HCG11靶向结合miR-543调节血肿瘤屏障通透性

目的研究HCG11和miR-543对血肿瘤屏障通透性的作用及可能机制。方法应用Real-time PCR检测人脑微血管内皮细胞(endothelial cells, ECs)和人胶质瘤微血管内皮细胞(glioma endothelial cells, GECs)中HCG11和miR-543的表达以及二者的结合作用。应用Lipo3000将HCG11表达沉默和/或miR-543过表达质粒载体分别转染GECs,验证转染效率后,通过测量跨内皮细胞阻抗值(transendothelial electric resistance, TEER)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)渗透量,检测血肿瘤屏障通透性。应用Real-time PCR和Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-5的表达。荧光素梅报告基因系统分析miR-543与HCG11的结合作用。结果 HCG11在GECs中表达显著增加,miR-543在GECs中表达显著降低;HCG11表达沉默、miR-543过表达均显著降低TEER值,增加HRP渗透量,降低ZO-1、Occludin和Claudin-5的蛋白表达水平。MiR-543与HCG11存在靶向结合作用。HCG11表达沉默显著增加miR-543的表达,增加血肿瘤屏障通透性。结论 HCG11通过靶向结合miR-543调节血肿瘤屏障通透性。     

RMP7介导血肿瘤屏障通透性增加的机制研究

目的研究miR-200b是否参与RMP7介导的血肿瘤屏障(BTB)通透性增加及可能机制。方法测量跨内皮阻抗值(TEER)、辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血肿瘤屏障的通透性的改变,应用RealTime PCR检测RMP7作用BTB后大鼠脑微血管内皮细胞(ECs)miR-200b的表达,应用miR-200b mimic和miR-200b inhibitor分别转染GECs(ECs和U87脑胶质瘤细胞共培养的细胞)后分析血肿瘤屏障的通透性的改变;应用Western blot检测紧密连接相关蛋白zonula occludens-1(ZO-1)的表达;应用免疫荧光方法观察GECs紧密连接相关蛋白ZO-1和丝状肌动蛋白(F-actin)结构和分布的改变。结果 CRMP7诱导TEER值显著降低,HRP显著升高;RMP7作用GECs后,使GECs内源性miR-200b表达显著降低;miR-200b mimic和miR-200b inhibitor成功转染到GECs中;miR-200b mimic显著抑制RMP7诱导TEER值的降低,HRP的升高,以及ZO-1的表达,抑制ZO-1由内皮细胞的边缘向细胞质转移,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,分布于细胞边缘的F-actin明显增加,应力纤维形成明显减少;miR-200b inhibitor结果与miR-200c mimic实验结果相反。结论 MiR-200b参与RMP-7介导的BTB通透性增加。     

ROCK介导缓激肽开放SD大鼠血肿瘤屏障

目的利用ROCK的特异性抑制剂Y-27632,研究ROCK是否介导缓激肽开放血肿瘤屏障。方法应用ROCK的特异性抑制剂Y-27632预处理大鼠原代脑微血管内皮细胞后,用缓激肽诱导血肿瘤屏障开放,测量跨内皮阻抗值(TEER),辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血肿瘤屏障的通透性的改变;应用Western-blot法检测紧密连接相关蛋白ZO-1的表达;应用免疫荧光方法观察原代大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白ZO-1和丝状肌动蛋白结构和分布的改变。结果 Y-27632显著抑制缓激肽诱导TEER值的降低,HRP的升高;Y-27632显著抑制ZO-1的表达;Y-27632抑制ZO-1由内皮细胞的边缘向细胞质转移,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,应力纤维形成明显减少。结论 ROCK介导缓激肽开放血肿瘤屏障。     

RNA干扰沉默神经轴突导向因子受体4基因增加血肿瘤屏障通透性

目的研究神经轴突导向因子受体(Robo4)对血肿瘤屏障(BTB)通透性的影响。方法建立了体外BTB模型,应用Real-time PCR和Western blot检测Robo4在正常人脑微血管内皮细胞和胶质瘤微血管内皮细胞中的表达变化。设计合成针对Robo4基因的小干扰RNA,转染至人脑微血管内皮h CMEC/D3细胞,下调体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中Robo4的表达,跨内皮电阻测量系统和辣根过氧化物酶渗透试验分析血肿瘤屏障通透性变化;Western blot和免疫荧光法检测h CMEC/D3细胞中紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达和分布变化。结果和正常人脑微血管内皮细胞相比,Robo4在胶质瘤微血管内皮细胞中的表达显著上调。下调体外血肿瘤屏障模型内皮细胞Robo4的表达后,TEER值显著降低,辣根过氧化物酶透过率显著增高;同时胶质瘤微血管内皮细胞中紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达显著降低,在细胞膜上呈不连续分布。结论 RNA干扰沉默Robo4表达能够显著降低紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达,增加BTB通透性。     

