白的表达

评价胆脂瘤上皮的增殖状态对研究胆脂瘤的生物学特征 ,确定其临床过程及严重程度有重要意义。研究胆脂瘤增殖细胞核抗原 (ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＰＣＮＡ)、Ｋｉ6 7和ｐ5 3表达的目的是确定它们的增殖行为 ,探讨其发生机制。一、材料和方法1 材料来源 :收集中国医科大学第二临床医院病理科 1988年 1月～ 1999年 10月的手术标本 ,其中胆脂瘤标本 18个 (男 10例、女 8例 ,年龄 6～ 6 5岁 ) ;正常外耳道皮肤标本 6个 (男 4例、女 2例 ,年龄 6～ 5 5岁 )。标本经 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋 ,制成 4μ…     

肿瘤坏死因子受体1在中耳胆脂瘤上皮中的表达

目的 研究肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）在中耳继发性胆脂瘤上皮的表达，探讨其在胆脂瘤型中耳炎的发病机制中的作用。方法 分别采用免疫组化法和Western blot技术检测TNFR1在36例中耳胆脂瘤组织及20例正常外耳道皮肤组织中的表达情况。结果 TNFR1在36例胆脂瘤上皮各层细胞中均有强表达，定位于胞膜和胞质，而外耳道皮肤表达较弱甚至没有表达，TNFR1在胆脂瘤上皮中的蛋白表达水平较外耳道皮肤显著增高，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 胆脂瘤上皮中TNFR1表达较外耳道皮肤显著增高，肿瘤坏死因子可能通过与TNFR1相结合而导致胆脂瘤上皮细胞的过度增殖及凋亡。     

角化细胞生长因子在中耳胆脂瘤的表达及意义

目的研究角化细胞生长因子（keratinocyte growth factor,KGF）在中耳胆脂瘤中的表达,探讨KGF对胆脂瘤上皮增殖能力的影响及其在中耳胆脂瘤发生、发展中的作用。方法20例胆脂瘤上皮标本及配对的正常外耳道皮肤标本制成石蜡切片,应用免疫组化SP染色法检测上述两组标本中KGF和Ki67的表达,对染色结果进行定量分析。结果KGF在胆脂瘤上皮中呈强阳性表达,且从基底层向角质层染色有逐渐增强的趋势,间质中可见散在的阳性细胞;正常外耳道皮肤标本主要表现为间质中稀疏不均的弱阳性表达,在上皮细胞不表达。胆脂瘤上皮和正常外耳道皮肤的KGF阳性表达率之间差异有显著性意义（P〈0.01）。在胆脂瘤上皮中KGF与Ki67表达呈正相关（r=0.609,P〈0.01）。结论KGF和Ki67表达与中耳胆脂瘤的增殖能力有高度相关性,局部炎症通过调控KGF的表达促进胆脂瘤上皮的异常增殖,其中KGF的自分泌机制可能与胆脂瘤的发生、发展密切相关。     

细胞周期蛋白D1基因表达与喉癌生物学行为的关系

为探讨ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因扩增的临床意义，采用免疫荧光技术检测了２５例喉鳞癌的新鲜标本。发现细胞周期蛋白Ｄ１基因在喉癌中有９例扩增，而且与肿瘤分级和ＴＮＭ分期差别无显著性意义；而与肿瘤组织相邻近的正常组织表达阴性，或仅见极个别散在表达，推测ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因在喉癌的发生发展中可能是非早期现象。