敲除CD226通过调节小鼠脾脏和肠道免疫细胞比例缓解小鼠的慢性束缚应激引起的抑郁样行为

目的 探讨CD226在小鼠慢性束缚应激(CRS)诱导的抑郁样行为中发挥的免疫调控作用及其可能机制。方法 选取4～6周龄野生型(WT)雄性C57/BL6J和同品系CD226基因敲除(CD226KO)小鼠建立CRS模型，通过强迫游泳测试、蔗糖偏好测试等行为学检测方法对小鼠进行应激抑郁评分，利用流式细胞术分析脾脏、Peyer淋巴结及肠上皮内淋巴细胞亚群的差异。结果 与WT CRS组相比，CD226KO CRS组强迫游泳测试静止时间显著降低，蔗糖偏好率显著上升；脾脏CD4⁺T细胞和CD8⁺ T细胞之比显著降低；小肠上皮内淋巴细胞中T细胞受体αβ(TCRαβ)和TCRαβ CD8αβ细胞亚群比例显著升高。结论敲除CD226能够缓解小鼠CRS模型诱导的抑郁样行为，影响CRS状态下小鼠脾脏及肠道免疫细胞比例，改善小鼠应激状态下的整体免疫状态。     

肝X受体激动剂GW3965对应激小鼠海马小胶质细胞活化的影响

目的:研究肝X受体（LXRs）激动剂GW3965对慢性不可预知性应激（CUS）抑郁模型小鼠海马CA1、CA2/3和DG区内小胶质细胞密度和神经炎症的作用。方法:选取4～6周龄的雄性C57BL/6J小鼠，适应性喂养1周后，随机分为对照组（control）、对照+GW组（GW）、抑郁模型组（CUS）以及抑郁模型+GW组（CUS+GW）。对CUS组和CUS+GW组小鼠进行10周的CUS干预；从第7周起，对GW组和CUS+GW组小鼠进行4周的GW3965给药。第10周末进行行为学测试后运用免疫荧光方法评估小鼠海马各亚区内小胶质细胞的密度，并采用Western Blot检测海马炎症因子的水平。结果:10周的CUS干预显著减少C57小鼠的体重以及糖水偏好实验结果，并显著增加强迫游泳实验中小鼠的不动时间；4周的GW3965治疗可以逆转以上结果。CUS干预显著增加小鼠海马CA1区、CA2/3区和DG区内Iba1⁺小胶质细胞密度，以及海马炎症因子IL-1β、TNF-α和转录因子NF-κB的蛋白表达水平，显著降低抗炎介质CD206的蛋白表达水平；而GW3965治疗可逆转上述变化。结论...     

慢性束缚应激对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响

目的 探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响。方法 48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、模型组(CRS)、氟西汀(FLX)药物干预组(CRS+FLX),每组各16只。慢性束缚应激3周建立抑郁小鼠模型，应激的第8天至第21天，CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射FLX(10 mg/kg),control组及CRS组注射等体积生理盐水。采用旷场实验以及糖水偏好实验检测各组小鼠行为变化；采用免疫组织化学法和Western blotting检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达；Real-time PCR检测海马A1和A2型星形胶质细胞标记物的表达。结果 与control组相比，CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为，包括糖水偏好百分比显著降低(P<0.0001),体重明显较低(P<0.05),旷场实验在中央区域活动的距离明显降低(P<0.0001),FLX干预可逆转CRS所诱导的抑郁样行为表现(P<0.05);与control组相比，CRS组小鼠海马星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(...     