RhoA在内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性中的作用

目的探索信号分子RhoA在内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-H)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性中的作用。方法采集出生3~5d的Wistar胎鼠的大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)原代培养;将BMECs与C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型;共培养后的BMECs随机分成3组(每组6例):对照组、EMAP-Ⅱ组和C3 exoenzyme+EMAP-Ⅱ组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组BTB通透性变化情况;Western blot法检测BMECs上紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平;免疫荧光法检测ZO-1和细胞骨架蛋白F-actin在BMECs上的分布与表达。结果与对照组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB通透性显著增高,ZO-1和F-actin在BMECs上的表达水平显著降低,应力纤维形成明显增多;EMAP-Ⅱ的上述作用受到RhoA抑制剂C3 exoenzyme预处理的显著抑制。结论信号分子RhoA在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性中发挥着重要的作用。     

内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的信号通路

目的探索内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ(EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(BTB)通透性的可能信号通路。方法荷瘤Wistar大鼠被随机分成3组(每组10只):对照组、EMAP-Ⅱ组和H7+EMAP-Ⅱ组。采用Western blot法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接蛋白ZO-1和磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)的表达水平变化,免疫荧光法检测ZO-1和肌动蛋白F-actin的分布与表达水平变化。结果与对照组相比,EMAP-Ⅱ组脑微血管内皮细胞上ZO-1和F-actin的表达水平显著降低,pMLC的表达水平显著增高;EMAP-Ⅱ的上述作用受到蛋白激酶C(PKC)抑制剂H7预处理的显著抑制。结论 PKC-pMLC信号通路参与调控EMAP-Ⅱ增加BTB通透性的过程。     

siRNA-Tie1下调紧密连接相关蛋白claudin-5、occludin和ZO-1增加血肿瘤屏障通透性

目的研究Tie1 AS和Tie1表达变化对血肿瘤屏障通透性的影响和相关机制。方法建立体外血脑屏障和血肿瘤屏障模型,Real-time PCR检测h CMEC/D3细胞中Tie1 AS和Tie1的表达水平。转染p IRES2-EGFPTie1 AS表达载体上调体外血肿瘤屏障模型h CMEC/D3细胞中Tie1 AS的表达,Western blot检测Tie1的表达变化。将si RNA-Tie1转染人h CMEC/D3细胞并建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统分析血肿瘤屏障通透性变化;Western blot和免疫荧光法检测h CMEC/D3细胞中紧密连接相关蛋白claudin-5、occludin和ZO-1的表达和分布变化。结果和正常脑微血管内皮细胞相比,体外血肿瘤屏障模型h CMEC/D3细胞中Tie1的表达显著增加,而Tie1 AS的表达显著降低。上调体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中Tie1 AS的表达水平,能够显著降低Tie1的表达。下调体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中Tie1的表达后屏障通透性显著下降,伴有claudin-5、occludin和ZO-1的表达下调以及在细胞膜上呈不连续分布。结论体外血肿瘤屏障模型内皮细胞中低表达的Tie1 AS能够负性调控Tie1的表达,进而通过调节紧密连接相关蛋白的表达和分布影响屏障的通透性。     

内皮-单核细胞激活多肽酶Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的机制

目的研究内皮-单核细胞激活多肽II(endothelial monocyte activating polypeptide-II,EMAP-II)选择性开放血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)的作用机制。方法荷瘤大鼠被随机分成4组(每组12只):对照组,EMAP-II组,寡霉素组和寡霉素+EMAP-II组。采用伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验评估各组BTB通透性变化情况;Western Blot法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平变化;双重免疫荧光法检测EMAP-II和α-ATP合成酶在脑微血管内皮细胞上的分布。结果 EMAP-II组BTB通透性显著高于对照组和寡霉素组(<0.01),紧密连接相关蛋白ZO-1的表达水平显著降低(<0.01),其作用受到ATP合成酶抑制剂寡霉素(Oligomycin)的显著抑制(<0.05);EMAP-II与α-ATP合成酶在胶质瘤微血管内皮细胞上共定位。结论 EMAP-II可能通过开放紧密连接增强BTB的通透性,脑微血管内皮细胞上的α-ATP合成酶是其可能的作用位点。     

蛋白激酶C在内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性中的作用

目的 探索信号分子蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ(endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性中的作用。方法 荷瘤大鼠被随机分成3组C每组8只):对照组、EMAP-Ⅱ组、H7+EMAP-Ⅱ组。采用伊文思蓝(Evans blue,EB)渗透性实验评估实验各组BTB通透性的变化;Western Blot法、免疫组织化学法及免疫荧光法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接相关蛋白occludin表达水平的变化。结果 与对照组和H7+EMAP-Ⅱ组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB通透性显著增高,紧密连接相关蛋白occludin的表达水平显著降低,EMAP-Ⅱ的作用受到PKC抑制剂H7预处理的显著抑制。结论 信号分子PKC在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性中发挥着重要的作用。     

PLGF通过激活Rho/ROCK信号通路介导人脑微血管内皮细胞间紧密连接开放

目的 探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制.方法 利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HBMEC间紧密连接相关蛋白质occludin和ZO-1的表达及分布,用蛋白激酶抑制剂干预和Western blot法检测Rho蛋白活性.结果 25 ng/mL PLGF 30 min显著降低体外血脑屏障模型TEER,使其通透性增高(P＜0.05);增加S-occludin表达的同时降低了IS-occludin的表达,使ZO-1蛋白在细胞周边分布减少;此外,ROCK蛋白激酶抑制剂Y27632抑制了PLGF引起的体外血脑屏障透过性增高(P＜0.05),并激活细胞内Rho激酶活性.结论 PLGF通过激活HBMEC内Rho/ROCK信号通路,影响HBMEC间紧密连接完整性,进而改变血脑屏障的通透性.     

MIAT过表达载体的构建及其对血肿瘤屏障通透性的影响

目的构建长链非编码RNA心肌梗死相关转录物(MIAT)过表达载体pcDNA3.1-MIAT,并研究其对血肿瘤屏障通透性影响。方法从与脑胶质细胞U87共培养的人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3(GECs)提取总RNA,用反转录聚合酶链式反应技术扩增出MIAT基因片段,通过无缝连接技术克隆到pcDNA3.1载体中进行序列分析,转染重组质粒pcDNA3.1-MIAT到GECs中,real-time PCR检测转染效率,应用跨内皮电阻测量系统和辣根过氧化物酶渗漏实验分析血肿瘤屏障通透性的变化。结果成功扩增出MIAT基因,成功构建pcDNA3.1-MIAT表达载体,Blast序列分析与GenBank中NR00349一致。转染pcDNA3.1-MIAT后,96h转染效率最高,过表达MIAT组跨内皮阻抗值最低,辣根过氧化物酶流量最高,血肿瘤屏障通透性最高。结论成功构建pcDNA3.1-MIAT表达载体,过表达MIAT使血肿瘤屏障通透性升高。     

miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响

目的研究miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响。方法将miR-19a模拟物转染至人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3,应用real-timePCR法检测miR-19a的表达。用过表达miR-19a的hCMEC/D3细胞和人U251胶质瘤细胞建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统检测血肿瘤屏障跨内皮阻抗值的变化;Western blot和免疫荧光法检测体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达。结果经miR-19a模拟物转染后,hCMEC/D3细胞中miR-19a的表达水平显著升高;血肿瘤屏障跨内皮阻抗值显著下降;体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平显著降低,在细胞膜上呈不连续分布。结论 miR-19a过表达能显著增加血肿瘤屏障的通透性,其机制之一可能与降低紧密连接相关蛋白相关。     

过表达miR-34a增加血肿瘤屏障通透性机制的研究

目的探讨过表达miR-34a增加血肿瘤屏障通透性的机制。方法将miR-34a模拟物转染至培养的人脑微血管内皮细胞NKIM-6,采用实时荧光定量PCR方法检测miR-34a的表达。用miR-34a模拟物转染的NKIM-6细胞和U87胶质瘤细胞建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统检测血肿瘤屏障跨内皮阻抗值的变化;western blot和免疫荧光法检测体外血肿瘤屏障NKIM-6细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和claudin-5的表达。结果经miR-34a模拟物转染后,NKIM-6细胞中miR-34a的表达水平显著升高;血肿瘤屏障跨内皮阻抗值显著下降;体外血肿瘤屏障NKIM-6细胞中紧密连接相关蛋白ZO-1和claudin-5的表达水平分别显著降低,在细胞膜上呈不连续分布。结论过表达miR-34a显著增加血肿瘤屏障的通透性,其机制之一可能与降低紧密连接相关蛋白相关。     