氟西汀通过上调海马内溴结构域蛋白4的表达改善慢性束缚应激所致小鼠的抑郁样行为

目的 探讨氟西汀（FLX）对慢性束缚应激（CRS）所致小鼠抑郁样行为及海马内溴结构域蛋白4（BRD4）表达的影响。 方法 24只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照（NS）组、抑郁模型（CRS）组、氟西汀干预（CRS+FLX）组。慢性束缚应激3周建立小鼠抑郁模型,应激的第8天至第21天 CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射氟西汀（10mg/kg）,NS组及CRS组注射等体积生理盐水。采用糖水偏好实验、喷糖实验、强迫游泳实验、新旧事物识别实验和旷场实验检测各组小鼠行为变化;采用Western blotting及Real-time PCR法检测小鼠海马BRD4蛋白和mRNA的表达情况。 结果 与NS组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低（P<0.01）,喷糖实验舔糖时间缩短（P<0.05）,强迫游泳不动时间增加（P<0.01）,新事物辨别指数降低（P<0.0001）,抗抑郁药FLX干预可逆转CRS所诱导的上述抑郁样行为表现（P<0.05）;与NS组相比,CRS组小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达明显下调（1.;0000 ± 0.04577 比 0.08337 ± 0.01658;1.0000 ± 0.04379 比 0.6672 ± 0.03193,P<0.05）,而FLX可上调抑郁小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达（0.08337 ± 0.01658 比 0.4983 ± 0.08574;0.6672 ± 0.03193比0.8572 ± 0.03181,P<0.05）。 结论 氟西汀可能通过上调海马BRD4的表达改善小鼠抑郁样行为。     

皮质酮与慢性不可预见性应激诱导的两种抑郁症模型比较

目的从行为学及分子水平比较皮质酮(CORT)与慢性不可预见性应激(CUMS)诱导的抑郁症模型的异同,为抑郁症发病机制研究及抗抑郁药物的筛选与评价模型提供一定的参考。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组(Ctrl)、慢性不可预见应激组(CUMS)和皮质酮注射应激组(CORT)组,制作应激模型21d,期间每3d对小鼠进行称重。21d模型制作结束后,对小鼠进行行为学测试,并于第22天,通过眼眶取血收集动物血清,并用ELISA法测定血清皮质酮含量。眼眶取血后脱颈椎处死动物,取出动物的胸腺和脾脏进行称重,计算脏器指数;取出脑组织,置于液氮罐保存,尼氏(Nissl)染色法观察小鼠大脑海马区神经元损伤情况;采用Western blotting、RT-PCR方法测定抑郁症相关蛋白及基因的表达。结果与对照组相比,两种抑郁症模型组开场实验中的行为学指标均改变,强迫游泳和悬尾实验的累积不动时间显著升高。两个模型组的胸腺指数无明显变化,而CORT组的脾脏指数较对照组下降。CUMS和CORT组小鼠血清皮质酮含量高于对照组,CORT组与CUMS组相比有升高趋势,但差异无显著性。CUMS和CORT两种模型均使海马CA1、CA3和DG区神经元密度降低,CORT模型变化更明显。两模型组的促肾上腺素释放激素(CRH)的mRNA和蛋白的表达量均显著性增加,脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化转录因子环磷腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的蛋白表达水平均呈现明显地抑制,但CUMS和CORT两组之间差异无显著性。结论 CORT模型和CUMS模型均能成功构建抑郁症模型,且与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴紊乱有关,两种模型在小鼠海马结构改变及大脑BDNF-pCREB和ERK信号通路激活等方面差异无显著性。提示,CORT模型可用于抑郁症机制的研究及抗抑郁药的筛选与评价,尤其可用于以HPA轴功能紊乱所引起的抑郁症分子机制探讨。     

慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷及相关酶表达的影响

目的 探讨慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷(m6A)及相关酶表达影响。方法 将20只C57BL/6J雄鼠随机分成对照(control)组、慢性束缚应激模型(CRS)组；给予CRS组小鼠3周慢性束缚应激建立小鼠焦虑模型，采用旷场实验和高架十字迷宫实验检测各组小鼠焦虑样行为变化；采用免疫组织化学法和m6A RNA甲基化检测试剂盒检测小鼠海马m6A的表达变化；采用Western blotting和Real-time PCR方法分析海马m6A相关酶表达变化。结果 1.小鼠焦虑相关行为学检测结果显示，与control组相比，CRS组小鼠在旷场内框停留时间明显下降(P<0.01);高架十字迷宫开放臂探索时间减少(P<0.0001);2. m6A RNA甲基化检测试剂盒检测结果显示，与control组相比，CRS组小鼠海马m6A含量明显减少(P<0.05);免疫组化结果显示，与control组相比，CRS组小鼠海马m6A阳性产物明显减少(P<0.001);3. PCR结果显示，与control组相比，CRS组小鼠海马去甲基化酶间变性淋巴瘤激酯B(AlkB)同源蛋白5(AL...     