IL-22改善脂多糖诱导的Caco-2单层肠上皮紧密连接损伤

目的紧密连接(TJ)屏障功能障碍在炎症性肠病(IBD)中起重要作用。据报道IL-22对IBD有直接的保护作用。研究IL-22对TJ屏障功能的保护作用。方法选择肠上皮Caco-2单层细胞,分为对照组、脂多糖(LPS)组、IL-22组、LPS+IL-22组。采用LPS(100μg/mL)或IL-22(100 ng/mL)处理肠上皮Caco-2单层细胞0、12、24、48 h。Western blot检测IL-22受体IL-22R1和TJ蛋白(ZO-1和Occludin)表达。检测Caco-2单层细胞膜跨膜电阻(TEER)。分析Caco-2单层细胞被LPS、IL-22处理48 h后的细胞膜TEER、TJ蛋白变化和免疫荧光方法观察TJ蛋白在细胞膜的分布。结果LPS可上调Caco-2细胞中IL-22R1的表达。LPS可显著降低Caco-2单层细胞膜TEER(刺激24 h,下降水平接近50%),差异有显著统计学意义(P 0.001)。IL-22组ZO-1、Occludin表达水平高于LPS组、LPS+IL-22组,差异有显著统计学意义(P 0.01)。LPS+IL-22组ZO-1、Occludin表达水平高于LPS组,差异有显著统计学意义(P 0.01)。免疫荧光法检测可见,对照组和IL-22组ZO-1、Occludin位于细胞膜,呈明亮连续条带;LPS组,位于细胞膜的ZO-1、Occludin明亮带变暗,显示强度和间断度降低;LPS+IL-22组细胞膜可见ZO-1、Occludin明亮带,但明亮带略弱于对照组和IL-22组。结论 IL-22在LPS诱导的肠屏障功能紊乱中起保护作用,并为IL-22在IBD中如何促进肠上皮屏障的完整性提供了新的证据。     

PGK1和ENO1介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用

目的研究磷酸甘油酸激酶1 (phosphoglycerate kinase 1, PGK1)和α-烯醇化酶(α-Enolase,ENO1)在脑胶质瘤微血管内皮细胞(Glioma microvascular endothelial cells, GECs)的表达,以及介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用。方法培养正常人脑为血管内皮细胞(normal microvascular endothelial cells, NECs)和GECs,应用Real-time PCR和Western Blot方法检测PGK1和ENO1的表达水平;设计并构建PGK1和ENO1表达沉默的质粒以及相应的对照质粒,分别转染hCMEC/D3细胞,筛选出稳定表达细胞株后建立PGK1和ENO1表达沉默的GECs;应用葡萄糖检测试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量,无血清培养法检测乳酸产量,Seahorse XF24细胞能量代谢分析仪检测细胞的细胞外酸化率;应用CCK8实验检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞迁移变化,Matrigel基质胶实验检测血管形成能力的变化。结果与NECs相比,PGK1和ENO1mRNA和蛋白表达水平在GECs中显著增高;PGK1和ENO1表达沉默均显著抑制了GECs的葡萄糖摄取量、乳酸产量和细胞外酸化率,显著降低了GECs的增殖、迁移和血管形成能力。结论 PGK1和ENO1介导的有氧糖酵解促进脑胶质瘤微血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成。     

血必净注射液通过降低细胞紧密连接的通透性减轻LPS诱导的脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤

目的 探究血必净注射液(XBJ)对脂多糖诱导的脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤的作用及其对细胞紧密连接通透性的影响。方法 选择大鼠肺微血管内皮细胞，利用5μg/mL的脂多糖(LPS)处理大鼠肺微血管内皮细胞24 h,构建大鼠脓毒症肺损伤细胞模型，XBJ治疗组采用生药浓度2.5、5、10、25、50 mg/mL的XBJ共同进行干预24 h。CCK-8检测各组细胞活性，筛选最佳XBJ浓度；Hoechst染色检测各组细胞凋亡率；Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved caspase3的表达；Transwell小室检测单层大鼠肺微血管内皮细胞通透性；Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1、ZO-2和occludin的表达。结果 CCK8实验结果显示，XBJ的最佳浓度为10mg/mL。LPS处理后，大鼠细胞凋亡率明显升高，凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的比值和cleaved caspase3的表达水平增加；而XBJ治疗后，细胞凋亡率下降。LPS处理导致FITC-dextran含量显著增加，ZO-1、ZO-2和Occludin的蛋白表达水平降...     