氟西汀对抑郁症模型小鼠Treg细胞的影响

目的:探讨CUMS抑郁症模型小鼠经氟西汀治疗后Treg细胞的改变。方法:采用慢性不可预知温和应激(CUMS)建立抑郁小鼠模型,糖水偏好和摄食比作为抑郁行为学的评估指标。通过免疫组化、流式细胞术检测抑郁小鼠中Treg细胞数的变化。结果:免疫组化结果显示CUMS模型组脾脏Treg细胞数量与对照组相比明显升高,经氟西汀治疗后Treg细胞数量下调(P<0.05);流式细胞术检测结果显示相比CUMS模型组及对照组氟西汀治疗后Treg细胞占CD4⁺T细胞明显降低。结论:CUMS模型小鼠抑郁症状可通过氟西汀治疗后改善,并伴随着Treg细胞亚群比例的降低。     

慢性应激对心肌梗死后大鼠模型行为学及海马BDNF的影响

目的:探讨慢性应激对心肌梗死后大鼠模型行为学及海马BDNF的影响.方法:建立急性心肌梗死模型.结合慢性不可预见的轻度应激和孤养制作心梗并抑郁复合大鼠模型.观察动物的体重变化和行为学指标,用Westernblot方法检测海马BDNF蛋白表达.结果:经过21天慢性不可预见轻度应激.模型组大鼠体重、糖水消耗和糖水偏爱百分比、敞箱试验得分均明显降低,纯水消耗显著增加;海马BDNF蛋白表达减少(P<0.05).结论:对急性心肌梗死大鼠采用21天慢性应激后,模型鼠体重下降、行为学明显异常,符合抑郁动物的行为学改变,且存在海马神经元可塑性降低的表现,这可能是心肌梗死并抑郁发病的机制之一.     

复方刺蒺藜苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及海马CNTF表达的影响

目的：观察刺蒺藜苷对慢性应激抑郁大鼠行为学及海马CNTF表达的影响.方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、复方刺蒺藜苷组、氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型.通过敞箱实验观察抑郁模型大鼠行为学改变并运用免疫组化和原位杂交方法探讨复方刺蒺藜苷对抑郁模型大鼠海马神经元细胞CNTF、CNTFmRNA表达的影响.结果：慢性应激抑郁大鼠敞箱实验中水平穿越格数、竖立次数、理毛时间有减少,中央格停留时间、粪便粒数均有增加.刺蒺藜苷和氟西汀可改善大鼠行为学变化.与模型组相比,复方刺蒺藜苷组大鼠海马神经元CNTF免疫反应阳性颗粒数目增多,神经元平均灰度值降低.结论：刺蒺藜苷能明显改善抑郁动物的各项行为学指标,增加海马CNTF、CNTF mRNA的表达具有抗抑郁作用.     

白桦脂醇对慢性应激抑郁模型大鼠行为及神经营养因子表达的影响*

目的：探讨白桦脂醇对慢性不可预知温和应激抑郁（ CUMS）模型大鼠的抗抑郁作用，为治疗抑郁症提供 基础理论依据。方法：大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组和白桦脂醇组，采用氟西汀和白桦脂醇干预改进 CUMS模型大鼠，通过行为学观察抑郁行为，TUNEL法检测海马神经元凋亡，HPLC-ECD法检测5- 羟色胺（5-HT）、 去甲肾上腺素（ NE）和多巴胺（ DA）神经递质水平，免疫印迹检测脑源性神经营养因子（ BDNF）、神经营养 蛋白3（NT-3）和神经生长因子（ NGF）蛋白水平。结果：氟西汀组和白桦脂醇组较模型组大鼠的体质量在3、4 周增加，且在4 周时白桦脂醇组较氟西汀组的大鼠体质量增加；氟西汀组和白桦脂醇组较模型组大鼠悬尾静止时 间、强迫游泳不动时间均延长，且氟西汀组较白桦脂醇组明显延长；氟西汀组和白桦脂醇组较模型组海马凋亡细 胞数下降，且白桦脂醇组高于氟西汀组；氟西汀组和白桦脂醇组较模型组大鼠脑组织中5-HT、NE和DA含量均 减少，且氟西汀组较白桦脂醇组减少；氟西汀组较模型组大鼠脑组织BDNF、NT-3 和NGF 蛋白相对表达水平均 降低，氟西汀组较白桦脂醇组降低。结论：白桦脂醇能够改善CUMS模型大鼠的抑郁行为，且对其海马神经元具 有一定保护作用。     

葛根素对围绝经期抑郁症模型小鼠的神经保护作用及机制研究

目的:探讨葛根素对围绝经期抑郁症模型小鼠行为影响及神经生物学机制。方法:清洁级昆明小鼠饲养1周以适应环境。旷场实验(OFT)筛选后,随机分为假手术组、围绝经期抑郁症模型组、氟西汀组(FLU,3mg/kg)、雌激素组(E,0.15 mg/kg)和葛根素组(92 mg/kg),每组10只。采用小鼠双侧卵巢切除(OVX)联合慢性不可预知性温和应激(CUMS)法建立围绝经期抑郁症动物模型。各给药组于每日应激前1 h灌胃给药,其余各组给予等体积生理盐水,共计21 d。观察小鼠动情周期变化,测定行为学变化,观察海马组织形态学改变,测定脑组织单胺类递质含量,测定海马组织c AMP反应元件结合蛋白(CREB)-脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路主要蛋白表达。结果:与假手术组比较,各OVX组小鼠连续7 d内连续监测未见动情周期变化,证明去势成功;围绝经期抑郁症模型组小鼠呈现抑郁样行为,表现为自发活动及探索行为减少、行为绝望时间增加、体质量增长缓慢(P0.01或P0.05),海马神经元损伤、萎缩、数量减少、尼氏体减少及早期凋亡变化,脑组织五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)及多巴胺(DA)含量减少(P0.01);海马组织CREB-1、磷酸化c AMP反应元件结合蛋白(p-CREB-1)、BDNF及酪氨酸蛋白激酶B(Trk B)蛋白表达减少(P0.01)。与围绝经期抑郁症模型组比较,给予葛根素(Pue)治疗后,可改善围绝经期抑郁症模型小鼠抑郁样行为,表现为增加自发活动及探索行为、减少行为绝望时间、体质量增加迅速(P0.01或P0.05);减轻海马组织神经元损伤及凋亡细胞,增加脑组织5-HT、NE及DA含量(P0.01),增加海马组织CREB-1、p-CREB、BDNF及Trk B蛋白表达(P0.01),差异具有统计学意义。结论:采用小鼠双侧OVX联合CUMS可成功制备围绝经期抑郁症动物模型。葛根素具有神经保护及抗围绝经期抑郁症作用,其机制主要通过减轻海马神经元损伤、抑制神经元早期凋亡、增加脑组织单胺类递质含量及上调脑组织CREB-BDNF信号通路主要蛋白表达而发挥的。     

Chronic stress impairs learning and hippocampal cell proliferation in senescence-accelerated prone mice

Chronic stress can induce cognitive impairment. It is unclear whether a higher susceptibility to chronic stress is associated with the progression of pathological brain aging. Senescence-accelerated prone mouse 8 (SAMP8) is a naturally occurring animal model of accelerated brain aging. Senescence-accelerated resistant mouse 1 (SAMR1) is usually used as the normal control. In this study, we examined the effects of chronic restraint stress (CRS) on learning in the Y-maze, hippocampal cell proliferation, and the expression of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in the hippocampus of 4-month-old SAMP8 and SAMR1. The results showed that exposure to CRS impaired learning and hippocampal cell proliferation in SAMP8 and SAMR1 but to a much greater extent in SAMP8. Furthermore, CRS significantly decreased the expression of BDNF protein and mRNA in the hippocampus of SAMP8 and SAMR1. These data indicated that SAMP8 is more sensitive to the deleterious effects of CRS on learning than SAMR1. A greater decrease in hippocampal cell proliferation caused by chronic stress may be part of the underlying mechanism for the more severe learning deficit observed in SAMP8. In addition, our findings suggested a role of BDNF in the stress-induced impairment of learning and hippocampal cell proliferation in both strains.     