caveolin-1对低频超声辐照选择性开放血肿瘤屏障中occludin表达及分布的影响

目的探讨低频超声辐照选择性开放血肿瘤屏障过程中,caveolin-1对occludin表达及分布的影响。方法 Western blot检测occludin的表达,测量跨内皮细胞电阻值检测血肿瘤屏障通透性,双重免疫荧光染色法检测caveolin-1及occludin在脑微血管及体外血肿瘤屏障内皮细胞内的定位表达。结果低频超声辐照后occludin表达及跨内皮细胞电阻随时间变化呈先下降后回升趋势,于低频超声辐照后1.5h,二者下降最为显著(P0.01)。以低频超声辐照后1.5h为时间点,抑制caveolin-1的表达,occludin的表达增加(P0.01),跨内皮电阻增高(P0.05)。双重免疫荧光染色显示caveolin-1和occludin在正常和脑胶质瘤大鼠脑微血管共定位,在体外血肿瘤屏障内皮细胞膜上共定位;低频超声辐照后1.5h,caveolin-1在胞质中表达显著增多,并诱导occludin从胞膜转移至胞质。结论低频超声辐照选择性开放血肿瘤屏障的过程中,caveolin-1增加血肿瘤屏障通透性与下调occludin的蛋白表达并诱导其内化相关。     

蛋白酪氨酸激酶6对TNF-α诱导的人气道上皮屏障功能减损的影响北大核心CSCD

目的:探讨蛋白酪氨酸激酶6(PTK6)对TNF-α诱导的人气道上皮屏障功能减损的影响及相关机制。方法:体外培养人气道上皮16HBE细胞,予TNF-α刺激,分别转染PTK6 siRNA和recombined PTK6,以转染Scramble siRNA和Empty vector为对照。四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞活性;跨皮细胞组抗仪检测细胞跨皮细胞阻抗(TER);辣根过氧化物酶(HRP)流量法反应细胞通透性;RT-PCR检测ZO-1、Occludin mRNA水平;Western blot检测PTK6、ZO-1、Occludin、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化c-Jun氨基端激酶1/2(p-JNK1/2)和磷酸化p38(p-p38)蛋白水平。结果:TNF-α刺激后,细胞ZO-1、Occludin转录及蛋白水平、TER值显著降低,细胞通透性增高,同时PTK6、p-ERK1/2、p-JNK1/2和p-p38蛋白水平显著增高(P<0.05);上调PTK6使ZO-1、Occludin转录及蛋白水平和TER值进一步降低,细胞通透性和p-JNK1/2、p-p38蛋白水平也进一步增高(P<0.05),但下调PTK6后上述指标呈相反变化(P<0.05);上调或下调PTK6对p-ERK1/2无明显影响。结论:下调PTK6可以降低JNK1/2、p38MAPK磷酸化水平,进而改善TNF-α诱导的气道上皮屏障功能减损。     

EMAP-Ⅱ选择性增加胶质瘤大鼠血肿瘤屏障通透性

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对脑胶质瘤大鼠血肿瘤屏障(BTB)通透性的影响以及最佳的作用条件。方法应用免疫组织化学方法观察内源性EMAP-Ⅱ在正常脑组织和脑胶质瘤组织中的分布;采用伊文氏兰(EB)法检测不同浓度外源性EMAP-Ⅱ作用后血肿瘤屏障通透性的变化。结果在正常脑组织,内源性EMAP-Ⅱ主要表达在脑微血管和神经元;在脑肿瘤组织,主要表达在肿瘤组织微血管和肿瘤细胞。不同浓度的外源性EMAP-Ⅱ可使血肿瘤屏障对伊文氏兰的通透性增加,对正常脑组织的通透性没有影响,在EMAP-Ⅱ的作用1 h时达到高峰,以后逐渐下降,12 h时基本恢复至灌注前水平;40.g/kg体重的浓度为EMAP-Ⅱ的的最适作用浓度。结论EMAP-Ⅱ能够以剂量依赖的方式选择性增加血肿瘤屏障的通透性。     

缓激肽对脑胶质瘤大鼠紧密连接影响的形态学观察

目的研究缓激肽(BK)对脑胶质瘤大鼠血肿瘤屏障紧密连接的影响。方法采用伊文氏兰(EB)法检测缓激肽作用后血肿瘤屏障(BTB)通透性的变化;应用透射电镜(TEM)观察BK作用后内皮细胞间紧密连接的变化,同时应用硝酸镧[La(NO3)3]和辣根过氧化物酶(HRP)作示踪剂,检测缓激肽作用后,小分子和大分子示踪剂通过紧密连接的情况。结果缓激肽可使血肿瘤屏障对伊文氏兰的通透性增加,在15min时达到高峰,以后逐渐下降。透射电镜显示缓激肽作用15min时,肿瘤组织毛细血管内皮细胞间紧密连接的完整性明显破坏,缝隙指数显著增加,同时可见硝酸镧和辣根过氧化物酶在紧密连接处沉积。结论缓激肽能够通过开放紧密连接选择性增加血肿瘤屏障的通透性。