探索GalR1在雌性CUMS C57小鼠海马表达及M617对干细胞增殖的影响

目的:探究GalR1在雌性CUMS C57小鼠海马表达及GalR1激动剂M617对干细胞增殖的影响。方法:(1)将小鼠分为实验组及对照组,对照组不给予任何刺激,实验组给予慢性温和不可预知应激(CUMS)。通过糖水偏好、悬尾实验及血清皮质酮比较两组的抑郁水平;部分小鼠行免疫荧光染色比较两组海马DG的增殖情况;另一部分小鼠行qPCR检测,比较两组海马甘丙肽及其受体的表达。(2)行细胞培养,传代细胞给予不同浓度的M617处理3 d,取每组细胞铺板并加入10μmol/L的Brd U,继续孵育4 h后PFA固定,行Brdu免疫荧光染色并比较各组的阳性细胞数。结果:(1)第2、3周的糖水偏好实验显示两组糖水的消耗量未见差异,第4周CUMS组糖水消耗量少于对照组(P0.05);悬尾实验中,CUMS组静止不动时间延长(P0.05);CUMS组血清皮质酮水平明显高于对照组(P0.01)。(2)CUMS组海马DG区的Brd U+及Ki67+细胞数明显少于对照组(P0.05)。(3)q PCR结果显示CUMS组甘丙肽及GalR1基因表达水平明显增加(P0.01)。(4)不同浓度M617对干细胞增殖无明显组间差异。结论:(1)GalR1在雌性CUMS C57小鼠海马表达增高,可能参与调节抑郁症的发生过程。(2)不同浓度M617对干细胞增殖无明显影响,提示GalR1可能不参与神经干细胞增殖的调节。     

人脐带间充质干细胞移植对慢性应激模型小鼠抑郁行为的改善作用

目的 探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)尾静脉移植对慢性不可预测性温和应激(CUMS)模型小鼠抑郁行为的改善作用.方法 获得第3代hUCMSCs;将60只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组(给予生理盐水)、细胞组(移植hUCMSCs)、氟西汀(flu)给药组(给予flu),每组15只.构建6周CUMS小...     

毛蕊花糖苷通过调控BDNF-TrkB信号通路改善CUMS大鼠的抑郁样行为

目的:观察毛蕊花糖苷(acteoside)对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠抑郁样行为的影响,并探讨脑源性神经营养因子-原肌球蛋白受体激酶B(brain-derived neurotrophic factor-tropomyosin receptor kinase B,BDNF-TrkB)信号通路在其中的作用机制。方法:采用CUMS结合孤养的方式制备抑郁模型大鼠,成模后随机分为模型组、盐酸氟西汀(20 mg/kg)组和毛蕊花糖苷(30 mg/kg、60 mg/kg和120 mg/kg)组,每组18只,另取18只正常大鼠作为对照组,连续灌胃给药3周。采用强迫游泳实验和糖水偏好实验检测大鼠抑郁样行为的变化;免疫荧光和Western blot法检测大鼠海马BDNF-TrkB信号通路相关蛋白的表达情况;ELISA法检测脑组织中单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:与对照组比较,模型组大鼠强迫游泳不动时间明显延长,糖水偏好量明显下降,海马BDNF和TrkB的表达均明显降低,脑组织中5-HT、DA和NE含量均显著减少;与模型组比较,盐酸氟西汀组和毛蕊花糖苷各剂量组以上各检测指标均得到显著逆转(P0.05)。结论:毛蕊花糖苷可能通过上调海马BDNF-TrkB信号通路、增加脑内单胺类神经递质含量而改善CUMS大鼠的抑郁样行为。     

Chronic mild restraint stress rats decreased CMKLR1 expression in distinct brain region

Inflammation contributes to the pathophysiology of depression. Chemokine-like receptor-1 (CMKLR1) plays an important role both in the development of inflammation and in the mechanism of antidepressant effect of Omega-3 polyunsaturated fatty acids (Omega-3 PUFAs), ecosapeatanolicacid (EPA). The present study was to investigate the modification of CMKLR1 in chronic restraint stress (CRS) rats. CMKLR1 was examined in different brain region from CRS rats by using western blot and quantitative real-time PCR. The CMKLR1 expression in the hippocampus, prefrontal cortex and cerebellum was determined on 3, 7, 10 and 21 days of repeated restraint stress and was compared to controls. The results showed that the protein and mRNA level of CMKLR1 in the prefrontal cortex and hippocampus were significantly increased on day 3 and then decreased on day 7, 10 and 21 in the CRS rats. The protein and mRNA level of CMKLR1 in cerebellum was similar to that of control group throughout the whole experiment. Changed expression of brain CMKLR1 is suggested to be involved in the mechanism of depression.